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中药双龙丸对动脉粥样硬化细胞模型增殖动力学和病理形态学的影响 被引量：13
1
作者 王会玲 胡婉英 《中药药理与临床》 CAS CSCD 1999年第4期34-38,共5页
培养的家兔动脉血管平滑肌细胞（ASMC）用高脂血清（HLS）建立AS细胞模型，应用结晶紫色法、^3H-TdR掺入、透射电镜等方法观察了双龙丸药物血清对增殖动力学和病理形态学的影响，结果用10％的HLS能明显刺激ASMC增殖和DNA合成，使生长曲... 培养的家兔动脉血管平滑肌细胞（ASMC）用高脂血清（HLS）建立AS细胞模型，应用结晶紫色法、^3H-TdR掺入、透射电镜等方法观察了双龙丸药物血清对增殖动力学和病理形态学的影响，结果用10％的HLS能明显刺激ASMC增殖和DNA合成，使生长曲线升高，^3H-TdR掺入增加，引起细胞超微结构改变，促进肌原性泡沫细胞形成。双龙丸可显著抑制HLS作用下的ASMC增殖和DNA合成，同时使病理性细胞内超微结构改变明显减轻，提示双龙丸可通过干预ASMC增殖来阻止AS发生，抑制粥样斑块发展。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 动脉血管平滑肌细胞 双龙丸 细胞增殖 细胞动力学 病理形态学 AS
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动脉血管平滑肌细胞、血管内皮细胞原代培养方法的改良及应用 被引量：6
2
作者 王敏 崔连群 +3 位作者 王晓军 烟玉琴 韩秋霞 秦风菊 《山东医药》 CAS 北大核心 2004年第14期17-18,共2页
关键词 动脉血管平滑肌细胞 血管内皮细胞 体外培养 动脉粥样硬化 高血压
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小鼠血管平滑肌细胞原代培养方法的改良 被引量：4
3
作者 吴建芳 《青海医学院学报》 CAS 2008年第1期52-53,共2页
目的建立一种简单方便但高效的血管平滑肌细胞原代培养方法。方法改良酶消化法。结果用该法培养细胞传代生长快,细胞纯度达98%以上,足以满足各种细胞试验需求。结论与传统方法相比该法简单经济,试验成功率高,节省材料和时间,而且可获得... 目的建立一种简单方便但高效的血管平滑肌细胞原代培养方法。方法改良酶消化法。结果用该法培养细胞传代生长快,细胞纯度达98%以上,足以满足各种细胞试验需求。结论与传统方法相比该法简单经济,试验成功率高,节省材料和时间,而且可获得更多纯度较高的细胞。 展开更多
关键词 小鼠 动脉血管平滑肌细胞 原代培养
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剪切力对动脉血管平滑肌细胞增殖分化的影响 被引量：3
4
作者 王莹 樊瑜波 孙安强 《生命科学仪器》 2008年第1期31-35,共5页
目的:探讨剪切力作用下人脐动脉血管平滑肌细胞的增殖分化的变化。方法:利用改进的灌流及流动培养装置,通过蠕动泵提供稳定的剪切力,同时提供静态培养所需的其它条件,建立体外人脐动脉血管平滑肌流动培养模型。分别对体外培养的人脐动... 目的:探讨剪切力作用下人脐动脉血管平滑肌细胞的增殖分化的变化。方法:利用改进的灌流及流动培养装置,通过蠕动泵提供稳定的剪切力,同时提供静态培养所需的其它条件,建立体外人脐动脉血管平滑肌流动培养模型。分别对体外培养的人脐动脉血管平滑肌细胞加载3,4,5,8,10dyn/cm2的定长流剪切力24h,同时以静态培养的细胞为对照组。相差倒置显微镜观察玻片上细胞的数量并作细胞计数,α-actin免疫组化染色.结果:细胞记数显示,同对照组相比,切应力各组的增殖能力都有所下降,5dyn/cm2切应力作用下,细胞增殖缓慢最为明显.α-actin免疫组化染色提示切应力各组的分化程度较对照组高。结论:初步研究表明,剪切力对人脐动脉血管平滑肌细胞的增殖有一定抑制作用,并且可能促进了细胞的分化。 展开更多
关键词 剪切力 流动腔 动脉血管平滑肌细胞 细胞培养
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尾加压素Ⅱ诱导人脐血管平滑肌细胞肥大及其机制探讨 被引量：2
5
作者 王琼 王汉 +1 位作者 喻维 马杰军 《山东医药》 CAS 北大核心 2006年第36期23-24,共2页
用植块法培养人脐动脉血管平滑肌细胞,并加入尾加压素(U)进行培养;细胞图像分析系统测量细胞体积,考马斯亮蓝法测定细胞蛋白含量,[3H]-Leucine摄入法测定蛋白合成速率,免疫沉淀法并ERK1/2试剂盒测ERK1/2活性,Western-Blot测ERK蛋白(p-ER... 用植块法培养人脐动脉血管平滑肌细胞,并加入尾加压素(U)进行培养;细胞图像分析系统测量细胞体积,考马斯亮蓝法测定细胞蛋白含量,[3H]-Leucine摄入法测定蛋白合成速率,免疫沉淀法并ERK1/2试剂盒测ERK1/2活性,Western-Blot测ERK蛋白(p-ERK)1/2表达。与对照组相比,加入U培养的平滑肌细胞体积、蛋白含量、蛋白合成速率明显提高,p-ERK活性和表达增强;ERK1/2阻断剂U0126可减弱U的上述作用。表明U可以诱导人脐动脉血管平滑肌细胞肥大,其机制与激活ERK1/2通路有关。 展开更多
关键词 动脉血管平滑肌细胞 尾加压素Ⅱ 细胞肥大 机制探讨 人脐 ERK1/2 蛋白合成速率 ERK活性
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葛根素对大鼠肾动脉血管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道电流的影响 被引量：2
6
作者 秦小江 侯晓敏 梁泰刚 《中国药物与临床》 CAS 2014年第9期1203-1204,共2页
葛根素是从豆科植物野葛或甘葛根的干燥根中提取的单体,其化学名为8-β-D-葡萄吡喃糖-4,7-二羟基异黄酮。据研究报道,葛根素具有多种药理学活性,包括降低血压[1]、舒张大鼠冠状动脉[2]、改善急性心肌缺血[3]、清除氧自由基[4]等,但关于... 葛根素是从豆科植物野葛或甘葛根的干燥根中提取的单体,其化学名为8-β-D-葡萄吡喃糖-4,7-二羟基异黄酮。据研究报道,葛根素具有多种药理学活性,包括降低血压[1]、舒张大鼠冠状动脉[2]、改善急性心肌缺血[3]、清除氧自由基[4]等,但关于葛根素对大鼠肾动脉的作用却未见报道。本实验主要研究葛根素对大鼠离体肾动脉的肌源性作用,葛根素对大鼠肾动脉血管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道（BKCa）电流的作用及其与过氧化氢（H2O2）的关系。 展开更多
关键词 大电导钙激活钾通道 动脉血管平滑肌细胞 钾通道电流 葛根素 肾动脉 大鼠 豆科植物野葛 二羟基异黄酮
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祛痰泻浊方对机械损伤兔的血管平滑肌细胞增殖和凋亡机理研究 被引量：2
7
作者 张丝微 李艳石 杨关林 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2007年第3期364-365,共2页
观察祛痰泻浊方对实验性动脉粥样硬化(AS)家兔,机械损伤血管内皮后血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其机理。
关键词 祛痰泻浊方 动脉粥样硬化 动脉血管平滑肌细胞 血栓形成
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miR-24-3p靶向HIF-1α体外调节AngiotensinⅡ诱导的小鼠血管平滑肌细胞增殖、凋亡、迁移 被引量：2
8
作者 张永安 徐建平 +4 位作者 陈旭 龚绍慧 余斌 熊成英 詹剑 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期31-35,共5页
目的:探讨miR-24-3p靶向HIF-1α对血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ)体外诱导的小鼠血管平滑肌细胞增殖、凋亡及迁移的影响。方法:分离C57BL/6小鼠原代动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)体外培养,分为对照组和诱导组,诱导组用10-8 mol/L Angiotensi... 目的:探讨miR-24-3p靶向HIF-1α对血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ)体外诱导的小鼠血管平滑肌细胞增殖、凋亡及迁移的影响。方法:分离C57BL/6小鼠原代动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)体外培养,分为对照组和诱导组,诱导组用10-8 mol/L AngiotensinⅡ诱导VSMCs,采用qRT-PCR法检测miR-24-3p和HIF-1α表达,运用生物信息学预测和荧光素酶实验验证miR-24-3p和HIF-1α的靶向关系;体外原代培养VSMCs分为对照组,诱导组,诱导组+mimic,诱导组+pc-HIF-1α,采用Western blot法检测各组的HIF-1α蛋白表达水平,Colony forming法检测细胞增殖,Hoechest法检测细胞凋亡,划痕实验和Transwell小室迁移实验检测细胞迁移侵袭。结果:诱导组miR-24-3p mRNA的表达极显著低于对照组,HIF-1α的表达极显著高于对照组(P<0.01);HIF-1α是miR-24-3p的预测靶点;与对照组相比,诱导组和诱导组+pc-HIF-1α组HIF-1α的表达极显著增加,诱导组+mimic组HIF-1α的表达极显著下降(P<0.01);与对照组相比,诱导组和诱导组+pc-HIF-1α组细胞的集落率和迁移率显著上调、凋亡率显著下调,诱导组+mimic组细胞的集落率和迁移率显著下调、凋亡率显著上调。结论:miR-24-3p通过抑制HIF-1α的表达,抑制AngiotensinⅡ诱导的小鼠血管平滑肌细胞增殖和迁移,促进其凋亡。 展开更多
关键词 HIF-1Α 动脉血管平滑肌细胞 细胞增殖 细胞凋亡 细胞迁移
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神经肽Y及其亚型受体在动脉粥样硬化中的作用
9
作者 周永巧(综述) 杨剑 曾春雨(审校) 《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期636-638,共3页
动脉粥样硬化等心血管疾病的治疗仍然是临床难点之一。近年研究发现，神经肽Y（Neuropeptide Y，NPY）作为支配外周血管的交感神经递质，在促动脉粥样硬化发生中也发挥着重要的作用，它不仅促进动脉血管平滑肌细胞（vascular smooth mus... 动脉粥样硬化等心血管疾病的治疗仍然是临床难点之一。近年研究发现，神经肽Y（Neuropeptide Y，NPY）作为支配外周血管的交感神经递质，在促动脉粥样硬化发生中也发挥着重要的作用，它不仅促进动脉血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMC）异常增殖，还介导了巨噬细胞及血小板在粥样硬化病变过程的病理变化。本综述主要探讨NPY在动脉粥样硬化病变发生发展过程中的作用。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化病变 神经肽Y 亚型受体 动脉血管平滑肌细胞 交感神经递质 心血管疾病 CELLS 外周血管
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普伐他汀抑制肿瘤坏死因子α介导的人脐动脉血管平滑肌细胞成骨样钙化 被引量：1
10
作者 李振勇 倪兆慧 +4 位作者 钱家麒 戴慧莉 顾乐怡 郭永平 孙明姝 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期915-919,共5页
目的研究普伐他汀干预对肿瘤坏死因子α（TNF-α）介导的人脐动脉血管平滑肌细胞（hUASMC）成骨样分化标志蛋白骨特异性碱性磷酸酶（BAP）、骨桥蛋白（OPN）和骨形成蛋白2（BMP-2）表达以及细胞外钙盐沉积的影响，并探讨普伐他汀在血管... 目的研究普伐他汀干预对肿瘤坏死因子α（TNF-α）介导的人脐动脉血管平滑肌细胞（hUASMC）成骨样分化标志蛋白骨特异性碱性磷酸酶（BAP）、骨桥蛋白（OPN）和骨形成蛋白2（BMP-2）表达以及细胞外钙盐沉积的影响，并探讨普伐他汀在血管钙化防治中的潜在作用。方法植块贴壁法原代培养人hUASMC。予以TNF-α刺激和普伐他汀干预，甲O-酚酞络合酮方法测定细胞外基质钙盐沉积；实时定量PCR法观察血管平滑肌细胞BAP和OPNmRNA表达水平；免疫印迹法观察血管平滑肌细胞BAP、OPN和BMP-2蛋白表达水平。结果-定浓度范围的普伐他汀呈浓度依赖方式抑制TNF—α对hUASMC的促增殖作用（r=-0．946，P〈0．01）；一定浓度范围的普伐他汀呈浓度依赖方式下调TNF-仅介导上调的BAP、OPNmRNA表达（r=-0．972，P〈0．01）与蛋白的表达水平（BAP蛋白，r=-0．820，P〈0．01；OPN蛋白，r=-0．972，P〈0．01；BMP-2蛋白，r=-0．928，P〈0．01），抑制血管平滑肌细胞成骨样分化，减少细胞外基质钙盐的沉积（r=-0．973，P〈0．01）。结论普伐他汀可抑制TNF—α对hUASMC的促增殖作用，抑制细胞成骨样分化，减少细胞外基质钙盐的沉积。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子α 普伐他汀 钙质沉着症 碱性磷酸酶 人脐 动脉血管平滑肌细胞 成骨样钙化
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磷脂酶C与原发性高血压关系的研究
11
作者 王鹏飞 凌宗秀 黄爱龙 《现代医药卫生》 2001年第8期594-595,共2页
目的：研究磷脂酶Ｃ－γ１（ＰＬＣ－γ１）和磷脂酶Ｃ－δ１；（ＰＬＣ－δ１）在原发性高血压（ＥＨ）中含量的变化情况，进一步明确这二：者在ＥＨ形成中的作用。方法：设立ＥＨ组（１３例）和正常血压对照组（１７例），以抗牛ＰＬ... 目的：研究磷脂酶Ｃ－γ１（ＰＬＣ－γ１）和磷脂酶Ｃ－δ１；（ＰＬＣ－δ１）在原发性高血压（ＥＨ）中含量的变化情况，进一步明确这二：者在ＥＨ形成中的作用。方法：设立ＥＨ组（１３例）和正常血压对照组（１７例），以抗牛ＰＬＣ－γ１和抗入ＰＬＣ－δ１，单克隆抗体为探针，用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酞胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）和免疫印迹（Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ）的方式来测定人动脉血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）中ＰＬＣ－γ１和ＰＬＣ－γ１的相对含量。结果：ＰＬＣ－γ１和ＰＬＣ－δ１都能检测出，但二者在ＥＨ组和对照组之间均无明显差异（ｔ＝１．１０１和 ０．６８２，Ｐ＞０．０５）。结论ＥＨ中 ＰＬＣ活性的异常无ＰＬＣ－γ１和 ＰＬＣ－δ１量变的参与。 展开更多
关键词 原发性高血压 动脉血管平滑肌细胞 磷脂酶C
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组织块贴壁法培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞的特征 被引量：10
12
作者 张量 隋璐 +3 位作者 孙成林 王麟 牟艳玲 苏禄辉 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2005年第19期108-110,i003,共4页
目的:采用组织块贴壁法培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞,并应用光镜、电镜和免疫组织化学方法观察细胞各生长时期的形态变化。方法:实验于2004-02/08在中国医科大学基础医学院药理实验室完成。选择健康清洁级Wistar大鼠30只,体质量150～18... 目的:采用组织块贴壁法培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞,并应用光镜、电镜和免疫组织化学方法观察细胞各生长时期的形态变化。方法:实验于2004-02/08在中国医科大学基础医学院药理实验室完成。选择健康清洁级Wistar大鼠30只,体质量150～180g,无菌条件下取全段主动脉中膜组织修剪成1mm×1mm大小的组织块直接贴壁于一次性塑料培养皿中,组织块间距0.5cm,保证细胞从组织块游出后有足够的生长空间并保持局部细胞密度的均匀,发现漂起的组织块及时清理,于37℃孵箱内放置1.5h左右使组织块与壁贴附后,缓慢加入改良Eagle培养液培养3～5d,待有细胞从组织块周围游出后换液。当细胞长满培养皿时即可传代。采用倒置相差显微镜和透射电镜及抗α-平滑肌肌动蛋白免疫组织化学方法观察主动脉平滑肌细胞的形态。绘制主动脉平滑肌细胞生长曲线,观察各生长时期的变化,并评估其培养方法的优点。结果:30只大鼠全部进入结果分析。①技术方法优点:贴块方便,直接一次性贴壁使污染机会少,随组织块生长随时清理漂起的组织块,可减少对其他组织块的毒性作用,并增加已游离出的细胞生长空间。②原代培养血管平滑肌细胞:光镜观察形态多样,大小略有差异,胞体较小,胞质折光性强。③传代血管平滑肌细胞:光镜下观察呈现特征性“峰”、“谷”状生长。电镜下观察:细胞形态不规则,胞浆内有肌丝,纵向平行排列,有密区,具备平滑肌细胞特征。免疫组织化学染色后可见细胞浆中大量平行条状棕黄染色、胞核不着色,所有细胞均染色,呈阳性。④主动脉平滑肌细胞生长曲线:血管平滑肌细胞生长曲线近似“S”形,传代后第1天细胞数有所减少,经过2d潜伏适应期后进入对数生长期,持续两三天进入平台期。结论:组织块贴壁法培养技术具有操作简便,污染机会少,有足够细胞生长� 展开更多
关键词 主动脉血管平滑肌细胞 组织块贴壁法 免疫组织化学方法 免疫组织化学染色 α-平滑肌肌动蛋白 细胞生长曲线 Wistar大鼠 主动脉平滑肌细胞 对数生长期 中国医科大学 镜下观察 细胞特征 药理实验室 基础医学院 相差显微镜
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TGF-β1/BMP-4诱导肺动脉血管平滑肌细胞增殖及橙皮素、芍药苷的干预 被引量：10
13
作者 任周新 余海滨 +2 位作者 梅晓峰 冯月 沈俊岭 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2018年第6期1339-1342,共4页
目的：探讨橙皮素和芍药苷对正常培养及TGF-β1/BMP-4诱导肺动脉血管平滑肌细胞增殖的影响。方法：首先,0、50、100、150、200μg/mL的橙皮素或芍药苷作用于正常培养条件下的人肺动脉血管平滑肌细胞,24 h及48 h检测药物的细胞增殖抑制... 目的：探讨橙皮素和芍药苷对正常培养及TGF-β1/BMP-4诱导肺动脉血管平滑肌细胞增殖的影响。方法：首先,0、50、100、150、200μg/mL的橙皮素或芍药苷作用于正常培养条件下的人肺动脉血管平滑肌细胞,24 h及48 h检测药物的细胞增殖抑制率。接着,应用均匀设计制订TGF-β1与BMP的剂量组合,诱导细胞增殖,多元线性回归和单因素方差分析确定诱导细胞增殖的TGF-β1与BMP的优化剂量组合;应用该剂量诱导细胞增殖,MTT和Brd U两种方法检测药物对细胞增殖的影响。结果：150、200μg/mL的橙皮素或芍药苷抑制正常培养条件下的细胞增殖（P〈0.05或0.01）。多元回归方程显示：TGF-β1和BMP-4对细胞增殖的影响相互拮抗,7.5 ng/mL TGF-β及20 ng/mL BMP-4显著增加细胞的增殖（P〈0.05）。12.5-100μg/mL的橙皮素不能显著抑制TGF-β1/BMP-4诱导肺动脉血管平滑肌细胞增殖（P〉0.05）;25-100μg/mL的芍药苷显著抑制TGF-β1/BMP-4诱导肺动脉血管平滑肌细胞增殖（P〈0.05或0.01）。结论：橙皮素和芍药苷均抑制正常肺动脉平滑肌细胞的增殖。芍药苷抑制TGF-β1/BMP-4诱导肺动脉血管平滑肌细胞增殖,具有较高的研究与开发价值。 展开更多
关键词 橙皮素 芍药苷 肺动脉血管平滑肌细胞 TGF-β1/BMP-4 增殖
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超声造影剂对血管平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的影响 被引量：7
14
作者 张萍 高云华 +2 位作者 刘平 谭开彬 刘政 《临床超声医学杂志》 2005年第5期289-292,共4页
目的探讨超声波联合超声造影剂对平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法体外培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)。采用MTT法、Millicell小室、AnnexinV-FITC/PI双标染色和流式细胞仪,检测VSMC的增殖、迁移能力和凋亡,观察血小板衍... 目的探讨超声波联合超声造影剂对平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法体外培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)。采用MTT法、Millicell小室、AnnexinV-FITC/PI双标染色和流式细胞仪,检测VSMC的增殖、迁移能力和凋亡,观察血小板衍生生长因子———BB(PDGF-BB)对VSMC增殖、迁移和凋亡的影响,频率1MHz、声强0·3W/cm2的连续波超声联合声学造影剂辐照VSMC后上述指标的变化。结果PDGF-BB对VSMC的凋亡无影响,但可促进VSMC增殖和迁移。超声联合造影剂辐照VSMC30s即可显著抑制PDGF-BB所致的VSMC增殖(P<0·05),同时细胞凋亡比例显著增高(P<0·01),辐照60s可显著抑制PDGF-BB所致的VSMC迁移(P<0·05),随着辐照时间延长,以上作用增强,辐照60s时对VSMC增殖的抑制程度最强。结论低强度超声波辐照联合超声造影剂可抑制VSMC增殖、迁移,并促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 超声造影剂 血管平滑肌细胞 增殖 迁移 凋亡 血管平滑肌细胞增殖 超声造影剂 迁移能力 细胞凋亡 VSMC增殖 PDGF-BB 主动脉血管平滑肌细胞 血小板衍生生长因子 超声波辐照
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糖尿病大鼠血管平滑肌细胞体外培养方法的探讨 被引量：9
15
作者 李艳平 李新荣 +2 位作者 邓湘蕾 李震 缪峰 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2005年第3期186-189,共4页
目的:对糖尿病大鼠血管平滑肌细胞体外培养方法进行探讨,建立糖尿病大鼠血管平滑肌细胞模型,为糖尿病慢性血管并发症研究奠定基础。方法:建立糖尿病大鼠模型,用组织贴壁法体外培养胸主动脉血管平滑肌细胞。结果:糖尿病大鼠造模成功。用... 目的:对糖尿病大鼠血管平滑肌细胞体外培养方法进行探讨,建立糖尿病大鼠血管平滑肌细胞模型,为糖尿病慢性血管并发症研究奠定基础。方法:建立糖尿病大鼠模型,用组织贴壁法体外培养胸主动脉血管平滑肌细胞。结果:糖尿病大鼠造模成功。用贴壁法培养糖尿病大鼠血管平滑肌细胞,3d后相差显微镜下可见细胞游出,培养7～10d左右细胞重叠生长达多层,高低起伏呈“峰—谷”状。平滑肌细胞actin免疫组织化学染色鉴定为平滑肌细胞。结论:糖尿病大鼠血管平滑肌细胞增殖速度快,培养条件要求严格,在形态学上与正常大鼠平滑肌细胞相同。 展开更多
关键词 糖尿病大鼠 体外培养方法 主动脉血管平滑肌细胞 慢性血管并发症 免疫组织化学 组织贴壁法 ACTIN 细胞模型 大鼠模型 显微镜下 染色鉴定 增殖速度 培养条件 正常大鼠 形态学
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丹酚酸B激活自噬改善高磷诱导血管平滑肌细胞钙化的机制研究 被引量：7
16
作者 林评兰 吴明 +4 位作者 杨枫 徐琳 黄迪 裘福荣 叶朝阳 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2022年第12期1192-1196,共5页
目的:探讨丹酚酸B(Salvianolic acid B,SAB)改善高磷诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化的作用及机制。方法:采用大鼠血管平滑肌细胞(A7r5)钙化体外模型,用细胞增殖与活性检测试剂盒(cell counting kit-8,CC... 目的:探讨丹酚酸B(Salvianolic acid B,SAB)改善高磷诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化的作用及机制。方法:采用大鼠血管平滑肌细胞(A7r5)钙化体外模型,用细胞增殖与活性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测SAB对细胞活力的影响;2.6μmol·g^(-1)高磷诱导VSMCs钙化,加入丹参多酚酸类化合物丹酚酸B、丹酚酸C(Salvianolic acid C,SAC)、迷迭香酸(Rosmarinic acid,RA)及细胞自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA,5 nmol·g^(-1)),采用邻甲酚酞络合铜法及茜素红S染色检测细胞钙化程度;Western blot检测VSMCs钙化指标Runx2、OPN,自噬相关蛋白Beclin-1和LC3II/LC3I以及平滑肌收缩表型蛋白Calponin、SM22α的表达。结果:(1)钙离子浓度定量实验及茜素红染色实验显示SAB显著减轻高磷诱导的VSMCs钙化;(2)SAB浓度小于100 nmol·g^(-1)以下时对VSMCs生存活力无明显影响,选择3,10,30 nmol·g^(-1)剂量进行后续实验;Western blot显示SAB明显降低VSMCs成骨样分化的分子标志物Runx2、OPN蛋白表达(P<0.05),上调自噬标志物Beclin-1、LC3-I/II及VSMCs收缩表型标志物Calponin、SM22蛋白表达(P<0.05)。(3)SAB减轻高磷诱导VSMCs钙化的作用被自噬抑制剂3-MA阻断。结论:SAB可通过激活自噬抑制VSMCs钙化及向成骨样表型转化。 展开更多
关键词 胸主动脉血管平滑肌细胞 血管钙化 丹酚酸B 自噬
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油酸调节人血管平滑肌细胞TLR4的增殖活性及炎性因子的表达 被引量：6
17
作者 杨海静 陈卫 +3 位作者 权金星 李伟华 刘静 邱明才 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第1期44-48,共5页
目的探讨油酸对人主动脉血管平滑肌细胞TLR4及炎性因子表达的调节作用。方法 MTT法检测细胞增殖活性;实时荧光定量PCR法检测TLR4及炎性因子mRNA的表达;Western blot法检测细胞TLR4蛋白表达,ELISA法检测炎性因子蛋白含量。结果油酸促进... 目的探讨油酸对人主动脉血管平滑肌细胞TLR4及炎性因子表达的调节作用。方法 MTT法检测细胞增殖活性;实时荧光定量PCR法检测TLR4及炎性因子mRNA的表达;Western blot法检测细胞TLR4蛋白表达,ELISA法检测炎性因子蛋白含量。结果油酸促进人主动脉血管平滑肌细胞增殖活性,增加油酸浓度,抑制细胞增殖。油酸上调TLR4、IL-6、IL-8和MCP-1 mRNA表达最大幅度为6.5、7.4、7.4和7.1倍。IL-6、IL-8和MCP-1蛋白表达最大上调幅度为2.16、1.93和2.06倍。200μmol/L组TLR4蛋白表达的吸光度值为(1.70±0.62),与对照组(0.29±0.22)比较P<0.05。LPS组TLR4、IL-6、IL-8和MCP-1的表达明显增加(P<0.05)。结论油酸促进人主动脉血管平滑肌细胞TLR4及炎性因子mRNA及蛋白表达。 展开更多
关键词 人主动脉血管平滑肌细胞 油酸 果蝇样受体4 细胞因子 基因表达
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氧化型低密度脂蛋白对人血管平滑肌细胞透明质酸表达的影响及机制 被引量：6
18
作者 梁雅林 张慧 宁雕 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2019年第6期489-494,共6页
目的观察氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)对人主动脉血管平滑肌细胞透明质酸(HA)合成的影响,并初步探究其分子机制。方法体外培养人主动脉血管平滑肌细胞T/GHAVSMC,使用不同浓度(10、25、50、75、100mg/L)ox-LDL对T/GHAVSMC细胞进行干预,使... 目的观察氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)对人主动脉血管平滑肌细胞透明质酸(HA)合成的影响,并初步探究其分子机制。方法体外培养人主动脉血管平滑肌细胞T/GHAVSMC,使用不同浓度(10、25、50、75、100mg/L)ox-LDL对T/GHAVSMC细胞进行干预,使用CCK-8法检测细胞存活率,并进行分组分析。采用浓度为25和50mg/L的ox-LDL干预T/GHAVSMC细胞48h,并设置天然LDL(native-LDL,N-LDL)组(50mg/L的N-LDL)和对照组,使用HPLC法测定HA含量,使用实时定量PCR检测透明质酸合成酶2(HAS2)和透明质酸合成酶3(HAS3)的mRNA表达,使用Westernblot法检测凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)、低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP-1)、氧化脂蛋白的清道夫受体(SR-PSOX)以及脂肪酸转位酶(CD36)的表达。结果低于100mg/L的ox-LDL对T/GHAVSMC细胞无明显细胞毒性。25mg/L和50mg/Lox-LDL组HA含量、HAS2和HAS3的mRNA表达量明显高于N-LDL组和对照组(P<0.05),N-LDL组与对照组组间差异无显著性(P>0.05)。25mg/L和50mg/Lox-LDL组LOX-1表达明显高于N-LDL组和对照组(P<0.05),而LRP-1、SR-PSOX和CD36表达无明显变化(P>0.05)。结论ox-LDL能够诱导人主动脉平滑肌细胞中HA的合成,其机制可能与结合LOX-1有关。 展开更多
关键词 氧化型低密度脂蛋白 人主动脉血管平滑肌细胞 透明质酸 凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1
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白藜芦醇抑制血管平滑肌细胞成骨样转化的实验研究 被引量：6
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作者 张明慧 王本泉 +7 位作者 蔡晓青 刘彪 王斯璐 吴存造 白永恒 陈必成 刘毅 邵蓉蓉 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1444-1449,共6页
目的研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对血管钙化的抑制作用,观察不同浓度的Res对高钙高磷诱导的人脐动脉血管平滑肌细胞(hVSMC)成骨样转化的影响。方法体外培养hVSMC细胞,通过形态学和α-SMA标记进行鉴定。用高钙高磷(钙2.5 mmol/L、磷3.... 目的研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对血管钙化的抑制作用,观察不同浓度的Res对高钙高磷诱导的人脐动脉血管平滑肌细胞(hVSMC)成骨样转化的影响。方法体外培养hVSMC细胞,通过形态学和α-SMA标记进行鉴定。用高钙高磷(钙2.5 mmol/L、磷3.0 mmol/L)培养基诱导hVSMC成骨样转化,通过茜红素染色法鉴定成骨样转化。以普通培养hVSMC作为对照组,加高钙高磷为阳性对照组,实验组为阳性对照加不同浓度的Res(5、10、20μmol/L)干预,培养12 d后,检测各组细胞含钙量,实时荧光定量PCR检测hVSMC成骨样转化相关基因骨特异性碱性磷酸酶(BAP)、骨形态蛋白(BMP-2)、骨桥蛋白(OPN)的表达水平;Western blotting和免疫荧光标记方法检测BAP、BMP-2、OPN蛋白的表达。结果与对照组比较,阳性对照组细胞内含钙量明显升高约5倍,α-SMA蛋白表达下降,而成骨样细胞特异性标记BAP、BMP-2、OPN mRNA和蛋白质表达均显著升高(P<0.01)。不同浓度Res干预后后,细胞内含钙量下降,BAP、BMP-2、OPN mRNA水平降低(P<0.05、0.01);BMP-2及OPN的蛋白表达显著降低(P<0.01),并与Res浓度呈负相关。结论 hVSMC在高钙高磷条件下发生成骨样转化,而Res抑制此过程的进展并与其浓度呈正相关。 展开更多
关键词 白藜芦醇 人脐动脉血管平滑肌细胞 成骨样转化 骨桥蛋白 骨形态蛋白
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Kv3．4通道参与15-羟二十碳四烯酸诱导的大鼠肺动脉收缩 被引量：5
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作者 李倩 毕海容 +1 位作者 张荣 朱大岭 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期77-82,共6页
通过组织浴槽血管环方法观察Kv3．4通道特异阻断剂BDS-Ⅰ对15-羟二十碳四烯酸(15-hydroxyeicosatetraenoic acid,15- HETE)收缩肺动脉血管的影响:通过酶法分离、培养Wistar大鼠肺动脉血管平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cel... 通过组织浴槽血管环方法观察Kv3．4通道特异阻断剂BDS-Ⅰ对15-羟二十碳四烯酸(15-hydroxyeicosatetraenoic acid,15- HETE)收缩肺动脉血管的影响:通过酶法分离、培养Wistar大鼠肺动脉血管平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells, PASMCs),RT-PCR和Western blot技术观察15-HETE对大鼠PASMCs上Kv3．4通道表达的影响,以探讨Kv3．4通道在15- HETE收缩肺动脉过程中的作用。结果如下:(1)15-HETE以浓度依赖方式使肺动脉环张力增加,对缺氧组大鼠肺动脉环张力作用更为明显,与正常对照组相比差异显著:(2)除去肺动脉内皮后,15-HETE引起血管收缩的强度较内皮完整时增强,呈剂量依赖性收缩反应;(3)阻断Kv3．4通道可抑制15-HETE收缩肺动脉;(4)15-HETE下调PASMCs膜上Kv3．4通道 mRNA及蛋白质表达。上述观察结果提示Kv3．4通道参与由15-HETE引起的缺氧肺动脉血管收缩(hypoxic pulmonary vasoconstriction,HPV)。 展开更多
关键词 15-羟二十碳四烯酸 电压门控性钾通道亚型 肺动脉血管平滑肌细胞 缺氧肺动脉血管收缩
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