怀山药种质资源的包埋玻璃化超低温保存与植株再生 被引量：20

1

作者 李海兵 周娜 +4 位作者 赵姣 李翔 冯秋妍 赵喜亭 李明军 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期379-383,共5页

通过对怀山药(Dioscorea opposita)种质资源的包埋玻璃化超低温保存与植株再生进行研究,结果表明:将低温下锻炼7天的怀山药试管苗带芽茎段放入预培养基中,低温下培养3天,然后在室温下用3%的海藻酸钠和0.5mol·L-1CaCl2包埋,包埋珠用... 通过对怀山药(Dioscorea opposita)种质资源的包埋玻璃化超低温保存与植株再生进行研究,结果表明:将低温下锻炼7天的怀山药试管苗带芽茎段放入预培养基中,低温下培养3天,然后在室温下用3%的海藻酸钠和0.5mol·L-1CaCl2包埋,包埋珠用MS+0.2mol·L-1蔗糖+2mol·L-1甘油+50g·L-1二甲基亚砜在0°C下装载60分钟,用30%甘油+15%乙二醇+10%二甲基亚砜+15%聚乙二醇+0.4mol·L-1蔗糖在0°C下脱水60分钟,迅速投入液氮,24小时后立即用40°C水浴快速化冻,再用MS+0.5mol·L-1蔗糖溶液洗涤2次,转入再生培养基中培养,可获得再生植株。再生植株成活率因基因型而异,铁棍山药、太谷山药、怀庆1号山药和B号山药的成活率分别为64.29%、49.21%、13.11%和39.81%。 展开更多

关键词 超低温保存 怀山药 包埋玻璃化 再生植株

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怀地黄玻璃化和包埋玻璃化法超低温保存 被引量：11

2

作者 李明军 周娜 +3 位作者 刘杰 张晓丽 李萍 张楠 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期607-610,共4页

比较了玻璃化与包埋玻璃化超低温保存怀地黄[Rehmannia glutinosa(Gaertn.)Libosch]‘85-5’带芽茎段的效果。结果表明:4℃低温锻炼5d,在添加二甲基亚砜(DMSO)和乙酰胺的培养基中预培养3d,60%PVS2室温装载25min,PVS20℃脱水30min时,玻... 比较了玻璃化与包埋玻璃化超低温保存怀地黄[Rehmannia glutinosa(Gaertn.)Libosch]‘85-5’带芽茎段的效果。结果表明:4℃低温锻炼5d,在添加二甲基亚砜(DMSO)和乙酰胺的培养基中预培养3d,60%PVS2室温装载25min,PVS20℃脱水30min时,玻璃化和包埋玻璃化两种保存方法均得到本试验条件下最佳结果;两种方法相比,玻璃化法的存活率和再生率均较包埋玻璃化法高,前者的存活率(88.92%)和再生率(64.29%)分别是后者的1.38倍和2.41倍。可见,采用超低温保存怀地黄种质资源是可行的,且玻璃化法优于包埋玻璃化法。 展开更多

关键词 怀地黄 带芽茎段 玻璃化 包埋玻璃化 超低温保存

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紫参薯的包埋玻璃化超低温保存 被引量：7

3

作者 蔡月琴 王艳平 +4 位作者 庄君娥 林燕茹 柯美玉 陆銮眉 张泽宏 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期58-64,共7页

以紫参薯带芽茎段为材料,采用2%海藻酸钠和0.1mol/L氯化钙凝胶系统制备包埋珠,液氮保存,以茎段细胞活力和包埋珠成活率为指标筛选获得有关参数适宜水平,比较冻后再生苗与常温苗形态及生理指标.结果表明:紫参薯试管苗经4℃锻炼6d后,无菌... 以紫参薯带芽茎段为材料,采用2%海藻酸钠和0.1mol/L氯化钙凝胶系统制备包埋珠,液氮保存,以茎段细胞活力和包埋珠成活率为指标筛选获得有关参数适宜水平,比较冻后再生苗与常温苗形态及生理指标.结果表明:紫参薯试管苗经4℃锻炼6d后,无菌条件下制备其带芽茎段包埋珠,接种到MS+2 mg/L KT+0.2 mg/L NAA+0.5mol/L蔗糖液体培养基中预培养1d,转入MS+2 mol/L甘油+0.4 mol/L蔗糖溶液中室温下装载40min,在玻璃化保护剂PVS2中脱水40min,更新PVS2后迅即液氮保存,24h后置于37℃水浴中化冻5min,用MS+2mg/L KT+0.2mg/L NAA+0.8mol/L蔗糖溶液洗涤3次(每次10min),然后转入MS+2mg/L KT+0.2mg/L NAA+30g/L蔗糖+1g/L活性炭固体培养基中,暗培养7d后转至光照下培养14d,该包埋珠成活率可达60%.冻后再生苗诸多形态和生理指标与常温苗差异不具有统计学意义. 展开更多

关键词 紫参薯 带芽茎段 包埋玻璃化 超低温保存

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江西铅山红芽芋胚性愈伤组织的包埋玻璃化超低温保存 被引量：4

4

作者 洪森荣 尹明华 王艾平 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期80-87,共8页

为长期安全保存江西铅山红芽芋种质资源,本文以江西铅山红芽芋的胚性愈伤组织为对象,研究了包埋玻璃化冻存过程中各因素对细胞活力和愈伤组织成活率的影响,优化建立了江西铅山红芽芋胚性愈伤组织包埋玻璃化超低温保存体系。将约0.2 g胚... 为长期安全保存江西铅山红芽芋种质资源,本文以江西铅山红芽芋的胚性愈伤组织为对象,研究了包埋玻璃化冻存过程中各因素对细胞活力和愈伤组织成活率的影响,优化建立了江西铅山红芽芋胚性愈伤组织包埋玻璃化超低温保存体系。将约0.2 g胚性愈伤组织块包埋成海藻酸钙凝胶珠后,在25℃下转入MS+2 mg/L TDZ+1 mg/L NAA+0.75 mol/L蔗糖的培养基中于14 h/d光周期下预培养1 d;预培养后的胚性愈伤组织块用2 mol/L甘油和0.4 mol/L蔗糖的混合物在25℃下装载40 min;采用PVS2在25℃下脱水30 min,更换PVS2后直接投入液氮保存1 d;再将胚性愈伤组织块置于37℃恒温水浴中化冻3 min,然后用MS+2 mg/L TDZ+1 mg/L NAA+1.2 mol/L蔗糖的液体培养基洗涤3次,每次10 min;洗涤后的胚性愈伤组块转入MS+2 mg/L TDZ+1mg/L NAA固体培养基上先暗培养7 d再转到14 h/d光周期中培养。7 d后胚性愈伤组织块开始恢复生长,并且在30 d内分化出胚状体;将胚状体再次转入MS+2 mg/L TDZ+1 mg/L NAA固体培养基上,60 d后形成完整的植株。红芽芋胚性愈伤组织包埋玻璃化超低温保存后的平均成活率约为60%,并且红芽芋胚性愈伤组织冻后再生苗没有发生形态性状和染色体数目的变异,此结果为长期安全保存江西铅山红芽芋种质资源奠定了良好的基础。 展开更多

关键词 江西铅山红芽芋 胚性愈伤组织 包埋玻璃化 超低温保存

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扁桃茎尖包埋玻璃化超低温保存条件研究 被引量：9

5

作者 陈加利 姜喜 +3 位作者 肖巍 刘建亮 王琳 李志军 《塔里木大学学报》 2014年第2期110-114,共5页

采用包埋玻璃化法对莎车18号扁桃茎尖超低温保存进行了研究。主要探讨低温锻炼、预处理浓度和预处理时间、装载时间和PVS2处理时间对莎车18号扁桃茎尖超低温保存后存活率的影响。结果表明,将低温锻炼4周的莎车18号扁桃茎尖切2 mm长用3%... 采用包埋玻璃化法对莎车18号扁桃茎尖超低温保存进行了研究。主要探讨低温锻炼、预处理浓度和预处理时间、装载时间和PVS2处理时间对莎车18号扁桃茎尖超低温保存后存活率的影响。结果表明,将低温锻炼4周的莎车18号扁桃茎尖切2 mm长用3%海藻酸钠包埋后,在含有0.3 mg/L蔗糖＋5%DMSO（二甲基亚砜）的MS培养基预培养1 d,装载液处理20min,在0℃条件下用PVS2处理50 min后迅速投入液氮,24 h后取出,放入40℃水浴锅中化冻1～2 min,用1.2 mg/L蔗糖的MS洗涤液洗涤2次,每次10 min,接种于含6-BA0.3 mg/L和IAA 0.3 mg/L的MS培养基上进行培养,暗培养15 d,转移至正常光下,存活率高达52%。 展开更多

关键词 莎车18号扁桃 茎尖 包埋玻璃化法 存活率

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山药种质包埋玻璃化超低温保存再生植株的稳定性分析 被引量：8

6

作者 赵喜亭 王苗 +3 位作者 邵换娟 李翔 李海兵 李明军 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2012年第1期234-238,共5页

为了验证前期建立的包埋玻璃化超低温保存技术是山药(Dioscorea opposita)种质资源离体保存的一种有效的方法,对包埋玻璃化超低温保存后的山药再生植株的形态、生理和同工酶酶谱进行了研究。结果表明:与常温保存的植株相比,供试的铁棍... 为了验证前期建立的包埋玻璃化超低温保存技术是山药(Dioscorea opposita)种质资源离体保存的一种有效的方法,对包埋玻璃化超低温保存后的山药再生植株的形态、生理和同工酶酶谱进行了研究。结果表明:与常温保存的植株相比,供试的铁棍山药再生植株的平均株高、叶片数、芽数和茎节长,叶片中叶绿素、可溶性蛋白和可溶性糖含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活力在绝对值上虽有差异,但均未达到显著水平,且能移栽成活,保持了形态和生理的稳定性;供试的铁棍、太谷、怀庆和嘉祥细长毛4种山药再生植株的SOD和蛋白水解酶的同工酶条带数目及强度均未发生变化,保持了酶蛋白的稳定性。说明前期建立的包埋玻璃化法超低温保存技术是山药种质离体保存的一种有效方法。 展开更多

关键词 山药 超低温保存 包埋玻璃化法 稳定性

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江西山药茎尖包埋玻璃化法超低温保存及其遗传稳定性检测 被引量：8

7

作者 尹明华 徐志坚 +5 位作者 章省琴 吕思杰 曾艳红 付有章 夏瑾华 洪森荣 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第6期984-991,共8页

采用植物组织培养法对广丰药薯茎尖的包埋玻璃化法超低温保存程序进行优化,并采用扩增片段长度多态性（AFLP）分子标记法和流式细胞术对其冻后再生苗的遗传稳定性进行检测,同时将超低温程序应用到江西山药其他地方品种,旨在为薯蓣属植... 采用植物组织培养法对广丰药薯茎尖的包埋玻璃化法超低温保存程序进行优化,并采用扩增片段长度多态性（AFLP）分子标记法和流式细胞术对其冻后再生苗的遗传稳定性进行检测,同时将超低温程序应用到江西山药其他地方品种,旨在为薯蓣属植物种质资源的长期保存奠定理论基础。结果表明,广丰药薯茎尖预培养的较佳时间为5 d,较佳的蔗糖浓度为0.75 mol·L^-1;装载的较佳时间为40 min;脱水的较佳温度为0℃,较佳时间为60 min;冻后黑暗培养7 d可以显著提高其成活率。用AFLP分子标记法和流式细胞术对茎尖冻后再生植株的遗传稳定性进行检测,没有发现异常条带和染色体倍性变化,气孔观察也未发现叶下表皮气孔参数的显著变异。将这种超低温保存程序用于江西山药其他基因型,成活率约为40%-85%。该研究建立的包埋玻璃化法超低温保存程序能保证江西山药的遗传稳定性,可为建立江西山药种质资源超低温保存库提供一定的技术支撑。 展开更多

关键词 江西山药 茎尖 包埋玻璃化法 超低温保存 遗传稳定性

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树莓试管苗茎尖包埋玻璃化法超低温保存 被引量：7

8

作者 娄汉平 郭修武 代汉萍 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2010年第18期59-62,共4页

对树莓茎尖包埋玻璃化法种质资源保存进行了研究,以期建立简单、高效的树莓种质资源超低温保存体系。试验以树莓试管苗茎尖为材料,探讨了不同因素对树莓试管苗茎尖包埋玻璃化法超低温保存后成活率的影响。结果表明:长约1mm的树莓试管苗... 对树莓茎尖包埋玻璃化法种质资源保存进行了研究,以期建立简单、高效的树莓种质资源超低温保存体系。试验以树莓试管苗茎尖为材料,探讨了不同因素对树莓试管苗茎尖包埋玻璃化法超低温保存后成活率的影响。结果表明:长约1mm的树莓试管苗茎尖用海藻酸钙包埋后,采用分步预培养的方法,最后终止蔗糖浓度为0.9mol/L的MS培养基中进行预培养3天,再用含2mol/L甘油和0.9mol/L蔗糖的装载液处理90min,在0℃下用PVS2处理180min后投入液氮中保存1h,在40℃下化冻3min,用含1mol/L蔗糖的MS液体培养基洗涤20min,最后转到恢复培养基上,30天后在没有形成愈伤组织的情况下形成新的植株。以上的保存程序应用于6个树莓品种,成活率达85%。该结果为树莓种质资源的超低温长期保存提供了理论依据。 展开更多

关键词 树莓 茎尖 包埋玻璃化法

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李茎尖包埋玻璃化法超低温保存的条件探索 被引量：6

9

作者 陈红 韩晓莹 《山地农业生物学报》 2013年第3期276-279,共4页

以贵州特有地方李资源——酥李为材料,探讨了超低温保存过程中海藻酸钠浓度、氯化钙浓度、渗透保护剂中蔗糖浓度和玻璃化液PVS2处理时间对茎尖存活的影响。结果表明:剥取长约2 mm的李茎尖悬浮于2%～3%海藻酸钠的溶液中,将该混合液滴于0.... 以贵州特有地方李资源——酥李为材料,探讨了超低温保存过程中海藻酸钠浓度、氯化钙浓度、渗透保护剂中蔗糖浓度和玻璃化液PVS2处理时间对茎尖存活的影响。结果表明:剥取长约2 mm的李茎尖悬浮于2%～3%海藻酸钠的溶液中,将该混合液滴于0.1 mol/L Ca2+溶液中,包埋液均含有2 mol/L甘油和0.4 mol/L蔗糖。包埋30 min后,在0℃下PVS2处理120 min后快速投入液氮(LN),24 h后取出。在37℃水浴中化冻3 min,用1.2 mol/L的蔗糖溶液洗涤2次,每次10 min,接种于恢复培养基中,暗培养1周后,转移至正常光下,茎尖存活率达21%。 展开更多

关键词 酥李 茎尖 包埋玻璃化法 存活率

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包埋玻璃化法超低温保存沙生柽柳休眠茎尖的研究 被引量：5

10

作者 刘艳萍 滕立平 +2 位作者 段黄金 鲁乃增 王高辉 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第11期5576-5577,5607,共3页

[目的]采用包埋玻璃化法,对沙生柽柳休眠茎尖成功地进行冷冻保存。[方法]将沙生柽柳休眠茎尖包埋在含3%褐藻酸钙的胶球中,研究了预培养中蔗糖浓度、培养时间和不同玻璃化保护液处理的时间对沙生柽柳休眠茎尖存活率的影响。[结果]含沙生... [目的]采用包埋玻璃化法,对沙生柽柳休眠茎尖成功地进行冷冻保存。[方法]将沙生柽柳休眠茎尖包埋在含3%褐藻酸钙的胶球中,研究了预培养中蔗糖浓度、培养时间和不同玻璃化保护液处理的时间对沙生柽柳休眠茎尖存活率的影响。[结果]含沙生柽柳茎尖的胶球在0.8mol/L蔗糖溶液中培养24h可获得较高的存活率;胶球经玻璃化保护液[40%甘油+45%(0.4mol/L)蔗糖+10%聚乙二醇(分子量4000)+5%二甲基亚砜]在25℃处理20min可以明显提高存活率,在优化条件下存活率可高达48.3%。[结论]蔗糖浓度和预培养时间是决定沙生柽柳茎尖存活率的关键因素。 展开更多

关键词 沙生柽柳 休眠茎尖 超低温保存 包埋玻璃化法

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木薯茎尖包埋—玻璃化法超低温保存及植株再生 被引量：3

11

作者 陈志林 陆柳英 李开绵 《广西热带农业》 2007年第4期19-22,共4页

主要探讨装载时间、蔗糖浓度、预培养时间和PVS2处理时间对木薯种质超低温保存舌成活率的影响。结果表明，长约1．5mm的木薯茎尖用海藻酸钙包埋后，在含有2mo1．L^-1甘油和0．4mo1．L^-1蔗糖的装载液装载30-40min，然后在含有0．5mo1．L... 主要探讨装载时间、蔗糖浓度、预培养时间和PVS2处理时间对木薯种质超低温保存舌成活率的影响。结果表明，长约1．5mm的木薯茎尖用海藻酸钙包埋后，在含有2mo1．L^-1甘油和0．4mo1．L^-1蔗糖的装载液装载30-40min，然后在含有0．5mo1．L^-1蔗糖的改良MS培养基上预培齐2d，0℃下PVS2处理4h后快速投入液氮（LN），1h后取出，在40℃水浴中化冻90sec，用含有1．2mo1．L^-1蔗糖的改良MS培养液洗涤20min，接种于恢复培养基中（MS＋0．02mg．L^-1NAA），暗培养3-5d，转移至正常光下，最高成活率接近70％；再生植株生长和分化正常。 展开更多

关键词 木薯 茎尖 包埋玻璃化法 超低温保存

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红芽芋茎尖的包埋玻璃化法超低温保存（英文） 被引量：4

12

作者 王艾平 尹明华 洪森荣 《植物分类与资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期801-812,共12页

对红芽芋(Colocasia esculenta var.cormosus ‘Hongyayu’)茎尖的包埋玻璃化法超低温保存技术进行了研究。茎尖从培养8周的试管苗上切下并包埋成海藻酸钙凝胶珠,并在MS+3.5 mg·L^(-1)6-BA+0.5 mg·L^(-1)IBA+0.1 mg·L^(-... 对红芽芋(Colocasia esculenta var.cormosus ‘Hongyayu’)茎尖的包埋玻璃化法超低温保存技术进行了研究。茎尖从培养8周的试管苗上切下并包埋成海藻酸钙凝胶珠,并在MS+3.5 mg·L^(-1)6-BA+0.5 mg·L^(-1)IBA+0.1 mg·L^(-1)GA_3+0.3 mol·L^(-1)蔗糖的液体培养基中预培养24 h,随后用2 mol·L^(-1)甘油+0.4 mol·L^(-1)蔗糖的混合物在25℃下装载30 min,并用PVS2在25℃脱水20 min后将包埋的茎尖直接投入液氮保存。保存1 d后取出材料在40℃水浴快速复温3 min后,吸去冷冻管中PVS2,并用MS+3.5 mg·L^(-1)6-BA+0.5mg·L^(-1)IBA+0.1 mg·L^(-1)GA_3+1.2 mol·L^(-1)蔗糖的液体培养基在25℃洗涤3次,每次10 min。最后将茎尖接种于MS+3.5 mg·L^(-1)6-BA+0.5 mg·L^(-1)IBA+0.1 mg·L^(-1)GA_3的固体培养基上,暗培养3 d后转入正常的光周期中培养。红芽芋茎尖冻后成活率约为80%,其再生植株没有发生形态学的变化。这种包埋玻璃化法程序有望成为红芽芽茎尖超低温保存的常规方法。 展开更多

关键词 超低温保存 包埋玻璃化法 红芽芋 茎尖

原文传递

甘薯茎尖超低温保存技术研究 被引量：4

13

作者 田霄 侯夫云 +1 位作者 王庆美 张立明 《山东农业科学》 2010年第5期55-56,共2页

本试验采用包埋玻璃化法超低温冷冻技术保存徐薯18号的茎尖,结果表明,当剥取茎尖大小为1.0~1.5 mm,玻璃化处理时间为90 min时,茎尖存活率达85%以上。

关键词 徐薯18号 茎尖 包埋玻璃化法

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胡杨休眠茎尖的包埋玻璃化法冷冻保存研究 被引量：4

14

作者 张玲 田洪涛 +1 位作者 刘锦涛 刘艳萍 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2232-2238,共7页

【目的】建立适合胡杨休眠茎尖的冷冻保存方法,对珍稀濒危植物胡杨种质资源进行保存。【方法】取深冬胡杨休眠茎尖,无菌处理后,包埋在3%褐藻酸钙胶球中,对包埋后的胶球进行蔗糖预培养,预培养后的胶球再用玻璃化保护液进行处理。研究预... 【目的】建立适合胡杨休眠茎尖的冷冻保存方法,对珍稀濒危植物胡杨种质资源进行保存。【方法】取深冬胡杨休眠茎尖,无菌处理后,包埋在3%褐藻酸钙胶球中,对包埋后的胶球进行蔗糖预培养,预培养后的胶球再用玻璃化保护液进行处理。研究预培养过程中蔗糖浓度、预培养时间及不同玻璃化保护液和处理时间对胡杨休眠茎尖存活率的影响。【结果】含有休眠茎尖的褐藻酸钙胶球在0.8 mol/L蔗糖溶液中预培养24 h,经玻璃化保护液[40%甘油+45%(0.4 mol/L)蔗糖+10%聚乙二醇(4 000)+5%二甲基亚砜],于室温下处理30 min后再进行冷冻保存,可以获得较好的存活率。【结论】在优化的条件下,胡杨休眠茎尖存活率可高达77%,对保存后再生的幼芽进行遗传稳定性检测,未发现变异。采用液氮冷冻保存胡杨休眠茎尖是可行的。 展开更多

关键词 胡杨 休眠茎尖 冷冻保存 包埋玻璃化法

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药用植物黄芪离体培养茎尖的包埋脱水法和包埋玻璃化法超低温保存（英文） 被引量：2

15

作者 尹明华 洪森荣 《植物分类与资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期767-778,共12页

为找出一条黄芪种质长期包埋脱水法保存和包埋玻璃化法保存的程序,以来源于黄芪离体生长腋芽的黄芪茎尖并包埋成海藻酸钙珠。随后,在MS+0.75 mol·L^(-1)蔗糖的液体培养基中25℃下预培养5 d后,放于干硅胶上无菌干燥5 h,直至含水量达... 为找出一条黄芪种质长期包埋脱水法保存和包埋玻璃化法保存的程序,以来源于黄芪离体生长腋芽的黄芪茎尖并包埋成海藻酸钙珠。随后,在MS+0.75 mol·L^(-1)蔗糖的液体培养基中25℃下预培养5 d后,放于干硅胶上无菌干燥5 h,直至含水量达23.1%(以鲜重为基础)时将材料投入液氮保存。保存1 d后,茎尖在40℃水浴中化冻2~3 min并转入固体培养基上进行再生培养,2周后大约50%的茎尖可再生出芽。黄芪茎尖包埋玻璃化法超低温保存程序也被优化,同样包埋成海藻酸钙凝胶珠的茎尖在MS+1 mg·L^(-1)6-BA+0.05 mg·L^(-1)NAA+0.75 mol·L^(-1)蔗糖的液体培养基中25℃预培养3 d,用2 mol·L^(-1)甘油+0.4 mol·L^(-1)蔗糖装载液25℃装载90 min并再用PVS2在0℃下处理120 min后直接投入液氮。保存1 d后,取出材料在37℃水浴中化冻2~3 min,并用MS+1 mg·L^(-1)6-BA+0.05 mg·L^(-1)NAA+1.2 mol·L^(-1)蔗糖的液体培养基进行10 min的洗涤后转入MS+1 mg·L^(-1)6-BA+0.05 mg·L^(-1)NAA的固体培养基上进行再生培养。茎尖的再生率接近80%。以上两种超低温保存方式均未造成再生植株形态学上的变化。因此,包埋脱水法和包埋玻璃化法两种常规方法对于黄芪茎尖超低温保存来说均具有重要的意义。 展开更多

关键词 超低温保存 包埋脱水法 包埋玻璃化法 黄芪 茎尖 种质保存

原文传递

包埋玻璃化法超低温保存灰杨休眠茎尖的研究 被引量：2

16

作者 刘艳萍 段黄金 +1 位作者 鲁乃增 姜雪飞 《河北农业科学》 2010年第5期61-63,共3页

采用包埋玻璃化法,对灰杨休眠茎尖进行了超低温保存研究。将灰杨休眠茎尖包埋在含3%褐藻酸钙的胶球中,研究了预培养中的蔗糖浓度、培养时间和不同玻璃化保护液处理时间对灰杨休眠茎尖存活率的影响。结果表明:含灰杨茎尖的胶球在0.8 mol/... 采用包埋玻璃化法,对灰杨休眠茎尖进行了超低温保存研究。将灰杨休眠茎尖包埋在含3%褐藻酸钙的胶球中,研究了预培养中的蔗糖浓度、培养时间和不同玻璃化保护液处理时间对灰杨休眠茎尖存活率的影响。结果表明:含灰杨茎尖的胶球在0.8 mol/L的蔗糖溶液中培养24 h,可获得较高的存活率;胶球经玻璃化保护液[40%甘油+45%(0.4 mol/L)蔗糖+10%聚乙二醇(分子量4 000)+5%二甲基亚砜]在25℃处理20 m in,可以显著提高其存活率,在优化条件下存活率可高达58.3%。 展开更多

关键词 灰杨 休眠茎尖 超低温保存 包埋玻璃化法

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扁桃休眠茎尖包埋玻璃化超低温保存的初探 被引量：2

17

作者 肖巍 刘建亮 +3 位作者 姜喜 马其 王梦雪 王秀 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1624-1629,共6页

[目的]研究包埋玻璃化法对扁桃休眠茎尖超低温保存的影响,为扁桃资源的超低温保存提供理论依据.[方法]采用不同预培养蔗糖浓度和预培养时间、不同装载液处理时间、不同玻璃化液处理时间及不同化冻方式对莎车14号扁桃休眠茎尖包埋玻璃化... [目的]研究包埋玻璃化法对扁桃休眠茎尖超低温保存的影响,为扁桃资源的超低温保存提供理论依据.[方法]采用不同预培养蔗糖浓度和预培养时间、不同装载液处理时间、不同玻璃化液处理时间及不同化冻方式对莎车14号扁桃休眠茎尖包埋玻璃化超低温保存存活率进行比较.[结果]将低温贮藏的扁桃休眠茎尖剥成1～2 mm,用3％的海藻酸钠包埋,在含0.4 mol/L蔗糖的0.1 mol/L CaCl2溶液中固定30 min后形成包埋丸,用含有0.5 mg/L蔗糖的MS培养基预培养3d,放入装载液（MS＋2 mol/L甘油＋0.4 mol/L蔗糖）中处理20 min,0℃下用PVS2处理30 min后迅速投入液氮,超低温保存24 h后取出,放入40℃水浴锅中化冻1～2 min,用1.2 mg/L蔗糖的MS洗涤液洗涤20 min,转入含0.3 mg/L 6-BA和0.3 mg/L IAA的MS培养基中培养,存活率达45％.[结论]包埋玻璃化法能够提高莎车14号扁桃休眠茎尖超低温保存的存活率. 展开更多

关键词 超低温保存 扁桃 休眠茎尖 包埋玻璃化法

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卵叶泥炭藓茎尖包埋玻璃化法超低温保存研究 被引量：2

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作者 许丹尔 高雪笛 +5 位作者 李秋萍 戚钰 韦玉梅 卢春红 王健 朱瑞良 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期573-578,共6页

该研究通过对脱水时间和化冻温度的探索,检验了包埋玻璃化法在超低温保存湿润生境中苔藓的可能性。结果表明:卵叶泥炭藓无菌苗在4℃条件下预培养3d后,在0℃用60% PVS_2装载30min,PVS_2脱水60min后迅速投入液氮保存,24h后用40℃水浴快速... 该研究通过对脱水时间和化冻温度的探索,检验了包埋玻璃化法在超低温保存湿润生境中苔藓的可能性。结果表明:卵叶泥炭藓无菌苗在4℃条件下预培养3d后,在0℃用60% PVS_2装载30min,PVS_2脱水60min后迅速投入液氮保存,24h后用40℃水浴快速化冻2min再培养,成活率可达42.41%,且再生植株与常温状态下的植株形态指标没有显著性差异。研究认为,包埋玻璃化法超低温保存湿润环境中生长的苔藓植物是可行的。 展开更多

关键词 苔藓植物 卵叶泥炭藓 包埋玻璃化法 超低温保存

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菊花茎尖外植体高效超低温保存技术建立的分析

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作者 夏铭 李经纬 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第11期3670-3678,共9页

菊花是全球最重要的鲜切花之一,建立高效的菊花茎尖超低温保存体系具有重要意义。本研究以菊花‘Sei Hillary’试管苗为材料,研究了茎尖大小、炼苗期光照条件、六种再生培养基配方、超低温保存方法、母株感染病害情况对超低温保存效率... 菊花是全球最重要的鲜切花之一,建立高效的菊花茎尖超低温保存体系具有重要意义。本研究以菊花‘Sei Hillary’试管苗为材料,研究了茎尖大小、炼苗期光照条件、六种再生培养基配方、超低温保存方法、母株感染病害情况对超低温保存效率的影响,结果发现,上述参数均显著影响茎尖超低温保存效率,组织切片观察揭示了超低温保存方法影响再生效率的原因。本研究建立了一个高效的菊花茎尖超低温保存体系,主要技术步骤包括:健康试管苗在16 h的光周期下4℃炼苗6周、切取携带3~4片叶原基的茎尖(1.5 mm),利用小滴玻璃化法进行超低温保存,快速解冻后于添加0.05 mg/L GA3的1/2Knop培养基上再生培养。该体系可获得85.5%成活率和53.7%的再生率,为菊花种质资源提供了一种简单高效的长期保存方法。 展开更多

关键词 菊花(Chrysanthemum morifolium) 茎尖超低温保存 包埋玻璃化法 小滴玻璃化法 类病毒

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高山红景天(Rhodiola sachalinensis A.Bor)茎尖包埋-玻璃化法超低温保存与植株再生 被引量：11

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作者 刘剑锋 阎秀峰 +1 位作者 程云清 李霞 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期265-270,共6页

使用包埋-玻璃化法对两种来源的高山红景天茎尖进行超低温保存研究，探讨蔗糖预处理、包埋过程中渗透处理和不同温度下玻璃化液PVS2处理的时间对超低温保存后茎尖存活率的影响．结果表明，茎尖依次在0．3、0．5、0．7、1．0mol·L^-... 使用包埋-玻璃化法对两种来源的高山红景天茎尖进行超低温保存研究，探讨蔗糖预处理、包埋过程中渗透处理和不同温度下玻璃化液PVS2处理的时间对超低温保存后茎尖存活率的影响．结果表明，茎尖依次在0．3、0．5、0．7、1．0mol·L^-1的蔗糖溶液中各预培养1d后，转入1．0mol·L^-1的蔗糖溶液中继续培养4d，然后使用附加2mol·L^-1甘油和1mol·L^-1蔗糖的包埋液渗透处理60min，包埋珠在0℃处理180～210min后投入液氮，48h后用40℃水浴快速化冻3min，用含有1mol·L。蔗糖的改良MS培养液洗涤20min，转入MS＋6-BA1mg·L^-1＋NAAO．1mg·L^-1固体培养基中在22℃条件下进行暗培养，2d后转移入光照培养，最高成活率接近100％，再生植株生长和分化正常． 展开更多

关键词 高山红景天 茎尖 包埋-玻璃化法 超低温保存

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