目的观察大鼠角膜碱烧伤使用羊膜匀浆提取液(extraction of amniotic membrane,EAM)后角膜瘢痕的变化,探讨羊膜匀浆提取液应用于角膜碱烧伤的临床价值及作氉用机理。方法取SD大鼠40只随机分为EAM组(20只)和对照组(20只),所有大鼠通过1 m...目的观察大鼠角膜碱烧伤使用羊膜匀浆提取液(extraction of amniotic membrane,EAM)后角膜瘢痕的变化,探讨羊膜匀浆提取液应用于角膜碱烧伤的临床价值及作氉用机理。方法取SD大鼠40只随机分为EAM组(20只)和对照组(20只),所有大鼠通过1 mol·L-1的NaOH溶液建立右眼角膜碱烧伤模型。EAM组行EAM滴眼,每天4次,对照组用PBS缓冲液滴眼。通过裂隙灯显微镜下观察大鼠角膜透明性,角膜共聚焦显微镜动态观察大鼠角膜超微结构的变化,计算肌成纤维细胞的数量。结果碱烧伤后28 d,EAM组的角膜透明度评分明显好于对照组,两组分别为2.36±0.81和3.36±1.12(P<0.01)。碱烧伤后第9天、第11天、第14天EAM组肌成纤维细胞密度均小于对照组,各时间点EAM组、对照组分别为(201±39)个·mm-2、(291±48)个·mm-2,(248±84)个·mm-2、(349±105)个·mm-2,(108±57)个·mm-2、(175±62)个·mm-2,两组之间差异均有统计学意义(均为P<0.01)。结论新鲜EAM可以有效抑制碱烧伤后肌成纤维细胞的激活和增殖,减少角膜瘢痕的形成。展开更多
目的:探索缺氧预适应小鼠脑匀浆提取液(Brain tissue extract of hypoxia-preconditioned mice,BHP)对NGF诱导分化的PC12细胞缺氧耐受性的影响及保护性作用的适合浓度。方法:复制小鼠急性重复缺氧模型,制备BHP,用考马斯亮蓝法定量蛋白...目的:探索缺氧预适应小鼠脑匀浆提取液(Brain tissue extract of hypoxia-preconditioned mice,BHP)对NGF诱导分化的PC12细胞缺氧耐受性的影响及保护性作用的适合浓度。方法:复制小鼠急性重复缺氧模型,制备BHP,用考马斯亮蓝法定量蛋白。在分化PC12细胞中加入BHP使其蛋白终浓度分别为1.0、10.0、100.0μg/ml(BHP组)。以等蛋白终浓度正常小鼠脑匀浆提取液(Brain tissue extract of normal mice,BN)作为对照组(BN组)。同时设置只加PBS的溶剂对照组(PBS组)。缺氧(2%o_2)培养24、48、72h后,采用回唑盐(MTT)比色法检测各组细胞活力(OD_(570nm)值)和乳酸脱氢酶(LDH)透出率、缺氧72h晚期凋亡率。结果:缺氧24h时,蛋白终浓度为10.0、100.0μg/ml的BHP组OD_(570nm)值显著高于同浓度BN组和缺氧PBS组,其LDH透出率显著低于同浓度BN组和缺氧PBS组。随缺氧时间延长,其保护作用逐渐减弱。至缺氧72h时,仅蛋白终浓度为100.0μg/ml的BHP组OD_(570nm)值显著高于同浓度BN组,其LDH透出率、晚期凋亡率均显著低于缺氧PBS组。结论:BHP对分化PC12细胞缺氧耐受性的增强作用有浓度依赖性和时间依赖性,蛋白终浓度为100.0μg/ml的BHP组保护作用稳定、持久。展开更多
文摘目的:探索缺氧预适应小鼠脑匀浆提取液(Brain tissue extract of hypoxia-preconditioned mice,BHP)对NGF诱导分化的PC12细胞缺氧耐受性的影响及保护性作用的适合浓度。方法:复制小鼠急性重复缺氧模型,制备BHP,用考马斯亮蓝法定量蛋白。在分化PC12细胞中加入BHP使其蛋白终浓度分别为1.0、10.0、100.0μg/ml(BHP组)。以等蛋白终浓度正常小鼠脑匀浆提取液(Brain tissue extract of normal mice,BN)作为对照组(BN组)。同时设置只加PBS的溶剂对照组(PBS组)。缺氧(2%o_2)培养24、48、72h后,采用回唑盐(MTT)比色法检测各组细胞活力(OD_(570nm)值)和乳酸脱氢酶(LDH)透出率、缺氧72h晚期凋亡率。结果:缺氧24h时,蛋白终浓度为10.0、100.0μg/ml的BHP组OD_(570nm)值显著高于同浓度BN组和缺氧PBS组,其LDH透出率显著低于同浓度BN组和缺氧PBS组。随缺氧时间延长,其保护作用逐渐减弱。至缺氧72h时,仅蛋白终浓度为100.0μg/ml的BHP组OD_(570nm)值显著高于同浓度BN组,其LDH透出率、晚期凋亡率均显著低于缺氧PBS组。结论:BHP对分化PC12细胞缺氧耐受性的增强作用有浓度依赖性和时间依赖性,蛋白终浓度为100.0μg/ml的BHP组保护作用稳定、持久。
