三七总皂甙对脑出血大鼠前脑促凋亡基因caspase-3影响的研究 被引量：27

1

作者 李巾伟 朱培纯 +2 位作者 司银楚 许红 吴海霞 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期22-25,共4页

目的　研究大鼠脑出血前脑内促凋亡基因半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶 - 3(caspase 3)的表达 ,以及三七总皂甙对其表达的影响。方法　用原位杂交法观察胶原酶诱导的脑出血大鼠前脑内caspase 3mRNA在给药组和对照组的表达变化 ;用免疫组... 目的　研究大鼠脑出血前脑内促凋亡基因半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶 - 3(caspase 3)的表达 ,以及三七总皂甙对其表达的影响。方法　用原位杂交法观察胶原酶诱导的脑出血大鼠前脑内caspase 3mRNA在给药组和对照组的表达变化 ;用免疫组化法观察caspase 3p2 0蛋白的变化。结果　脑出血后前脑内caspase 3mRNA及caspase 3p2 0主要在病灶及病灶周围、大脑皮质Ⅱ～Ⅴ层、海马CA2 、CA3区表达 ,阳性细胞包括变性神经元和胶质细胞。给药组阳性细胞数量显著减少 ,细胞着色变浅。结论　三七总皂甙可通过抑制caspase 3mRNA的转录及caspase 3蛋白的裂解活化 ,减少细胞凋亡 。 展开更多

关键词 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3 三七总皂甙 脑出血 细胞凋亡 原位杂交 免疫组化 大鼠

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灵芝多糖对AD模型大鼠海马组织Caspase-3和FasL表达的影响 被引量：15

2

作者 张跃平 袁华 +1 位作者 黎莉 王晓芸 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2008年第5期484-489,共6页

目的研究灵芝多糖(GLP)对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马组织半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(caspase-3)和FasL基因以及空间学习记忆能力的影响。方法双侧海马内一次性注射淀粉样多肽25-35片段(Aβ25-35)制作大鼠AD模型,治疗组24h后腹腔注... 目的研究灵芝多糖(GLP)对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马组织半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(caspase-3)和FasL基因以及空间学习记忆能力的影响。方法双侧海马内一次性注射淀粉样多肽25-35片段(Aβ25-35)制作大鼠AD模型,治疗组24h后腹腔注射灵芝多糖水溶液,1周后进行Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力变化。采用免疫组织化学法和逆转录-聚合酶链式反应法(RT-PCR)分别检测大鼠海马组织caspase-3蛋白的表达量和FasL基因的表达,以及灵芝多糖对上述各指标的影响。结果灵芝多糖能明显改善AD模型大鼠低下的空间学习记忆能力。显著降低模型大鼠海马组织caspase-3和FasL的表达,而且灵芝多糖能明显改善模型大鼠脑组织海马CAI区神经元的退行性变化。结论灵芝多糖能降低海马组织内FasL和caspase-3表达量,改善海马CA1区神经元的退行性变化。对老年性痴呆大鼠学习记忆能力可能有增强和提高作用。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 Β-淀粉样蛋白 灵芝多糖 基因FasL 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3

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金龙胆草总皂苷诱导Hela细胞和SPC-A1细胞凋亡的研究 被引量：11

3

作者 刘培 周立军 +1 位作者 苏艳芳 颜世伦 《中国药房》 CAS CSCD 北大核心 2011年第35期3288-3291,共4页

目的:研究金龙胆草总皂苷对宫颈癌(Hela)细胞和肺癌(SPC-A1)细胞增殖的影响。方法:采用MTT法检测金龙胆草总皂苷对Hela细胞和SPC-A1细胞生长的影响;琼脂糖凝胶电泳法检测药物作用后细胞DNA变化;Western blot法检测药物对半胱氨酰天冬氨... 目的:研究金龙胆草总皂苷对宫颈癌(Hela)细胞和肺癌(SPC-A1)细胞增殖的影响。方法:采用MTT法检测金龙胆草总皂苷对Hela细胞和SPC-A1细胞生长的影响;琼脂糖凝胶电泳法检测药物作用后细胞DNA变化;Western blot法检测药物对半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)含量的影响。结果:10-3～10-7mol·L-1金龙胆草总皂苷对Hela细胞和SPC-A1细胞的生长抑制有明显的剂量和时间依赖性,并诱导细胞发生凋亡;DNA凝胶电泳呈凋亡特有的梯状带;Caspase-3含量在药物作用前后有变化。结论:金龙胆草总皂苷是通过诱导Hela细胞和SPC-A1细胞凋亡而抑制其生长的。 展开更多

关键词 金龙胆草总皂苷 HELA细胞 SPC.A1细胞 凋亡 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶.3

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苦参碱诱导人乳腺癌细胞凋亡逆转耐药及对酸化蛋白激酶B、Fas、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3表达的影响 被引量：10

4

作者 周炳刚 沈义军 +3 位作者 杨涛 余生林 鲍山林 余建军 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1856-1857,共2页

乳腺癌的综合治疗除手术、放疗、内分泌外，化疗仍是最有效的治疗方法，化疗可明屈提高患者的生存率，但肿瘤的多约耐药（MDR）是临床化疗最棘手的难题，寻找高效低毒能抗肿瘤并能逆转MDR新药是目前肿瘤防治研究的热点。

关键词 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3 逆转耐药 乳腺癌 蛋白激酶B 癌细胞凋亡 苦参碱 FAS 酸化

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银杏叶提取物对过氧化氢诱导的星形胶质细胞氧化损伤的保护作用 被引量：6

5

作者 张申 李湘君 卫涛涛 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2007年第1期92-98,共7页

目的研究银杏叶提取物(EGb761)对H2O2所致星形胶质细胞氧化损伤的保护作用。方法用不同浓度的EGb761预处理细胞,再加入H2O2,通过噻唑蓝(MTT)实验、线粒体跨膜电位(ΔΨm)及细胞色素C释放实验、DNA损伤实验及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白... 目的研究银杏叶提取物(EGb761)对H2O2所致星形胶质细胞氧化损伤的保护作用。方法用不同浓度的EGb761预处理细胞,再加入H2O2,通过噻唑蓝(MTT)实验、线粒体跨膜电位(ΔΨm)及细胞色素C释放实验、DNA损伤实验及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)活性测定,观察EGb761对细胞存活率、线粒体膜通透性、DNA氧化损伤及Caspase-3活性的影响。结果EGb761能明显降低H2O2对星形胶质细胞的氧化损伤,提高细胞的存活率;维持线粒体膜的完整性,抑制跨膜电位的耗散和细胞色素C的释放;抑制Caspase-3的活化和DNA的降解。结论EGb761具有清除活性氧,减轻HO所致星形胶质细胞的氧化损伤,对星形胶质细胞有保护作用。 展开更多

关键词 银杏叶提取物 氧化损伤 细胞色素C 星形胶质细胞 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3

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姜黄素对肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制 被引量：6

6

作者 戴莉 杨炯 +4 位作者 潘雪凯 王小康 张驰 王诗培 冯茂辉 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期2358-2361,共4页

目的 观察姜黄素对肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤的干预作用并探讨机制.方法 建立肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤模型,将40只荷瘤鼠随机分成对照组和不同浓度（10、50、100 mg/kg）姜黄素干预组,每隔1d腹腔注射给药1次,共8次,每4d测定各组荷瘤鼠... 目的 观察姜黄素对肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤的干预作用并探讨机制.方法 建立肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤模型,将40只荷瘤鼠随机分成对照组和不同浓度（10、50、100 mg/kg）姜黄素干预组,每隔1d腹腔注射给药1次,共8次,每4d测定各组荷瘤鼠体质量和皮下移植瘤体积.同时体外培养A549细胞,细胞计数试剂盒（CCK-8）和膜联蛋白V（Annexin V）-异硫氰酸荧光素（FITC）/碘化丙锭（PI）标记法分别检测不同浓度姜黄素（10、50、100 mmol/L）对细胞增殖和凋亡的影响.实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）和Western blot分别检测不同处理组细胞B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白（bax）和B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）mRNA和蛋白表达水平.半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3活性检测试剂盒测定各组细胞Caspase-3活性相对值.结果 与对照组比较,不同浓度姜黄素对荷瘤鼠体质量均无明显影响（P＞0.05）,但10、50、100 mg/kg姜黄素干预荷瘤鼠16d后皮下移植瘤平均体积分别为同期对照组的76.2％、55.7％和38.3％,抑制作用呈浓度依赖性（P＜0.05）.10、50、100 mmol/L姜黄素均能抑制体外培养的A549细胞增殖,同时促进细胞凋亡,100 mmol/L姜黄素干预A549细胞48 h后抑制率为（51.95±13.32）％,凋亡率为（30.89-±6.27）％.RT-qPCR和Western blot结果均表明,100 mmol/L姜黄素显著上调bax表达,下调bcl-2表达,使bax/bcl-2比值增大,且Caspase-3活性相对值也达到峰值（8.39±1.40）,与其他各组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 姜黄素对肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤的生长具有抑制作用,其机制可能是通过上调bax表达,下调bcl-2表达,活化下游Caspase-3信号,从而抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡. 展开更多

关键词 姜黄素 肺腺癌 移植瘤 脱噬作用 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3

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吡柔比星诱导人膀胱癌T24细胞凋亡及其作用机制 被引量：6

7

作者 葛波 宋亚辉 +3 位作者 张旭 李鹏程 谭操 蒋雷鸣 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期2235-2237,共3页

目的 探讨吡柔比星（THP）对人膀胱癌T24细胞凋亡的影响及其作用机制.方法 使用不同浓度（0、0.1、1.0、10.0mg/L）THP作用膀胱癌T24细胞,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot检测细胞中生存素（Survivin）和半胱氨酰天冬氨酸... 目的 探讨吡柔比星（THP）对人膀胱癌T24细胞凋亡的影响及其作用机制.方法 使用不同浓度（0、0.1、1.0、10.0mg/L）THP作用膀胱癌T24细胞,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot检测细胞中生存素（Survivin）和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3 mRNA及蛋白的表达;细胞计数试剂盒（CCK-8）检测细胞的增殖能力;流式细胞术检测细胞的周期及凋亡.结果 与空白组比较,各THP作用组T24细胞中Survivin mRNA及蛋白水平表达降低,Caspase-3 mRNA及蛋白水平表达增高（P＜0.01）;THP可抑制T24细胞的增殖,抑制率分别为（13.74±1.25）％、（36.28±0.75）％、（47.13±1.62）％,并诱导其凋亡,凋亡率为（15.29±0.98）％、（19.56±1.45）％、（23.81±0.81）％,并呈现一定的浓度和时间依赖性（P＜0.05）.结论 THP可促进膀胱癌T24细胞的凋亡,其可能通过抑制细胞中Survivin的表达,增强Caspase-3的活性而发挥作用. 展开更多

关键词 膀胱癌 吡柔比星 生存素 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3

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人脐带间充质干细胞防治早期激素性股骨头坏死的作用及其机制 被引量：5

8

作者 邱晨 彭昊 +2 位作者 彭普基 龙林生 邓爽 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2021年第2期309-313,共5页

目的探讨人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)对大鼠早期激素性股骨头坏死(GC-ONFH)防治作用及其机制。方法将48只SD大鼠完全随机法分为4组:对照组、模型组、低剂量治疗组、高剂量治疗组。使用注射用甲泼尼龙琥珀酸钠建立GC-ONFH的模型,并给... 目的探讨人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)对大鼠早期激素性股骨头坏死(GC-ONFH)防治作用及其机制。方法将48只SD大鼠完全随机法分为4组:对照组、模型组、低剂量治疗组、高剂量治疗组。使用注射用甲泼尼龙琥珀酸钠建立GC-ONFH的模型,并给予不同剂量的hUC-MSCs干预。6周后分离股骨头组织,利用苏木精-伊红(HE)染色、原位缺口末端标记法(TUNEL)染色、微型CT(Micro-CT)、蛋白质印迹法(Western blot)和定量聚合酶链反应(qPCR)评价股骨头坏死、细胞凋亡、骨密度及凋亡相关蛋白mRNA表达水平。采用t检验和完全随机设计的方差分析。结果对照组、模型组、高剂量治疗组和低剂量治疗组股骨头坏死发生率分别为0(0/12)、83%(10/12)、17%(2/12)、50%(6/12),空骨陷窝率和细胞凋亡率分别为(2.301±1.238)%、(26.138±2.742)%、(10.229±2.658)%和(13.518±2.241)%,治疗组中空骨陷窝率和细胞凋亡率显著低于模型组(F=13.45,P<0.05),差异有统计学意义。Micro-CT结果显示对照组、模型组、高剂量治疗组和低剂量治疗组骨体积分数分别为(0.618±0.147)%、(0.250±0.130)%、(0.563±0.127)%、(0.358±0.057)%,骨小梁厚度分别为(0.448±0.086)、(0.218±0.082)、(0.418±0.059)、(0.292±0.051)mm,骨小梁间隙分别为(0.042±0.010)、(0.016±0.008)、(0.036±0.004)、(0.023±0.004)mm,骨小梁数量分别为(4.233±1.137)、(1.950±0.650)、(3.633±0.717)、(2.333±0.457)/mm,治疗组上述指标显著高于模型组(F=11.75、13.02、14.22、10.79,P<0.05),差异有统计学意义。Western blot检测对照组、模型组、高剂量治疗组和低剂量治疗组B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bcl-2)蛋白表达分别为(1.000±0.039)、(7.508±0.253)、(1.540±0.182)、(3.778±0.160),bcl-2蛋白表达分别为(1.000±0.053)、(0.202±0.046)、(0.745±0.083)、(0.485±0.065),半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达分别为(1.000±0.045)、(8.917±0.238)、(1.694±0.189)、(4. 展开更多

关键词 股骨头坏死 人脐带间充质干细胞 B细胞淋巴瘤/白血病-2 B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3

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银杏叶提取物对H_2O_2诱导的巨噬细胞凋亡的抑制作用 被引量：4

9

作者 张申 江兴林 卫涛涛 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期750-754,共5页

目的研究银杏叶提取物(EGb761)对H_2O_2所致RAW264.7巨噬细胞凋亡的保护作用。方法以H_2O_2诱导RAW264.7巨噬细胞凋亡为实验模型,用噻唑蓝(MTT)实验、流式细胞术、蛋白质印迹分析、琼脂糖凝胶电泳和荧光分析分别检测细胞存活率、线粒体... 目的研究银杏叶提取物(EGb761)对H_2O_2所致RAW264.7巨噬细胞凋亡的保护作用。方法以H_2O_2诱导RAW264.7巨噬细胞凋亡为实验模型,用噻唑蓝(MTT)实验、流式细胞术、蛋白质印迹分析、琼脂糖凝胶电泳和荧光分析分别检测细胞存活率、线粒体膜电位、细胞色素C的释放和Bax,bcl-2蛋白水平、DNA的降解、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(caspase-3)活性。结果EGb761能明显降低H_2O_2对RAW264.7细胞的氧化损伤,提高细胞的存活率；维持线粒体膜的完整性,抑制跨膜电位的耗散和细胞色素C的释放；抑制caspase-3的活化和DNA的降解。结论EGb761具有清除活性氧,减轻H_2O_2所致RAW264.7细胞的氧化损伤,在对H_2O_2诱导的细胞凋亡中发挥重要的抗凋亡作用。 展开更多

关键词 银杏叶提取物 氧化损伤 细胞色素C 巨噬细胞 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3

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肝细胞癌癌组织caspase-3和DcR3蛋白及SNHG12 mRNA水平变化及其临床意义探讨 被引量：4

10

作者 杜联江 李京涛 崔杰 《实用肝脏病杂志》 CAS 2022年第5期706-709,共4页

目的研究肝细胞癌(HCC)患者癌组织半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(caspase-3)和诱捕受体3(DcR3)蛋白表达及小分子核仁宿主基因12(SNHG12)mRNA水平变化及其临床意义。方法2016年5月~2019年5月我院收治的68例HCC患者,行肝叶切除术治疗,... 目的研究肝细胞癌(HCC)患者癌组织半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(caspase-3)和诱捕受体3(DcR3)蛋白表达及小分子核仁宿主基因12(SNHG12)mRNA水平变化及其临床意义。方法2016年5月~2019年5月我院收治的68例HCC患者,行肝叶切除术治疗,取癌组织和癌旁肝组织,采用EnVision法检测caspase-3和DcR3蛋白表达,采用RT-qPCR法检测SNHG12 mRNA水平,应用Logistic多元回归分析影响HCC患者死亡的危险因素。结果HCC患者癌组织caspase-3阳性率为47.1%,显著低于癌旁组织的77.9%(P<0.05),而DcR3阳性率为61.8%,SNHG12 mRNA水平为(2.9±0.8),显著高于癌旁组织【分别为33.8%和(1.6±0.5),P<0.05】;18例有淋巴结转移的癌组织caspase-3阳性率为33.3%,显著低于50例无淋巴结转移者的62.0%(P<0.05),而DcR3蛋白阳性率为88.9%,显著高于无淋巴结转移者的50.0%,SNHG12 mRNA水平为(2.6±0.4),显著高于无淋巴结转移者【(1.5±0.3),P<0.05】,45例肿瘤直径>5 cm癌组织SNHG12 mRNA水平为(2.7±0.4),显著高于23例无淋巴结转移者【(1.4±0.3),P<0.05】;随访结束时,本组68例HCC患者生存30例(44.1%),死亡38例(55.9%);多元Logistic回归分析显示,肿瘤直径大、合并肝硬化、存在淋巴结转移、Caspase-3低表达、DcR3高表达和SNHG12高水平是HCC患者死亡的危险因素。结论HCC患者癌组织存在基因水平和蛋白表达的显著变化,了解这些变化并探讨其临床意义,将为肝癌防治提供有价值的线索。 展开更多

关键词 肝细胞癌 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3 诱捕受体3蛋白 小分子核仁宿主基因12

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白藜芦醇诱导人脉络膜恶性黑色素瘤细胞凋亡及其机制研究 被引量：4

11

作者 李明新 李健樊 伟英 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期2566-2568,共3页

目的探讨白藜芦醇（Res）诱导人脉络膜恶性黑色素瘤细胞Mum2c凋亡及其机制。方法应用不同浓度的Res（0、4、8、16、32、48mg／L）处理体外培养Mum2c细胞，24、48、72h后，采用细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测细胞增殖。应用不同浓度的Res... 目的探讨白藜芦醇（Res）诱导人脉络膜恶性黑色素瘤细胞Mum2c凋亡及其机制。方法应用不同浓度的Res（0、4、8、16、32、48mg／L）处理体外培养Mum2c细胞，24、48、72h后，采用细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测细胞增殖。应用不同浓度的Res（32、40、48mg／L）处理Mum2c细胞，24h后采用流式细胞仪膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素（AnnexinV，FITC）／碘化丙锭（PI）双标法检测细胞凋亡，线粒体膜电位JC-1荧光检测观察细胞凋亡，检测半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3活性，免疫细胞化学法检测B淋巴细胞／白血病-2（bcl-2）表达。结果CCK一8检测结果显示16mg／L以上浓度的Res作用24、48、72h后Mum2c增殖与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。AnnexinV—FITC／PI染色流式细胞仪检测显示。Res（32、40、48mg／L）作用组凋亡率[（7．00±0．98）％、（11．87±0．60）％、（15．39±1．04）％]，与阴性对照组[（2．02±0．84）％]比较差异有统计学意义（P〈0．05）。jc-1荧光显微镜下观察，可见随浓度增加Res作用组低红染色细胞比例[（7．42±0．53）％、（13．12±0．83）％、（15．57±0．53）％]逐渐增加，与阴性对照组[（3．57±0．53）％]比较差异有统计学意义（P〈0．05）。各Res作用组Caspase-3的吸光度（A）值（0．246±0．015、0．566±0．027、0．778±0．018），与阴性对照组（0．151±0．010）比较差异有统计学意义（P〈0．05）。bcl-2阳性细胞百分率[（49．60±1．51）％、（38．00±1．26）％、（26．67±1．21）％]，与阴性对照组[（61．33±1．21）％]比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Res能够诱导人脉络膜恶性黑色素瘤Mum2c细胞凋亡，其作用机制与线粒体膜电位被破坏，Caspase-3活性增强，bel-2表达水平降低有关。 展开更多

关键词 白藜芦醇 人脉络膜恶性黑色素瘤 细胞凋亡 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3 B淋巴细胞 白血病-2

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半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3和Beclin1在腹部创伤大鼠组织的表达及其意义

12

作者 阿尔帕提·买买提 贾德政 郭飞 《中华实验外科杂志》 CAS 2024年第4期724-727,共4页

目的探讨半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和Beclin1在腹部创伤大鼠组织中的表达及意义。方法20只SD大鼠建立腹部创伤大鼠模型,按照数字表法分为对照组和腹部创伤组,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质免疫印迹分析两组大... 目的探讨半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和Beclin1在腹部创伤大鼠组织中的表达及意义。方法20只SD大鼠建立腹部创伤大鼠模型,按照数字表法分为对照组和腹部创伤组,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质免疫印迹分析两组大鼠肠道组织Caspase-3和Beclin1,采用原位缺口末端标记法(TUNEL)染色分析两组大鼠肠道组织细胞凋亡水平;采用免疫荧光分析两组大鼠肠道组织LC3点的数量;采用免疫组织化学分析两组大鼠肠道组织裂解的Caspase-3(cleaved-Caspase-3)蛋白表达水平。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两组大鼠肠道组织炎性因子水平。组间计量数据比较采用t检验。结果对照组大鼠肠道组织Caspase-3和Beclin1 mRNA表达水平(0.96±0.11、1.08±0.12)明显低于腹部创伤组大鼠(1.82±0.12、1.77±0.18),差异有统计学意义(t=16.910、10.120,P<0.05)。对照组大鼠肠道组织炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平[(18.82±3.56)pg/ml]明显低于腹部创伤组大鼠[(71.98±11.80)pg/ml],差异有统计学意义(t=13.640,P<0.05)。对照组大鼠肠道组织Caspase-3和Beclin1蛋白相对表达水平(0.60±0.08、0.89±0.08)明显低于腹部创伤组大鼠(1.34±0.18、1.56±0.16),差异有统计学意义(t=12.170、12.230,P<0.05)。对照组大鼠肠道组织cleaved Caspase-3蛋白相对表达水平(97.66±11.25)明显低于腹部创伤组大鼠(191.33±24.47),差异有统计学意义(t=10.990,P<0.05)。对照组大鼠肠道组织TUNEL染色阳性率[(2.83±1.10)%]明显低于腹部创伤组大鼠[(50.59±10.15)%],差异有统计学意义(t=14.790,P<0.05)。对照组大鼠肠道组织LC3点数量[(45.20±14.91)个]明显低于腹部创伤组大鼠[(82.81±13.17)个],差异有统计学意义(t=5.977,P<0.05)。蛋白免疫印迹结果显示,对照组大鼠肠道组织自噬底物p62蛋白表达水平(1.26±0.11)明显高于腹部创伤组大鼠(0.62±0.11),差异有统计学意义(t=12.940,P<0.05)。结论腹部创伤后 展开更多

关键词 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3 BECLIN1 腹部创伤 凋亡 自噬

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西妥昔单抗对胃癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量：4

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作者 吴秀英 管洪庚 兰晶 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1733-1736,共4页

目的观察西妥昔单抗对体外培养的人胃癌细胞株SGC-7901增殖和凋亡的影响。方法不同浓度西妥昔单抗（12．5、25．0、50．0、100．0mg／L）作用于对数期生长的胃癌细胞SGC-7901，噻唑蓝（MTF）法观察生长抑制作用；流式细胞术（FCM）检测... 目的观察西妥昔单抗对体外培养的人胃癌细胞株SGC-7901增殖和凋亡的影响。方法不同浓度西妥昔单抗（12．5、25．0、50．0、100．0mg／L）作用于对数期生长的胃癌细胞SGC-7901，噻唑蓝（MTF）法观察生长抑制作用；流式细胞术（FCM）检测对细胞周期和细胞凋亡的影响；逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）法检测半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3（Caspase-3）mRNA的表达水平；免疫组织化学（SP）法测定细胞内B淋巴细胞／白血病-2（bcl-2）、p-27蛋白表达变化。结果MTr法显示随西妥昔单抗浓度增加，抑制率由（9．76±1．41）％上升至（78．12±3．88）％，并呈现时间依赖性（P〈0．05），FCM结果示G。／G．期细胞比例上升，S期细胞比例下降，呈浓度依赖性（P〈0．05），凋亡率与西妥昔单抗浓度呈正相关。RT-PCR法和SP法结果显示，细胞中Caspase-3、p-27mRNA和蛋白随西妥昔单抗浓度增加而表达增加，bcl-2mRNA和蛋白则表达下降（P〈0．05）。结论西妥昔单抗可抑制体外培养的人胃癌细胞SGC-7901增殖，诱导细胞凋亡，其机制可能与上调Caspase-3、P-27基因转录和蛋白表达，下调bcl-2基因转录和蛋白表达有关。 展开更多

关键词 胃癌细胞SGC-7901 西妥昔单抗 凋亡 B淋巴细胞/白血病-2 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3 p-27

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榄香烯诱导神经母细胞瘤凋亡的作用 被引量：2

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作者 周景儒 赵婉妮 +1 位作者 王栋梁 梁剑峰 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期680-682,共3页

目的探讨榄香烯对神经母细胞瘤增殖和凋亡的作用。 方法将SK-N-SH神经母细胞瘤细胞株分为对照组和实验组，实验组中加入不同浓度的榄香烯。应用细胞计数试剂盒（CCK-8）法测定榄香烯对SK-N-SH细胞增殖活力的影响，采用流式细胞仪测定... 目的探讨榄香烯对神经母细胞瘤增殖和凋亡的作用。 方法将SK-N-SH神经母细胞瘤细胞株分为对照组和实验组，实验组中加入不同浓度的榄香烯。应用细胞计数试剂盒（CCK-8）法测定榄香烯对SK-N-SH细胞增殖活力的影响，采用流式细胞仪测定榄香烯对SK-N-SH细胞凋亡的诱导作用，应用实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）法检测榄香烯对SK-N-SH细胞中半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3和Caspase-9的mRNA表达的影响，并进一步用Caspase活性试剂盒测定Caspase-3和Caspase-9的活性。 结果榄香烯作用24 h后，各浓度点的抑制率为（10.963±2.994）%、（50.013±3.641）%、（77.515±4.612）%，t＝4.220、5.615、8.096，P＝0.022、0.000、0.000；榄香烯作用48 h后，各浓度点的抑制率为（14.478±2.270）%、（56.387±3.494）%、（79.531±3.874）%，t＝4.229、5.379、7.842，P＝0.021、0.000、0.000；榄香烯作用72 h后，各浓度点的抑制率为（24.174±2.920）%、（64.619±3.180）%、（87.375±4.189）%，t＝4.759、6.773、15.384，P＝0.001、0.000、0.000。榄香烯作用SK-N-SH细胞24 h后显著诱导细胞凋亡，各浓度点的凋亡率为（19.280±2.991）%、（52.493±4.379）%、（82.189±3.175）%，t＝4.166、6.324、9.703，P＝0.048、0.000、0.000。榄香烯作用SK-N-SH细胞后上调其Caspase-3和Caspase-9的mRNA表达，Caspase-3 mRNA在各浓度点的上调倍数为（2.712±0.127）、（3.013±0.304）、（3.931±0.410），t＝4.714、6.079、9.318，P＝0.015、0.000、0.000；Caspase-9 mRNA在各浓度点的上调倍数为（1.206±0.136）、（2.331±0.412）、（2.824±0.410），t＝4.874、7.523、10.530，P＝0.038、0.010、0.000。并且榄香烯增强Caspase-3和Caspase-9的活性，Caspase-3的活性在各浓度点的上调倍数为（1.517±0.192）、（2.016±0.323）、（2.081±0.361），t＝5.175、7.107、12.100，P＝0.005、0.001、0.000；Caspase-9在各浓度点的上调 展开更多

关键词 榄香烯 神经母细胞瘤 细胞凋亡 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-9

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转化生长因子-β1诱导的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶依赖的人胃癌细胞凋亡途径 被引量：3

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作者 解刚强 刘德纯 +3 位作者 陈登庭 邓淼 汪建光 刘起鹏 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1553-1555,共3页

目的探讨转化生长因子-β1（TGF—β1）诱导胃癌细胞的凋亡作用及机制。方法利用TGF-β1诱导胃癌细胞SGC7901凋亡，小干扰RNA（siRNA）封闭半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-8的表达，Westernblot检测诱导及封闭前后各Caspases... 目的探讨转化生长因子-β1（TGF—β1）诱导胃癌细胞的凋亡作用及机制。方法利用TGF-β1诱导胃癌细胞SGC7901凋亡，小干扰RNA（siRNA）封闭半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-8的表达，Westernblot检测诱导及封闭前后各Caspases表达随时间的变化，流式细胞术分析细胞的凋亡率。结果TGF—β1作用后，各组细胞的凋亡率明显增加，0、24、48h凋亡率分别为1．13％、14．88％、37．32％；Caspase-812h后激活，Caspase-924h后激活；白RNA干扰（RNAi）后Caspase-8表达明显下降，24h后Caspase-8表达量为对照组的11．2％，48～72h未测到表达，96h后Caspase-8表达重新出现，为对照组的9．2％。结论TGF—B1通过Caspase途径诱导胃癌细胞发生凋亡，由Caspase-8开始启动；抑制Caspase-8表达可以在一定程度上阻断TGF—β1／Caspases信号的转导，进而抑制细胞凋亡。 展开更多

关键词 胃肿瘤 转化生长因子-Β1 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶 细胞凋亡

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脑室内亚低温对缺血性脑损伤的保护作用 被引量：3

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作者 綦斌 冯兴慧 +4 位作者 鲁质成 邬巍 毕春华 王欣 孟繁波 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期2517-2519,共3页

目的观察脑室内亚低温对兔局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用，探讨亚低温对脑缺血性脑损伤脑保护的机制。方法采用线栓法制作兔大脑中动脉闭塞（MCAO）脑缺血模型。将18只新西兰纯种白兔分为对照组、闭塞组、亚低温组。通过脑室内滴注... 目的观察脑室内亚低温对兔局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用，探讨亚低温对脑缺血性脑损伤脑保护的机制。方法采用线栓法制作兔大脑中动脉闭塞（MCAO）脑缺血模型。将18只新西兰纯种白兔分为对照组、闭塞组、亚低温组。通过脑室内滴注低温液2h后，采用Longa评分法进行神经功能评分评定；按Elliott公式测定脑水肿程度；流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率的变化；Westernblot法检测半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3（Caspase．3）蛋白的表达。结果低温组神经功能评分（2．167±0．753），明显低于闭塞组（P〈0．01）。低温组左侧脑组织干湿比79．26±1．30，与闭塞组、对照组比较干湿比差异有统计学意义（P〈0．05）。低温组凋亡率明显降低（2．46±0．84）。低温组细胞G．期比例减少（64．05±3．24），s期（43．79±2．25）、G2期（12．88±1．77）细胞比例增加，与其他组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。亚低温下调Caspase-317kb蛋白的表达（P〈0．01）。结论亚低温可能通过减轻脑水肿、抑制细胞凋亡、降低脑缺血再灌注后Caspase-3表达，从而发挥其脑保护作用。 展开更多

关键词 亚低温 脑缺血 再灌注损伤 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3 脱噬作用

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右美托咪定对痫性发作大鼠海马神经细胞B细胞淋巴瘤／白血病-2、B细胞淋巴瘤／白血病-2相关X蛋白、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3蛋白表达的影响 被引量：3

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作者 宋伏虎 张海星 +2 位作者 李传翔 陈力 黄海城 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1929-1932,共4页

目的观察右美托咪定（DEX）对痫性发作大鼠海马神经细胞凋亡蛋白表达的影响。方法将36只sD大鼠随机分为3组（n=12）：对照组（Control组）、右美托咪定组（DEX组）及致痫组（EP组）。DEX组给予10μg／k剂量DEX灌胃，连续3d，至致痫当日... 目的观察右美托咪定（DEX）对痫性发作大鼠海马神经细胞凋亡蛋白表达的影响。方法将36只sD大鼠随机分为3组（n=12）：对照组（Control组）、右美托咪定组（DEX组）及致痫组（EP组）。DEX组给予10μg／k剂量DEX灌胃，连续3d，至致痫当日；对照组、致痫组则分别给予等体积生理盐水灌胃。以氯化锂-匹罗卡品制作致痫模型，观察SD大鼠行为学变化；采用Westernblot检测B细胞淋巴瘤／白血病-2（bcl-2）、bcl-2相关x蛋白（bax）和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3（Caspase-3）表达水平。结果EP组大鼠均表现易激惹，DEX组反复自发性痫性发作（SRS）次数[（5．67±1．53）次]比EP组[（10．33±3．06）次]明显减少，且差异有统计学意义（P〈0．05）。bcl-2、bax、bcl-2／bax和Caspase-3表达水平结果，对照组分别为1．0557±0．0081、0．5712±0．0057、1，0870±0．0026、0；DEX组分另U为0．9654±0．0216、0．6920±0．0028、1．3951±0．0328、0．6765±0．9697；EP组分另0为0．8925±0．0063、0．7427±0．0010、1．2016±0．0082、0．8565±0．9626。EP组与对照组比较，大鼠海马、bax、活化的active—Caspase-3表达水平增加，bcl-2表达水平降低，差异有统计学意义（P〈0．05），bcl-2／bax比值升高，差异有统计学意义（P〈0．05）；DEX组与EP组比较，海马bcl-2表达水平、bcl-2／bax比值升高，bax、active—Caspase-3表达水平降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论DEX可能作用抑制大鼠海马神经细胞Casepase-3和box基因表达，减少SRS次数，对海马神经元产生保护作用。 展开更多

关键词 右美托咪定 癫痫 B细胞淋巴瘤/白血病-2 B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3

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乙醇对人骨髓间充质干细胞神经肽及凋亡相关基因表达的影响 被引量：3

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作者 荆凯 王义生 +2 位作者 左松 李辰成 李月白 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期793-795,共3页

目的观察在乙醇作用下人骨髓问充质干细胞（hBMSCs）中神经肽受体及凋亡相关基因mRNA表达的变化。方法密度梯度离心贴壁培养获得hBMSCs，流式细胞仪鉴定后传至第3代，随机分为实验组及对照组，实验组加入浓度为0．09mol／L乙醇，对照组... 目的观察在乙醇作用下人骨髓问充质干细胞（hBMSCs）中神经肽受体及凋亡相关基因mRNA表达的变化。方法密度梯度离心贴壁培养获得hBMSCs，流式细胞仪鉴定后传至第3代，随机分为实验组及对照组，实验组加入浓度为0．09mol／L乙醇，对照组正常培养。培养11d后，采用实时定量逆转录聚合酶链反应（RT—qPCR）分析两组中过氧化物酶体增殖子活化受体-γ（PPAR．1）、降钙素基因相关肽受体（CGRPR）、成骨转录因子（Runx2）及凋亡相关基因B淋巴细胞／白血病-2（bcl-2）、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3（Caspase．3）mRNA的表达。结果实验组CGRPR、Runx2、bcl-2mRNA表达较对照组降低，CGRPR（1．90E-01±4．12E-02比3．27E-01±8．24E-02，t=6．66，P〈0．05）、Runx2（1．28E-01±3．18E-02比2．50E-01±5．33E-02，t=8．80．P〈0．05）、bcl-2（1．65E-01±3．98E-02比2．95E-01±6．78E-02，t=7．35，P〈0．05）．Caspase-3mRNA与PPAR-1mRNA表达较对照组增高，Caspase．3（5．27E-01±1．26E-01比3．17E-01±7．46E-02，t=6．39。P〈0．05）、PPAR-γ（2．90E-01±、6．74E-02比1．15E-OI±3．36E-02，t=10．38，P〈0．05），差异有统计学意义。结论乙醇能够上调hBMSCs中凋亡基因、成脂基因表达，下调神经肽因子、抗凋亡基因、成骨基因表达，导致细胞凋亡、成脂分化，抑制成骨分化。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 乙醇 B淋巴细胞 白血病-2 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3

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半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3和β-连环蛋白、糖原合成激酶-3β在体外培养保存关节软骨组织中的表达及其相关性 被引量：2

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作者 宋洪强 李雪芳 +1 位作者 玄燕华 亓建洪 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期151-153,共3页

目的体外培养保存关节软骨组织，探讨半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3（Caspase-3）和Wnt／β-连环蛋白（β-catenin）信号通路中关键蛋白表达规律及其相关性。方法选取20只健康成年新西兰大白兔，切取膝骨软骨柱100枚，随机分为5组（n... 目的体外培养保存关节软骨组织，探讨半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3（Caspase-3）和Wnt／β-连环蛋白（β-catenin）信号通路中关键蛋白表达规律及其相关性。方法选取20只健康成年新西兰大白兔，切取膝骨软骨柱100枚，随机分为5组（n=20）。对照组：取材2h内的新鲜软骨；实验组：分为4组，将软骨柱浸入MEME培养液中保存，第14、21、28、35天时各取一组检测指标。采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素（Annexin V—FITC）细胞凋亡检测法测定凋亡率，Western blot检测Caspase-3、糖原合酶激酶-38（GSK-3B）表达，免疫组织化学法检测β-catenin表达。结果随着保存时间延长，软骨细胞凋亡率逐渐增加，Caspase-3、GSK-3β表达逐渐上调，各组间差异均有统计学意义（P〈0．05），各组软骨细胞凋亡率为：对照组（6．04±1．09）％、14d（12．75±0．40）％、21d（21．90±0．57）％、28d（30．44±0．79）％、35d（40．70±0．43）％，Caspase-3表达量为：0．078±0．032、0．193±0．026、0．327±0．041、0．510±0．023、0．719±0．063，GSK-3β表达量为：0．162±0．025、0．242±0．019、0．493±0．012、0．717±0．020、0．905±0．011；免疫组织化学结果显示，细胞质与细胞核中B-catenin阳性染色逐渐增强，组间差异有统计学意义（P〈0．05）；细胞凋亡率与Caspase-3、GSK-3β、β—Catenin表达呈高度正相关（r=0．695、0．702、0．682，P〈0．01）；Caspase-3与GSK-3β、β—catenin表达呈高度正相关（r=0．713、0．661，P〈0．01）。结论体外培养保存关节软骨组织过程中，软骨细胞凋亡伴有Wnt／β-catenin信号通路关键蛋白β—catenin和GSK-3β表达的显著上调。 展开更多

关键词 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3 糖原合酶激酶-3Β Β-连环蛋白 关节软骨

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二硫代氨基甲酸吡咯烷对人骨肉瘤细胞凋亡及黑色素瘤凋亡抑制蛋白和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3表达的影响 被引量：2

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作者 王玉峰 黄涛 +3 位作者 叶天宝 成硕 胡春吉 柴利鹏 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期2496-2498,共3页

目的 观察二硫代氨基甲酸吡咯烷对人骨肉瘤MG-63细胞凋亡及黑色素瘤凋亡抑制蛋白（Livin）和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3表达的影响.方法 采用体外培养人骨肉瘤MG-63细胞株,用50、100、200、400 μmol/L的吡咯烷二硫代... 目的 观察二硫代氨基甲酸吡咯烷对人骨肉瘤MG-63细胞凋亡及黑色素瘤凋亡抑制蛋白（Livin）和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3表达的影响.方法 采用体外培养人骨肉瘤MG-63细胞株,用50、100、200、400 μmol/L的吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC）分别作用于骨肉瘤MG-63细胞,在24、48、72 h后,噻唑蓝（MTT）法测各组细胞存活率,用流式细胞仪检测细胞的凋亡率.作用于骨肉瘤MG-63细胞24h后,用Western blot方法检测各组细胞Livin和Caspase-3蛋白的表达水平.结果 随PDTC浓度增加骨肉瘤MG-63细胞增殖活性呈下降趋势,作用时间越长细胞的增殖活性越低,而细胞的凋亡率呈上升趋势（P＜0.05）.作用24h后,随PDTC浓度增加各组细胞中Livin蛋白的表达为1.384±0.009、0.912±0.007、1.501±0.011、0.751 ±0.008,对照组为1.834±0.006,呈下降趋势,而Caspase-3蛋白表达呈上升趋势（P＜0.05）.结论 PDTC可诱导入骨肉瘤MG-63细胞凋亡,其机制可能与PDTC抑制核因子（NF）-κB传导通路,下调Livin表达继而上调Caspase-3表达有关. 展开更多

关键词 二硫代氨基甲酸吡咯烷 骨肉瘤 黑色素瘤凋亡抑制蛋白 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3 Cysteinyl aspartate-specific protease-3

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