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改良无血清法培养新生SD乳鼠原代海马神经元细胞 被引量：4
1
作者 冯龙 刘蔷薇 +3 位作者 冯泽国 袁维秀 徐龙河 张宏 《解放军医学院学报》 CAS 2020年第12期1222-1225,共4页
目的探讨改良无血清法培养新生SD乳鼠原代海马神经元细胞的效果及注意事项。方法2018年2-12月共解剖分离72只出生24 h内SD乳鼠的海马,采取Neurobasal+B27改良无血清法培养原代海马神经元细胞。铺板前使用Invitroge自动细胞计数仪计数存... 目的探讨改良无血清法培养新生SD乳鼠原代海马神经元细胞的效果及注意事项。方法2018年2-12月共解剖分离72只出生24 h内SD乳鼠的海马,采取Neurobasal+B27改良无血清法培养原代海马神经元细胞。铺板前使用Invitroge自动细胞计数仪计数存活及死亡细胞。细胞贴壁生长0 d、3 d、6 d、9 d、12 d时使用激光共聚焦显微镜观察神经细胞形态变化。结果平均每只乳鼠的海马可分离出(8.40±2.86)×10^(5)个神经细胞,其中存活细胞数为(5.48±1.73)×10^(5),死亡细胞数为(3.08±1.30)×10^(5),细胞总存活率为69%。细胞贴壁后第3天可观察到轴突长出,第6天树突长出,第9天和第12天可观察到周围神经细胞轴突、树突连成神经网络。贴壁后第3天胞体逐渐变大变饱满,最后呈扁圆形。细胞可存活4周左右。结论改良无血清法可用于培养原代海马神经元细胞,快速精准解剖分离及轻柔有效吹打海马组织是培养出高存活率和高活性原代海马神经元细胞的关键。 展开更多
关键词 原代海马神经元细胞 Neurobasal培养基 无血清培养 乳鼠 细胞培养
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清心开窍方对Aβ25-35诱导原代海马神经元损伤IGF-1R、IRS-1及Aβ mRNA表达的影响 被引量：2
2
作者 李燕 杨文育 +3 位作者 高诗雨 林坚炜 王天琪 胡海燕 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2018年第8期1810-1814,I0005,共6页
目的：研究清心开窍方对Aβ25-35诱导原代海马神经元细胞损伤胰岛素样生长因子1受体（insulin—like growth factor 1 receptor，IGF-1R）、胰岛素受体底物蛋白1（insulin receptor substrate-1，IRS-1）及β-淀粉样蛋白（β—amyloid，... 目的：研究清心开窍方对Aβ25-35诱导原代海马神经元细胞损伤胰岛素样生长因子1受体（insulin—like growth factor 1 receptor，IGF-1R）、胰岛素受体底物蛋白1（insulin receptor substrate-1，IRS-1）及β-淀粉样蛋白（β—amyloid，Aβ）基因表达的影响，探讨清心开窍方对神经元细胞的保护作用及其机制。方法：制备sD乳鼠原代海马神经元细胞，分为6组：正常对照组、模型组、尼莫地平组（1×107mol.L-1）、清心开窍方低、中、高剂量组（6.25、12.5、25mg/mL）。支持培养至第7天，各治疗组分别给予相应药物预处理24h后，模型组及各治疗组加入老化处理的Aβ25-35。（终浓度为10 μmol.L-1）共同作用24h，建立AD细胞模型。正常对照组给予相等体积的培养液继续孵育24h。采用CCK一8法检测各组的细胞活力，RT—PCR法检测各组IGF-1R、IRS-1和Aβ mRNA的表达水平。结果：模型组与正常对照组比较细胞活性明显降低（P〈0.01），而清心开窍方能有效改善细胞活性；RT—PCR法结果显示模型组IGF-1R mRNA明显降低（P〈0.01），IRS-1和Aβ mRNA表达均明显增加（P〈0.01），而不同浓度的清心开窍方处理后均能提高IGF-1R mRNA的表达（P〈0.01或P〈0.05），减少IRS-1和Aβ mRNA表达（P〈0.01或P〈0.05）。结论：清心开窍方能减轻β一淀粉样蛋白对神经元细胞的毒性作用，提高细胞存活率，保护海马神经元细胞。 展开更多
关键词 清心开窍方 原代海马神经元细胞 胰岛素样生长因子1受体 胰岛素受体底物蛋白1 β-淀粉样蛋白
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右美托咪啶对大鼠缺氧缺糖海马神经元凋亡的影响 被引量：2
3
作者 朱丝雨 郭明炎 曹铭辉 《岭南急诊医学杂志》 2014年第1期48-50,共3页
目的:探讨右旋美托咪啶(DEX)在大鼠海马神经元细胞中对缺氧缺糖(OGD)损伤导致的细胞凋亡的影响。方法:取培养8 d的原代新生大鼠海马神经元细胞随机分为4组:正常对照组、OGD模型组、DEX对照组和DEX处理组。建立大鼠原代海马神经元缺氧缺... 目的:探讨右旋美托咪啶(DEX)在大鼠海马神经元细胞中对缺氧缺糖(OGD)损伤导致的细胞凋亡的影响。方法:取培养8 d的原代新生大鼠海马神经元细胞随机分为4组:正常对照组、OGD模型组、DEX对照组和DEX处理组。建立大鼠原代海马神经元缺氧缺糖/复氧复糖损伤模型,JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位(MMP)变化,DCFH-DA染色检测细胞内活性氧(ROS)水平变化。结果:与对照组相比,OGD损伤可明显降低细胞内MMP水平,而右旋美托咪啶预处理可抑制MMP的降低,并可抑制OGD介导的ROS生成。结论:右美托咪啶对大鼠海马神经元OGD损伤具有保护作用,其机制与抑制ROS生成和抑制MMP下降相关。 展开更多
关键词 右美托咪啶 缺氧缺糖 原代海马神经元细胞 线粒体膜电位 活性氧
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