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卵裂球的完整性和生长与否对冻融胚胎移植妊娠结局的影响 被引量:22
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作者 陆湘 李路 +5 位作者 高晓红 吴煜 王永卫 孙健 陶皆惟 孙晓溪 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期518-522,共5页
目的:探讨冻融胚胎移植(FET)周期卵裂球的完整性和生长与否对妊娠结局的影响。方法:375例FET周期,其中解冻当天移植周期242例,提前解冻周期133例,根据复苏后移植卵裂球的完整性分为3组:均完整(A组,n=235)、均有破损(B组,n=21)、完整与... 目的:探讨冻融胚胎移植(FET)周期卵裂球的完整性和生长与否对妊娠结局的影响。方法:375例FET周期,其中解冻当天移植周期242例,提前解冻周期133例,根据复苏后移植卵裂球的完整性分为3组:均完整(A组,n=235)、均有破损(B组,n=21)、完整与破损混合(C组,n=119);提前解冻者根据卵裂球的生长与否分为均有生长74例(Ⅰ组)、部分有生长45例(Ⅱ组)和均无生长14例(Ⅲ组)3组。结果:375例FET周期共解冻胚胎1284个,复苏率为61.2%,每移植周期临床妊娠率30.1%,种植率18.3%;A组的继续妊娠率和种植率分别为27.7%和20.5%,明显高于B组的9.5%和8.3%(P<0.05),C组为22.7%和15.1%,低于A组,但差异无统计学意义(P>0.05)。随着移植胚胎中含完整存活胚胎数的增加(0个、1个、2个、3个),继续妊娠率呈增加趋势(9.5%、17.6%、22.3%和38.2%),移植胚胎中含3个完整胚胎的继续妊娠率明显高于含0、1个完整胚胎者(P<0.05);提前解冻的Ⅰ组继续妊娠率(37.8%)和种植率(26.1%)最高,Ⅲ组最低(7.1%和8.3%),Ⅱ组为24.4%和14.1%,组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:卵裂球的完整性是影响冻融胚胎种植率的重要因素,移植前提早解冻观察复苏后胚胎有无进一步生长,有助于评价冻融胚胎的发育潜能。 展开更多
关键词 冻融胚胎移植(FET) 卵裂 妊娠率 种植率
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囊胚培养的相关因素分析 被引量:11
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作者 黄志辉 余敏 +1 位作者 伍琼芳 辛才林 《江西医药》 CAS 2013年第4期305-308,共4页
目的探讨体外受精(IVF)和精子卵胞浆内注射技术(ICSI)治疗周期中体外培养囊胚形成的影响因素。方法将卵裂期第3d(D3)冷冻后剩余胚胎进行体外延长培养至囊胚期,观察囊胚形成情况。结果共收集7438个冷冻后剩余胚胎,经序贯培养,形成1382个... 目的探讨体外受精(IVF)和精子卵胞浆内注射技术(ICSI)治疗周期中体外培养囊胚形成的影响因素。方法将卵裂期第3d(D3)冷冻后剩余胚胎进行体外延长培养至囊胚期,观察囊胚形成情况。结果共收集7438个冷冻后剩余胚胎,经序贯培养,形成1382个优质囊胚(18.58%)。D3胚胎中6个细胞的优质囊胚形成率(10.34%)显著高于4-5个细胞的优质囊胚形成率(5.45%),差异有统计学意义(P=0.011);7-9个细胞的优质囊胚形成率(19.95%)显著高于6个细胞的优质囊胚形成率(10.34%),≥10个细胞的优质囊胚形成率(27.47%)显著高于7-9个细胞的优质囊胚形成率(19.95%),差异均有统计学意义(P<0.001)。D2胚胎中4个细胞的优质囊胚形成率(25.40%)显著高于3个细胞、5个细胞的优质囊胚形成率(10.26%,15.41%),差异有统计学意义(P<0.001)。碎片评级I-II级D2、D3胚胎的囊胚形成率均显著高于III-IV级的胚胎,差异有统计学意义(P<0.001)。结论体外延长培养能有效筛选具有发育潜力的胚胎,优质囊胚形成与D2、D3胚胎的卵裂球数及碎片评级密切相关。 展开更多
关键词 体外受精 囊胚培养 卵裂 胚胎碎片
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山羊(Bore)-兔异种克隆胚胎连续核移植的研究 被引量:6
3
作者 章志国 章孝荣 +4 位作者 刘亚 金仁桃 章美玲 汪存利 赵焕 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期601-605,共5页
以山羊-兔异种克隆桑椹胚卵裂球为核供体,兔卵母细胞为受体进行连续核移植研究,最终连续 2 次,共获得继Ⅰ代重构胚 58 枚,继Ⅱ代重构胚 14 枚。融合率分别为 79.5%和 70%,差异不显著(P>0.05)卵裂率分别为 75.9%和 28.6%,差异显著(P&l... 以山羊-兔异种克隆桑椹胚卵裂球为核供体,兔卵母细胞为受体进行连续核移植研究,最终连续 2 次,共获得继Ⅰ代重构胚 58 枚,继Ⅱ代重构胚 14 枚。融合率分别为 79.5%和 70%,差异不显著(P>0.05)卵裂率分别为 75.9%和 28.6%,差异显著(P<0.05)。但继Ⅱ代重构胚最终未能发育至囊胚,继Ⅰ代重构胚囊胚率达到 10.2%。 展开更多
关键词 山羊 异种克隆 囊胚率 桑椹胚 核移植 胚囊 卵裂 重构胚 胚胎 卵裂
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引物延伸预扩增法应用于β-地中海贫血患者胚胎植入前遗传学诊断——附一例报告 被引量:5
4
作者 焦泽旭 庄广伦 +5 位作者 周灿权 舒益民 李洁 梁晓燕 张敏芳 邓明芬 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期143-146,共4页
目的 探讨对 β 地中海贫血进行胚胎植入前遗传学诊断 (PGD)的方法。 方法 两对夫妇双方均分别为密码子 41 42 ( TCTT)及插入序列 (IVS) Ⅱ 65 4(C→T)突变杂合子 ,在本中心进行超排卵和体外受精 胚胎移植治疗 ,胚胎活检后应用全基... 目的 探讨对 β 地中海贫血进行胚胎植入前遗传学诊断 (PGD)的方法。 方法 两对夫妇双方均分别为密码子 41 42 ( TCTT)及插入序列 (IVS) Ⅱ 65 4(C→T)突变杂合子 ,在本中心进行超排卵和体外受精 胚胎移植治疗 ,胚胎活检后应用全基因组扩增技术及反向点杂交进行胚胎PGD ,根据诊断结果选择健康的胚胎移植入子宫。结果  2例患者共获卵 3 5个 ,受精率为 87% ,共活检胚胎16个 ,获卵裂球 2 5个 ,单卵裂球总扩增效率为 84% ,等位基因脱扣率为 15 %。 2例患者共移植 5个胚胎 ,1例获得妊娠 ,已分娩健康双胎。结论 应用引物延伸预扩增技术可对 β 地中海贫血进行PGD 。 展开更多
关键词 Β-地中海贫血 患者 PGD 遗传学诊断 全基因组扩增 胚胎植入 治疗 密码子 卵裂 引物
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玻璃化冻融后胚胎卵裂球的损伤与生长融合对移植结局的影响 被引量:9
5
作者 李伟 施文浩 +1 位作者 李明昭 师娟子 《生殖医学杂志》 CAS 2015年第7期542-545,共4页
目的探讨玻璃化冻融胚胎移植周期卵裂球的损伤以及生长、融合与否对移植结局的影响。方法回顾性分析2010年1月至2012年2月1 679个玻璃化冻融胚胎移植周期,根据复苏后是否有卵裂球损伤分为两组:A组(无损伤组,n=1 357)、B组(有损伤组,n=3... 目的探讨玻璃化冻融胚胎移植周期卵裂球的损伤以及生长、融合与否对移植结局的影响。方法回顾性分析2010年1月至2012年2月1 679个玻璃化冻融胚胎移植周期,根据复苏后是否有卵裂球损伤分为两组:A组(无损伤组,n=1 357)、B组(有损伤组,n=322)。根据过夜培养后胚胎卵裂球是否分裂生长将A组分为两个亚组:AⅠ组(有生长组,n=1 170)、AⅡ组(无生长组,n=187);根据胚胎卵裂球是否有融合将AⅠ组再分为:AⅠ-1组(有融合组,n=316)、AⅠ-2组(无融合组,n=854)。比较各组移植后的种植率和临床妊娠率。结果A组的种植率和临床妊娠率分别为32.33%、54.09%,显著高于B组的23.07%、40.37%(P<0.01);AⅠ组的种植率和临床妊娠率分别为33.87%、56.50%,显著高于AⅡ组的22.08%、39.04%(P<0.01);AⅠ-1组的种植率和临床妊娠率分别为40.93%、64.87%,显著高于AⅠ-2组的31.31%、53.40%(P<0.01)。结论胚胎经过玻璃化冻融后,卵裂球的损伤会影响随后的种植和妊娠。冻融后的胚胎经过培养,能恢复分裂生长甚至达到融合状态,有助于评价胚胎的发育潜能,对冻融移植周期胚胎的选择有一定的指导作用。 展开更多
关键词 冻融胚胎移植 卵裂 种植率 妊娠率
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植入前遗传学诊断中四种卵裂球固定方法的比较 被引量:8
6
作者 李刚 孙莹璞 金海霞 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期440-442,共3页
目的:寻求卵裂球固定的最适方法。方法:IVF/ICSI受精治疗周期中不宜移植的24枚胚胎,采用OCTAX-LaserShot胚胎透明带激光打孔,用吸拉法共活检出154个完整卵裂球,分别用4种不同的固定方法(KCl组;Tween-20/HCl组;甲醇/冰醋酸组;Tween-20/H... 目的:寻求卵裂球固定的最适方法。方法:IVF/ICSI受精治疗周期中不宜移植的24枚胚胎,采用OCTAX-LaserShot胚胎透明带激光打孔,用吸拉法共活检出154个完整卵裂球,分别用4种不同的固定方法(KCl组;Tween-20/HCl组;甲醇/冰醋酸组;Tween-20/HCl+甲醇/冰醋酸组)固定,固定后使用X、Ya-卫星DNA探针进行荧光原位杂交,比较其固定率和出信号率。结果:透明带激光打孔辅助下卵裂球吸拉法活检成功率为96.25%;4种固定方法固定率和出信号率分别为98.4%和95.2%,60.0%和72.2%、63%和73.7%、70%和76.2%。结论:透明带激光打孔辅助卵裂球吸拉法活检有效;第4种卵裂球固定方法能减少卵裂球丢失,简化操作程序,因此两者在植入前遗传学诊断中值得推广。 展开更多
关键词 植入前遗传学诊断(PGD) 卵裂 荧光原位杂交
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冻融胚胎移植卵裂球数目及胚胎存活状态与临床妊娠的关系 被引量:9
7
作者 王利红 钟景琦 +1 位作者 石磊 郭颖 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第38期72-73,共2页
目的探讨冻融胚胎移植(CET)卵裂球数目及胚胎存活状态与临床妊娠的关系。方法 146例不孕症患者,均进行CET。其中胚胎解冻后平均卵裂球数目<6个且胚胎全存活者20例(A组),平均卵裂球数目<6个且胚胎不全存活者28例(B组),平均卵裂球... 目的探讨冻融胚胎移植(CET)卵裂球数目及胚胎存活状态与临床妊娠的关系。方法 146例不孕症患者,均进行CET。其中胚胎解冻后平均卵裂球数目<6个且胚胎全存活者20例(A组),平均卵裂球数目<6个且胚胎不全存活者28例(B组),平均卵裂球数目≥6个且胚胎全存活者30例(C组),平均卵裂球数目≥6个且胚胎不全存活者60例(D组)。各组均选择质量较好的1~3个胚胎进行移植。结果 A、B、C、D组临床妊娠率分别为10.0%、21.4%、43.3%、32.4%,C组临床妊娠率明显高于A组(P<0.05),A组与B组、B组与C组、C组与D组临床妊娠率相比P均>0.05。结论采用CET辅助生殖者胚胎解冻后平均卵裂球数目及胚胎存活状态与临床妊娠率有关。平均卵裂球数目≥6个且胚胎全部存活的CET患者临床妊娠率最高。 展开更多
关键词 胚胎冷冻 卵裂 胚胎存活
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单细胞扩增前引物延伸多基因位点检测研究 被引量:3
8
作者 袁淑慧 金帆 黄荷凤 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2002年第3期145-148,共4页
目的 :考察单细胞扩增前引物延伸 (PEP)全基因组扩增 ,后续巢式 PCR同步检测β地中海贫血突变基因 CD17、nt- 2 8及连锁基因 (ATTTT)、18和 2 1号染色体短串联重复序列 D18S5 1、D2 1S11和 D2 1S14 11、囊性纤维病 CFΔ F5 0 8及连锁基... 目的 :考察单细胞扩增前引物延伸 (PEP)全基因组扩增 ,后续巢式 PCR同步检测β地中海贫血突变基因 CD17、nt- 2 8及连锁基因 (ATTTT)、18和 2 1号染色体短串联重复序列 D18S5 1、D2 1S11和 D2 1S14 11、囊性纤维病 CFΔ F5 0 8及连锁基因 (GATT)、杜氏肌营养不良症 DMD基因外显子 17和 4 8以及 Y染色体性别决定基因 SRY的可行性。方法 :显微操作获取单个淋巴细胞和胚胎细胞 ,PEP全基因组扩增 ,后续特异性巢式 PCR,检测上述 10个基因位点的单细胞扩增成功率、假阳性率、假阴性率。结果 :上述 10个位点的单个淋巴细胞扩增成功率、假阳性率和假阴性率分别为 89.5 %、0 .4 8%和 2 .5 0 % ,单个胚胎细胞扩增成功率和假阳性率分别为 85 .5 6 %和 3.0 %。结论 :单细胞 PEP后续巢式 PCR同步检测上述 10个基因位点有较高的扩增成功率和很低的假阳性率和假阴性率 ,具有应用于植入前遗传学诊断的实际可行性。 展开更多
关键词 单细胞扩增前引物延伸 多基因位点检测 PEP 淋巴细胞 卵裂 基因诊断 Β地中海贫血
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影响冻融胚胎发育潜能及妊娠结局因素的探讨 被引量:8
9
作者 王宁怡 孙晓溪 +3 位作者 陆朱娣 曹英 曹翔 刘素英 《生殖与避孕》 CAS CSCD 2012年第8期533-539,517,共8页
目的:探讨胚胎冷冻复苏后,卵裂球存活状态对胚胎发育的影响以及体外授精(IVF)和卵胞质内单精子注射(ICSI)2种授精方式对冷冻胚胎复苏后体外发育能力和妊娠结局的影响。方法:回顾性分析142例患者,150个复苏周期,共769个冷冻胚胎复苏后培... 目的:探讨胚胎冷冻复苏后,卵裂球存活状态对胚胎发育的影响以及体外授精(IVF)和卵胞质内单精子注射(ICSI)2种授精方式对冷冻胚胎复苏后体外发育能力和妊娠结局的影响。方法:回顾性分析142例患者,150个复苏周期,共769个冷冻胚胎复苏后培养至囊胚期进行移植的结果。结果:共复苏胚胎769个,存活胚胎702个,复苏率91.3%。220个胚胎(31%)到达囊胚阶段。在卵裂球全部存活胚胎中,囊胚形成率35%,部分存活胚胎中囊胚形成率24%,两者有统计学差异(P<0.01)。在卵裂球全部存活胚胎中,来源于IVF的胚胎囊胚形成率为40%,来源于ICSI的为26%,两者有统计学差异(P<0.01);部分卵裂球存活胚胎中来源于IVF的胚胎囊胚形成率为26%,来源于ICSI的为19%,差异无统计学意义(P>0.05)。在全部220个囊胚中,IVF组的优质囊胚率为38.6%,ICSI组的优质囊胚率为21.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。临床妊娠率IVF组和ICSI组分别为61.05%与61.11%;胚胎种植率分别为37.50%与36.67%,活产率分别为81.03%与78.79%,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:胚胎冷冻复苏后卵裂球的损伤削弱了囊胚形成能力,影响卵裂期胚胎进一步发育,这与ICSI和冷冻胚胎复苏后发育潜能的降低有关,但其对临床结果和妊娠结局的影响不大。 展开更多
关键词 卵裂 囊胚 冷冻 IVF ICSI
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乙型肝炎病毒DNA在胚胎卵裂球细胞中的整合 被引量:7
10
作者 张昌军 杨敬宁 +3 位作者 王华 罗清炳 彭海英 熊进 《山西医科大学学报》 CAS 2008年第12期1068-1070,1151,共4页
目的探讨乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)在胚胎卵裂球细胞中的整合情况,并探索卵裂球细胞的活组织检查用于阻断HBV垂直传播的可行性。方法体外受精的患者共43对夫妇,依据HBV感染情况分为三组:A组18对夫妇(丈夫HBsAg阳性或HBeAg阳... 目的探讨乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)在胚胎卵裂球细胞中的整合情况,并探索卵裂球细胞的活组织检查用于阻断HBV垂直传播的可行性。方法体外受精的患者共43对夫妇,依据HBV感染情况分为三组:A组18对夫妇(丈夫HBsAg阳性或HBeAg阳性,妻子HBsAg阴性且抗-HBs阳性);B组20对夫妇(夫妻双方HBsAg、HBeAg均为阳性);C组5对夫妇,为对照组(夫妻双方均无HBV感染)。活检体外受精的胚胎,应用荧光原位杂交技术检测HBV在胚胎卵裂球细胞的整合情况。结果荧光原位杂交结果显示,在子代胚胎卵裂球细胞,A组有2例检测到HBV的整合,B组有9例检测到HBV的整合,C组均未观测到HBV整合。与A组比较,B组HBV在胚胎卵裂球细胞整合率明显升高(P<0.05)。B组中部分卵裂球细胞为多拷贝整合,在来自HBV感染的同一个胚胎的卵裂球细胞,HBV整合只出现在部分细胞。结论HBV可整合于胚胎卵裂球细胞。HBsAg和HBeAg均为阳性的夫妇的后代胚胎易于发生HBV整合。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 整合 垂直传播 卵裂
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蒙古绵羊胚胎的卵裂及囊胚形成 被引量:6
11
作者 荀崇文 包彬 《解剖学报》 CAS 1981年第3期326-331,共6页
研究蒙古绵羊胚胎发生的规律,对绵羊的繁殖育种、定向培育新品种、丰富胚胎学内容,都有重要的意义。同时近年来国内外学者对家畜受精卵的移植作了大量研究工作。因此,通过对蒙古绵羊胚胎发生的研究,不但可以阐明蒙古绵羊胚胎的卵裂及囊... 研究蒙古绵羊胚胎发生的规律,对绵羊的繁殖育种、定向培育新品种、丰富胚胎学内容,都有重要的意义。同时近年来国内外学者对家畜受精卵的移植作了大量研究工作。因此,通过对蒙古绵羊胚胎发生的研究,不但可以阐明蒙古绵羊胚胎的卵裂及囊胚形成的胚胎学特征,而且也为蒙古绵羊受精卵的移植提供科学论据。 展开更多
关键词 囊胚形成 卵裂 分裂 胚胎 蒙古绵羊
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人类卵裂早期胚胎多核现象研究进展 被引量:5
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作者 王志强 倪亚莉 +1 位作者 张霖 柴三明 《生殖医学杂志》 CAS 2017年第6期621-625,共5页
移植日胚胎的选择在辅助生殖技术(ART)治疗过程中至关重要,如何挑选高质量胚胎进行移植与ART治疗结局息息相关。目前辅助生殖实验室常用胚胎形态学特征来评估胚胎的发育潜能,但其中暂未纳入早期胚胎的卵裂球多核现象。近年来,随着ART及... 移植日胚胎的选择在辅助生殖技术(ART)治疗过程中至关重要,如何挑选高质量胚胎进行移植与ART治疗结局息息相关。目前辅助生殖实验室常用胚胎形态学特征来评估胚胎的发育潜能,但其中暂未纳入早期胚胎的卵裂球多核现象。近年来,随着ART及医学遗传学诊断方法的飞速发展,生殖医学研究者逐渐认识到胚胎早期发育过程中的卵裂球多核现象可能与胚胎后续发育潜能之间有一定的相关性,并对其进行了深入研究。本文就胚胎早期发育过程中多核卵裂球的形成原因及其与胚胎后续发育潜能和临床结局之间的相关性展开综述。 展开更多
关键词 卵裂早期 多核 卵裂 染色体 辅助生殖技术
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人卵和胚胎线粒体ATP合酶表达的研究 被引量:4
13
作者 黄睿 彭文林 +1 位作者 张敏芳 庄广伦 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期92-93,100,F004,共4页
 目的 探讨ATP合酶表达与卵子发育潜能间的关系。方法 收集行常规体外受精 (IVF) 和单精子卵胞质内注射 (ICSI) 不受精的成熟卵母细胞25个, 不适合移植及冷冻保存的胚胎30 个, 应用免疫组织化学方法检测单个卵子和胚胎ATP合酶的蛋白...  目的 探讨ATP合酶表达与卵子发育潜能间的关系。方法 收集行常规体外受精 (IVF) 和单精子卵胞质内注射 (ICSI) 不受精的成熟卵母细胞25个, 不适合移植及冷冻保存的胚胎30 个, 应用免疫组织化学方法检测单个卵子和胚胎ATP合酶的蛋白表达。结果 ATP合酶均匀地表达于人卵和胚胎的卵裂球中。未受精人卵中表达呈弱阳性; 胚胎中的表达呈强阳性; 有碎片的胚胎中, 碎片部位ATP合酶的表达明显较卵裂球降低。结论 ATP合酶蛋白表达减少可能通过干扰卵子的能量代谢以及正常的受精过程而参与受精失败, 并与卵子的发育潜能密切相关。 展开更多
关键词 人卵 胚胎 酶表达 卵子 线粒体 免疫组织化学方法 ICSI ATP合酶 卵裂 发育
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卵裂球培养的研究进展 被引量:3
14
作者 秦应和 《国外畜牧科技》 1999年第3期31-33,共3页
卵裂球培养是进行胚胎克隆的一种简便而实用的方法。它主要包括多个卵裂球培养或单个卵裂球培养,虽然不同的方法有各自的优缺点,但以单个卵裂球的无透明带培养最具实用价值。目前存在的根本问题是培养的卵裂球发育成功率不高,克隆胚... 卵裂球培养是进行胚胎克隆的一种简便而实用的方法。它主要包括多个卵裂球培养或单个卵裂球培养,虽然不同的方法有各自的优缺点,但以单个卵裂球的无透明带培养最具实用价值。目前存在的根本问题是培养的卵裂球发育成功率不高,克隆胚胎的再克隆也有待进一步研究。 展开更多
关键词 卵裂 胚胎培养 胚胎克隆 动物
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多齿围沙蚕Perinereis nuntia (Savigny)个体发育的研究 被引量:5
15
作者 龚启祥 范广钻 +1 位作者 谷进进 郑佩玉 《浙江海洋学院学报(自然科学版)》 CAS 1984年第2期141-148,4,共9页
本文通过对多齿围沙蚕个体发育的观察,就多齿围沙蚕个体发育的特点、沙蚕发育类型;幼沙蚕的形态特征以及沙蚕幼体消化道内的油球结构及其生理功能等问题作了叙述和探讨。
关键词 担轮幼虫期 多齿围沙蚕 图版 分裂 卵裂 个体发育 个体发生 Perinereis nuntia SAVIGNY
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影响兔胚胎细胞核移植效率的因素 被引量:3
16
作者 崔奎青 刘庆友 +2 位作者 谢英 韦精卫 石德顺 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期1255-1259,共5页
对兔胚胎细胞核移植(NT)的有关影响因素进行了系统研究。结果发现电场强度100V·mm-1,脉冲时间15μs,电脉冲3~4次的融合率显著高于其它组(P<0.05);融合前激活卵母细胞,分裂率和囊胚率显著高于融合后激活(P<0.05);当用8~16-... 对兔胚胎细胞核移植(NT)的有关影响因素进行了系统研究。结果发现电场强度100V·mm-1,脉冲时间15μs,电脉冲3~4次的融合率显著高于其它组(P<0.05);融合前激活卵母细胞,分裂率和囊胚率显著高于融合后激活(P<0.05);当用8~16-细胞胚胎的卵裂球作供核时,卵裂率和囊胚率显著高于致密桑椹胚卵裂球为供核组;当重组胚在含3%发情牛血清(OCS)的TCM199中培养48h后,转入含10%FCS的TCM199中继续培养,卵裂率和囊胚率显著高于一直在3%OCS或10%胎犊血清(FCS)中培养的重组胚(P<0.05)。将22枚2~4-细胞期重组胚移入同期发情的受体母兔输卵管内,34d后产下NT仔兔1只。结果表明,电融合参数和供体胚胎的发育阶段以及受体卵母细胞的状态对NT效果有显著影响,在NT胚胎的不同发育阶段采用不同的血清种类和浓度可提高其胚胎发育能力。 展开更多
关键词 兔胚胎 移植效率 胚胎发育能力 卵母细胞 发育阶段 细胞核移植 囊胚率 重组胚 系统研究 电场强度 脉冲时间 同期发情 卵裂 卵裂 融合率 电脉冲 桑椹胚 牛血清 FCS OCS 细胞期 NT 电融合 激活 受体 母兔 仔兔 供体
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双重套式PCR对不同取样胚胎性别鉴定灵敏度测试 被引量:5
17
作者 赵学明 朱士恩 +1 位作者 侯云鹏 周光斌 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期17-22,共6页
目的 :测定双重套式PCR微量扩增体系的灵敏度 ,为附植前遗传学诊断 (PGD)、家畜胚胎性别鉴定等提供技术保障。方法 :以桑椹胚卵裂球为模板进行扩增 ,建立昆明白小鼠特异的SRY ZFX双重套式PCR性别鉴定体系。按卵裂球数量的不同分为五组 ... 目的 :测定双重套式PCR微量扩增体系的灵敏度 ,为附植前遗传学诊断 (PGD)、家畜胚胎性别鉴定等提供技术保障。方法 :以桑椹胚卵裂球为模板进行扩增 ,建立昆明白小鼠特异的SRY ZFX双重套式PCR性别鉴定体系。按卵裂球数量的不同分为五组 ,对应的卵裂球个数分别为 1、2、3、4、5及以上。根据有效扩增结果得出双重套式PCR的灵敏度。结果 :第 1组 (卵裂球个数为 1 ) ,有效检出率为 85 % ( 34 /40 ) ,污染率为 7 5 % ( 3 /40 ) ,漏检率为 7 .5 % ( 3 /40 )。随着卵裂球个数的增多 ,有效检出率逐渐升高 ,而污染率和漏检率则呈逐渐下降趋势。第 5组 (卵裂球达到 5及以上 ) ,有效检出率达到 1 0 0 % ,漏检率为 0。对于第 2、3、4、5组而言 ,有效检出率及漏检率各组间并无显著差异 (P >0 . 0 5 ) ;而第一组与其它各组间 ,有效检出率及漏检率存在显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 :双重套式PCR可以有效扩增基因组DNA量约为 1 2pg的模板 ,且扩增片段为单拷贝片段。 展开更多
关键词 套式PCR 检出率 扩增片段 卵裂 PGD 遗传学诊断 升高 胚胎性别鉴定 桑椹胚 污染率
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家兔供体卵裂球细胞周期对核移植胚胎发育的影响 被引量:2
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作者 王永胜 曾申明 +7 位作者 朱士恩 田见晖 余文莉 李树静 张忠诚 陈永福 商家骥 魏建生 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第3期368-374,共7页
通过化学药物处理使家兔桑椹胚卵裂球的细胞周期分别同期化于G1、S或G2期 ,然后分别移入去核的MⅡ期卵母细胞中 ,以研究供体核细胞周期对家兔胚胎细胞核移植效率的影响。试验结果表明供体核细胞周期对家兔核移植胚胎的发育潜力有明显影... 通过化学药物处理使家兔桑椹胚卵裂球的细胞周期分别同期化于G1、S或G2期 ,然后分别移入去核的MⅡ期卵母细胞中 ,以研究供体核细胞周期对家兔胚胎细胞核移植效率的影响。试验结果表明供体核细胞周期对家兔核移植胚胎的发育潜力有明显影响 ,以G1期卵裂球为供体的核移植重组胚的激活率、卵裂率、桑椹胚、囊胚和孵化囊胚率及囊胚平均细胞数分别为 87 3% (32 2 / 36 9)、 84 9% (2 99/ 35 2 )、 71 5 % (193/ 2 70 )、5 8 0 % (76 / 131)、 35 1% (4 6 / 131)和 12 6± 4 8,显著高于S期 [79 6 % (10 9/ 137)、 74 4% (93/ 12 5 )、30 3% (33/ 10 9)、19 3% (17/ 88)、 6 8% (6 / 88)和 118 8± 3 5 ]、G2期 [6 3 6 % (70 / 110 )、6 0 % (6 0 / 10 0 )、16 9% (11/ 6 5 )、 16 3% (7/ 43)、 4 7% (2 / 43)和 110 6± 5 8]和未经同期化处理的卵裂球 [78 1% (185 /2 37)、 73 2 % (15 8/ 2 16 )、 49 4% (4 3/ 87)、 32 2 % (2 8/ 87)、 12 6 % (11/ 87)和 12 0 5± 4 4](P <0 0 5 )。来源于G1期卵裂球的 144枚克隆胚胎移植到 12只受体中 ,6只妊娠并产下 19只活仔 ,产仔率为 13 2 % ,显著高于来源于S期 (5 8% ,7/ 12 0 )、G2期 (0 ,0 / 12 6 )或未同期化卵裂球的克隆胚胎 (5 3% ,8/ 15 0 ) (P 展开更多
关键词 家兔 供体 卵裂 细胞周期 核移植 胚胎发育
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人早期胚胎卵裂球全能性的体外实验研究 被引量:4
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作者 黄娟华 刘炜培 +1 位作者 张羽虹 李颖嫦 《中国优生与遗传杂志》 2006年第2期89-90,共2页
目的研究人早期胚胎分割后单个卵裂球的继续发育与分化,探讨人早期胚胎卵裂球的全能性。方法采用胚胎分割技术把35个人早期胚胎(2-8细胞期)分割成单个卵裂球,再行单个卵裂球的体外培养,观察卵裂球的生长发育情况。结果 35个胚胎经胚胎... 目的研究人早期胚胎分割后单个卵裂球的继续发育与分化,探讨人早期胚胎卵裂球的全能性。方法采用胚胎分割技术把35个人早期胚胎(2-8细胞期)分割成单个卵裂球,再行单个卵裂球的体外培养,观察卵裂球的生长发育情况。结果 35个胚胎经胚胎分割处理后共获得178个单个卵裂球,分散成功率为75.1%,单个卵裂球体外培养24h 分裂率为73.6%,48h达3-4细胞者70.2%,72h挤紧(compaction)者61.2%,96h迭早期囊胚者51.1%,120h达扩张囊胚阶段者42.7%。结论人早期胚胎的单个卵裂球体外培养可发育到扩张囊胚阶段,此试验可为人早期胚胎卵裂球全能性的研究提供直接的论据,具重要的临床价值和广泛的应用前景。 展开更多
关键词 胚胎 卵裂 全能性
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未见原核晚期卵裂胚胎染色体的微阵列-比较基因组杂交分析 被引量:4
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作者 张守信 刘晓妍 +2 位作者 孙成铭 刘杰 郝翠芳 《中华妇幼临床医学杂志(电子版)》 CAS 2013年第6期653-656,共4页
目的观察体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗周期中未见原核(PN)晚期卵裂胚胎单个卵裂球染色体分子核型。方法取IVF-ET治疗中4枚未见PN晚期卵裂胚胎进行体外培养,在受精第3天行胚胎活检,对单个卵裂球行微阵列-比较基因组杂交(microarray-CGH... 目的观察体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗周期中未见原核(PN)晚期卵裂胚胎单个卵裂球染色体分子核型。方法取IVF-ET治疗中4枚未见PN晚期卵裂胚胎进行体外培养,在受精第3天行胚胎活检,对单个卵裂球行微阵列-比较基因组杂交(microarray-CGH)染色体分析。结果 4枚未见PN受精卵染色体均发生非整倍体变异。其中1枚胚胎性染色体为X染色体单体,3枚胚胎性染色体为XY正常二倍体。但4枚胚胎均存在常染色体变异。结论未见PN晚期卵裂胚胎染色体microarray CGH分析结果表明,其单个卵裂球全基因组呈非整倍性变异,未见PN晚期卵裂胚胎存在常染色体和性染色体变异风险。 展开更多
关键词 体外受精-胚胎移植 微阵列-比较基因组杂交 无原核 卵裂
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