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RUNX1在鼻息肉黏膜上皮细胞凋亡中的作用研究 被引量：1
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作者 裴银银 黄丹怡 +7 位作者 张婷 张薇 张洁 张少聪 类云 周勇 程雷 陈静 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CSCD 北大核心 2021年第12期1328-1335,共8页
目的探究Runt相关转录因子1(Runt-related transcription factor 1,RUNX1)在鼻息肉(nasal polyps,NPs)组织中的表达差异,并分析RUNX1在NPs原代人鼻黏膜上皮细胞(primary human nasal epithelial cells,pHNECs)凋亡中的作用及调控机制。... 目的探究Runt相关转录因子1(Runt-related transcription factor 1,RUNX1)在鼻息肉(nasal polyps,NPs)组织中的表达差异,并分析RUNX1在NPs原代人鼻黏膜上皮细胞(primary human nasal epithelial cells,pHNECs)凋亡中的作用及调控机制。方法以免疫蛋白印迹(WB)和免疫组织化学染色检测组织层面RUNX1的表达水平。采用肿瘤坏死因子α(TNF-α,20 ng/ml)体外诱导pHNECs发生凋亡,进行Hoechst染核观察细胞凋亡。随后,通过实时荧光定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和WB检测凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤基因2(B-cell lymphoma-2,BCL-2);BCL2相关蛋白质X(BCL2-associated X,BAX);含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)的表达,评估凋亡水平。将sh-RUNX1-6质粒转染至pHNECs凋亡模型,用WB和流式细胞术评估RUNX1沉默对凋亡的影响。通过SPSS 19.0软件和GraphPad Prism 5软件进行统计学分析。结果NPs组织中RUNX1的表达明显高于正常下鼻甲组织,差异具有统计学意义(0.274±0.042比0.110±0.027,t=9.675,P<0.05)。与下鼻甲组织相比,NPs中BAX和Caspase-3高表达,而BCL-2低表达,差异具有统计学意义(BAX 0.346±0.032比0.302±0.037,Caspase-30.228±0.061比0.158±0.065,BCL-20.090±0.047比0.276±0.057,t值分别为2.680、2.361、7.575,P值均<0.05)。TNF-α诱导后pHNECs中RUNX1的蛋白、mRNA表达和凋亡水平均呈时间依赖性升高,差异具有统计学意义(P值均<0.05)。sh-RUNX1-6质粒转染能够下调TNF-α刺激下pHNECs中RUNX1的表达。沉默TNF-α刺激下pHNECs中的RUNX1后,细胞中BAX和Caspase-3的蛋白水平降低,而BCL-2表达增高,细胞凋亡率降低,差异有统计学意义(P值均<0.05)。结论RUNX1在NPs组织中高表达,沉默RUNX1能够抑制TNF-α诱导的pHNECs凋亡,从而减轻细胞炎症损伤。 展开更多
关键词 Runt相关转录因子1 鼻息肉 原代人鼻黏膜上皮细胞 肿瘤坏死因子Α 凋亡
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