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中药小分子单克隆抗体技术平台的构建 被引量：13
1
作者 屈会化 赵琰 王庆国 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期895-899,共5页
抗体是现代生命科学研究中极其重要的工具,小分子抗体技术在中医药研究领域具有广阔的应用前景。结合创新团队开展的研究工作,介绍了中药小分子单克隆抗体技术平台建立的背景和抗体制备的技术难点,针对基于中药小分子单克隆抗体的技术产... 抗体是现代生命科学研究中极其重要的工具,小分子抗体技术在中医药研究领域具有广阔的应用前景。结合创新团队开展的研究工作,介绍了中药小分子单克隆抗体技术平台建立的背景和抗体制备的技术难点,针对基于中药小分子单克隆抗体的技术产品,如ELISA检测试剂盒、免疫亲和色谱柱、胶体金试纸、荧光标记抗体和抗体芯片等,探索实践了其在中医药研究领域中的多种应用,并对中药小分子单克隆抗体技术的科学意义和应用价值进行了展望。 展开更多
关键词 中药小分子 单克隆抗体制备 酶联免疫吸附法 免疫亲和色谱柱 胶体金试纸 荧光标记抗体 抗体芯片
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新城疫病毒单克隆抗体的制备及鉴定 被引量：3
2
作者 王琴 罗晶璐 +2 位作者 蒋文泓 聂飞 任涛 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期112-114,共3页
以纯化的新城疫病毒ND35免疫Balb/C小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合.经筛选,获得5株能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株.特异性试验表明,7G5单克隆抗体仅与ND35病毒株反应,而不与禽流感病毒AIV(H5亚型)、产蛋下降综合症病毒(EDS-... 以纯化的新城疫病毒ND35免疫Balb/C小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合.经筛选,获得5株能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株.特异性试验表明,7G5单克隆抗体仅与ND35病毒株反应,而不与禽流感病毒AIV(H5亚型)、产蛋下降综合症病毒(EDS-76V)、传染性支气管炎病毒(IBV)、传染性法氏囊病毒(IBDV)、马立克氏病毒(MDV)、禽肺病毒(APV)反应.通过Western-blot对7G5单克隆抗体进行鉴定,发现其在相对分子质量47 500～62 000之间出现条带,表明其与NDV抗原有特异性结合.这5株单克隆抗体属于IgG1、IgG2b亚类,κ轻链. 展开更多
关键词 新城疫病毒 单克隆抗体 单克隆抗体制备 单克隆抗体鉴定
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肉鸡HSP70的基因克隆、原核表达及单克隆抗体制备 被引量：3
3
作者 孙培明 吴晓东 +3 位作者 赵永刚 刘雨田 王志亮 鲍恩东 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期2154-2161,共8页
【目的】制备高特异性的肉鸡热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)单克隆抗体,研究肉鸡HSP70与热应激损伤的关系。【方法】利用RT-PCR方法扩增肉鸡HSP70mRNA,将其扩增产物克隆到PGEM-T Easy载体和原核表达载体pET-28a(+)上,进一步... 【目的】制备高特异性的肉鸡热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)单克隆抗体,研究肉鸡HSP70与热应激损伤的关系。【方法】利用RT-PCR方法扩增肉鸡HSP70mRNA,将其扩增产物克隆到PGEM-T Easy载体和原核表达载体pET-28a(+)上,进一步转化至大肠杆菌BL-21中,用IPTG诱导表达重组肉鸡HSP70。以纯化的重组肉鸡HSP70制备多克隆抗体,免疫印迹分析说明重组肉鸡HSP70具有很好的免疫原性。以纯化的重组肉鸡HSP70免疫Balb/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体。【结果】获得2株分泌肉鸡HSP70单克隆抗体的杂交瘤细胞株,进一步通过免疫印迹分析筛选出1株高特异性的肉鸡HSP70单克隆抗体,命名为BH70-1。【结论】免疫组织化学结果显示,单克隆抗体BH70-1是一种理想的抗体。 展开更多
关键词 热休克蛋白70 原核表达 单克隆抗体制备 肉鸡
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抗苗勒管激素的单克隆抗体制备与鉴定 被引量：1
4
作者 苏晓菱 李丽蓥 +4 位作者 李苗苗 何洁 王瑞雪 王勇 罗树红 《分子诊断与治疗杂志》 2020年第2期239-243,共5页
目的表达高纯度的抗苗勒管激素蛋白,以该蛋白作为抗原制备单克隆抗体,并鉴定抗体亚型,为进一步开发优质的抗苗勒管激素诊断试剂盒做技术储备。方法在表达载体pET⁃28a(+)质粒中接入经密码子优化的抗苗勒管激素基因(AMH)片段,转化于BL21... 目的表达高纯度的抗苗勒管激素蛋白,以该蛋白作为抗原制备单克隆抗体,并鉴定抗体亚型,为进一步开发优质的抗苗勒管激素诊断试剂盒做技术储备。方法在表达载体pET⁃28a(+)质粒中接入经密码子优化的抗苗勒管激素基因(AMH)片段,转化于BL21细菌中,异丙基硫代⁃β⁃D⁃半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白大量表达,对上清中可溶性蛋白进行纯化。使用SDS⁃PAGE分析纯化蛋白的纯度。经纯化的抗原蛋白3次皮下免疫小鼠,挑选产生高效价的抗体的小鼠,取其脾细胞,制备悬液。经细胞杂交技术与骨髓瘤细胞进行融合,筛选能稳定持久分泌抗AMH抗体的杂交瘤细胞株,并制备腹水抗体。通过亲和层析技术、BCA蛋白检测方法等测定手段,纯化抗体、检测抗体浓度。结果筛选到2株能持久分泌抗AMH蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别为克隆细胞株3F6和4E7,分泌抗体均为IgG1亚型。结论筛选出稳定分泌高纯度的抗苗勒管激素抗体的2株杂交瘤细胞,并制备单克隆抗体。下一步将其应用于AMH检测试剂盒的开发。 展开更多
关键词 抗苗勒管激素 单克隆抗体制备 蛋白纯化
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PEDV S1蛋白多表位单克隆抗体制备及结果比对
5
作者 赵晶 朱建国 《农业开发与装备》 2016年第5期71-71,74,共2页
猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是由PED病毒(PEDV)引起猪的一种急性高度接触性传染病,其中S糖蛋白携带主要的B淋巴细胞抗原决定簇,能够诱导产生中和抗体和提供免疫保护作用的重要结构蛋白。主要针对PEDV S1蛋白选择九条... 猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是由PED病毒(PEDV)引起猪的一种急性高度接触性传染病,其中S糖蛋白携带主要的B淋巴细胞抗原决定簇,能够诱导产生中和抗体和提供免疫保护作用的重要结构蛋白。主要针对PEDV S1蛋白选择九条不同的多肽片段,并利用BALB/C小鼠单克隆抗体制备技术得到识别相应多肽片段的单克隆抗体,针对九条不同多肽表位获得的单克隆抗体与重组原核表达的PEDV S1蛋白识别效果进行对比,最后证实在所选的九条多肽表位片段中,以序列90至102、621至637、718至731这三条多肽的抗原性最好。 展开更多
关键词 PEDV S1蛋白 多肽片段表位设计 单克隆抗体制备
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单克隆抗体制备技术的改进
6
作者 李丽英 《内江科技》 2013年第2期99-,132,共2页
鉴于血管内皮细胞生长因子受体(KDR)的重要生物学作用,我们采用杂交瘤技术制备能稳定分泌抗KDR单克隆抗体的杂交瘤细胞。本文就抗KDR单克隆抗体制备过程中所涉及的技术改进作一总结。
关键词 单克隆抗体 单克隆抗体制备技术 KDR
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应用Protein A亲和层析法制备及纯化R1 JHL单克隆抗体
7
作者 李桂新 孙长凯 +3 位作者 程桂芝 罗建红 李芳 徐淑君 《大连医科大学学报》 CAS 2008年第2期188-190,共3页
[目的]制备、纯化N-甲基D-门冬氨酸受体(NMDAR,NR)主亚基RIJHL单克隆抗体。[方法]NR1杂交瘤细胞腹腔注射BalB/C小鼠制备抗体,Protein A-Sepharose CL-4B亲和层析纯化单抗,Western-blot鉴定该单抗特异性。[结果]纯化后单抗识别大鼠脑组... [目的]制备、纯化N-甲基D-门冬氨酸受体(NMDAR,NR)主亚基RIJHL单克隆抗体。[方法]NR1杂交瘤细胞腹腔注射BalB/C小鼠制备抗体,Protein A-Sepharose CL-4B亲和层析纯化单抗,Western-blot鉴定该单抗特异性。[结果]纯化后单抗识别大鼠脑组织膜蛋白中约115 kD大小的单一条带。[结论]制备、纯化了具有高度特异性的抗NR1单克隆抗体,为进一步研究NMDA受体提供了工具。 展开更多
关键词 NMDA受体 杂交瘤细胞 单克隆抗体制备纯化 WESTERN-BLOT
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“单克隆抗体”专题复习教学设计
8
作者 朱栋栋 《中学课程资源》 2022年第3期48-50,69,共4页
在“单克隆抗体”专题复习教学中,教师可以创设新情境,思考传统抗体药物制备方法的不足,利用流程图排序连线法复习单克隆抗体的制备过程,以问题串的形式讨论关键步骤,并分析鼠源单克隆抗体的不足之处,设计人源化单克隆抗体改造的方案,... 在“单克隆抗体”专题复习教学中,教师可以创设新情境,思考传统抗体药物制备方法的不足,利用流程图排序连线法复习单克隆抗体的制备过程,以问题串的形式讨论关键步骤,并分析鼠源单克隆抗体的不足之处,设计人源化单克隆抗体改造的方案,评价“人人”“人鼠”“鼠鼠”三个方案的优点和不足,思考单克隆抗体的其他价值,最后展示我国单克隆抗体药物的发展势头,使学生形成国家自豪感和科研使命感。 展开更多
关键词 专题复习 单克隆抗体的制备 教学设计
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