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同时检测四种病原菌的PCR方法研究 被引量：5
1
作者 牟恺 陈智 +4 位作者 王春民 李栋刚 于建辉 王凤明 赵宏坤 《山东农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第2期253-257,共5页
(目的)为建立一种同时检测四种常见动物源致病菌的PCR方法。(方法)本研究针对大肠杆菌的(16 s-23 s rRNA)基因、金黄色葡萄球菌的(nuc)基因、单增李斯特氏杆菌的(hlyA)基因以及沙门氏菌的(invA)基因分别设计合成了四对特异性引物,PCR扩... (目的)为建立一种同时检测四种常见动物源致病菌的PCR方法。(方法)本研究针对大肠杆菌的(16 s-23 s rRNA)基因、金黄色葡萄球菌的(nuc)基因、单增李斯特氏杆菌的(hlyA)基因以及沙门氏菌的(invA)基因分别设计合成了四对特异性引物,PCR扩增的目的基因片段分别为662 bp、484 bp、372 bp、284 bp,并对多重PCR反应条件进行了优化。(结果)建立的多重PCR方法具有敏感、特异、准确、快速的优点,检测时间为4h左右。(结论)为研发同时检测人畜共患病食源性主要致病菌即大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特氏杆菌及沙门氏菌的试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 多重PCR 食品检测 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 单增李斯特氏杆菌 沙门氏菌
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食源性致病菌快速检测试剂盒的研制 被引量：4
2
作者 王文娟 周明东 +1 位作者 姜彦君 赵宏坤 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第2期144-150,共7页
目的:研制一种快速检测沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单核细胞增生李斯特菌的三重PCR试剂盒,并在山东泰安地区禽肉市场采样检测。方法:以沙门氏菌的invA基因、单增李斯特菌溶血素hlyA基因和金黄色葡萄球菌耐热核酸酶Nuc基因序列作为目的... 目的:研制一种快速检测沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单核细胞增生李斯特菌的三重PCR试剂盒,并在山东泰安地区禽肉市场采样检测。方法:以沙门氏菌的invA基因、单增李斯特菌溶血素hlyA基因和金黄色葡萄球菌耐热核酸酶Nuc基因序列作为目的基因片段金黄色葡萄球菌、沙门菌和单核细胞增生李斯特菌的特异性抗原基因序列,分别设计1对引物,优化各种工作条件,建立一种多重PCR诊断试剂盒。结果:该试剂盒特异性好,敏感性高,沙门氏菌检出极限为4.7cfu/mL,单核细胞增生李斯特菌检出极限17cfu/mL,金黄色葡萄球菌检出极限4.5cfu/mL,可在5h之内得到检测结果。在山东泰安地区取样58份,其中25份样品中检出沙门氏菌阳性,带染率43.1%;6份样品中检出单增李斯特菌阳性,带染率为10.3%;3份样品中检出金黄色葡萄球菌阳性,带染率为5.2%。结论:建立的试剂盒能同时检测上述3种病原菌,可用于食品及其原料的生物安全监测,也可用于兽医临床诊断。 展开更多
关键词 多重PCR 食品检测 沙门氏菌 单增李斯特氏杆菌 金黄色葡萄球菌
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