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氨基糖苷类药物双圈耐药型鲍曼不动杆菌16S rRNA甲基化酶基因研究 被引量：10
1
作者 张晓文 邵海枫 +1 位作者 王卫萍 李晓军 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期855-858,共4页
目的探讨在K-B法药物敏感试验中对氨基糖苷类药物双圈耐药的鲍曼不动杆菌16S rRNA甲基化酶基因携带状况以及药物诱导对该基因mRNA表达量的影响。方法收集42株鲍曼不动杆菌,K-B法测定其药敏情况;PCR法扩增三种16S rRNA甲基化酶基因armA、... 目的探讨在K-B法药物敏感试验中对氨基糖苷类药物双圈耐药的鲍曼不动杆菌16S rRNA甲基化酶基因携带状况以及药物诱导对该基因mRNA表达量的影响。方法收集42株鲍曼不动杆菌,K-B法测定其药敏情况;PCR法扩增三种16S rRNA甲基化酶基因armA、rmtB及rmtC;用RT-PCR的方法分析阿米卡星诱导前后耐药基因表达量。结果 90.4%(38/42)的菌株阿米卡星药敏纸片周围呈现双圈耐药,且均检测到armA,未检测到rmtB及rmtC,其余3株为敏感,1株为普通耐药,且PCR检测耐药基因为阴性。RT-PCR结果显示经阿米卡星诱导后细菌armA基因mRNA表达量显著上升。结论双圈耐药现象与armA基因诱导型表达有关。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 双圈耐药 16S rRNA甲基化酶基因
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Vitek 2 Compact全自动微生物仪检测鲍曼不动杆菌对阿米卡星敏感性误差的原因 被引量：8
2
作者 王莹 汪鹏程 +2 位作者 曾章锐 王卫萍 邵海枫 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期28-31,共4页
目的探讨为什么不能用Vitek 2 Compact全自动微生物分析仪检测鲍曼不动杆菌对阿米卡星的敏感性。方法收集用Vitek 2 Compact检测对阿米卡星敏感的鲍曼不动杆菌60株,用K-B法和琼脂稀释法复检,PCR法扩增4种氨基糖苷类修饰酶基因aac(6'... 目的探讨为什么不能用Vitek 2 Compact全自动微生物分析仪检测鲍曼不动杆菌对阿米卡星的敏感性。方法收集用Vitek 2 Compact检测对阿米卡星敏感的鲍曼不动杆菌60株,用K-B法和琼脂稀释法复检,PCR法扩增4种氨基糖苷类修饰酶基因aac(6')-Ⅰ、aac(3')-Ⅰ、aph(3')-Ⅵ及aac(3')-Ⅱ和3种16S rRNA甲基化酶基因armA、rmtB及rmtC。结果 K-B法和琼脂稀释法的药敏结果一致,与仪器法有差异;50株(83.3%)仪器法敏感的菌株,K-B法表型为阿米卡星双圈耐药,该50株菌均扩增出armA,未扩增出rmtB及rmtC;其中47株(94.0%)扩增出aac(6')-Ⅰ基因,35株(70.0%)扩增出aac(3')-Ⅰ基因,10株(20.0%)扩增出aph(3')-Ⅵ基因,8株(16.0%)扩增出aac(3')-Ⅱ基因;有9株(15.0%)3种药敏方法的结果一致,均对阿米卡星敏感,未扩增出相关耐药基因;另有1株(1.7%)仪器法敏感、K-B法阿米卡星为非双圈耐药,未扩增出16SrRNA甲基化酶相关基因,仅扩增出aac(6')-Ⅰ基因。结论用Vitek 2 Compact检测鲍曼不动杆菌对阿米卡星会出现假敏感现象,可能由16S rRNA甲基化酶基因armA表达介导。 展开更多
关键词 VITEK 2 COMPACT 鲍曼不动杆菌 双圈耐药 16S rRNA甲基化酶基因
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导致氨基糖苷类药物双圈耐药型鲍曼不动杆菌的相关携带基因研究 被引量：7
3
作者 张晓文 邵海枫 +1 位作者 王卫萍 李晓军 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期19-21,共3页
目的探讨在K-B法药物敏感试验中对氨基糖苷类抗菌药物双圈耐药的鲍曼不动杆菌耐药基因携带状况及药物诱导对耐药基因mRNA表达量的影响。方法收集42株携带Ⅰ类整合子酶基因的鲍曼不动杆菌;PCR法扩增其整合子可变区;联合RFLP和DNA测序技... 目的探讨在K-B法药物敏感试验中对氨基糖苷类抗菌药物双圈耐药的鲍曼不动杆菌耐药基因携带状况及药物诱导对耐药基因mRNA表达量的影响。方法收集42株携带Ⅰ类整合子酶基因的鲍曼不动杆菌;PCR法扩增其整合子可变区;联合RFLP和DNA测序技术分析可变区耐药基因;用RT-PCR的方法分析药物诱导前后细菌耐药基因表达量。结果 90.4%(38/42)的整合子阳性菌株可变区扩增片段大小为2300bp左右。RFLP分型和DNA测序结果表明,整合子可变区携带的基因盒为aacA4-catB-aadA1。RT-PCR结果显示经阿米卡星诱导后细菌aacA4基因mRNA表达量显著上升。结论氨基糖苷类药物双圈耐药型菌株的Ⅰ类整合子中主要携带氨基糖苷类耐药基因,双圈现象可能与整合子携带的耐药基因诱导型表达有关。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 氨基糖苷类药物 双圈耐药 RT-PCR
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阿米卡星双圈耐药型鲍曼不动杆菌药敏试验研究 被引量：3
4
作者 徐小用 苏建荣 《临床和实验医学杂志》 2015年第1期60-62,共3页
目的调查鲍曼不动杆菌(Ab)K-B法药敏试验阿米卡星出现的双圈现象,结合不同药敏试验方法和药敏结果探讨其治疗选药。方法全部37株非重复Ab均用VITEK-2 compact全自动微生物鉴定仪鉴定并做仪器法药敏;通过K-B法再对阿米卡星单独做纸片法... 目的调查鲍曼不动杆菌(Ab)K-B法药敏试验阿米卡星出现的双圈现象,结合不同药敏试验方法和药敏结果探讨其治疗选药。方法全部37株非重复Ab均用VITEK-2 compact全自动微生物鉴定仪鉴定并做仪器法药敏;通过K-B法再对阿米卡星单独做纸片法药敏试验,并对出现双圈现象的鲍曼不动杆菌进行传代诱导;琼脂稀释法检测阿米卡星对出现双圈和耐药现象的菌株最低抑菌浓度(MIC)。结果全部37株Ab被VITEK-2 compact全自动微生物鉴定仪确认并报告为对阿米卡星敏感;K-B法21株阿米卡星周围显示双圈表型、12株敏感、4株耐药;诱导7 h左右开始出现双圈现象,至第6代抑菌圈完全消失;琼脂稀释法得出出现双圈和耐药现象的菌株MIC值≥4 096 mg/L,个别菌株高达8 192 mg/L,均达到耐药标准。结论仪器法药敏缺乏药物选择灵活性,应仔细阅读操作说明,药敏试验结果应参考K-B法并进行修正,以免误导临床;阿米卡星K-B法产生双圈现象应报告阿米卡星耐药;双圈现象可经传代诱导消失。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 阿米卡星 K-B法药敏 双圈耐药
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肠杆菌科细菌对阿米卡星双圈耐药机制探讨 被引量：1
5
作者 周万青 沈瀚 +2 位作者 宁明哲 张之烽 张葵 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期490-493,共4页
目的探讨肠杆菌科细菌K-B法检测结果对阿米卡星(AMK)呈双圈耐药的相关机制。方法收集K-B法对AMK呈双圈耐药的临床分离大肠埃希菌(E.coli)5株和肺炎克雷伯菌(Kpn)2株作为实验菌株,同期分离对AMK完全耐药的E.coli和Kpn各2株作为对照菌株;... 目的探讨肠杆菌科细菌K-B法检测结果对阿米卡星(AMK)呈双圈耐药的相关机制。方法收集K-B法对AMK呈双圈耐药的临床分离大肠埃希菌(E.coli)5株和肺炎克雷伯菌(Kpn)2株作为实验菌株,同期分离对AMK完全耐药的E.coli和Kpn各2株作为对照菌株;分别采用Vitek 2 Compact药敏卡和琼脂稀释法复核菌株对AMK的药物敏感性;用PCR及DNA测序检测氨基糖苷类修饰酶基因、整合子及16S rRNA甲基化酶相关基因;用基因外重复回文序列(REP)-PCR法分析菌株的同源性。结果 Vitek 2 Compact药敏卡结果显示,7株实验菌中3株对AMK为敏感,4株为中介;对照菌株均对AMK耐药。琼脂稀释法结果显示所测菌株均对AMK耐药,MIC均>512 mg/L。所测菌株携带不同的氨基糖苷类修饰酶基因,主要为aac(6)-Ⅰ基因;整合子可变区携带基因盒为aadA5-dfrA17的菌株8株,为aadA2-dfrA12的菌株3株。双圈耐药表型菌株均扩增出armA基因,而对照菌株未扩增出该基因。REP-PCR结果显示双圈耐药菌株同源性较高,与同期分离的对照菌株差异较大。结论 AMK双圈耐药表型的出现与16S rRNA甲基化酶armA基因的表达相关;Vitek 2 Compact药敏系统对K-B法中对AMK呈双圈耐药的肠杆菌科细菌药敏结果可能发生偏差。 展开更多
关键词 阿米卡星 双圈耐药 肠杆菌科 VITEK ARMA
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导致阿米卡星双圈耐药肠杆菌科细菌耐药性研究 被引量：1
6
作者 周万青 沈瀚 +5 位作者 宁明哲 张之烽 徐学静 朱宏 曹小利 张葵 《检验医学》 CAS 2013年第11期1012-1015,共4页
目的探讨临床分离的纸片扩散法药物敏感性试验对阿米卡星(AMK)呈双圈耐药的肠杆菌科细菌相关携带基因及药物诱导对耐药基因mRNA表达量的影响。方法收集纸片扩散法药物敏感性试验对AMK呈双圈耐药的大肠埃希菌(编号Eco85)和肺炎克雷伯菌(... 目的探讨临床分离的纸片扩散法药物敏感性试验对阿米卡星(AMK)呈双圈耐药的肠杆菌科细菌相关携带基因及药物诱导对耐药基因mRNA表达量的影响。方法收集纸片扩散法药物敏感性试验对AMK呈双圈耐药的大肠埃希菌(编号Eco85)和肺炎克雷伯菌(编号Kpn110)各1株;纸片诱导法探讨耐药表型的改变;聚合酶链反应(PCR)扩增氨基糖苷类修饰酶基因、整合子及其可变区以及16S rRNA甲基化酶基因;逆转录PCR分析armA基因在AMK诱导前后菌株中的表达情况;接合试验探讨耐药基因的可传递性。结果 Eco85和Kpn110分别在第10代和第16代诱导后转变为双圈消失;2株菌均扩增出Ⅰ类整合子基因,可变区分别携带aadA5-dfra17和aadA2-dfrA12基因盒,未扩增出Ⅱ和Ⅲ类整合子基因;Eco85扩增出aac(6)-Ⅰ基因,而Kpn110扩增出ant(3″)-Ⅰ基因;Eco85和Kpn110均扩增出armA基因,基因测序未发现突变,未检出rmtB基因;经AMK诱导后菌株armA基因mRNA表达量明显上升;接合试验未获成功。结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对AMK呈双圈耐药可能与16S rRNA甲基化酶armA基因的诱导表达相关。 展开更多
关键词 双圈耐药 诱导 armA基因 阿米卡星 肠杆菌科细菌 逆转录-聚合酶链反应
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