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miR-186-5p调控猪原代前体脂肪细胞增殖和分化的研究 被引量:3
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作者 蔡春波 刘敏 +5 位作者 杨阳 张万锋 高鹏飞 曹果清 李步高 郭晓红 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1247-1257,共11页
旨在探究miR-186-5p对猪原代前体脂肪细胞增殖和成脂分化的调控作用及机制。本研究采集7日龄健康马身猪公猪的颈部皮下脂肪,分离培养马身猪原代前体脂肪细胞;猪原代前体脂肪细胞分为4组,分别转染miR-186-5p模拟物(mimics)及其对照组(mim... 旨在探究miR-186-5p对猪原代前体脂肪细胞增殖和成脂分化的调控作用及机制。本研究采集7日龄健康马身猪公猪的颈部皮下脂肪,分离培养马身猪原代前体脂肪细胞;猪原代前体脂肪细胞分为4组,分别转染miR-186-5p模拟物(mimics)及其对照组(mimics NC),miR-186-5p抑制剂(inhibitor)及其对照组(inhibitor NC),用CCK8和划痕试验分析猪原代前体脂肪细胞的增殖效果,油红O染色检测其成脂分化能力,qPCR检测其增殖和成脂分化相关基因的表达水平;预测miR-186-5p的靶基因,用双荧光素酶报告试验检测miR-186-5p与靶基因的相互作用。结果,当猪原代前体脂肪细胞中转染mimics时,miR-186-5p的表达量极显著升高(P<0.01),细胞增殖能力和增殖相关基因:增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinases 4,CDK4)的表达量以及预测靶基因去乙酰化酶2(sirtuins 2,SIRT2)的表达量都极显著降低(P<0.01),而细胞成脂分化能力和成脂分化相关基因:过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptorγ,PPARγ)、固醇调节元件结合转录因子1(sterol regulatory element binding transcription factor 1,SREBF1)、CCAAT增强子结合蛋白β(CCAAT enhancer binding proteinβ,C/EBPβ)、脂肪酸结合蛋白4(fatty acid-binding protein 4,FABP4)、脂蛋白脂肪酶(lipoprotein lipase,LPL)的表达量都极显著升高(P<0.01);当猪原代前体脂肪细胞转染inhibitor时,miR-186-5p的表达量极显著降低(P<0.01),细胞增殖能力以及增殖相关基因PCNA和CDK4的表达量、预测靶基因SIRT2的表达量都显著或极显著升高(P<0.05、P<0.01),而细胞成脂分化能力以及成脂分化相关基因PPARγ、SREBF1、C/EBPβ、FABP4、LPL的表达量都极显著降低(P<0.01)。转染miR-186-5p mimics可以显著抑制SIRT23′UTR野生型双荧光素酶报告载体(SIRT2-Wt-psiCHECK-2)中荧光素酶的活性,但不影响SIRT23′UTR突变型� 展开更多
关键词 miR-186-5p 马身猪 原代脂肪细胞 增殖 成脂分化 靶基因
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BAMBI在小鼠不同类型脂肪组织发育及脂肪细胞分化过程中的差异表达规律 被引量:2
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作者 罗肖 贾如 +5 位作者 魏双羽 姚婷 王宇祥 鹿畅 Jonathan P.Whitehead 闫剑群 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期1-5,共5页
目的研究BAMBI基因在小鼠不同脂肪组织发育过程中的表达规律。方法利用RT-q PCR及Western blot技术检测BAMBI基因在小鼠不同类型脂肪组织、不同发育阶段(胚胎第18天、出生第0天、第21天、第8周和第6个月)及原代前体脂肪细胞分化过程中(... 目的研究BAMBI基因在小鼠不同脂肪组织发育过程中的表达规律。方法利用RT-q PCR及Western blot技术检测BAMBI基因在小鼠不同类型脂肪组织、不同发育阶段(胚胎第18天、出生第0天、第21天、第8周和第6个月)及原代前体脂肪细胞分化过程中(分化第0、3、7、11天)的差异表达情况。结果随着脂肪组织的发育,BAMBI m RNA及蛋白的表达量逐渐降低;在发育的同一时间段,BAMBI m RNA在内脏白色脂肪组织较皮下白色脂肪组织表达量高,在棕色脂肪组织中表达量最低;在小鼠前体脂肪细胞诱导分化过程中,BAMBI m RNA表达量呈时间依赖性降低。结论提示BAMBI的差异表达规律与脂肪组织类型、发育阶段以及脂肪细胞分化程度密切相关,其在脂肪组织发育过程中起着重要的作用。 展开更多
关键词 BAMBI RT-QPCR 脂肪组织 发育阶段 原代脂肪细胞
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新型格列酮类化合物ANY_2对原代大鼠前体脂肪细胞糖脂代谢的影响 被引量:1
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作者 乔海琦 巫冠中 《宁夏医科大学学报》 2010年第2期179-182,F0004,共5页
目的研究新型格列酮类化合物ANY2对原代大鼠前体脂肪细胞糖脂代谢的影响。方法①用Ⅱ型胶原酶消化法得到原代大鼠前体脂肪细胞接种于24孔细胞培养板,以诱导培养基诱导分化,油红O染色法观察化合物ANY2对前体脂肪细胞分化的影响,并用异丙... 目的研究新型格列酮类化合物ANY2对原代大鼠前体脂肪细胞糖脂代谢的影响。方法①用Ⅱ型胶原酶消化法得到原代大鼠前体脂肪细胞接种于24孔细胞培养板,以诱导培养基诱导分化,油红O染色法观察化合物ANY2对前体脂肪细胞分化的影响,并用异丙醇萃取油红O测定吸光度,比较各组分化程度。②以高浓度地塞米松作用于分化的脂肪细胞,制备胰岛素抵抗模型,观察化合物ANY2对胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖消耗量(GC)和游离脂肪酸(FFAs)溢出量的影响。结果浓度为1.1mg.L-1的化合物ANY2能显著促进前体脂肪细胞分化,分化率高达152%,提高其储脂能力,增加小脂肪细胞数量;提高胰岛素抵抗脂肪细胞糖耗量达363 mg.mg pro-1,减少其游离脂肪酸溢出,溢出量仅69 mmol.mg pro-1。结论化合物ANY2可促进原代前体脂肪细胞分化充脂,并改善高浓度地塞米松所导致的胰岛素抵抗作用。 展开更多
关键词 原代脂肪细胞 分化 脂肪酸溢出 胰岛素抵抗
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