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B型流感病毒NP蛋白双单克隆抗体夹心ELISA检测方法的建立 被引量：2
1
作者 徐菱 张振宇 +2 位作者 郭兴 于萌萌 王晓钧 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期779-785,共7页
为建立B型流感病毒(IBV)快速诊断方法,本研究采用真核表达系统表达并纯化了IBV中高度保守的核糖核蛋白(NP),以其为抗原,免疫小鼠制备IBV NP蛋白单克隆抗体(MAb),选取抗原表位长、特异性强的MAb2B3-5作为捕获抗体,选取抗原表位短、灵敏... 为建立B型流感病毒(IBV)快速诊断方法,本研究采用真核表达系统表达并纯化了IBV中高度保守的核糖核蛋白(NP),以其为抗原,免疫小鼠制备IBV NP蛋白单克隆抗体(MAb),选取抗原表位长、特异性强的MAb2B3-5作为捕获抗体,选取抗原表位短、灵敏度高的MAb 3C3-7经HRP标记后作为检测抗体,经条件优化,建立了检测IBV NP蛋白的双MAb夹心ELISA检测方法。结果显示,该检测方法捕获抗体包被量为每孔100 ng,检测抗体使用量为每孔20 ng,NP蛋白浓度在3.9 ng/mL^62.5 ng/mL时与OD450nm呈良好的线性关系,相关系数R2>0.99。利用该ELISA方法对多种病毒进行检测,结果显示该方法仅能与IBV发生反应,表明该方法特异性强;灵敏度试验结果显示,该方法对病毒NP蛋白的最低检测限为13.26 ng/mL,敏感性高;批内和批间重复性变异系数均小于8%,重复性好;捕获抗体可在25℃和37℃保存4 d,热稳定性好。利用本实验建立的ELISA方法和qPCR方法对本实验室保存的40份人咽拭子进行检测,该方法与qPCR方法相比符合率为70%,表明本研究建立的方法可用于临床检测。本研究建立的ELISA检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好,为B型流感的快速诊断、NP蛋白功能研究及定量检测提供技术支持。 展开更多
关键词 B型流感病毒 NP蛋白 双单克隆抗体夹心elisa
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抑制性受体CD305表达在移植肾排斥反应监测中的意义
2
作者 李州利 蔡明 +4 位作者 陈莉萍 张赟 徐竹蔚 金伯泉 石炳毅 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期160-162,共3页
目的探讨抑制性受体CD305的表达在移植肾排斥反应中的意义。方法应用双单克隆抗体夹心ELISA法检测153例肾移植术后患者血清中可溶型CD305（5CD305）的表达水平，20例健康志愿者标本作为对照组。结果对照组和98例移植肾功能正常患者血清s... 目的探讨抑制性受体CD305的表达在移植肾排斥反应中的意义。方法应用双单克隆抗体夹心ELISA法检测153例肾移植术后患者血清中可溶型CD305（5CD305）的表达水平，20例健康志愿者标本作为对照组。结果对照组和98例移植肾功能正常患者血清sCD305表达分别为（4．3±2．3）和（6．3±3．7）μg／L。20例移植肾急性排斥及5例移植肾失功患者血清sCD305表达明显增加，分别为（36．3±14．7）和（28．8±9．4）μg／L，显著高于对照组和移植物功能正常组（P〈0．01）。30例移植肾慢性排斥及6例尿毒症透析患者血清sCD305分别为（13．1±5．5）和（11．2±4．6）μg／L，亦明显高于对照组和移植肾功能正常组（P=0．00）。结论发生移植肾排斥反应的患者血清sCD305有较高水平的表达，可望作为移植肾排斥反应的监测指标之一。 展开更多
关键词 肾移植 移植物排斥 双单克隆抗体夹心elisa 可溶型CD305
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错位阻双单克隆抗体夹心ELISA竞争法测定同位阻群抗体相对亲和力 被引量：1
3
作者 李文琦 赵秦 刘新铭 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第1期29-32,共4页
在抗乙型肝炎病毒表面抗原单克隆抗体位阻分析的基础上,选用错位阻双单克隆抗体夹心ELISA竞争法测定同位阻群抗体相对亲和力。并测出了第4组、第5组相对亲和力最好的抗体为9B_5和24D_2。方法简便易行。
关键词 错位阻双单克隆抗体夹心elisa竞争法 测定 同位阻群抗体相对亲和力 乙型肝炎表面抗原
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