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去细胞猪主动脉瓣膜的生物力学和组织相容性研究 被引量：5
1
作者 金振晓 刘维永 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期310-311,W001,共3页
组织工程心脏瓣膜的构建需要良好的支架结构作为细胞生长和附着的载体 ,本研究探讨了去细胞后猪主动脉瓣瓣叶的生物力学性能和组织相容性 ,发现该去细胞方法可以完全去除瓣叶内的细胞成分 ,且去细胞后瓣叶的组织含水量增加 ,可溶性蛋白... 组织工程心脏瓣膜的构建需要良好的支架结构作为细胞生长和附着的载体 ,本研究探讨了去细胞后猪主动脉瓣瓣叶的生物力学性能和组织相容性 ,发现该去细胞方法可以完全去除瓣叶内的细胞成分 ,且去细胞后瓣叶的组织含水量增加 ,可溶性蛋白含量下降 ,而瓣叶的热皱缩温度、厚度、断裂伸长率和断裂强度均未发生明显变化。幼兔皮下埋植试验证明 ,宿主细胞可以沿纤维框架的纹理长入到瓣膜内。说明该去细胞瓣叶具有足够的力学强度和组织相容性 ,可用于构建组织工程心脏瓣叶。 展开更多
关键词 心脏瓣膜 组织工程 生物力学 去细胞猪主动脉瓣膜 组织相容性
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原花青素处理去细胞猪主动脉瓣细胞相容性研究 被引量：1
2
作者 刘洋 刘珊珊 +4 位作者 段维勋 朱海龙 金振晓 易定华 刘维永 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期2195-2197,共3页
目的观察原花青素处理去细胞猪主动脉瓣的细胞相容性。方法采用L929细胞经原花青素处理去细胞猪主动脉瓣浸提液培养后，噻唑蓝（MTT）比色法以100％、50％、25％浸提液组培养L929细胞测定其相对增殖率；将L929细胞与原花青素处理去细胞... 目的观察原花青素处理去细胞猪主动脉瓣的细胞相容性。方法采用L929细胞经原花青素处理去细胞猪主动脉瓣浸提液培养后，噻唑蓝（MTT）比色法以100％、50％、25％浸提液组培养L929细胞测定其相对增殖率；将L929细胞与原花青素处理去细胞猪主动脉瓣直接接触培养，逐日观察细胞生长状态；将L929细胞种植于原花青素处理的去细胞猪主动脉瓣表面，扫描电镜观察其生长。结果100％、50％、25％浸提液组培养L929细胞相对增殖率（RGR）在87．5％-111．5％之间，与阳性对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01），原花青素处理去细胞猪主动脉瓣性质稳定，细胞毒性程度为0—1级。L929细胞与心包材料直接接触培养生长良好，形态学无明显改变。结论原花青素处理去细胞猪主动脉瓣细胞相容性好。 展开更多
关键词 原花青素 去细胞猪主动脉瓣 生物材料 细胞毒性
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去细胞猪主动脉瓣膜超微结构及生物相容性研究
3
作者 丁静丽 朱志刚 +5 位作者 周建良 张智 聂彬恩 杨威 龚艺 徐建军 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2775-2778,共4页
目的 观察曲拉通X-100（Triton X-100）与脱氧胆酸钠（SD）对猪主动脉瓣的去细胞效果,探讨去细胞猪主动脉瓣膜超微结构及其生物相容性.方法 分别采用1％ Triton X-100和1％SD对猪主动脉瓣进行去细胞处理,通过苏木素-伊红（HE）、Van Gie... 目的 观察曲拉通X-100（Triton X-100）与脱氧胆酸钠（SD）对猪主动脉瓣的去细胞效果,探讨去细胞猪主动脉瓣膜超微结构及其生物相容性.方法 分别采用1％ Triton X-100和1％SD对猪主动脉瓣进行去细胞处理,通过苏木素-伊红（HE）、Van Gieson染色,扫描电子显微镜从组织学上对去细胞瓣观察,通过血小板黏附实验和细胞毒性实验评价去细胞瓣的生物相容性.结果 1％SD去除细胞完全,细胞外基质保存完整,但去细胞瓣膜血小板黏附严重且具有一定的细胞毒性,24h和48 h的细胞相对增殖率分别为（80.29±2.05）％和（75.44±3.22）％;1％ Triton X-100去除细胞不完全,血小板黏附严重,也具有一定的细胞毒性,24h和48 h的细胞相对增殖率分别为（88.05±1.82）％和（82.95 ±3.07）％.结论 1％SD联合核酸酶对猪主动脉瓣的去细胞效果优于1％ Triton X-100,但均不够理想,其他无毒环保的去细胞试剂有待进一步探索. 展开更多
关键词 去细胞猪主动脉瓣膜 细胞外基质 生物相容性
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枝状化聚乙二醇修饰的去细胞猪主动脉瓣膜内皮化的性能研究
4
作者 周建良 聂彬恩 +3 位作者 朱志刚 丁静丽 胡时栋 陈佳 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1844-1847,共4页
目的观察枝状化聚乙二醇（PEG）修饰后的去细胞猪主动脉瓣（DPAV）的内皮细胞生长性能。方法自合成枝状化聚乙二醇（4-arm—PEG—acrylate），采用核磁共振氢谱（1HNMR），对复合物进行表征检测，利用4-arm。PEG．amylate上的丙烯酸酯... 目的观察枝状化聚乙二醇（PEG）修饰后的去细胞猪主动脉瓣（DPAV）的内皮细胞生长性能。方法自合成枝状化聚乙二醇（4-arm—PEG—acrylate），采用核磁共振氢谱（1HNMR），对复合物进行表征检测，利用4-arm。PEG．amylate上的丙烯酸酯与巯基化的DPAV结合对其进行PEG化，体外获取人脐静脉内皮细胞，以细胞密度为1X10。接种于各组瓣膜支架材料上，8d后MTS试剂、苏木素-伊红（HE）染色、扫描电镜（SEM）评价内皮细胞的生长。结果。HNMR（D2O）：3．51～3．86ppm处PEG信号峰，4．14（4H，CH，OAr），5．80～6．48ppm处丙烯酸酯双键。SEM可见枝状化㈨（；修饰的DPAV胶原纤维交联增粗，人脐静脉内皮细胞在DPAV上种植8天DPAV组细胞数为（0．88±0．03）×105／cm，PEG—DPAV组细胞数为（1．18±0．04）×105／cm2，PEG—DPAV组高于DPAV组（P〈0．05）。HE染色和SEM可见两组瓣膜支架表面仅有散在的细胞存在，呈梭形或不规则形，细胞数PEG—DPAV高于DPAV组，部分可见细胞问连接紧密形成一层近似融合的细胞层，但细胞紧惭连接不连续。结论枝状化PEG修饰的去细胞猪主动脉瓣膜能够提高内皮细胞的黏附增殖，但卸不能在去细胞瓣膜支架表面形成一层完整的融合层，因此PEG化的瓣膜并不能达到理想的内皮化，有必要进行进一步修饰。 展开更多
关键词 组织工程心脏瓣膜 去细胞猪主动脉瓣膜 聚乙二醇 共价修饰 内皮化
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重组纤维连接蛋白羧基端细胞结合域对骨髓基质干细胞黏附力的影响 被引量：3
5
作者 徐瑞剑 黄盛东 +3 位作者 徐志云 龚德军 张宝仁 徐驯海 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期965-968,共4页
目的:研究增强骨髓基质干细胞黏附力的方法。方法:去细胞猪主动脉瓣叶分别用纤维连接蛋白(Fn)和重组纤维连接蛋白羧基端细胞结合域(FnCTD64)及牛血清白蛋白(BSA)浸泡预涂处理12 h,对照组未预涂蛋白。采用间隔24 h、3次种植的方法种植骨... 目的:研究增强骨髓基质干细胞黏附力的方法。方法:去细胞猪主动脉瓣叶分别用纤维连接蛋白(Fn)和重组纤维连接蛋白羧基端细胞结合域(FnCTD64)及牛血清白蛋白(BSA)浸泡预涂处理12 h,对照组未预涂蛋白。采用间隔24 h、3次种植的方法种植骨髓基质干细胞(BMSCs),于种植后第8天进行细胞计数及MTT法检测比较去细胞瓣叶上黏附、增殖的细胞数量,同时取瓣叶进行组织学检测观察瓣叶表面BMSCs覆盖情况。结果:采用预涂Fn和FnCTD64后的去细胞猪主动脉瓣叶,预涂Fn组的细胞计数为(9.085±0.622)×104,MTT的吸光值为0.537±0.022;预涂FnCTD64组的细胞计数为(9.111±0.607)×104,MTT的吸光值为0.540±0.025;预涂BSA组的细胞计数为(4.593±0.464)×104,MTT的吸光值为0.360±0.018;对照组的细胞计数为(4.460±0.441)×104,MTT的吸光值为0.353±0.019;前两组明显高于后两组(P<0.01)。预涂Fn组和FnCTD64组无显著性差异。瓣叶经H-E染色,可见预涂Fn和FnCTD64组细胞覆盖情况优于预涂BSA组和对照组。结论:Fn和FnCTD64能明显增加BMSCs在去细胞猪主动脉瓣叶表面的黏附和增殖。 展开更多
关键词 去细胞猪主动脉瓣叶 重组纤维连接蛋白羧基端细胞结合域 骨髓基质干细胞 细胞黏附
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脂肪间充质干细胞分化为内皮细胞并体外构建组织工程心脏瓣膜 被引量：4
6
作者 周虹 张涛 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第27期4979-4984,共6页
背景:组织工程心脏瓣膜是利用组织工程技术将种子细胞种植于瓣膜支架上所构建的一种人工瓣膜,目前国内外研究主要集中于种子细胞来源及支架选择上。目的:探讨人脂肪间充质干细胞体外向内皮细胞诱导分化后的细胞作为种子细胞,脱细胞猪主... 背景:组织工程心脏瓣膜是利用组织工程技术将种子细胞种植于瓣膜支架上所构建的一种人工瓣膜,目前国内外研究主要集中于种子细胞来源及支架选择上。目的:探讨人脂肪间充质干细胞体外向内皮细胞诱导分化后的细胞作为种子细胞,脱细胞猪主动脉瓣膜作为支架体外构建组织工程心脏瓣膜的可行性。方法:利用吸脂术采集脂肪组织,分离、培养脂肪间充质干细胞,流式细胞仪鉴定细胞表型;免疫细胞化学方法及RT-PCR检测细胞分化标志物;应用TritonX-100联合胰蛋白酶的方法制备脱细胞猪主动脉瓣支架,将体外培养扩增的诱导分化后的内皮细胞种植于支架上构建组织工程心脏瓣膜,光镜及电镜下观察组织工程心脏瓣膜的组织学结构。结果与结论:脂肪组织分离培养的脂肪间充质干细胞向内皮细胞诱导分化后表达CD31、CD34、CD144、Ⅷ因子和内皮型一氧化氮合成酶等内皮细胞特异性抗原;脱细胞猪主动脉瓣膜支架脱细胞完全,弹力纤维及胶原纤维保持完整;构建的组织工程心脏瓣膜可见支架上排列连续的单细胞层。提示脂肪间充质干细胞在体外向内皮细胞诱导分化后已初步具有内皮细胞功能,在脱细胞猪主动脉瓣膜支架上生长良好,可以在体外初步构建组织工程心脏瓣膜。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 诱导分化 内皮细胞 脱细胞猪主动脉瓣膜支架 组织工程心脏瓣膜
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共价结合血管内皮生长因子促进内皮祖细胞在去细胞瓣上的粘附和增殖 被引量：1
7
作者 周建良 邹明晖 +3 位作者 陈义初 卢翠芬 史嘉玮 董念国 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1474-1479,共6页
目的对去细胞主动脉瓣进行聚乙二醇(PEG)交联和血管内皮生长因子(VEGF)共价结合,以改善去细胞主动脉瓣生物学性能。方法枝化状聚乙二醇末端的丙烯酰基与引入到去细胞主动脉瓣上的巯基,通过迈克尔加成反应完成对去细胞主动脉瓣的PEG交联... 目的对去细胞主动脉瓣进行聚乙二醇(PEG)交联和血管内皮生长因子(VEGF)共价结合,以改善去细胞主动脉瓣生物学性能。方法枝化状聚乙二醇末端的丙烯酰基与引入到去细胞主动脉瓣上的巯基,通过迈克尔加成反应完成对去细胞主动脉瓣的PEG交联;通过PEG交联去细胞主动脉瓣上的未饱和丙烯酰基与VEGF中半胱氨酸残基上的巯基发生另一个迈克尔加成反应,对去细胞主动脉瓣进行VEGF共价结合,酶联免疫吸附试验和免疫荧光测定VEGF修饰效果;在去细胞主动脉瓣、PEG交联去细胞主动脉瓣和VEGF共价结合的PEG交联去细胞主动脉瓣上种植内皮祖细胞,培养10 d后行瓣膜上DNA含量测定、苏木素-伊红染色和扫描电镜。结果免疫荧光和ELISA检测显示:每片PEG交联去细胞主动脉瓣最大结合(908.94±0.27)pg VEGF;与去细胞主动脉瓣和PEG交联去细胞主动脉瓣相比,VEGF共价结合的PEG交联去细胞主动脉瓣明显促进内皮祖细胞的黏附和增殖,并且可在瓣膜表面形成一层连续的单细胞层。结论借助PEG,VEGF能有效地共价结合去细胞主动脉瓣,促进细胞的粘附和增殖,有利于组织工程心脏瓣膜的构建。 展开更多
关键词 去细胞主动脉瓣 聚乙二醇 迈克尔加成反应 血管内皮生长因子 内皮祖细胞
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