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Streptomyces griseochromogenes菌株milbemycin生物合成基因簇的筛选
被引量：
2
1
作者
阎浩林
IKEDA Haruo
MURA Satoshi
《沈阳药科大学学报》
CAS
CSCD
2001年第5期345-349,共5页
经BamHI酶切的柯氏质粒pku4 0 3与MboⅠ部分消化并经碱性磷酸酶处理的Streptomycesgriseochromogenes染色体DNA片段相连接 ,体外包装后 ,转化大肠杆菌E .coliJM1 0 8,挑取转化子1 1 5 2个 ,构建Streptomycesgriseochromogenes的基因文...
经BamHI酶切的柯氏质粒pku4 0 3与MboⅠ部分消化并经碱性磷酸酶处理的Streptomycesgriseochromogenes染色体DNA片段相连接 ,体外包装后 ,转化大肠杆菌E .coliJM1 0 8,挑取转化子1 1 5 2个 ,构建Streptomycesgriseochromogenes的基因文库。分别以avermectin聚酮体合成酶 (PKS)的酰基转移酶基因 (AT)、酮基合成酶基因 (KS)及参与avermectin生物合成的内酯化酶基因(aveE)、C5 O 甲基转移酶基因 (aveD)为探针 ,利用菌落原位杂交、核酸杂交和以烯酰基还原酶基因(ER)引物的PCR扩增等手段 ,从文库中筛选出 2 4个阳性克隆。根据克隆DNA之间的重叠关系 ,将阳性克隆分为 7组 ,这
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关键词
柯氏质粒pku403
包装
蛋白
转化
基因文库
聚酮体合成酶
菌落原位杂交
核酸杂交
PCR
链霉菌
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职称材料
影响λ噬菌体包装蛋白抽提物效价的因素
2
作者
罗瑞柏
易清明
《生物化学杂志》
CSCD
1993年第2期250-251,共2页
以λ噬菌体DNA作载体构建基因文库时,λ噬菌体包装蛋白抽提物是实验成败的关键之一,市场上虽有此商品出售,但由于价格昂贵加上运输和保藏方面的问题,使用时往往不够理想。所以,不少实验室自己制备噬菌体包装蛋白抽提物。任兆韵等报导:...
以λ噬菌体DNA作载体构建基因文库时,λ噬菌体包装蛋白抽提物是实验成败的关键之一,市场上虽有此商品出售,但由于价格昂贵加上运输和保藏方面的问题,使用时往往不够理想。所以,不少实验室自己制备噬菌体包装蛋白抽提物。任兆韵等报导:快速诱导可以提高包装效价,在这里我们报导包装反应时间等其他因素对λ噬菌体包装蛋白抽提物效价的影响。
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关键词
噬菌体
包装
蛋白
效价
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职称材料
热诱导速度对噬菌体包装蛋白提取物效价的影响
3
作者
任兆钧
冯其辉
刘新垣
《生物化学杂志》
CAS
CSCD
1990年第2期191-192,共2页
<正> 利用D蛋白和E蛋白基因缺陷λ的溶原菌热诱导制备蛋白质提取物,进行噬菌体的体外包装,提取物的效价高低,对重组噬菌体的包装是至为关键的,直接影响到外源基因库的完整性和随机性。目前一般包装效价为10~7—10~8Pfu/μgDNA本...
<正> 利用D蛋白和E蛋白基因缺陷λ的溶原菌热诱导制备蛋白质提取物,进行噬菌体的体外包装,提取物的效价高低,对重组噬菌体的包装是至为关键的,直接影响到外源基因库的完整性和随机性。目前一般包装效价为10~7—10~8Pfu/μgDNA本文比较了快、慢诱导对效价的影响,快诱导的体外包装效价可达2.8×10~8Pfu/μgDNA,而慢诱导包装效价低。
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关键词
噬菌体
包装
蛋白
提取物
包装
效价
热诱导
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职称材料
题名
Streptomyces griseochromogenes菌株milbemycin生物合成基因簇的筛选
被引量：
2
1
作者
阎浩林
IKEDA Haruo
MURA Satoshi
机构
沈阳药科大学制药工程学院
日本国北里研究所
出处
《沈阳药科大学学报》
CAS
CSCD
2001年第5期345-349,共5页
文摘
经BamHI酶切的柯氏质粒pku4 0 3与MboⅠ部分消化并经碱性磷酸酶处理的Streptomycesgriseochromogenes染色体DNA片段相连接 ,体外包装后 ,转化大肠杆菌E .coliJM1 0 8,挑取转化子1 1 5 2个 ,构建Streptomycesgriseochromogenes的基因文库。分别以avermectin聚酮体合成酶 (PKS)的酰基转移酶基因 (AT)、酮基合成酶基因 (KS)及参与avermectin生物合成的内酯化酶基因(aveE)、C5 O 甲基转移酶基因 (aveD)为探针 ,利用菌落原位杂交、核酸杂交和以烯酰基还原酶基因(ER)引物的PCR扩增等手段 ,从文库中筛选出 2 4个阳性克隆。根据克隆DNA之间的重叠关系 ,将阳性克隆分为 7组 ,这
关键词
柯氏质粒pku403
包装
蛋白
转化
基因文库
聚酮体合成酶
菌落原位杂交
核酸杂交
PCR
链霉菌
Keywords
cosmid pku403
packaging protein
transformation
gene library
PKS(polyketide synthase)
colony hybridization
southern hybridization
PCR
分类号
R97 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
影响λ噬菌体包装蛋白抽提物效价的因素
2
作者
罗瑞柏
易清明
机构
武汉大学生物系
出处
《生物化学杂志》
CSCD
1993年第2期250-251,共2页
文摘
以λ噬菌体DNA作载体构建基因文库时,λ噬菌体包装蛋白抽提物是实验成败的关键之一,市场上虽有此商品出售,但由于价格昂贵加上运输和保藏方面的问题,使用时往往不够理想。所以,不少实验室自己制备噬菌体包装蛋白抽提物。任兆韵等报导:快速诱导可以提高包装效价,在这里我们报导包装反应时间等其他因素对λ噬菌体包装蛋白抽提物效价的影响。
关键词
噬菌体
包装
蛋白
效价
分类号
Q939.480.6 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
热诱导速度对噬菌体包装蛋白提取物效价的影响
3
作者
任兆钧
冯其辉
刘新垣
机构
中国医学科学院医学生物学研究所
华南农业大学
中国科学院上海生物化学研究所
出处
《生物化学杂志》
CAS
CSCD
1990年第2期191-192,共2页
文摘
<正> 利用D蛋白和E蛋白基因缺陷λ的溶原菌热诱导制备蛋白质提取物,进行噬菌体的体外包装,提取物的效价高低,对重组噬菌体的包装是至为关键的,直接影响到外源基因库的完整性和随机性。目前一般包装效价为10~7—10~8Pfu/μgDNA本文比较了快、慢诱导对效价的影响,快诱导的体外包装效价可达2.8×10~8Pfu/μgDNA,而慢诱导包装效价低。
关键词
噬菌体
包装
蛋白
提取物
包装
效价
热诱导
分类号
Q939.480.6 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Streptomyces griseochromogenes菌株milbemycin生物合成基因簇的筛选
阎浩林
IKEDA Haruo
MURA Satoshi
《沈阳药科大学学报》
CAS
CSCD
2001
2
下载PDF
职称材料
2
影响λ噬菌体包装蛋白抽提物效价的因素
罗瑞柏
易清明
《生物化学杂志》
CSCD
1993
0
下载PDF
职称材料
3
热诱导速度对噬菌体包装蛋白提取物效价的影响
任兆钧
冯其辉
刘新垣
《生物化学杂志》
CAS
CSCD
1990
0
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职称材料
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