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Mg^(2+)转运基因AtMGT6功能互补分析 被引量：1
1
作者 康沈兰 《生命科学研究》 CAS CSCD 2006年第S2期99-104,共6页
Mg2+是植物细胞中含量最丰富的二价阳离子,在植物体内起重要作用.在模式植物拟南芥中发现了一个与Mg2+转运相关的拥有10个成员的基因家族-AtMGT家族,有一些成员已被鉴定具Mg2+转运功能.对此家族成员之一AtMGT6的生理功能进行了初步研究... Mg2+是植物细胞中含量最丰富的二价阳离子,在植物体内起重要作用.在模式植物拟南芥中发现了一个与Mg2+转运相关的拥有10个成员的基因家族-AtMGT家族,有一些成员已被鉴定具Mg2+转运功能.对此家族成员之一AtMGT6的生理功能进行了初步研究.采取的方法是用RTP-CR方法从野生型拟南芥中获得AtMGT6的cDNA,克隆到pMD18T-载体上,测序后亚克隆到pTrc99A载体上构建重组表达质粒.重组质粒电转化至细菌突变株MM281,经IPTG诱导表达,在NM-inimalMedium中检测其Mg2+转运功能.功能互补实验结果表明AtMGT6基因确实编码Mg2+转运基因,但其转运能力相对较低,可能属于低亲和性的Mg2+转运基因. 展开更多
关键词 拟南芥 AtMGT6 RTP-CR 功能互补实验
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矮珍珠硝酸盐转运蛋白基因GeNRT2.1的克隆和功能研究
2
作者 黄赳 师双峰 +3 位作者 张二特 李梅 于跃 刘昱辉 《生物技术进展》 2022年第2期256-264,共9页
硝酸盐转运蛋白(nitratetransporter,NRT)是植物识别、吸收和转运硝酸盐的关键蛋白,对促进作物根系发育、提高产量具有重要作用。通过筛选水生植物,利用NRT蛋白的保守区设计简并引物,并通过PCR和RACE技术,首次从矮珍珠(Glossostigmaelat... 硝酸盐转运蛋白(nitratetransporter,NRT)是植物识别、吸收和转运硝酸盐的关键蛋白,对促进作物根系发育、提高产量具有重要作用。通过筛选水生植物,利用NRT蛋白的保守区设计简并引物,并通过PCR和RACE技术,首次从矮珍珠(Glossostigmaelatinoides)中克隆得到GeNRT2.1基因。进化分析结果表明,GeNRT2.1与烟草NRT2.1在进化关系上距离最近。qRT-PCR结果表明,GeNRT2.1在矮珍珠根中表达量最高,其次是叶和茎,此外,低浓度硝酸盐(0.5 mmol·L^(−1))处理后,GeNRT2.1在根、叶、茎中的表达量分别是高浓度硝酸(2 mmol·L^(−1))处理后的1.89、1.93和2.07倍。功能互补实验发现,GeNRT2.1能使缺陷型酵母Δynr恢复生长,具有硝酸盐转运蛋白的功能。通过丰富NRT基因资源,以期为培育氮肥高效利用转基因作物,发展绿色农业,保证我国的粮食安全和环境安全提供理论依据。 展开更多
关键词 矮珍珠 硝酸盐转运蛋白 GeNRT2.1基因 功能互补实验
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小麦钾离子通道蛋白基因TaAKT1的功能分析 被引量：2
3
作者 毕惠惠 毛伟伟 +5 位作者 李海霞 程西永 周渭皓 周思远 武会芳 许海霞 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1391-1399,共9页
小麦AKT1具有钾离子转运功能。为了给小麦钾离子吸收转运机制的研究提供参考,本研究从普通小麦品种石4185中扩增得到TaAKT1基因,其编码区序列全长2 694bp,生物信息学分析表明,TaAKT1蛋白包含897个氨基酸,相对分子质量为100.92kDa,具有... 小麦AKT1具有钾离子转运功能。为了给小麦钾离子吸收转运机制的研究提供参考,本研究从普通小麦品种石4185中扩增得到TaAKT1基因,其编码区序列全长2 694bp,生物信息学分析表明,TaAKT1蛋白包含897个氨基酸,相对分子质量为100.92kDa,具有钾离子通道蛋白的特征序列TxxTxGYGD。多序列比对发现,TaAKT1蛋白与大麦HvAKT1蛋白的进化关系最近,相似性达97.22%。利用qRT-PCR分析发现,在正常条件下TaAKT1基因在小麦根部表达量约为叶片中表达量的5倍,低钾环境下TaAKT1的表达量在小麦根部明显上调,叶部的表达量无明显变化。利用酵母功能互补实验发现,转TaAKT1基因的酵母在含有5mmol·L^(-1) KCl的AP培养基上正常生长,而转空载体的酵母长势受到抑制,说明TaAKT1具有钾离子转运功能。同时转TaAKT1基因与TaCIPK23基因的酵母能在含60μmol·L^(-1) KCl的AP培养基上生长,而转空载体与转TaAKT1基因的酵母菌株均不能生长,说明TaCIPK23可以增强TaAKT1的钾离子吸收能力。 展开更多
关键词 小麦 TaAKT1 钾离子通道 酵母功能互补实验
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续随子ElSAD2基因的克隆与功能分析
4
作者 王鑫雨 葛丽萍 +3 位作者 盛晓倩 牛听风 包鹏 李润植 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期549-557,共9页
Δ^(9)-硬脂酰-ACP脱氢酶(SAD)是参与植物不饱和脂肪酸生物合成的关键酶。该研究从续随子(Euphorbia lathyris)种子转录组数据库中筛选得到续随子ElSAD2基因序列,对其序列表达特性进行分析,并鉴定ElSAD2基因的功能。结果显示:(1)续随子E... Δ^(9)-硬脂酰-ACP脱氢酶(SAD)是参与植物不饱和脂肪酸生物合成的关键酶。该研究从续随子(Euphorbia lathyris)种子转录组数据库中筛选得到续随子ElSAD2基因序列,对其序列表达特性进行分析,并鉴定ElSAD2基因的功能。结果显示:(1)续随子ElSAD2的cDNA全长1665 bp,ORF为1194 bp,编码397个氨基酸残基;系统进化分析显示ElSAD2蛋白与蓖麻(Ricinus communis)RcSAD1蛋白等亲缘关系较近。(2)ElSAD2在续随子各器官中均有表达,其中在花后30 d种子中表达量最高。(3)在BY4389缺陷型酵母中过表达ElSAD2,使缺陷酵母不饱和脂肪酸含量升高。(4)本氏烟草瞬时表达ElSAD2,使得烟草叶片总油脂和油酸含量分别提高2.46%和2.1%。研究发现,ElSAD2能催化单不饱和油酸的生物合成,可进一步应用于油料植物油脂产量和品质改良。 展开更多
关键词 Δ^(9)-硬脂酰-ACP脱氢酶 续随子 能源植物 油酸(18∶1Δ^(9)) 酵母功能互补实验 烟草瞬时表达
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