期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到9篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
白念珠菌H3K4甲基转移酶N末端肽段Set1-208p的原核细胞表达及鉴定 被引量：6
1
作者 孔倩倩 廖红 +3 位作者 李芳秋 马春芳 史利宁 胡毓安 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期919-921,930,共4页
目的原核细胞表达白念珠菌H3K4甲基转移酶N末端肽段Set1-208p,鉴定重组蛋白质的抗原性。方法用比对软件对白念珠菌H3K4甲基转移酶与其他物种甲基转移酶进行比对。选择与人类无同源性的抗原特异性片段,以白念珠菌C1标准株基因组DNA为模板... 目的原核细胞表达白念珠菌H3K4甲基转移酶N末端肽段Set1-208p,鉴定重组蛋白质的抗原性。方法用比对软件对白念珠菌H3K4甲基转移酶与其他物种甲基转移酶进行比对。选择与人类无同源性的抗原特异性片段,以白念珠菌C1标准株基因组DNA为模板,PCR扩增Set1-208p的编码基因,以pET28a(+)为载体,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白质表达。用抗His标签的单克隆抗体鉴定融合蛋白,并用确诊侵袭性白念珠菌感染(IC)患者血清进行抗原性鉴定。结果成功克隆了白念珠菌抗原特异性H3K4甲基转移酶片段Set1-208p基因并诱导表达,获得了纯化的重组肽段,所得蛋白质分子量(Mr)约为29 000,带有His标签,经western blot鉴定,诱导的重组蛋白可与IC患者血清特异性反应。结论成功诱导表达了具有良好抗原反应性的Set1-208p重组蛋白质,为建立相应的抗原、抗体ELISA检测方法提供基础。 展开更多
关键词 白念珠菌 H3K4甲基转移酶 基因克隆 原核细胞表达
下载PDF
牦牛和双峰驼重组朊蛋白的原核细胞表达 被引量：5
2
作者 吴润 陈豪泰 +1 位作者 刘湘涛 谢庆阁 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期1-6,共6页
应用重组DNA技术构建了牦牛和双峰驼重组朊蛋白的4个表达载体，即pGEX-BoPrP（23～242）、pGEX—BoPrP（100～242）、pGEX—CaPrP（25～241）和pGEX—CaPrP（93～241），经转化E．coli BL21（DE3），成功地获得了重组菌E．coli BoPrP（2... 应用重组DNA技术构建了牦牛和双峰驼重组朊蛋白的4个表达载体，即pGEX-BoPrP（23～242）、pGEX—BoPrP（100～242）、pGEX—CaPrP（25～241）和pGEX—CaPrP（93～241），经转化E．coli BL21（DE3），成功地获得了重组菌E．coli BoPrP（23～242）、E．coli BoPrP（100～242）、E．coli CaPrP（25～241）和E．coli CaPrP（93～241），分别可表达大小约为50．2、41．7、49．9和42．4ku的融合蛋白。各重组菌经1．0mmol／L的IPTG于37℃诱导5～6h可产生占细菌总蛋白量30％～45％的融合蛋白。免疫印迹分析表明，除融合蛋白GST—BoPrP（100～242）外，GST—BoPrP（23～242）、GST—CaPrP（25～241）和GST—CaPrP（93～241）均可与抗牛单克隆抗体4C11反应，显示中国黄牛PrP^c与牦牛和双峰驼PrP^c具有共同的抗原成分。 展开更多
关键词 朊粒 牦牛 双峰驼 原核细胞表达
下载PDF
人分化抗原5C5在原核细胞的表达 被引量：1
3
作者 孟晓燕 汪燚 +3 位作者 马凤蓉 史耕先 赵方萄 朱立平 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2001年第3期218-221,共4页
为了确证 5C5cDNA是全长cDNA并制备抗 5C5分化抗原不同表位的功能性单抗 ,进而研究 5C5分化抗原的结构与功能 ,用Northern blot检测 5C5mRNA在人各种组织的表达 ,并构建了重组表达质粒pGEX 5X 3 5C5全长和pGEX 5X 3 5C5N端与pGEX 5X 3 5... 为了确证 5C5cDNA是全长cDNA并制备抗 5C5分化抗原不同表位的功能性单抗 ,进而研究 5C5分化抗原的结构与功能 ,用Northern blot检测 5C5mRNA在人各种组织的表达 ,并构建了重组表达质粒pGEX 5X 3 5C5全长和pGEX 5X 3 5C5N端与pGEX 5X 3 5C5C端。结果表明 :所有检测的组织中均只有一个 5C5mRNA转录本 ,其大小与 5C5cDNA长度一致 ,表明所分离到的 90 8bp 5C5cDNA是个全长cDNA。重组表达质粒pGEX 5X 3 5C5N端与pGEX 5X 3 5C5C端在大肠杆菌DH5α表达出了可溶性融合蛋白GST 5C5N端与GST 5C5C端 ,分子量各为 36kD和 35kD。 展开更多
关键词 分化抗原5C5 原核细胞表达 Northern印迹杂交
下载PDF
白念珠菌β-葡萄糖苷酶2的原核细胞表达、鉴定及免疫反应性 被引量：1
4
作者 贺政新 冉向阳 +2 位作者 陈晶 王宪灵 侯天文 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期59-61,共3页
目的构建白念珠菌β-葡萄糖苷酶2(BGL2)的原核细胞表达质粒,诱导其表达后加以鉴定,并初步判定重组蛋白质的免疫反应性。方法 PCR法获取白念珠菌SC5314的bgl2基因,插入原核细胞表达载体pET30a中,以重组质粒转染感受态细胞大肠埃希菌(E.co... 目的构建白念珠菌β-葡萄糖苷酶2(BGL2)的原核细胞表达质粒,诱导其表达后加以鉴定,并初步判定重组蛋白质的免疫反应性。方法 PCR法获取白念珠菌SC5314的bgl2基因,插入原核细胞表达载体pET30a中,以重组质粒转染感受态细胞大肠埃希菌(E.coli)BL21,经IPTG诱导表达后,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测蛋白质的表达情况,梯度透析法对包涵体蛋白质复性,用抗His标签单克隆抗体鉴定。用临床侵袭性念珠菌病(IC)患者血清判定重组蛋白质的免疫反应性。结果成功构建原核细胞表达质粒pET30a-bgl2,诱导后的重组蛋白质以包涵体形式表达,经梯度透析复性成功。重组蛋白质能被抗His标签抗体识别,并与IC患者血清有良好的反应性。结论用原核细胞表达体系成功表达了白念珠菌BGL2,该蛋白质具有良好的免疫反应性,为进一步研究其在IC诊断中的作用打下基础。 展开更多
关键词 白念珠菌 原核细胞表达 β-葡萄糖苷酶2 侵袭性念珠菌病
下载PDF
人内皮抑素endostatin基因的融合表达纯化及活性测定
5
作者 杨芳 何援利 刘芸 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第13期1554-1557,共4页
目的:获得有活性的人内皮抑素(endostatin)融合蛋白. 方法:从人胎肝组织中提取总RNA,经逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出endostatin基因,定向克隆重组入pTRX表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3), IPTG诱导表达,纯化,MTT法测定endostati... 目的:获得有活性的人内皮抑素(endostatin)融合蛋白. 方法:从人胎肝组织中提取总RNA,经逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出endostatin基因,定向克隆重组入pTRX表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3), IPTG诱导表达,纯化,MTT法测定endostatin蛋白对人脐带静脉血管内皮细胞的抑制活性. 结果:RT-PCR获得endostatin基因,扩增产物在10 g/L 琼脂糖凝胶上显示为1条扩增条带,约573 bp,与预计大小一致.将PCR产物连入PGEM-T载体,转化大肠杆菌DH5α,阳性克隆经KpnⅠ,NotⅠ酶切鉴定、测序验证.构建pTRX-endo表达载体,在大肠杆菌BL21 (DE3)中的表达,经SDS-PAGE分析,出现特异性蛋白质条带,大小与预期相符合.重组蛋白经纯化,MTT 法测定重组人内皮抑素蛋白具有生物学活性.人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)受到明显抑制,具有剂量依赖抑制关系,ED50=550μg/L. 结论:人内皮抑素基因在原核细胞表达载体pTRX中获得成功表达,表达蛋白能够抑制人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)的增殖. 展开更多
关键词 ENDOSTATIN基因 人脐静脉血管内皮细胞 活性测定 纯化 融合表达 BL21(DE3) 逆转录-聚合酶链式反应 人脐带静脉血管内皮细胞 重组人内皮抑素 人内皮抑素基因 大肠杆菌 RT-PCR 特异性蛋白质 原核细胞表达 表达载体 MTT法
下载PDF
马立克氏病病毒囊膜糖蛋白B基因原核细胞表达产物单克隆抗体的制备
6
作者 韩凌霞 丁家波 +1 位作者 陈雷 崔治中 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期547-549,共3页
用大肠杆菌 BL2 1表达了马立克氏病病毒 (MDV)强毒 GA株的囊膜糖蛋白 B(g B)基因 ,通过 SDS- PAGE电泳分离表达蛋白条带 ,切下并碾碎后作为免疫原制备单克隆抗体。通过 EL ISA和间接免疫荧光试验 (IFA) ,得到 1株阳性单克隆抗体杂交瘤... 用大肠杆菌 BL2 1表达了马立克氏病病毒 (MDV)强毒 GA株的囊膜糖蛋白 B(g B)基因 ,通过 SDS- PAGE电泳分离表达蛋白条带 ,切下并碾碎后作为免疫原制备单克隆抗体。通过 EL ISA和间接免疫荧光试验 (IFA) ,得到 1株阳性单克隆抗体杂交瘤细胞株 7C8。该单抗腹水的 EL ISA效价为 1∶ 2 1 2 ,IFA效价为 1∶ 80 0 ,与 MDV不同致病型毒株CVI988、GA、RB1B、MD11、6 48A株感染的鸡胚成纤维细胞 (CEF)均呈 IFA阳性。1∶ 10 0稀释时与 GA株感染的 CEF在斑点酶联免疫吸附试验 (dot- EL ISA)中呈阳性。 展开更多
关键词 囊膜糖蛋白B基因 原核细胞表达 单克隆抗体 制备 马立克氏病病毒 GB基因
下载PDF
戊型肝炎病毒疫苗研究进展
7
作者 吴淑玲 成军 邓红 《中华实验和临床感染病杂志（电子版）》 CAS 2007年第1期54-57,共4页
关键词 戊型肝炎病毒 病毒疫苗 原核表达系统 抗-HEV HEV疫苗 原核细胞表达 ORF2基因 保护作用
原文传递
细胞器荧光蛋白标记稳定细胞株系的建立与应用
8
作者 彭挺 李和 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期380-381,共2页
绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）以及由其演变而来的突变体或来自于其他物种的各色荧光蛋白，因为良好的荧光激发特性、稳定的真原核细胞表达及较小的细胞毒性等特点，被广泛应用为蛋白质定位的重要标记分子和报告基因... 绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）以及由其演变而来的突变体或来自于其他物种的各色荧光蛋白，因为良好的荧光激发特性、稳定的真原核细胞表达及较小的细胞毒性等特点，被广泛应用为蛋白质定位的重要标记分子和报告基因，在生命科学的诸多研究领域得以应用。 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白 应用 细胞株系 稳定 标记 细胞器 原核细胞表达 蛋白质定位
下载PDF
基因重组表达戊型肝炎病毒的研究进展
9
作者 王淑颖 阮冰 《肝脏》 2001年第2期132-133,共2页
关键词 戊型肝炎病毒 基因重组表达 昆虫肝状病毒表达系统 原核细胞表达系统 哺乳动物表达系统
下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部