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肉葡萄球菌tat-gfp融合基因的构建与表达
被引量：
1
1
作者
于长燕
郑秀
+3 位作者
朱燕
孟庆艳
王梦晓
高强
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第8期203-207,共5页
将PCR扩增的肉葡萄球菌铁离子过氧化物酶基因(fepB)的双精氨酸转运(Tat)信号肽DNA序列与绿色荧光蛋白基因(gfp)亚克隆到pCX9质粒中构建可表达的tat-gfp融合基因,再将形成的pCX19-Tat-GFP质粒电转化转入肉葡萄球菌宿主中。提取阳性克隆...
将PCR扩增的肉葡萄球菌铁离子过氧化物酶基因(fepB)的双精氨酸转运(Tat)信号肽DNA序列与绿色荧光蛋白基因(gfp)亚克隆到pCX9质粒中构建可表达的tat-gfp融合基因,再将形成的pCX19-Tat-GFP质粒电转化转入肉葡萄球菌宿主中。提取阳性克隆子质粒进行酶切验证,表明表达载体pCX19-Tat-GFP成功地构建并转化。用木糖诱导重组菌株后,分别使用荧光显微镜和SDS-PAGE检测外源GFP蛋白的表达分泌情况。结果显示,菌体能够发出绿色的荧光,且蛋白电泳能够在细胞质与细胞壁组分中检测到GFP蛋白条带,表明肉葡萄球菌宿主可以将表达载体pCX19-Tat-GFP表达的GFP在细胞质中正确折叠,并以活性形式转运到细胞壁部分。
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关键词
肉葡萄球菌
双
精氨酸
转运
(
tat
)
信号肽
融合基因
绿色荧光蛋白(GFP)
质粒
下载PDF
职称材料
双精氨酸转运(Tat)系统及其在大肠杆菌分泌表达重组蛋白中的应用
2
作者
贾爱娟
谭树华
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2012年第5期443-447,共5页
常见的分泌途径(Sec途径)是细菌中蛋白分泌跨膜转运的主要途径,而双精氨酸转运(Tat)则是另外一个蛋白分泌跨膜转运系统,该系统的特征是在分泌蛋白的信号肽中含有一个高度保守的双精氨酸基序。与Sec途径相比,Tat系统的显著优点是它只分...
常见的分泌途径(Sec途径)是细菌中蛋白分泌跨膜转运的主要途径,而双精氨酸转运(Tat)则是另外一个蛋白分泌跨膜转运系统,该系统的特征是在分泌蛋白的信号肽中含有一个高度保守的双精氨酸基序。与Sec途径相比,Tat系统的显著优点是它只分泌已正确折叠的蛋白,而未正确折叠的蛋白则不能通过该系统分泌,这样就保证了分泌产物在结构上的正确性。因此,研究利用Tat信号肽牵引重组蛋白通过Tat系统进行分泌跨膜转运在重组蛋白的表达方面具有很好的应用前景。
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关键词
细菌
Sec途径
双
精氨酸
转运
(
tat
)系统
信号肽
蛋白质跨膜
转运
原文传递
题名
肉葡萄球菌tat-gfp融合基因的构建与表达
被引量：
1
1
作者
于长燕
郑秀
朱燕
孟庆艳
王梦晓
高强
机构
天津科技大学生物工程学院工业微生物教育部暨天津市重点实验室
天津科技大学后勤服务集团
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第8期203-207,共5页
基金
国家"973"项目(2007CB714305
2011CB707401)
+1 种基金
科技部国际合作计划项目(2007DFB31620)
天津市自然科学基金重点项目(08JCZDJC15100)
文摘
将PCR扩增的肉葡萄球菌铁离子过氧化物酶基因(fepB)的双精氨酸转运(Tat)信号肽DNA序列与绿色荧光蛋白基因(gfp)亚克隆到pCX9质粒中构建可表达的tat-gfp融合基因,再将形成的pCX19-Tat-GFP质粒电转化转入肉葡萄球菌宿主中。提取阳性克隆子质粒进行酶切验证,表明表达载体pCX19-Tat-GFP成功地构建并转化。用木糖诱导重组菌株后,分别使用荧光显微镜和SDS-PAGE检测外源GFP蛋白的表达分泌情况。结果显示,菌体能够发出绿色的荧光,且蛋白电泳能够在细胞质与细胞壁组分中检测到GFP蛋白条带,表明肉葡萄球菌宿主可以将表达载体pCX19-Tat-GFP表达的GFP在细胞质中正确折叠,并以活性形式转运到细胞壁部分。
关键词
肉葡萄球菌
双
精氨酸
转运
(
tat
)
信号肽
融合基因
绿色荧光蛋白(GFP)
质粒
Keywords
Staphylococcus carnosus Twin-arginine-translocation （
tat
） Signal peptide Fusion gene Green fluorescent pro-tein （GFP） Plasmid
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
双精氨酸转运(Tat)系统及其在大肠杆菌分泌表达重组蛋白中的应用
2
作者
贾爱娟
谭树华
机构
中国药科大学分子生物学教研室
出处
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2012年第5期443-447,共5页
文摘
常见的分泌途径(Sec途径)是细菌中蛋白分泌跨膜转运的主要途径,而双精氨酸转运(Tat)则是另外一个蛋白分泌跨膜转运系统,该系统的特征是在分泌蛋白的信号肽中含有一个高度保守的双精氨酸基序。与Sec途径相比,Tat系统的显著优点是它只分泌已正确折叠的蛋白,而未正确折叠的蛋白则不能通过该系统分泌,这样就保证了分泌产物在结构上的正确性。因此,研究利用Tat信号肽牵引重组蛋白通过Tat系统进行分泌跨膜转运在重组蛋白的表达方面具有很好的应用前景。
关键词
细菌
Sec途径
双
精氨酸
转运
(
tat
)系统
信号肽
蛋白质跨膜
转运
Keywords
Bacteria,Sec pathway,Twin-arginine translocation （
tat
） system,Signal peptide,Transmembrane transport of protein
分类号
Q81 [生物学—生物工程]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
肉葡萄球菌tat-gfp融合基因的构建与表达
于长燕
郑秀
朱燕
孟庆艳
王梦晓
高强
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
1
下载PDF
职称材料
2
双精氨酸转运(Tat)系统及其在大肠杆菌分泌表达重组蛋白中的应用
贾爱娟
谭树华
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2012
0
原文传递
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