靶向肿瘤血管内皮细胞抑制人肝癌移植瘤生长的功能性抗体的研制 被引量：4

1

作者 胡海 冉宇靓 +3 位作者 遇珑 周转 娄晋宁 杨治华 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第5期453-457,共5页

背景与目的:肿瘤的生长依赖于新生血管形成,阻断其血管形成可有效治疗肿瘤。本研究旨在研制抗人肝癌血管内皮细胞的功能性单克隆抗体,确定其抑制人肝癌移植瘤生长的作用。方法:用从新鲜人肝癌组织中分离、鉴定、培养的人肝癌血管内皮细... 背景与目的:肿瘤的生长依赖于新生血管形成,阻断其血管形成可有效治疗肿瘤。本研究旨在研制抗人肝癌血管内皮细胞的功能性单克隆抗体,确定其抑制人肝癌移植瘤生长的作用。方法:用从新鲜人肝癌组织中分离、鉴定、培养的人肝癌血管内皮细胞免疫10只BALB/c小鼠。免疫小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合后采用甲基纤维素选择培养。使用活细胞免疫荧光、细胞增殖、内皮成管实验及“人源化血管”动物模型体内抑瘤实验筛选和鉴定有治疗潜力的功能性抗体。结果:细胞融合产生1442个单个集落的杂交瘤株,获得119株阳性克隆,其中53株是具有抑制人肝癌血管内皮细胞增殖、成管的功能性抗体,2株被证实能抑制人肝癌移植瘤在BALB/c裸鼠体内的生长,抑瘤率为66.7%～76.5%。结论:建立了高通量制备、筛选、鉴定内皮细胞功能性单抗技术,获得了2株具有靶向血管内皮细胞抑制人肝癌移植瘤生长的功能性单抗。 展开更多

关键词 肝肿瘤 血管内皮细胞 功能性抗体 抗血管治疗

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重组金黄色葡萄球菌疫苗免疫血清中功能性抗体OPK检测方法的建立 被引量：6

2

作者 周恒 杨柳扬 +5 位作者 杨峰 章金勇 邹金桃 程平 曾浩 邹全明 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期252-258,共7页

目的建立重组金黄色葡萄球菌疫苗免疫血清中功能性抗体检测方法。方法在参考美国阿拉巴马大学的多重调理吞噬实验(UAB-MOPA)方法的基础上,构建并鉴定HL-60效应细胞库及金黄色葡萄球菌工作种子批,完成补体浓度、调理和吞噬孵育时间及血... 目的建立重组金黄色葡萄球菌疫苗免疫血清中功能性抗体检测方法。方法在参考美国阿拉巴马大学的多重调理吞噬实验(UAB-MOPA)方法的基础上,构建并鉴定HL-60效应细胞库及金黄色葡萄球菌工作种子批,完成补体浓度、调理和吞噬孵育时间及血清预稀释倍数等关键实验参数的优选。在此基础上对5种不同来源金黄色葡萄球菌进行调理吞噬杀菌(OPK)活性的检测。结果 HL-60细胞经0.8%DMF诱导分化4 d后,CD35表达量为87.1%,CD71表达量为2.82%,活细胞比例为75.7%;靶细菌工作种子批冻存复活率>90%,工作稀释度>1 000;体系中补体终浓度确定为6%;选择30 min、60 min作为调理和吞噬孵育时间;血清预稀释倍数为2倍;疫苗免疫血清对5种不同来源的金黄色葡萄球菌均表现出良好的OPK活性及标准的"S"型杀菌曲线。结论本研究优化建立的OPK检测方法,可有效评价重组金黄色葡萄球菌疫苗的体外功能性抗体水平,为疫苗临床试验样本检测及免疫有效性替代终点的确立提供了重要的技术支撑。 展开更多

关键词 金黄色葡萄球菌 重组蛋白疫苗 功能性抗体 调理吞噬杀菌实验

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食管癌细胞表面DR5的表达分布与细胞铺展状态的关系 被引量：4

3

作者 刘广超 都景芳 +4 位作者 马远方 王秀英 高荣 高萍 刘世贵 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期817-821,共5页

目的:探讨食管癌鳞癌EC9706细胞系细胞表面DR5的表达分布与细胞铺展状态的关系。方法:免疫细胞化学技术分析食管癌EC9706细胞的DR5表达分布;流式细胞术检测食管癌细胞表面DR5的表达及细胞的凋亡率。结果:DR5分布在食管癌EC9706细胞的细... 目的:探讨食管癌鳞癌EC9706细胞系细胞表面DR5的表达分布与细胞铺展状态的关系。方法:免疫细胞化学技术分析食管癌EC9706细胞的DR5表达分布;流式细胞术检测食管癌细胞表面DR5的表达及细胞的凋亡率。结果:DR5分布在食管癌EC9706细胞的细胞质和细胞膜表面,主要在细胞质,但在细胞核没有DR5分布,而且在悬浮的食管癌细胞表面DR5表达高于铺展者。悬浮的食管癌细胞对抗DR5功能性抗体诱导的细胞凋亡敏感性高于铺展者。结论:食管癌细胞表面DR5的表达与细胞铺展状态具有密切的关系,细胞铺展状态的变化直接影响细胞表面DR5的表达分布以及对抗DR5功能性抗体诱导的细胞凋亡敏感性。该研究结果对进一步探讨DR5表达分布的机制以及TRAIL和DR5的功能性抗体的抗肿瘤临床应用有一定的指导意义。 展开更多

关键词 DR5 功能性抗体 TRAIL 细胞凋亡

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抗人DR5单克隆功能抗体mDRA-6诱导Jurkat细胞凋亡的Caspase路径机制研究 被引量：1

4

作者 杜耀武 刘广超 +5 位作者 王靖 赵粤萍 李淑莲 蒋祺 蔡静 马远方 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期48-53,79,共7页

目的:探讨抗人死亡受体5(DR5)功能性单克隆抗体(mDRA-6)对Jurkat细胞诱导凋亡的Caspase分子机制。方法:琼脂糖凝胶电泳检测mDRA-6作用后Jurkat细胞的DNA ladder;MTT法检测单克隆抗体(mDRA-6)对Jurkat细胞生长抑制作用的剂量-效果关系;An... 目的:探讨抗人死亡受体5(DR5)功能性单克隆抗体(mDRA-6)对Jurkat细胞诱导凋亡的Caspase分子机制。方法:琼脂糖凝胶电泳检测mDRA-6作用后Jurkat细胞的DNA ladder;MTT法检测单克隆抗体(mDRA-6)对Jurkat细胞生长抑制作用的剂量-效果关系;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术定量分析mDRA-6对Jurkat细胞的凋亡作用;观察Caspase-10、9、8、3等抑制剂对mDRA-6诱导细胞凋亡的抑制作用;免疫印迹技术检测凋亡信号蛋白Caspase-10、9、8、3、Bid(tbid)、Cyto c等活化裂解的情况。结果:琼脂糖凝胶电泳显示DNA呈现明显梯状带型;mDRA-6对Jurkat细胞具有明显的生长抑制作用且呈量-效关系,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测显示,mDRA-6在2.0μg/ml浓度作用Jurkat细胞0.25、0.5、1、2小时,其凋亡率分别为16.17%、28.25%、69.23%、78.23%;Caspase-8抑制剂能明显抑制mDRA-6诱导的细胞凋亡,抑制率为77.85%,Caspase-3和Cas-pase-9抑制剂的抑制率分别为54.20%、8.74%,而Caspase-10的抑制剂无抑制作用;免疫印迹技术检测显示Caspase-8、3、9均呈现随时间延长酶原逐渐减少、活化片段增加的现象,Bid激活降解为tbid,Cyto c大量释放,而Caspase-10酶原无明显改变、无活化片段出现。结论:mDRA-6诱导Jurkat细胞凋亡主要是激活了死亡受体信号传导途径上游的Caspase-8引起的,该细胞凋亡机制涉及Caspase-3、Caspase-9及Bid(tbid)、Cyto c等分子,而同样是凋亡的上游信号Caspase-10没有参与此凋亡过程。本研究为mDRA-6的人源化改造及后续的实验研究打下了基础。 展开更多

关键词 死亡受体5 功能性抗体 JURKAT细胞 细胞凋亡 分子机制

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去黏附化增强抗DR5抗体介导食管癌细胞凋亡及其作用机制 被引量：1

5

作者 刘广超 马远方 +3 位作者 都景芳 张军 李淑莲 白慧玲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期961-963,共3页

目的:探讨去黏附化对抗死亡受体5(DR5)抗体诱导的食管癌鳞癌EC9706细胞系凋亡的影响及作用机制。方法:用EDTA消化对蓝菌素A预处理或未处理的贴壁生长的食管癌细胞,制备悬浮细胞;利用流式细胞术检测食管癌细胞表面DR5表达及人抗DR5功能... 目的:探讨去黏附化对抗死亡受体5(DR5)抗体诱导的食管癌鳞癌EC9706细胞系凋亡的影响及作用机制。方法:用EDTA消化对蓝菌素A预处理或未处理的贴壁生长的食管癌细胞,制备悬浮细胞;利用流式细胞术检测食管癌细胞表面DR5表达及人抗DR5功能抗体诱导的细胞凋亡;利用免疫荧光技术观察食管癌EC9706细胞DR5表达分布。结果:悬浮食管癌细胞对抗DR5的功能性抗体诱导的细胞凋亡的敏感性明显高于铺展者;未经蓝菌素A预处理制备的悬浮食管癌细胞的表面DR5表达明显高于经蓝菌素A处理制备的悬浮者。在铺展的食管癌EC9706细胞,DR5分布于细胞质和细胞膜表面,主要在细胞质,在细胞核没有DR5分布,但在悬浮的食管癌细胞表面DR5表达明显增强。结论:去黏附化增强食管癌细胞对抗DR5功能性抗体诱导细胞凋亡的敏感性,该作用是通过去黏附化增强DR5向细胞表面转运实现的,DR5的膜转运与高尔基体有关。该研究结果对进一步探讨DR5表达分布的机制以及TRAIL和DR5的功能性抗体的抗肿瘤临床应用有一定的指导意义。 展开更多

关键词 DR5 功能性抗体 TRAIL 细胞凋亡 细胞黏附

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人源抗体筛选和表达载体的构建

6

作者 张福强 王斗斗 +1 位作者 宿晓云 马杰 《现代生物医学进展》 CAS 2008年第5期817-819,共3页

目的:构建一个可供抗体CDR(决定簇互补区)进行自由替换、筛选、表达的通用载体,并对其生物学功能进行鉴定。方法:在已构建好的具有Fc段的完全人源抗狂犬病病毒抗体表达载体基础上,利用PCR介导的定点突变技术,引入2个可供CDR3区进行自由... 目的:构建一个可供抗体CDR(决定簇互补区)进行自由替换、筛选、表达的通用载体,并对其生物学功能进行鉴定。方法:在已构建好的具有Fc段的完全人源抗狂犬病病毒抗体表达载体基础上,利用PCR介导的定点突变技术,引入2个可供CDR3区进行自由替换的限制性酶切位点,构建出通用表达载体。体外合成人源、鼠源抗乳腺癌Her2抗体的CDR3区,克隆至已构建的通用载体,在毕赤酵母中诱导表达。应用ELISA和Western Blotting技术对亲本抗体和新抗体进行生物学及免疫学分析。结果:PCR、Western Blotting等试验表明具有Her2抗原结合活性的人源和鼠源突变型抗体获得成功表达,通过对表达产物的免疫学及功能学检测证明所表达出的抗体具有抗原中和活性,而且鼠源抗体的活性要稍高于人源抗体。结论:成功构建了可用于功能性抗体筛选和表达的通用载体,对抗体的体外亲和力成熟及抗体的人源化有重要意义。 展开更多

关键词 通用载体 CDR3 筛选 表达 功能性抗体

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自体红细胞凝集试验研究进展 被引量：2

7

作者 邵长利 吕茂民 +1 位作者 史利军 章金刚 《生物技术通讯》 CAS 2007年第5期840-842,共3页

自体红细胞凝集试验是一种快速、简便,成本低廉的免疫学检测方法。用于自体红细胞凝集试验的主要成分是一种双功能性抗体。介绍了自体红细胞凝集试验的基本原理和主要特点,以及如何建立自体红细胞凝集试验检测体系;简要综述了双功能性... 自体红细胞凝集试验是一种快速、简便,成本低廉的免疫学检测方法。用于自体红细胞凝集试验的主要成分是一种双功能性抗体。介绍了自体红细胞凝集试验的基本原理和主要特点,以及如何建立自体红细胞凝集试验检测体系;简要综述了双功能性抗体的活性、稳定性、特异性、敏感性等方面的研究进展,以及自体红细胞凝集试验检测方法的应用前景。 展开更多

关键词 红细胞 凝集试验 双功能性抗体

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食管癌侵袭转移功能性抗体的制备 被引量：1

8

作者 遇珑 胡海 +3 位作者 周转 潘建 杨治华 冉宇靓 《中国卫生检验杂志》 CAS 2009年第4期765-768,共4页

目的:本研究旨在研制抗人食管癌侵袭转移功能性单克隆抗体,确定其抑制食管癌转移的特性。方法:用5例新鲜肺转移性食管癌原发瘤标本中分离的有核细胞免疫6只BALB/c小鼠。选择高血清效价小鼠脾细胞与S/P20细胞融合,采用HAT在甲基纤维素中... 目的:本研究旨在研制抗人食管癌侵袭转移功能性单克隆抗体,确定其抑制食管癌转移的特性。方法:用5例新鲜肺转移性食管癌原发瘤标本中分离的有核细胞免疫6只BALB/c小鼠。选择高血清效价小鼠脾细胞与S/P20细胞融合,采用HAT在甲基纤维素中选择培养。使用活细胞免疫荧光,迁移、侵袭、黏附、细胞增殖等方法筛选和鉴定有治疗价值的功能性单克隆抗体。结果:细胞融合挑选单个集落1260个。经活细胞免疫荧光筛选获得545株识别食管癌细胞膜蛋白的单抗。再通过免疫组化筛选获得了485株不与正常人食管组织反应的相对特异的单抗。通过对迁移、侵袭、黏附、增殖等功能筛选获得70株抑制迁移、32株抑制肺内皮黏附的相关单抗。结论:采用高通量制备、筛选、鉴定功能性单克隆抗体技术,获得了多株能够显著抑制食管癌细胞转移相关生物学行为和功能的单抗。 展开更多

关键词 食管癌 转移:功能性抗体

原文传递

功能性自身抗体及其作用机制研究进展 被引量：2

9

作者 孟彩云 宋武琦 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期906-911,共6页

随着对自身抗体研究的不断深入,功能性自身抗体已成为自身抗体研究领域的新热点。这类免疫球蛋白大多为受体抗体,其在疾病中的作用机制为目前的热点研究内容。该类抗体对介导机体心血管功能异常、内分泌紊乱以及神经系统传导功能异常等... 随着对自身抗体研究的不断深入,功能性自身抗体已成为自身抗体研究领域的新热点。这类免疫球蛋白大多为受体抗体,其在疾病中的作用机制为目前的热点研究内容。该类抗体对介导机体心血管功能异常、内分泌紊乱以及神经系统传导功能异常等具有重要作用。本文将对功能性自身抗体的作用机制以及应用价值进行综述。 展开更多

关键词 功能性自身抗体 作用机制 受体抗体

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FkpA促进功能性工程抗体的生产

10

作者 杨萌 杜琳 《生物制品快讯》 2004年第5期20-21,共2页

关键词 FkpA 功能性工程抗体 基因工程 大肠杆菌 融合蛋白

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肝癌干细胞抗体靶向治疗的实验 被引量：10

11

作者 孙力超 赵璇 +3 位作者 孙立新 遇珑 杨治华 冉宇靓 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期609-614,共6页

目的研究抗人肝癌干细胞鼠单抗15B7的生物学特征、体内外功能,探讨靶向肝癌干细胞是否能够有效抑制肝癌移植瘤复发、自发性肺转移以及延长荷瘤小鼠的生存期。方法采用双色免疫荧光、双色流式细胞技术、皮下成瘤实验,检测、鉴定15B7单克... 目的研究抗人肝癌干细胞鼠单抗15B7的生物学特征、体内外功能,探讨靶向肝癌干细胞是否能够有效抑制肝癌移植瘤复发、自发性肺转移以及延长荷瘤小鼠的生存期。方法采用双色免疫荧光、双色流式细胞技术、皮下成瘤实验,检测、鉴定15B7单克隆抗体能够识别肝癌干细胞(hepatocellularcarcinomacancer stemcells,HCC-CSC)。从人肝癌细胞系BEL7402中以流式细胞仪分选具有CD133+或ESA+表型的细胞。在此基础上采用CCK-8细胞增殖实验、侵袭实验、迁移实验等检测分析15B7单抗对CD133+表型的细胞增殖、侵袭、迁移的作用以及对细胞周期的影响。裸鼠体内治疗实验研究15B7单抗对BEL7402移植瘤生长的抑制作用。以Western blot方法鉴定该功能性单抗的抗原。结果双色免疫荧光和双色流式检测显示15B7单抗能与HCC-CSC的标志物ESA、CD133共染;流式分选15B7+或ESA+或CD133+的细胞在体外无血清培养条件下有良好的成球生长能力;流式分选的15B7+细胞裸鼠皮下接种1×104个/只,2月可形成肿瘤,以上实验证明15B7单抗是抗肝癌干细胞的单抗。体外功能实验结果显示15B7单抗能够抑制CD133+细胞的增殖、迁移、侵袭,抑制率分别达13.8%、15.7%和30.9%,同时还能诱导CD133+细胞发生G1期阻滞。体内治疗实验研究结果表明15B7单抗能明显抑制裸鼠肝癌移植瘤生长,抑制率可达60.5%。Western blot显示15B7单抗识别HCC-CSC表达的抗原蛋白相对分子质量约50kD。结论 15B7单抗能明显抑制裸鼠体内人肝移植瘤的生长,为肝癌干细胞的靶向治疗提供有重要应用价值的候选抗体药物。 展开更多

关键词 肝肿瘤 肿瘤干细胞 功能性单克隆抗体 靶向治疗

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肺癌抑制性抗体及其抗原的鉴定 被引量：6

12

作者 冉宇靓 胡海 +3 位作者 陈立钊 遇珑 孙立新 杨治华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2007年第2期110-114,共5页

目的:鉴定抑制肺癌细胞生长的功能性单克隆抗体1E2及其抗原,为治疗肺癌提供有潜力的靶向抗体治疗剂和分子靶位。方法:采用活细胞荧光、MTT细胞增殖实验、ELISA、动物体内治疗实验等方法检测鼠单克隆抗体1E2对人肺癌细胞增殖的抑制、单... 目的:鉴定抑制肺癌细胞生长的功能性单克隆抗体1E2及其抗原,为治疗肺癌提供有潜力的靶向抗体治疗剂和分子靶位。方法:采用活细胞荧光、MTT细胞增殖实验、ELISA、动物体内治疗实验等方法检测鼠单克隆抗体1E2对人肺癌细胞增殖的抑制、单抗与癌细胞的结合部位、单抗的亚类和单抗对肺癌移植瘤的抑制,以Western blotting和MALDI TOF质谱方法鉴定该功能性单抗的抗原。结果:单抗1E2能够与肺癌细胞GLC82和NCI-H520的细胞膜结合,在体外能够明显抑制肺癌细胞的增殖。动物实验表明单抗1E2能够抑制肺癌移植瘤的生长,抑制率达49%。Western blotting显示其抗原相对分子质量约110000,质谱鉴定该抗原为氨甲酰磷酸合成酶(carbamoyl-phosphate synthetase1,CPS1)。结论:单抗1E2能够在体内外抑制肺癌的生长,具有成为肺癌靶向治疗剂的潜力。该抗体识别的抗原CPS1可表达于肺癌细胞的细胞膜,可能是一个肺癌靶向治疗的新靶位。 展开更多

关键词 肺癌 功能性单克隆抗体 抗原 靶位 靶向治疗

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抑制食管癌与肺血管内皮黏附的功能性抗体的制备 被引量：4

13

作者 遇珑 潘健 +4 位作者 周转 冉宇靓 胡海 娄晋宁 杨治华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2006年第5期332-337,共6页

目的制备抑制食管癌细胞与肺血管内皮黏附的功能性单克隆抗体,为研究食管癌转移的靶向治疗剂打下基础。方法以人食管癌新鲜组织分离的肿瘤细胞免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合后,采用活细胞荧光、ELISA、免疫组化、肿... 目的制备抑制食管癌细胞与肺血管内皮黏附的功能性单克隆抗体,为研究食管癌转移的靶向治疗剂打下基础。方法以人食管癌新鲜组织分离的肿瘤细胞免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合后,采用活细胞荧光、ELISA、免疫组化、肿瘤细胞-内皮细胞黏附实验、Weasternbloting等方法筛选并鉴定抑制肿瘤细胞黏附的功能性单克隆抗体。结果共融合获得了1134株杂交瘤克隆,在能与食管癌细胞膜反应的486株克隆中,有294株与正常食管上皮不反应或低反应;筛选到15株单抗显著地抑制食管癌细胞与人正常肺血管内皮黏附,其中2株单抗识别的黏附分子相对分子质量分别为30000和60000。结论成功获得了多株具有抑制食管癌细胞与肺血管内皮黏附的功能性抗体,其中2株单抗具有治疗食管癌转移的潜在应用价值。 展开更多

关键词 食管癌 肺血管内皮细胞 黏附 功能性单克隆抗体

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功能差异细胞模型筛选抗肺癌功能性单克隆抗体及其抗原 被引量：6

14

作者 卢燕来 冉宇靓 +4 位作者 遇珑 赵西路 刘军 胡海 杨治华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第6期501-507,共7页

目的:筛选获取抗肺癌细胞膜的功能性单克隆抗体及其靶抗原,为肺癌靶向治疗提供候选治疗剂及靶标。方法:将新鲜人肺癌组织细胞免疫BALB/c小鼠,采用脾细胞融合法制备大容量单克隆抗体库。建立肺癌细胞增殖、侵袭、迁移等定向功能差异细胞... 目的:筛选获取抗肺癌细胞膜的功能性单克隆抗体及其靶抗原,为肺癌靶向治疗提供候选治疗剂及靶标。方法:将新鲜人肺癌组织细胞免疫BALB/c小鼠,采用脾细胞融合法制备大容量单克隆抗体库。建立肺癌细胞增殖、侵袭、迁移等定向功能差异细胞模型,采用活细胞免疫荧光与功能差异模型筛选其抗原在定向功能(细胞增殖、迁移、侵袭)差异模型细胞膜上差异表达的单抗,再经体外相应功能实验筛选具有抑制作用的功能性单抗,Western blotting鉴定这些单抗的抗原,裸鼠体内抑瘤实验鉴定部分单抗对肺癌的抑制作用。结果:细胞融合后共获得2 893株杂交瘤克隆,其中与肺癌细胞膜结合反应的309株。分别建立了3种体外肺癌细胞增殖、侵袭、迁移差异模型用于筛选,筛选获得20株单抗能显著抑制肺癌细胞增殖、10株单抗能显著抑制肺癌细胞侵袭、5株单抗能显著抑制肺癌细胞迁移(P<0.05或P<0.01)。Western blotting鉴定了其中6株的抗原。选取其中2株单抗均能在裸鼠体内显著抑制肺癌移植瘤的生长(P<0.05或P<0.01)。结论:采用大容量功能性单抗库技术结合功能差异细胞模型可批量筛选获得具有体内外抑制肺癌细胞恶性生物学行为的功能性单抗,为筛选肺癌靶向治疗剂及靶标提供了一种潜在的新方法。 展开更多

关键词 肺癌 功能性单克隆抗体 抗原 功能差异细胞模型 靶向治疗

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抗肺癌单克隆抗体15A1的靶抗原在肺癌细胞中的表达及其转位特征 被引量：4

15

作者 孙立新 冉宇靓 +5 位作者 杨薇薇 孙力超 张晓艳 容雁 刘军 杨治华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期133-138,共6页

目的:分析抗肺癌单克隆抗体15A1的靶抗原在肺癌细胞的表达、亚细胞定位和转位的特征,研究15A1的体内外抑瘤功能,为肺癌靶向治疗提供候选抗体药物及靶标。方法:采用免疫荧光及细胞流式术检测单克隆抗体15A1靶抗原在肺癌细胞中的表达及定... 目的:分析抗肺癌单克隆抗体15A1的靶抗原在肺癌细胞的表达、亚细胞定位和转位的特征,研究15A1的体内外抑瘤功能,为肺癌靶向治疗提供候选抗体药物及靶标。方法:采用免疫荧光及细胞流式术检测单克隆抗体15A1靶抗原在肺癌细胞中的表达及定位,免疫组化分析其在人肺癌组织中的表达;CCK-8法和裸鼠移植瘤体内抗体抑瘤实验评估该单克隆抗体对肺癌细胞的抑制作用。结果:单克隆抗体15A1识别的抗原在人肺腺癌细胞(A549、ANIP-973、GLC-82、Calu-3、H157、H1299)、人肺鳞癌细胞(GLC-P、H520)、人小细胞肺癌细胞(H446、H209)、人大细胞肺癌细胞(PG、H460)共12种细胞的胞内及胞膜上均有表达,肺腺癌细胞的表达强度明显高于其他病理类型肺癌细胞;该抗原在75%的人肺癌组织中非常特异地上调表达。该抗原在肺腺癌细胞中相当一部分从胞核转位至胞质,在肺鳞癌细胞中仅有小部分从细胞核转位至细胞质;转位抗原的一部分表达于膜表面,并同样是肺腺癌细胞的表达强度强于肺鳞癌细胞。该单克隆抗体体内外显著抑制肺癌细胞的生长,抑瘤率在25%～80%。结论:单克隆抗体15A1在体内外能显著抑制肺癌的生长,其靶抗原在人肺癌组织和细胞中特异上调表达,并能以特定转位模式表达于肺癌细胞膜上,可能是一个肺癌靶向治疗的潜在靶标。 展开更多

关键词 肺癌 功能性单克隆抗体 靶抗原 靶向治疗 转位 靶标

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功能性单克隆抗体40E11靶向治疗肺癌的实验研究 被引量：3

16

作者 张晓艳 孙立新 +3 位作者 容雁 冉宇靓 杨治华 孙力超 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2012年第6期401-405,439,共6页

目的:检测分析抗肺癌单克隆抗体40E11识别的靶抗原在肺癌细胞系及肺癌组织中的表达,研究单克隆抗体40E11体内外抑瘤功能,并初步鉴定其识别的抗原蛋白,为肺癌的靶向治疗提供候选抗体药物及靶标。方法:应用细胞免疫荧光检测单克隆抗体40E1... 目的:检测分析抗肺癌单克隆抗体40E11识别的靶抗原在肺癌细胞系及肺癌组织中的表达,研究单克隆抗体40E11体内外抑瘤功能,并初步鉴定其识别的抗原蛋白,为肺癌的靶向治疗提供候选抗体药物及靶标。方法:应用细胞免疫荧光检测单克隆抗体40E11所识别的靶抗原在肺癌细胞系中的表达及定位,免疫组化检测其在人肺癌组织中的表达;CCK-8法检测分析40E11对肺癌细胞增殖的影响。裸鼠体内治疗实验研究40E11对移植瘤生长的抑制作用。Western bloting鉴定该单克隆抗体识别的抗原的分子量。结果:单克隆抗体40E11识别的抗原在人肺腺癌细胞(A549、GLC-82、ANIP-973)、人肺鳞癌细胞(GLC-P)的胞内及胞膜均有表达;该抗原在84.6%的人肺癌组织中的表达较癌旁组织显著上调;CCK-8法检测结果显示单克隆抗体40E11明显抑制肺癌细胞体外生长;抗体治疗实验结果表明单克隆抗体40E11明显抑制体内肺癌细胞生长,其抑制率达64.4%,P<0.05;蛋白质印迹法显示40E11识别的抗原相对分子质量约为100×103。结论:抗肺癌单克隆抗体40E11在体内外能显著抑制肺癌细胞的生长,为肺癌的靶向治疗提供具有重要应用价值的候选抗体药物。 展开更多

关键词 肺肿瘤 功能性单克隆抗体 靶向治疗

原文传递

识别肺癌上调表达的膜蛋白单抗抑制肺癌生长 被引量：3

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作者 杨薇薇 遇珑 +4 位作者 孙力超 孙立新 李江伟 杨治华 冉宇靓 《中国卫生检验杂志》 CAS 2010年第7期1586-1589,1592,共5页

目的:分析研究抗肺癌24H7单抗的体内外功能,并初步鉴定其识别的抗原蛋白,为肺癌靶向治疗提供候选抗体药物及靶标。方法:采用活细胞免疫荧光及流式细胞荧光检测单抗与多种肺癌细胞的反应;应用CCK-8法和裸鼠体内成瘤实验鉴定单抗对肺癌细... 目的:分析研究抗肺癌24H7单抗的体内外功能,并初步鉴定其识别的抗原蛋白,为肺癌靶向治疗提供候选抗体药物及靶标。方法:采用活细胞免疫荧光及流式细胞荧光检测单抗与多种肺癌细胞的反应;应用CCK-8法和裸鼠体内成瘤实验鉴定单抗对肺癌细胞体外增殖及体内肿瘤生长的影响;同时采用免疫组化检测该单抗识别抗原在肿瘤及癌旁正常组织中的表达差异;免疫亲和层析纯化抗原。结果:活细胞免疫荧光及流式荧光结果显示24H7单抗识别抗原在12种不同肺癌细胞系膜上均有阳性表达;体外增殖及动物体内治疗实验显示该单抗在体外能抑制肺癌细胞的增殖,并在体内显著抑制肿瘤的生长,其抑制率达73.74%(P<0.01);免疫组化结果表明该单抗的靶抗原在肺腺癌组织中的表达较癌旁正常显著上调;免疫亲和层析显示靶抗原的分子量约为170 KD。结论:抗肺癌单抗24H7能够在体内外抑制肺癌的生长,其靶抗原可表达于肺癌细胞的膜上,且在肺腺癌组织上调表达,可能是一个肺腺癌靶向治疗的新靶标。 展开更多

关键词 肺癌 膜蛋白 功能性单克隆抗体 抗原 靶标

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一株靶向CD90^+ MHCC97-L细胞单克隆抗体治疗肝癌的实验研究 被引量：2

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作者 孙力超 杨婧 +7 位作者 遇珑 张媛 张峰 陈梦 刘军 孙立新 杨治华 冉宇靓 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第15期2619-2622,共4页

目的:研究抗人肝癌干细胞单抗28C10体内外功能,为肝癌干细胞的靶向治疗提供有应用价值的候选治疗剂。方法:采用无血清成球实验、侵袭实验和CCK-8方法等检测分析28C10单抗对MHCC97-Lsphere的细胞自我更新、侵袭和耐药的影响。裸鼠体内治... 目的:研究抗人肝癌干细胞单抗28C10体内外功能,为肝癌干细胞的靶向治疗提供有应用价值的候选治疗剂。方法:采用无血清成球实验、侵袭实验和CCK-8方法等检测分析28C10单抗对MHCC97-Lsphere的细胞自我更新、侵袭和耐药的影响。裸鼠体内治疗实验研究单抗28C10联合顺铂对MHCC97-L移植瘤生长的作用。Western-Blot方法鉴定该单抗识别抗原的分子量。结果:流式细胞检测结果显示单抗28C10能够识别MHCC97-L中CD90阳性细胞的比例为2.75%。体外功能实验结果显示单抗28C10能显著抑制MHCC97-Lsphere细胞的无血清成球能力和侵袭能力,抑制率分别达33.33%和53.8%。28C10能显著抑制MHCC97-Lsphere的顺铂耐药能力,其IC50为0.74μg/ml,而对照组的IC50为1.42μg/ml。抗体体内治疗实验结果显示,低、高剂量抗体28C10均能抑制肝癌移植瘤的生长,抑制率分别达到了24.0%和67.7%,单独顺铂组肝癌移植瘤的抑制率为35.9%,而顺铂联合高剂量抗体28C10组对肝癌移植瘤的抑制率达到70.1%。Western-Blot结果显示单抗28C10识别的抗原蛋白分子量约100kD。结论:筛选获得了1株抗肝癌干细胞的功能性单抗,为靶向肝癌干细胞治疗肝癌奠定了重要的基础。 展开更多

关键词 肝癌 肿瘤干细胞 功能性单克隆抗体 靶向治疗 CD90

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一株特异识别肺癌组织的单抗抑制肺腺癌的生长 被引量：1

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作者 王翠红 孙立超 +3 位作者 孙立新 杨治华 冉宇靓 吴翠娇 《中国卫生检验杂志》 CAS 2010年第5期976-978,1070,共4页

目的:已采用功能性抗体库技术筛选出抗肺癌的单抗13C9,进一步确定其识别的抗原在肺癌组织和细胞中的表达及体内抑制肺癌生长的能力,以期为肺癌靶向治疗提供有价值的分子靶位和治疗剂。方法:常规方法鉴定13C9单抗的一般特性,用细胞免疫... 目的:已采用功能性抗体库技术筛选出抗肺癌的单抗13C9,进一步确定其识别的抗原在肺癌组织和细胞中的表达及体内抑制肺癌生长的能力,以期为肺癌靶向治疗提供有价值的分子靶位和治疗剂。方法:常规方法鉴定13C9单抗的一般特性,用细胞免疫荧光、免疫组织化学检测其抗原蛋白在肺癌细胞及组织中的表达和定位,体内移植瘤治疗实验评价13C9单抗对肺癌生长的抑制作用,Western blotting等方法鉴定13C9单抗识别的抗原。结果:13C9单抗与肺癌细胞GLC-82和A549的细胞膜结合,免疫组化结果显示其识别的抗原在人肺癌组织中高表达(79.8%),而在癌旁组织中不表达或低表达(9.6%,P<0.05)。该抗体亚型为IgM、κ型,13C9单抗治疗能够抑制人肺腺癌移植瘤的生长,抑制率达63.29%(P<0.05)。Western blotting显示13C9单抗识别的抗原相对分子质量约220 KD。结论:单抗13C9能显著抑制体内肺癌生长,具有成为肺癌靶向治疗剂的应用潜力,其识别的特异表达在肺癌细胞膜上的220 KD的膜蛋白,可能是肺癌潜在的治疗靶位。 展开更多

关键词 肺癌 功能性单克隆抗体 靶向治疗 免疫组化

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单克隆抗体12H6的靶抗原在肺癌细胞中的表达及功能研究

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作者 徐洁 孙立新 +3 位作者 遇珑 冉宇靓 孙力超 杨治华 《中国肿瘤》 CAS 2013年第2期120-125,共6页

[目的]分析抗肺癌单抗12H6的靶抗原在肺癌细胞系和肺癌组织中的表达,研究单抗12H6体内外生物学功能。[方法]细胞免疫荧光、流式细胞荧光法检测单抗12H6靶抗原在3种肺癌细胞系中的表达及其定位,免疫组化法检测其在人肺癌组织中表达及特异... [目的]分析抗肺癌单抗12H6的靶抗原在肺癌细胞系和肺癌组织中的表达,研究单抗12H6体内外生物学功能。[方法]细胞免疫荧光、流式细胞荧光法检测单抗12H6靶抗原在3种肺癌细胞系中的表达及其定位,免疫组化法检测其在人肺癌组织中表达及特异性;Transwell法和CCK-8法分别检测12H6体外对肺癌细胞系侵袭和增殖功能的影响。共接种模型裸鼠体内治疗实验研究12H6对移植瘤生长的抑制作用。[结果]单抗12H6的靶抗原在人肺腺癌细胞(A549、GLC-82)、人肺鳞癌细胞(GLC-P)的胞内及胞膜均有表达,在3种细胞系胞膜的表达比例分别为31.2%、15.4%和16.7%。单抗12H6在人肺癌组织中的表达比例为80.6%,较配对癌旁组织显著上调。单抗12H6在体外能明显抑制肺癌细胞侵袭和增殖;体内能明显抑制移植瘤生长,抑制率为40%。[结论]单抗12H6具有优良的体内外抑瘤功能,可能为肺癌靶向治疗提供潜在的靶向治疗药物。 展开更多

关键词 肺癌 功能性单克隆抗体 靶向治疗

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