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华癸根瘤菌在非豆科植物根圈定殖能力的研究 被引量:24
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作者 王平 王勤 冯新梅 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期238-241,共4页
本文首次报道了华癸根瘤菌在水稻、小麦、油菜和棉花4种非豆科作物根圈的定殖能力。分别通过盆栽试验并采用外源标记基因(luxAB和gusA)特异性检测技术进行检测,研究发现华癸根瘤菌不但可以在这4种非豆科植物根圈定殖,而... 本文首次报道了华癸根瘤菌在水稻、小麦、油菜和棉花4种非豆科作物根圈的定殖能力。分别通过盆栽试验并采用外源标记基因(luxAB和gusA)特异性检测技术进行检测,研究发现华癸根瘤菌不但可以在这4种非豆科植物根圈定殖,而且还能进入根内,其数量可达103个/g以上。接种华癸根瘤菌对油菜和棉花根系的生长有一定影响,并能显著促进水稻的生长,为扩大华癸根瘤菌的应用范围展示了诱人的前景。 展开更多
关键词 根瘤菌 非豆科植物 根圈定殖 土壤 根瘤菌
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华癸根瘤菌中自体诱导物的初步研究 被引量:9
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作者 高轶静 钟增涛 +2 位作者 郑会明 王卉 朱军 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期19-22,共4页
群体感应 (Quorumsensing)是细菌通过产生可扩散的小分子量自体诱导物信号分子感知细胞群体密度变化 ,进行基因表达调控的生理行为。将根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens)构建为超量表达群体感应调节蛋白TraR的检测菌株JZA1,试验... 群体感应 (Quorumsensing)是细菌通过产生可扩散的小分子量自体诱导物信号分子感知细胞群体密度变化 ,进行基因表达调控的生理行为。将根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens)构建为超量表达群体感应调节蛋白TraR的检测菌株JZA1,试验证明该检测菌株能检测纳摩尔浓度的自体诱导物 ,利用该菌株对 3株不同华癸根瘤菌(Mesorhizobiumhuakuii)进行自体诱导物活性检测 ,发现该 3株华癸根瘤菌均能产生自体诱导物 ,其表达量与菌体密度成正相关 ,但 3株菌在相同培养条件下自体诱导物的表达量存在差异 ,结果表明自体诱导物在种内水平上存在一定的多样性 ;同时发现高pH条件能大大降低自体诱导物的稳定性 。 展开更多
关键词 群体感应 自体诱导物 根瘤菌
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紫云英根瘤分离菌株质粒多样性的研究 被引量:3
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作者 郭先武 张学贤 +3 位作者 张忠明 王平 曹燕珍 李阜棣 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 1999年第3期305-309,共5页
从广东、广西、湖南、湖北、江西、浙江、江苏7省紫云英(AstragalussinicusL.)主要分布区46个采集点的紫云英根瘤中分离到101个菌株.检测发现有16种不同质粒类型,所含质粒1~4个不等,含两个质粒的菌... 从广东、广西、湖南、湖北、江西、浙江、江苏7省紫云英(AstragalussinicusL.)主要分布区46个采集点的紫云英根瘤中分离到101个菌株.检测发现有16种不同质粒类型,所含质粒1~4个不等,含两个质粒的菌株占绝大部分,质粒Mr为36×106~364×106.用克隆M.huakui7653R的nodDBC4.2kb片段为探针(α32pdCTP)进行的分子杂交结果表明,所有这些菌株均含有共生质粒,通常为第一大质粒,但C、L、M、N和O型为第二大质粒,共生质粒Mr在131×106~364×106之间.比较质粒类型与16S23SrDNAIGS(pHr,p23SR01)PCRRFLP分析结果表明,IGS类型不同,即使在同一植株分离所得的根瘤其质粒类型常不同,但在同一植株上分离菌株的质粒类型相同,则其IGS常表现相同. 展开更多
关键词 根瘤菌 质粒型 多样性 共生固氮
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用Tn5标记带发光酶基因的华癸根瘤菌(Mesorhizobium huakui)7653R质粒 被引量:2
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作者 郭先武 张忠明 +3 位作者 胡福荣 莫才清 李阜棣 陈华癸 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期147-150,共4页
在pRK2073的辅助作用下,通过三亲本接合转移,将Tn5(sacB-luxAB)插入华癸根瘤菌7653R菌株基因组中。将3200个Tn5标记菌株影印到含有8%蔗糖的YMA平板,检测这些菌株的发光酶活性和新霉素抗性。... 在pRK2073的辅助作用下,通过三亲本接合转移,将Tn5(sacB-luxAB)插入华癸根瘤菌7653R菌株基因组中。将3200个Tn5标记菌株影印到含有8%蔗糖的YMA平板,检测这些菌株的发光酶活性和新霉素抗性。共获得8个菌株,其选择标记消失。质粒检测发现其共生质粒有不同程度的缺失甚至消除。结瘤实验证明,所有共生质粒部分缺失(有的缺失达1/3)的菌株依然结瘤。经用luxAB探针的分子杂交证实,8个菌株中有3个对应的标记菌株其Tn5插在共生质粒上。 展开更多
关键词 根瘤菌 共生质粒 分子标记 发光酶基因
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基于根瘤菌来源的ACC脱氨酶基因提高大豆和紫云英根瘤菌的竞争结瘤能力 被引量:1
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作者 杜倩 赵文龙 李友国 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期88-95,共8页
根瘤菌的竞争结瘤能力提高对提高接种剂的应用效果至关重要.为提高根瘤菌的共生固氮和竞争结瘤能力,从大豆慢生型根瘤菌USDA110中扩增1-氨基环丙烷-1-羧酸脱氨酶(ACC脱氨酶)基因和其上游调控序列,通过两亲本接合转移导入华癸中慢生根瘤... 根瘤菌的竞争结瘤能力提高对提高接种剂的应用效果至关重要.为提高根瘤菌的共生固氮和竞争结瘤能力,从大豆慢生型根瘤菌USDA110中扩增1-氨基环丙烷-1-羧酸脱氨酶(ACC脱氨酶)基因和其上游调控序列,通过两亲本接合转移导入华癸中慢生根瘤菌7653R、大豆快生型根瘤菌HH103和SMH12,构建含有ACC脱氨酶的重组根瘤菌.结果显示:在土壤盆栽条件下,接种导入ACC脱氨酶的重组菌7653R,宿主植物地上鲜重、瘤数、瘤重和固氮酶活均显著增加,竞争结瘤能力提高22.6%;接种重组菌HH103,植物地上鲜重、瘤重和酶活显著增加,瘤数增加,竞争结瘤能力提高28.9%;接种重组菌SMH12,植物地上鲜重、瘤数、瘤重和酶活增加,未到达显著性,但竞争结瘤能力提高25.4%.本研究表明构建的3个重组根瘤菌具有良好的共生固氮和竞争结瘤能力,可作为有潜力的优良菌株应用到田间试验. 展开更多
关键词 ACC脱氨酶 根瘤菌 大豆根瘤菌 竞争结瘤 共生固氮
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可降解塑料—多聚羟基丁酸的高密度发酵研究
6
作者 黄海东 王海滨 赵良启 《山西化工》 2002年第2期5-7,共3页
对本实验室选育的合成多聚羟基丁酸的优良菌株华癸根瘤菌 M0 2进行分批发酵和补料分批发酵研究 ,细胞浓度可以达到 62 .3 g/ L,产物 PHB含量为 45 .2 g/ L。
关键词 可降解塑料 多聚羟基丁酚 分批发酵 补料分批发酵 高密度发酵 根瘤菌 热塑性塑料
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发光酶基因标记的华癸根瘤菌JS5A16L在紫云英根圈的定殖动态 被引量:6
7
作者 王平 冯新梅 李阜棣 《土壤学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期265-270,共6页
在土壤一盒栽、盆栽微宇宙系统(Microcosm)中和田间条件下,研究了发光酶基因(luxAB)标记的华癸根瘤菌JS5A16L在紫云英根圈的定殖动态、分布范围及结瘤情况。在盒栽系统中,JS5A16L的定殖密度在紫云英... 在土壤一盒栽、盆栽微宇宙系统(Microcosm)中和田间条件下,研究了发光酶基因(luxAB)标记的华癸根瘤菌JS5A16L在紫云英根圈的定殖动态、分布范围及结瘤情况。在盒栽系统中,JS5A16L的定殖密度在紫云英出苗2天后达到最高水平(7.88 lpg cfu/克根)(cfu为colony forming unit的缩写),然后开始下降,并保持在一个相对稳定的水平;58天后又有所回升,且能散布至种子下方22cm处的根段部位。盆栽条件下的定殖动态与盒栽系统中的相似,紫云英播种3天后,JS5A16L可达最高定殖水平(6.92 log cfu/株根系),随后开始缓慢下降,直至32天时仍维持在一个相对稳定水平。JS5A16L在田间条件的定殖动态则不同,播种后30天时定殖密度达到最大值(7 .03 log cfu/克根),90天后降到最低值(5. 24 log cfu/克根),然后又开始上升,160天时为7.87 log cfu/克根,甚至在地上部植株收割后20天仍可维持在7.89 log cfu/克根。接种该菌株可显著提高紫云英的生物学产量。 展开更多
关键词 发光酶 标记基因 根瘤菌JS5A16L 紫云英根圈 定殖动态
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紫云英-小麦混作体系中氮素转移对小麦生长的促进作用 被引量:13
8
作者 杜寒春 郑会明 +4 位作者 周晶 曹慧 沈标 娄无忌 钟增涛 《土壤学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期1043-1046,共4页
关键词 中慢生根瘤菌 nodD基因缺失 小麦 氮素 PGPR
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中慢生型华癸根瘤菌Mesorhizobium huakuii AS9自体诱导物合成酶基因的筛选及其功能分析 被引量:5
9
作者 袁全 杨梦华 +2 位作者 郑会明 钟增涛 朱军 《土壤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期459-463,共5页
细菌在高细胞密度下通过产生一类化学信号分子(autoinducer,自体诱导物)感知细胞群体密度变化,从而对基因表达进行调控,这一现象被称为群体感应(quorum sensing)。以中慢生型华癸根瘤菌Mesorhizobium huakuii AS9为出发菌株,利用转座子... 细菌在高细胞密度下通过产生一类化学信号分子(autoinducer,自体诱导物)感知细胞群体密度变化,从而对基因表达进行调控,这一现象被称为群体感应(quorum sensing)。以中慢生型华癸根瘤菌Mesorhizobium huakuii AS9为出发菌株,利用转座子随机突变的方法获得了自体诱导物缺失突变株YQ1,并克隆得到了其自体诱导物合成酶基因,命名为mrhI;构建PmrhI-lacZ转录融合表达质粒pYQ1,通过同源重组的方法得到在华癸根瘤菌中mrhI-lacZ融合表达而且mrhI基因突变菌株YQ3。突变株YQ3的培养液上清不含有自体诱导物分子,通过lacZ报告基因的表达发现mrhI的表达受自体诱导物的调控,说明mrhI基因是M.huakuii AS9的群体感应体系中的自体诱导物合成酶基因。 展开更多
关键词 中慢生根瘤菌 群体感应 自体诱导物合成酶基因
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中慢生华癸根瘤菌nodD-突变株的筛选及其对紫云英的促生作用 被引量:1
10
作者 杜寒春 高轶静 +2 位作者 郑会明 钟增涛 朱军 《土壤》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期529-532,共4页
通过二亲接合的方式,将含有sacB基因和nodD基因部分片段的质粒与中慢生华癸根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)93(Mh93)菌株进行同源重组,在含10%蔗糖的TY平板上成功地筛选到了nodD基因突变株Mh93-27。利用温室盆栽试验研究了紫云英单作及... 通过二亲接合的方式,将含有sacB基因和nodD基因部分片段的质粒与中慢生华癸根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)93(Mh93)菌株进行同源重组,在含10%蔗糖的TY平板上成功地筛选到了nodD基因突变株Mh93-27。利用温室盆栽试验研究了紫云英单作及紫云英-小麦间作体系Mh93-27对紫云英的促生作用,结果表明,接种Mh93-27后,紫云英的地上部生物量和全氮含量以及根部生长得到了不同程度的提高,但只有在小麦孕穗期和收获期时,根瘤菌才表现出显著的促生作用。 展开更多
关键词 中慢生根瘤菌 sacB NODD 紫云英 促生 氮素
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糖类碳源对中慢生华癸根瘤菌群体感应基因mrhI/R表达的影响
11
作者 朱庆成 毛怡玲 +3 位作者 茅冬梅 郑会明 钟增涛 朱军 《土壤》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期856-861,共6页
克隆了中慢生华癸根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)的mrh I和mrh R群体感应基因的启动子区域,至Lac Z翻译融合表达质粒载体p RA302中,经β-半乳糖苷酶活性检测发现,mrh I和mrh R的表达均受mrh I基因产物(自体诱导物)的正向调控。两种PTS糖... 克隆了中慢生华癸根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)的mrh I和mrh R群体感应基因的启动子区域,至Lac Z翻译融合表达质粒载体p RA302中,经β-半乳糖苷酶活性检测发现,mrh I和mrh R的表达均受mrh I基因产物(自体诱导物)的正向调控。两种PTS糖类:葡萄糖和果糖的外源添加可以显著增加细菌的生长量,但却都同时抑制了mrh I和mrh R基因的表达,暗示在中慢生华癸根瘤菌中群体感应基因的表达可能受细菌中普遍存在的碳源代谢物阻遏现象的调节。 展开更多
关键词 中慢生根瘤菌 群体感应 葡萄糖 果糖 碳源代谢物阻遏
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绿色荧光蛋白基因(gfp)在华癸中生根瘤菌与紫云英共生固氮作用研究中的应用 被引量:8
12
作者 周俊初 史巧娟 谢波 《中国科学基金》 CSCD 北大核心 2001年第5期302-305,共4页
绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)最初足从维多利亚多管水母(Aequoria victoria)中发现的发光蛋白[1]。天然GFP的生色团由65—67位Ser-Tyr-Gly的氨基酸残基组成,并经环化和脱氢形成一个咪唑环[2]。其最大激发峰为395nm,在47... 绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)最初足从维多利亚多管水母(Aequoria victoria)中发现的发光蛋白[1]。天然GFP的生色团由65—67位Ser-Tyr-Gly的氨基酸残基组成,并经环化和脱氢形成一个咪唑环[2]。其最大激发峰为395nm,在475 nm处有一副激发峰,最大发射峰位于510nm。gfp作为一种新型的报告基因具有许多优越性:首先它分子量较小,只编码238个氨基酸的多肽。 展开更多
关键词 紫方英 共生 结瘤 固氮 基因表达 绿色荧光蛋白基因 中生根瘤菌 启动子探针载体 原位监测 分子遗传学
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华癸中生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)研究进展 被引量:5
13
作者 胡国元 周俊初 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期213-218,共6页
综述了华癸中生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)遗传多样性、质粒多样性、质粒的功能、结瘤因子、结瘤基因、胞外多糖等方面的研究进展。这类菌只能在紫云英上结瘤,1997年并入Mesorhizobium。选取大量菌株进行REP-PCR、16S和23SrDNAPC... 综述了华癸中生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)遗传多样性、质粒多样性、质粒的功能、结瘤因子、结瘤基因、胞外多糖等方面的研究进展。这类菌只能在紫云英上结瘤,1997年并入Mesorhizobium。选取大量菌株进行REP-PCR、16S和23SrDNAPCR-RFLP等分析,揭示其分为16种16SrDNA基因型。选用不同16SrDNA基因型的部分代表菌株进行部分16SrDNA测序。能够在紫云英上结瘤的根瘤菌可以分为2个类群。表明这类菌具有遗传多样性,存在不同的种。它们多数含共生质粒,共生质粒定位于最大或次大质粒上,质粒数1~5个不等,其分子量范围在53-906kb之间。质粒缺失菌株表现为不结瘤(Nod^-)和结瘤而不固氮(Nod^+,Nif^-)。某些质粒缺失还影响LPS合成、抗酸性、竞争结瘤能力。其结瘤因子能诱导紫云英根毛变形,它们的结瘤因子结构类似于苜蓿根瘤菌的结瘤因子。它们的结瘤基因具独特性,nodA与nodBC分隔一定距离,且具有保守性。它们产生的胞外多糖在侵染结瘤过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 中生根瘤菌 遗传多样性 质粒 结瘤基因 胞外多糖
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华癸中生根瘤菌脂多糖突变株的共生能力 被引量:4
14
作者 程国军 周俊初 李友国 《中南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2008年第2期11-13,共3页
通过植物盆栽实验,对华癸中生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)lpsH基因的缺失突变株HK241进行共生能力研究.结果表明:突变株HK241形成的根瘤没有固氮能力,同时具有较低的结瘤效率和竞争结瘤能力.因此,lpsH基因参与编码脂多糖的合成,并且... 通过植物盆栽实验,对华癸中生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)lpsH基因的缺失突变株HK241进行共生能力研究.结果表明:突变株HK241形成的根瘤没有固氮能力,同时具有较低的结瘤效率和竞争结瘤能力.因此,lpsH基因参与编码脂多糖的合成,并且在共生中发挥非常重要的作用. 展开更多
关键词 中生根瘤菌 共生固氮 竞争结瘤
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华癸中生根瘤菌质粒消除方法研究进展 被引量:2
15
作者 胡国元 周俊初 《化学与生物工程》 CAS 2006年第3期7-9,共3页
结合对华癸中生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)质粒功能的研究,介绍了高温和吖啶橙处理法、标记质粒消除法和质粒的不相容性消除质粒法在华癸中生根瘤菌质粒消除中的应用,并比较了各方法的优缺点。
关键词 中生根瘤菌 质粒消除 质粒检测
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华癸中生根瘤菌共生基因exo56的克隆和功能初步分析 被引量:2
16
作者 程国军 陈大松 +2 位作者 李友国 谢福莉 周俊初 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期483-486,共4页
利用Tn5-sacB转座子随机插入突变的方法,从Mesorhizobium huakuii7653R的400个突变株中筛选获得1个共生缺失突变株HK56。使用热不对称交错PCR(TAIL-PCR)的方法从M.huakuii7653R中克隆了exo56序列。exo56全长969 bp,编码322个氨基酸,其... 利用Tn5-sacB转座子随机插入突变的方法,从Mesorhizobium huakuii7653R的400个突变株中筛选获得1个共生缺失突变株HK56。使用热不对称交错PCR(TAIL-PCR)的方法从M.huakuii7653R中克隆了exo56序列。exo56全长969 bp,编码322个氨基酸,其编码产物Exo56与糖基转移酶2个家族的成员有很高的相似性,糖基转移酶为胞外多糖合成所必需。盆栽结果表明,exo56基因突变株只能形成少量的不固氮根瘤。 展开更多
关键词 中生根瘤菌 共生基因 克隆与鉴定 胞外多糖
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用Tn5-mob-sacB转座子对华癸中生根瘤菌HN3015质粒进行定向标记、消除或缺失 被引量:1
17
作者 胡国元 李伟伟 周俊初 《化学与生物工程》 CAS 2006年第7期33-36,共4页
采用Tn5-mob-sacB转座子对Mesorhizobium huakuiiHN3015菌株含有的3条大质粒(pMhHN3015a,150kb;pMhHN3015b,294 kb和pMhHN3015c,390 kb)进行定向标记,获得各个质粒标记菌株。利用sacB基因对蔗糖的敏感性,对标记质粒进行消除实验,获得HN3... 采用Tn5-mob-sacB转座子对Mesorhizobium huakuiiHN3015菌株含有的3条大质粒(pMhHN3015a,150kb;pMhHN3015b,294 kb和pMhHN3015c,390 kb)进行定向标记,获得各个质粒标记菌株。利用sacB基因对蔗糖的敏感性,对标记质粒进行消除实验,获得HN3015质粒消除或缺失的突变株。并对HN3015及其突变菌株的培养特征、生长速度和共生结瘤能力进行了研究,结果表明:质粒消除或缺失的突变株的培养特征和生长速度与出发菌株基本一致,但是,pMhHN3015a与固氮有关,pMhHN3015b消除的菌株则失去结瘤能力,只有pMhHN3015c消除或缺失菌株不影响结瘤与固氮能力。 展开更多
关键词 中生根瘤菌 Tn5-sacB 质拉 标记 消除 缺失
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华癸中生根瘤菌共生质粒的定向标记、消除与结瘤功能的鉴定 被引量:2
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作者 胡国元 李伟伟 周俊初 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1415-1419,共5页
采用Tn5-mob-sacB转座子对华癸中生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)菌株7653R的共生质粒进行定向标记,获得该质粒标记菌株7653RT14。利用sacB基因对蔗糖的敏感性,对标记质粒进行消除实验,获得7653R的共生质粒消除突变株7653R-1。测得Tn5-... 采用Tn5-mob-sacB转座子对华癸中生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)菌株7653R的共生质粒进行定向标记,获得该质粒标记菌株7653RT14。利用sacB基因对蔗糖的敏感性,对标记质粒进行消除实验,获得7653R的共生质粒消除突变株7653R-1。测得Tn5-mob-sacB转座频率高于10?5。突变株的培养特征与出发菌株基本一致。采用琼脂管法对7653RT14和7653R-1进行回接实验,结果显示7653RT14能正常结瘤固氮,表明Tn5的插入并未影响其共生能力,但失去共生质粒的7653R-1则为不结瘤或只结个别小瘤。稳定性实验结果表明供试菌株的标记质粒在本实验条件下是稳定的,可以作为共生质粒转移的供体菌。 展开更多
关键词 中生根瘤菌 Tn5-mob-sacB 共生质粒 定向标记 消除 结瘤
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华癸中生根瘤菌的分离、回接及质粒检测 被引量:1
19
作者 胡国元 周俊初 《湖北农业科学》 北大核心 2006年第3期313-315,共3页
从华中农业大学的水稻田中采集的紫云英根瘤中分离到62株华癸中生根瘤菌,对其中的57株进行了回接结瘤试验,供试菌株均能正常结瘤。并对其中的44株进行质粒检测,13株含3个质粒,21株含2个质粒,7株含1个质粒,3株不含质粒,质粒分子量范围约... 从华中农业大学的水稻田中采集的紫云英根瘤中分离到62株华癸中生根瘤菌,对其中的57株进行了回接结瘤试验,供试菌株均能正常结瘤。并对其中的44株进行质粒检测,13株含3个质粒,21株含2个质粒,7株含1个质粒,3株不含质粒,质粒分子量范围约为174~510kb,为研究华癸中生根瘤菌内源性质粒的相互作用及其共生固氮效应奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 中生根瘤菌 分离 回接 质粒
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华癸中生根瘤菌7653R共生质粒pMH7653Rb的不相容性行为 被引量:1
20
作者 胡国元 李伟伟 周俊初 《中国科学(C辑)》 CSCD 北大核心 2009年第3期310-314,共5页
华癸中生根瘤菌菌株7653R含有2个内源质粒(pMH7653Ra,pMH7653Rb).用三亲本杂交法将7653R的共生质粒pMH7653Rb分别导入HN308SR(Smr,Rifr;含pMHHN308a,pMHHN308b和pMHHN308c)和HN3015SR(Smr,Rifr;含pMHHN3015a,pMHHN3015b和pMHHN3015c).... 华癸中生根瘤菌菌株7653R含有2个内源质粒(pMH7653Ra,pMH7653Rb).用三亲本杂交法将7653R的共生质粒pMH7653Rb分别导入HN308SR(Smr,Rifr;含pMHHN308a,pMHHN308b和pMHHN308c)和HN3015SR(Smr,Rifr;含pMHHN3015a,pMHHN3015b和pMHHN3015c).发现受体菌HN308SR的两个稳定内源质粒pMHHN308b和pMHHN308c随着pMH7653Rb的导入而同时被消除.该接合子命名为HN308SRN14.这一结果表明pMH7653Rb与pMHHN308b和pMHHN308c不相容,可以归于同一不相容群.另一转移接合子HN3015SRN14的质粒图谱显示其第二大质粒pMHHN3015b由于pMH7653Rb的导入而被消除.该结果表明,pMH7653Rb与pMHHN3015b不相容.植物结瘤实验结果表明,pMH7653Rb的导入能恢复HN308SRN14的结瘤能力,其结瘤数目超过HN308SR,但不能替代pMHHN308b和pMHHN308c的固氮作用,HN308SRN14失去了固氮能力.质粒消除突变株HN308SRN14D只含有pMHHN308a,能形成少量无效根瘤,确认pMHHN308a与HN308的结瘤能力有关.HN3015SRN14(含pMH7653Rb,pMHHN3015a和pMHHN3015c)只能形成无效根瘤,而质粒消除突变株HN3015SRN14D(仅含pMHHN3015a和pMHHN3015c)则完全失去结瘤能力.通过PCR反应从7653R,HN308,HN3015,HN308SRN14,HN3015SRN14中均检测到质粒复制基因repC.供试菌株的repC基因序列相似性达到99%. 展开更多
关键词 紫云英 接合质粒转移 内源质粒 中生根瘤菌 质粒消除 质粒不相容性 Tn5-sacB
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