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大流行流感疫苗研发和质量管理中一些问题的探讨 被引量：7
1
作者 李长贵 王军志 《中国药事》 CAS 2007年第8期563-568,共6页
季节性流感疫苗是公认的预防流行性感冒的有力武器,主要预防人流感病毒同型变异株造成的流行和感染。而大流行流感通常由新的流感病毒亚型引起,因此,大流行流感疫苗是一种全新的预防性疫苗。比较季节性流感和大流行流感的产生原因,进而... 季节性流感疫苗是公认的预防流行性感冒的有力武器,主要预防人流感病毒同型变异株造成的流行和感染。而大流行流感通常由新的流感病毒亚型引起,因此,大流行流感疫苗是一种全新的预防性疫苗。比较季节性流感和大流行流感的产生原因,进而从毒种制备、生产基质、抗原含量、佐剂、免疫效果评价、质控方法、生物安全等各个方面阐述大流行流感疫苗研制中面临的技术问题,同时介绍国外在质量管理方面的技术法规。 展开更多
关键词 大流行流感病毒疫苗 H5N1原型病毒株 佐剂
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世卫研发出H5N1禽流感原型病毒,药厂反应冷淡
2
《中国兽药杂志》 2004年第5期67-67,共1页
关键词 世界卫生组织 H5N1禽流感 原型病毒 药厂
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以荧光素酶为报告基因定量检测原型泡沫病毒的指示细胞系的建立 被引量：2
3
作者 许丰雯 徐丹 +2 位作者 李森 王明晓 乔文涛 《南开大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期80-84,共5页
原型泡沫病毒(prototypic foamy virus,PFV)属于反转录病毒科泡沫病毒亚科.为了在细胞水平定量检测PFV的感染,建立了以萤火虫荧光素酶为报告基因的指示细胞系.在幼小仓鼠肾细胞BHK-21中转染含有PFV LTR启动子及其控制下的荧光素酶报告... 原型泡沫病毒(prototypic foamy virus,PFV)属于反转录病毒科泡沫病毒亚科.为了在细胞水平定量检测PFV的感染,建立了以萤火虫荧光素酶为报告基因的指示细胞系.在幼小仓鼠肾细胞BHK-21中转染含有PFV LTR启动子及其控制下的荧光素酶报告基因的质粒,经过G418筛选得到稳定整合的细胞系.当PFV感染指示细胞系时,其反式激活因子Tas激活LTR启动子,诱导下游报告基因的表达,通过检测荧光素酶的活性即可对PFV的感染进行定量检测.结果表明,该细胞系可特异指示PFV的感染,相比于传统观察细胞病变的方法,该指示细胞系更为灵敏,是PFV相关研究的有力工具,具有潜在的应用价值. 展开更多
关键词 原型泡沫病毒PFV 荧光素酶报告基因 指示细胞系
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环媒恒温扩增技术（LAMP）检测原型泡沫病毒 被引量：1
4
作者 拜晓勃 杨彬 +2 位作者 陈启民 耿运琪 乔文涛 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期181-185,共5页
目的利用环媒恒温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification，LAMP），建立检测原型泡沫病毒（prototype foamy virus，PFV）的方法。方法根据PFV的整合酶核心区基因序列设计了3对LAMP引物，利用有链取代活性的Bst DNA聚合酶... 目的利用环媒恒温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification，LAMP），建立检测原型泡沫病毒（prototype foamy virus，PFV）的方法。方法根据PFV的整合酶核心区基因序列设计了3对LAMP引物，利用有链取代活性的Bst DNA聚合酶在63℃对靶序列进行扩增。优化检测条件，建立PFV的检测方法。结果以含目的片段的质粒为模板建立了PFV的检测方法，运用此方法可特异地检测出PFV，而人免疫缺陷病毒、牛免疫缺陷病毒、牛泡沫病毒检测均为阴性，检测灵敏度为50拷贝，较聚合酶链反应高一个数量级。系统可以在15min内完成扩增，同时可以在细胞基因组干扰下检出病毒，对混有病毒基因的人外周血单个核细胞（PBMC）总DNA的检测呈现特异阳性反应。结论建立基于PFV整合酶基因的LAMP检测方法，在PFV感染检测方面有应用前景。 展开更多
关键词 原型泡沫病毒 环媒恒温扩增技术 检测
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SLFN12与原型泡沫病毒Tas蛋白相互作用抑制其激活病毒启动子
5
作者 郭鸽 胡笑梅 +2 位作者 解英朋 谈娟 乔文涛 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1180-1187,共8页
Schlafen(SLFN)家族多个成员具有抗病毒活性,但Schlafen家族成员12(Schlafen12,SLFN12)的相关功能尚未见报道。本研究从B细胞cDNA文库中克隆获得SLFN12全长cDNA,亚克隆构建一系列真核表达质粒,分析SLFN12对原型泡沫病毒(prototype foamy... Schlafen(SLFN)家族多个成员具有抗病毒活性,但Schlafen家族成员12(Schlafen12,SLFN12)的相关功能尚未见报道。本研究从B细胞cDNA文库中克隆获得SLFN12全长cDNA,亚克隆构建一系列真核表达质粒,分析SLFN12对原型泡沫病毒(prototype foamy virus,PFV)复制的作用。将SLFN12全长质粒与PFV的感染性克隆(pcPFV)共转染HEK293T细胞。结果显示,当两者的转染质量比为1∶3时,SLFN12过表达使以游离病毒颗粒(cell-free)或细胞共培养(cell-to-cell)方式感染的PFV滴度分别降低了95.21%(P<0.001)以及97.91%(P<0.01),同时病毒蛋白质的表达量也减少,说明SLFN12能够抑制PFV的复制。共转染pcPFV与SLFN12的AAA结构域截短质粒进行同样的实验,PFV滴度分别对应下降了61.88%(P<0.05)以及72.28%(P<0.01),表明AAA结构域参与了SLFN12抑制PFV复制的功能。随后,利用报告质粒系统探究SLFN12对PFV启动子转录活性的影响,观察到SLFN12不影响病毒内部启动子(internal promoter,IP)(P>0.05)及长末端重复序列(long terminal repeat,LTR)(P>0.05)的基础转录活性,但抑制泡沫病毒反式激活因子(trans-activator of spumaviruses,Tas)的表达。当SLFN12和Tas表达质粒的转染质量比为1∶1时,Tas对IP以及LTR的转录激活作用相较对照组,分别减弱了66.27%(P<0.01)以及73.91%(P<0.01)。同时,免疫共沉淀实验观察到,Tas蛋白与SLFN12蛋白之间存在相互作用,表明SLFN12通过与PFV Tas相互作用削弱其表达,从而干扰Tas对IP和LTR的反式激活来抑制PFV复制。本研究发现,SLFN12具有抗病毒活性,拓宽了对SLFN家族抗病毒活性的认识,对于研究泡沫病毒潜伏感染的机制也具有参考价值。 展开更多
关键词 原型泡沫病毒 Schlafen家族成员12 泡沫病毒的反式激活因子
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SETDB1和HDAC1抑制原型泡沫病毒转录的机制研究
6
作者 袁佩佩 王爽 +1 位作者 闫君 刘万红 《湖北医药学院学报》 CAS 2022年第4期344-349,共6页
目的:探究组蛋白甲基化转移酶SETDB1及组蛋白去乙酰化酶HDAC1对原型泡沫病毒(prototype foamy virus, PFV)转录的影响。方法:通过qPCR检测下调SETDB1或下调HDAC1对病毒蛋白基因mRNA表达的影响;通过Western Blot检测下调SETDB1或下调HDAC... 目的:探究组蛋白甲基化转移酶SETDB1及组蛋白去乙酰化酶HDAC1对原型泡沫病毒(prototype foamy virus, PFV)转录的影响。方法:通过qPCR检测下调SETDB1或下调HDAC1对病毒蛋白基因mRNA表达的影响;通过Western Blot检测下调SETDB1或下调HDAC1对病毒蛋白表达的影响;通过ChIP-qPCR检测下调宿主蛋白Trim28的表达对SETDB1在PFV LTR启动子U5区域富集的影响;通过双荧光素酶报告基因实验检测抑制HDACs活性对病毒反式激活因子Tas功能的影响。结果:qPCR和Western Blot结果显示,下调SETDB1或下调HDAC1促进病毒蛋白基因gag和tas的mRNA水平及病毒蛋白Gag和Tas的表达;ChIP-qPCR结果显示,下调Trim28表达抑制SETDB1在LTR启动子U5区域的富集;双荧光素酶报告基因实验结果显示,TSA(trichostatin-A)抑制HDACs活性促进病毒反式激活因子Tas的转录激活活性。结论:SETDB1和HDAC1可负向调控原型泡沫病毒基因转录和病毒蛋白表达。 展开更多
关键词 原型泡沫病毒 SETDB1 HDAC1 LTR
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原型泡沫病毒Bet蛋白与SUMO1的相互作用及功能初探
7
作者 柴克莉 李丽爽 +2 位作者 张俊士 乔文涛 谈娟 《南开大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期14-19,共6页
原型泡沫病毒(prototype foamy virus,PFV)属于反转录病毒科泡沫病毒亚科,Bet是其编码的1个非结构蛋白.研究表明Bet蛋白在调控病毒蛋白的表达及病毒释放等过程中发挥重要作用.为进一步探究Bet的其他功能,通过酵母双杂交实验,以Bet作为... 原型泡沫病毒(prototype foamy virus,PFV)属于反转录病毒科泡沫病毒亚科,Bet是其编码的1个非结构蛋白.研究表明Bet蛋白在调控病毒蛋白的表达及病毒释放等过程中发挥重要作用.为进一步探究Bet的其他功能,通过酵母双杂交实验,以Bet作为诱饵钓取到与之相互作用的蛋白SUMO1,并初步探究了Bet对SUMO1功能的影响.实验结果表明,Bet与SUMO1在真核细胞中存在相互作用;Bet能够影响SUMO1在细胞中的定位,进而影响核定位蛋白NS1mut的SUMO化修饰. 展开更多
关键词 原型泡沫病毒 Bet蛋白 SUMO1 酵母双杂交
原文传递
世卫研发出H5N1禽流感原型病毒药厂反应冷淡
8
《饲料研究》 CAS 2004年第8期44-44,共1页
关键词 世界卫生组织 H5N1 禽流感原型病毒 疫苗 生产
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