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力生长因子在大肠杆菌中的表达及活性分析 被引量:10
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作者 张兵兵 江鹏 +4 位作者 鲜成玉 李玉筱 李大军 唐丽灵 王远亮 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期1180-1185,共6页
MGF(Mechano-growth factor)是一种IGF-1变体形式,研究发现该因子具有应力敏感性,并且具有促进肌肉肥大、再生以及神经损伤修复的功能。通过RT-PCR从拉伸刺激的人成骨细胞中克隆MGF cDNA序列,并去除5'端9bp的序列,使N端缺少对肠激酶... MGF(Mechano-growth factor)是一种IGF-1变体形式,研究发现该因子具有应力敏感性,并且具有促进肌肉肥大、再生以及神经损伤修复的功能。通过RT-PCR从拉伸刺激的人成骨细胞中克隆MGF cDNA序列,并去除5'端9bp的序列,使N端缺少对肠激酶(Enterokinase,EK)具有抑制作用的脯氨酸,将截短型MGF(des(1-3)MGF)cDNA序列克隆入pET32a(+)质粒,构建重组表达质粒。重组质粒转化E.coli BL21(DE3),在30oC培养下以可溶形式表达融合蛋白Trx/des(1-3)MGF,采用离子交换层析和Ni2+金属亲和层析,获得纯度95%以上的融合蛋白。再对融合蛋白EK酶切,rpHPLC分离获得纯度达98%的des(1-3)MGF,SDS-PAGE及质谱分析蛋白分子量与理论值相符。生物活性实验显示,所制备的des(1-3)MGF比des(1-3)IGF-1更显著的促进MC3T3-E1细胞的增值和迁移。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-1 生长因子 原核表达 增殖 迁移
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胰岛素样生长因子-I对骨骼肌生长和修复研究进展 被引量:9
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作者 曹龙军 黄力平 周石 《天津体育学院学报》 CAS CSSCI 北大核心 2006年第3期242-245,共4页
生长激素(GH/)胰岛素样生长因子-I(IGF-I)轴是肌肉生长的重要调节因子之一。虽然许多组织都能表达IGF-I,但它们各自的功能不同。骨骼肌是IGF-I的靶器官,同时也分泌IGF-I。骨骼肌组织表达的IGF-I对骨骼肌损伤后的再生、修复非常重要,也... 生长激素(GH/)胰岛素样生长因子-I(IGF-I)轴是肌肉生长的重要调节因子之一。虽然许多组织都能表达IGF-I,但它们各自的功能不同。骨骼肌是IGF-I的靶器官,同时也分泌IGF-I。骨骼肌组织表达的IGF-I对骨骼肌损伤后的再生、修复非常重要,也是通过适当干预保持肌肉质量的重要调节因素。主要讨论GH/IGF-I在促进骨骼肌再生和修复中的作用,并讨论其在运动康复中的应用前景。 展开更多
关键词 生长激素 胰岛素样生长因子-I 生长因子
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应力作用下成骨细胞内IGF-1的剪接变异及表达 被引量:8
3
作者 鲜成玉 王远亮 +5 位作者 张兵兵 唐丽灵 潘君 罗彦凤 江鹏 李大军 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第20期2399-2403,共5页
IGF-1能够促进成骨细胞的分化和骨的形成,应力刺激会促进其表达,因此认为IGF-1是联系力刺激与组织局部效应的效应分子.通过设计应力拉伸装置,对成骨细胞施加生理范围内静态和周期性动态拉伸刺激,应用不同的引物,通过RT-PCR扩增IGF-1mRNA... IGF-1能够促进成骨细胞的分化和骨的形成,应力刺激会促进其表达,因此认为IGF-1是联系力刺激与组织局部效应的效应分子.通过设计应力拉伸装置,对成骨细胞施加生理范围内静态和周期性动态拉伸刺激,应用不同的引物,通过RT-PCR扩增IGF-1mRNA,发现受到拉伸刺激的成骨细胞会有选择性剪接的IGF-1变构体产生,该变构体和肌肉中发现的力生长因子(mechano growth factor,MGF)序列一致.进一步通过半定量RT-PCR研究了应力刺激对L.IGF-1(liver-type)和MGF表达的调控.结果显示,拉伸刺激促进了IGF-1的表达,无论是L.IGF-1还是MGF周期性拉伸比静态拉伸具有更大的促进作用.MGF是拉伸刺激敏感的,仅在应力作用的细胞中发现,而且MGF比L.IGF-1更早地达到表达高峰. 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子 生长因子 选择性剪接 成骨细胞 拉伸
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力生长因子对兔桡骨骨折愈合的作用 被引量:8
4
作者 廖保强 邓墨渊 +2 位作者 傅亚 王远亮 饶泉珍 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期245-248,共4页
背景:目前对力生长因子的研究主要集中在肌肉、神经损伤修复方面,并证实其可明显促进肌肉细胞肥大和神经修复。关于其对骨折愈合的作用还不清楚。目的:观察力生长因子对兔桡骨骨折愈合的作用。方法:随机数字表法将新西兰大白兔分为空白... 背景:目前对力生长因子的研究主要集中在肌肉、神经损伤修复方面,并证实其可明显促进肌肉细胞肥大和神经修复。关于其对骨折愈合的作用还不清楚。目的:观察力生长因子对兔桡骨骨折愈合的作用。方法:随机数字表法将新西兰大白兔分为空白对照组、力生长因子低、高剂量组。通过手术造成大白兔左侧桡骨中段5mm完全缺损的骨折模型,术后第3天开始,各组分别予以PBS液及质量浓度为0.36,0.72g/L的力生长因子各0.2mL,经皮注射至骨折断端,连续注射5d,1次/d。术后第4,6,8周X射线观察骨折愈合情况。于术后第8周组织学观察各组骨折部位细胞形态学变化。结果与结论:术后第1天活动少,饮食量略减少,2d后基本恢复正常活动与饮食。3d内手术切口部位略有肿胀,少量渗血,无明显感染征象,12只兔全部进入结果分析。X射线显示,力生长因子高剂量组第4周时两骨折断端已基本结合在一起,骨皮质基本连续,骨折线模糊,第6周时骨髓腔已基本贯通,第8周时完全贯通,愈合时间较空白对照组、力生长因子低剂量组明显提前,愈合质量高。术后8周,空白对照组出现大量类骨组织,有少量编织骨形成,处于纤维性骨痂向骨性骨痂过度期;力生长因子低剂量组可见大量编织骨形成,处于骨性骨痂期;力生长因子高剂量组大量编织骨已改建为成熟的板层骨,已正处于骨痂改建期,与影像学结果一致。提示力生长因子具有明显促进骨折愈合的作用,并且在一定范围内随剂量的增大效果越明显。 展开更多
关键词 生长因子 骨折愈合 作用机制 局部应用 骨组织工程
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拉伸刺激下MGF在成骨细胞中的表达及亚细胞定位分析 被引量:8
5
作者 张兵兵 鲜成玉 +1 位作者 罗彦凤 王远亮 《中国科学(C辑)》 CSCD 北大核心 2009年第5期518-524,共7页
力生长因子(mechano-growth factor,MGF)是在成肌细胞中发现的一种对拉伸刺激敏感的生长因子,该生长因子也可能在其他的力效应细胞中由力学刺激产生.通过设计细胞拉伸装置,对成骨细胞施加不同时段的周期性动态拉伸刺激.定量分析mRNA和... 力生长因子(mechano-growth factor,MGF)是在成肌细胞中发现的一种对拉伸刺激敏感的生长因子,该生长因子也可能在其他的力效应细胞中由力学刺激产生.通过设计细胞拉伸装置,对成骨细胞施加不同时段的周期性动态拉伸刺激.定量分析mRNA和蛋白质表达显示,周期性拉伸刺激下成骨细胞中的MGF mRNA和蛋白质水平快速提高,mRNA的水平在加载6h达到最高峰,与静态对照组相比提高5倍,而MGF的蛋白表达需要加载12h达到最高,与对照相比提高了5.2倍,随后二者分别降低,在24h达到本底水平.荧光免疫细胞化学技术检验MGF在细胞中的分布发现,MGF具有核分布的特点.因此得出结论,周期性拉伸刺激能刺激成骨细胞快速表达,MGF核分布的特点暗示MGF可能是一种自分泌作用因子. 展开更多
关键词 生长因子 胰岛素样生长因子-1 成骨细胞 拉伸 亚细胞定位
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外力作为信号诱导基因的选择性剪接与力生长因子表达 被引量:7
6
作者 唐丽灵 李大军 王远亮 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第5期454-459,共6页
许多种类的细胞都响应力信号,人们将这些细胞称为力效应细胞(mechanocyte).应力可引起细胞在基因水平或表达水平的调控,其中胰岛素样生长因子Ⅰ(insulin-like growth factor-Ⅰ,IGFⅠ)是力学敏感因子.对骨骼肌的长期拉伸实验发现,IGF-... 许多种类的细胞都响应力信号,人们将这些细胞称为力效应细胞(mechanocyte).应力可引起细胞在基因水平或表达水平的调控,其中胰岛素样生长因子Ⅰ(insulin-like growth factor-Ⅰ,IGFⅠ)是力学敏感因子.对骨骼肌的长期拉伸实验发现,IGF-Ⅰ不仅表达量受到拉伸刺激的调控,而且存在多种变异体形式,其中一种对力刺激敏感,只在拉伸作用下产生,命名为力生长因子(mechano growth factor,MGF).进一步研究发现,MGF能激活卫星细胞、促进成肌细胞增殖,在治疗肌损失、预防心肌损伤和修复神经损伤等方面有重要的作用.机械拉伸也可以使成骨细胞表达MGF,研究表明,对成骨细胞施加应变为15%的周期性拉伸刺激,细胞的IGFⅠ表达量增加,同时表达MGF剪接变异体.对MGF的深入研究可望在疾病治疗和组织工程修复领域取得广泛的应用. 展开更多
关键词 刺激 胰岛素样生长因子 生长因子 选择性剪接
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结合力生长因子探讨骨肉不相亲理论与骨质疏松症 被引量:8
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作者 蒋林博 宋敏 +4 位作者 刘小钰 周灵通 董万涛 刘涛 巩彦龙 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期385-388,405,共5页
骨肉不相亲理论是中医学的经典理论,本文基于骨肉不相亲理论,由骨骼肌的机械应力刺激引出力生长因子,从分子生物学的角度论述了骨肉不相亲理论的科学内涵,进一步探讨了骨骼与肌肉的关系,并解释完善了运用骨肉不相亲理论防治骨质疏松症... 骨肉不相亲理论是中医学的经典理论,本文基于骨肉不相亲理论,由骨骼肌的机械应力刺激引出力生长因子,从分子生物学的角度论述了骨肉不相亲理论的科学内涵,进一步探讨了骨骼与肌肉的关系,并解释完善了运用骨肉不相亲理论防治骨质疏松症的作用机制,为中医药防治骨质疏松症提供了理论依据。 展开更多
关键词 骨肉不相亲 骨质疏松 机械应 生长因子 分子机制
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力生长因子及其E肽对成骨细胞分化的影响 被引量:6
8
作者 张兵兵 王远亮 +4 位作者 杨力 潘长江 傅亚 邓墨渊 李玉筱 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第3期304-312,共9页
力生长因子(mechano growth factor,MGF)是新近发现的一种生长因子,由Igf-1基因剪接变异产生,拉伸刺激会促使成骨细胞表达力生长因子.比较分析了MGF及其羧基端E肽(MGF-Ct24E)对成骨细胞前体细胞MC3T3-E1分化的影响.结果显示:MGF和MGF-Ct... 力生长因子(mechano growth factor,MGF)是新近发现的一种生长因子,由Igf-1基因剪接变异产生,拉伸刺激会促使成骨细胞表达力生长因子.比较分析了MGF及其羧基端E肽(MGF-Ct24E)对成骨细胞前体细胞MC3T3-E1分化的影响.结果显示:MGF和MGF-Ct24E具有显著激活胞外信号调节激酶1/2(Erk1/2)的作用,并降低了成骨细胞碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原的表达,促进了骨桥蛋白(OPN)的表达,减少了核心绑定因子(corebinding factor1,Cbfα-1)的核转运量,对成骨细胞的分化具有延迟效应,这种效应通过抑制剂PD98059抑制Erk1/2的活化得到逆转;MGF还能显著激活磷脂酰肌醇3-激酶信号通路中的蛋白激酶B(Akt),该活化作用对成骨细胞分化是必需的,钙沉积分析显示长期培养下的细胞MGF促进了矿化节结的形成.这些结果说明,MGF-Ct24E对成骨细胞的分化具有抑制作用,这种作用与Erk1/2的活化有关,MGF因为包含E肽和IGF-1部分,能分别激活Erk1/2和Akt,因此对成骨细胞分化表现出双重效用,在成骨细胞分化早期,具有一定的延迟效应,而在分化晚期对成骨细胞分化表现出促进作用. 展开更多
关键词 生长因子 胰岛素样生长因子-1 成骨细胞 分化
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力生长因子促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞的分化 被引量:7
9
作者 佟雁翔 冯卫 +4 位作者 贾燕飞 王彩霞 吕慧成 吴一民 蒋电明 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第32期4717-4724,共8页
背景:力生长因子具有激活肌肉卫星细胞和促进肌原细胞生长的作用,同时在维持骨质量和修复骨损伤方面具有作用。目的:研究力生长因子促进兔骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的作用机制。方法:采用MTT法检测力生长因子促进兔骨髓间充质干... 背景:力生长因子具有激活肌肉卫星细胞和促进肌原细胞生长的作用,同时在维持骨质量和修复骨损伤方面具有作用。目的:研究力生长因子促进兔骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的作用机制。方法:采用MTT法检测力生长因子促进兔骨髓间充质干细胞成骨分化的最佳质量浓度与时间。用定量PCR和Western blot检测此质量浓度力生长因子促进兔骨髓间充质干细胞成骨分化后细胞中成骨细胞标志物碱性磷酸酶和骨钙素mRNA和蛋白的表达水平变化,并用Western Blot检测AKT和mTOR磷酸化水平变化。结果与结论:力生长因子的质量浓度为45μg/L时作用5 d促进兔骨髓间充质干细胞成骨分化的效果最好。45μg/L力生长因子促进兔骨髓间充质干细胞成骨分化后细胞中碱性磷酸酶和骨钙素mRNA和蛋白水平在干预后4 h最高,同时AKT和mTOR的磷酸化水平也在干预后4 h时最高。说明力生长因子促进兔骨髓间充质干细胞向成骨细胞的分化的作用机制是通过PI3K/AKT途径实现的,且在45μg/L干预后4 h时的效果最好。 展开更多
关键词 细胞分化 碱性磷酸酶 组织工程 干细胞 骨髓干细胞 生长因子 PI3K/AKT通路 成骨细胞 MTOR
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IGF-1剪接变构体:力生长因子 被引量:4
10
作者 鲜成玉 王远亮 唐丽灵 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期322-324,共3页
力刺激与基因表达之间的联系是生理学研究中一个新的重要领域。从基因表达水平研究力学信号的影响有着特殊的重要意义,生物有机体的存在是基因表达的结果,而力在生命活动的整个过程发挥着作用。在骨骼肌中,力刺激诱导胰岛素样生长因子-1... 力刺激与基因表达之间的联系是生理学研究中一个新的重要领域。从基因表达水平研究力学信号的影响有着特殊的重要意义,生物有机体的存在是基因表达的结果,而力在生命活动的整个过程发挥着作用。在骨骼肌中,力刺激诱导胰岛素样生长因子-1(IGF-1)发生选择性剪接,产生能够激活卫星细胞而使细胞增殖的力生长因子(mechano growth factor,MGF),以及能促使细胞分化而形成肌管的肌肉型IGF-1(IGF-1Ea),这两种自分泌的局部生长因子在肌肉修复与再生中起着重要作用。 展开更多
关键词 刺激 胰岛素样生长因子-1 生长因子 卫星细胞
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力生长因子对牙周膜干细胞增殖分化的影响 被引量:1
11
作者 屠腾 刘艳丽 +2 位作者 王惠 赵萤 张旻 《口腔疾病防治》 2023年第2期86-93,共8页
目的探讨力生长因子(mechano⁃growth factor,MGF)对牙周膜干细胞增殖、分化的影响及其作用的分子机制。方法采用免疫磁珠法分选人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs),流式细胞仪检测表面标志物,并观察分选细胞的克... 目的探讨力生长因子(mechano⁃growth factor,MGF)对牙周膜干细胞增殖、分化的影响及其作用的分子机制。方法采用免疫磁珠法分选人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs),流式细胞仪检测表面标志物,并观察分选细胞的克隆形成能力及多向分化能力;CCK8法检测不同浓度MGF功能肽段(MGF⁃Ct24E肽)作用下PDLSCs的增殖活性;Western blot检测MGF⁃Ct24E肽作用下PDLSCs中的增殖细胞核抗原(pro⁃liferating cell nuclear antigen,PCNA)、碱性螺旋环螺旋转录因子Scleraxis、Ⅰ型胶原ɑ1(collagen type I alpha 1,COL1A1)、成骨细胞特异性转录因子Osterix、Yes相关蛋白(Yes⁃associated protein,YAP)、磷酸化YAP(phosphory⁃lation yes⁃associated protein,P⁃YAP)蛋白表达量;免疫荧光观察YAP的表达情况;siRNA干扰YAP表达后,观察PDLSCs中MGF⁃Ct24E作用下PCNA、Scleraxis和COL1A1的表达。结果免疫磁珠分选的PDLSCs高表达干细胞表面标志物CD29、CD90、CD105,低表达造血细胞表面标志物CD34、CD45;细胞具有较强的克隆形成能力,成骨诱导茜素红染色后可见红色钙结节,成脂诱导油红O染色后可见红色脂滴;50 ng/mL和100 ng/mL MGF⁃Ct24E肽作用24 h后,PDLSCs的增殖活性增强(P<0.05);细胞中PCNA、Scleraxis和COL1A1蛋白表达上调,而Osterix蛋白表达量下调(P<0.05);50 ng/mL MGF⁃Ct24E肽作用24 h后,YAP蛋白357位点磷酸化水平增强(P<0.05),免疫荧光染色观察发现,YAP蛋白在胞核聚集;MGF⁃Ct24E肽作用下,siRNA抑制YAP表达后,细胞中PCNA、Scler⁃axis蛋白表达量下调(P<0.05)。结论MGF通过激活YAP促进PDLSCs增殖及成纤维分化。 展开更多
关键词 生长因子 牙周膜 牙周膜干细胞 牙周膜成纤维细胞 Yes相关蛋白 P⁃Yes相关蛋白 细胞增殖 成纤维分化 成骨分化 再生修复
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力生长因子的表达及其在组织修复与再生中的作用 被引量:4
12
作者 张冰玉 宋关斌 +1 位作者 罗庆 杨力 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期617-620,共4页
目的对力生长因子(mechano-growth factor,MGF)的表达以及在组织修复与再生中的作用进行综述。方法广泛查阅近年来国内外有关MGF表达和参与组织修复与再生的文献,对其研究进展进行综述。结果 MGF在多种组织/细胞中表达,具有力敏感性,并... 目的对力生长因子(mechano-growth factor,MGF)的表达以及在组织修复与再生中的作用进行综述。方法广泛查阅近年来国内外有关MGF表达和参与组织修复与再生的文献,对其研究进展进行综述。结果 MGF在多种组织/细胞中表达,具有力敏感性,并能激活卫星细胞,促进成肌细胞增殖,在治疗肌肉缺损、预防心肌损伤和修复受损神经等方面起重要作用。结论 MGF在多种组织中的修复作用已明确,但其具体作用机制尚未明确,有待进一步深入研究。 展开更多
关键词 生长因子 IGF-Ⅰ 组织修复 组织再生
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TNF-α、IL-1β通过PKA通路诱导成纤维样滑膜细胞中力生长因子表达 被引量:3
13
作者 黄杨河 罗自维 +5 位作者 李海滨 吴双迟 吕永钢 刘万钱 钟莉 杨力 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第3期276-280,共5页
目的探讨炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6对力生长因子(mechano growth factor,MGF)表达的影响。方法实验组细胞用浓度为25、50、100 ng/mL的TNF-α、IL-6或者是2.5、5.0、10 ng/mL的IL-1β处理12 h,抑制剂组在因子处理前用1.0 mmol KT572... 目的探讨炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6对力生长因子(mechano growth factor,MGF)表达的影响。方法实验组细胞用浓度为25、50、100 ng/mL的TNF-α、IL-6或者是2.5、5.0、10 ng/mL的IL-1β处理12 h,抑制剂组在因子处理前用1.0 mmol KT5720预处理1 h,然后添加炎症因子刺激12 h,对照组细胞保持与实验组培养条件一致的情况下不添加因子刺激。因子刺激后,用定量PCR方法检测细胞中MGF表达量。结果 25 ng/mL TNF-α和10 ng/mL IL-1β因子刺激滑膜成纤维细胞诱导MGF表达显著增加(P<0.05)。IL-6对MGF表达无影响。1.0 mmol PKA通路抑制剂KT5720处理显著降低TNF-α和IL-1β诱导的MGF表达(P<0.05)。结论炎症因子TNF-α和IL-1β在浓度分别为25和10 ng/mL时能显著诱导滑膜成纤维细胞中MGF表达,其表达是通过PKA通路介导的。本研究对于促进MGF用于改善膝关节相关组织修复中的应力刺激不足有一定的现实意义。 展开更多
关键词 生长因子 成纤维样滑膜细胞 刺激
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力生长因子E肽与应力刺激对成骨细胞基因表达的影响 被引量:3
14
作者 林福春 张兵兵 +5 位作者 辛娟 向燕 鲜成玉 邓墨渊 彭琴 王远亮 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第1期65-71,共7页
目的应用基因芯片技术分析在力生长因子E肽(MGF-Ct24E)和应力作用下成骨细胞基因表达的差异。方法体外培养原代成骨细胞,分别对细胞施加周期性拉伸刺激(应变12%,频率0.5 Hz)和MGF-Ct24E(50 mg/L)直接作用,基因芯片技术分析力学刺激和MGF... 目的应用基因芯片技术分析在力生长因子E肽(MGF-Ct24E)和应力作用下成骨细胞基因表达的差异。方法体外培养原代成骨细胞,分别对细胞施加周期性拉伸刺激(应变12%,频率0.5 Hz)和MGF-Ct24E(50 mg/L)直接作用,基因芯片技术分析力学刺激和MGF-Ct24E作用对原代成骨细胞基因表达谱的影响,并用定量PCR验证基因芯片实验结果。结果与对照组相比,力学加载组共发现差异表达基因1 866个,其中上调基因1 113个,下调基因753个;MGF-Ct24E处理组共发现差异表达基因1 178个,其中上调基因796个,下调基因382个。GO分析发现两者的差异基因表达谱具有一致性,并且差异表达基因主要涉及细胞增殖与分化调节、细胞对应力刺激的响应和力学转导通路等。定量PCR实验结果验证的差异表达基因与芯片实验结果一致。结论基因表达谱分析显示应力刺激和MGF-Ct24E作用对成骨细胞的基因表达具有类似的调控效应,为后续使用MGF-Ct24E治疗骨修复以弥补应力刺激不足的研究提供了新的思路。 展开更多
关键词 成骨细胞 生长因子 刺激 基因芯片 基因表达 细胞培养
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力生长因子E肽对前交叉韧带成纤维细胞活力、迁移与侵袭的影响 被引量:3
15
作者 沙永强 吕永钢 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第3期227-234,共8页
目的研究力生长因子(mechano-growth factor,MGF)E肽对前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)成纤维细胞活力、迁移与侵袭的影响。方法以ACL成纤维细胞为研究对象:(1)经不同浓度(0、10和100μg/L)MGF E肽处理细胞24 h后,去除培养... 目的研究力生长因子(mechano-growth factor,MGF)E肽对前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)成纤维细胞活力、迁移与侵袭的影响。方法以ACL成纤维细胞为研究对象:(1)经不同浓度(0、10和100μg/L)MGF E肽处理细胞24 h后,去除培养基,换成1%血清浓度DMEM低糖培养基培养6和30 h后,检测细胞活力、DNA含量、细胞凋亡、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)活性变化及I型胶原(COL I)、III型胶原(COL III)mRNA表达;(2)使用不同浓度(0、5、10、20、50和100μg/L)MGF E肽处理ACL成纤维细胞48 h后,检测细胞活力与MMP-2活性,并利用划痕实验与Transwell实验分别检测细胞迁移与侵袭能力。结果 (1)6 h时,10μg/L浓度MGF E肽显著促进MMP-2、MMP-9活性,对细胞活力、增殖、凋亡及COL I、COL III mRNA表达无影响。100μg/L浓度MGF E肽显著促进MMP-2、MMP-9活性,并提高了COL I、COL III mRNA表达,但对细胞活力、增殖、凋亡无影响。30 h时,10μg/L浓度MGF E肽显著促进MMP-9活性及COL I、COL III mRNA表达,对细胞活力、增殖、MMP-2活性及细胞凋亡无影响。100μg/L浓度MGF E肽显著促进MMP-9活性及COL III mRNA表达,但对细胞活力、增殖、MMP-2活性、细胞凋亡、COL I mRNA表达无显著性调控作用。(2)MGF E肽显著促进ACL成纤维细胞的迁移与侵袭,且呈一定程度浓度依赖性;迁移与侵袭过程可能依赖于MMP-2活性。结论 MGF E肽能够促进ACL成纤维细胞胞外基质的合成与降解,进一步提高了细胞的迁移与侵袭,有助于组织损伤修复过程中成纤维细胞向损伤部位迁移,对ACL组织修复再生与术后康复具有积极的调控作用。 展开更多
关键词 生长因子 细胞活 细胞迁移 细胞侵袭 前交叉韧带
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力生长因子在兔膝关节软骨细胞增殖和迁移中的作用 被引量:1
16
作者 赵会 周君琳 +2 位作者 杨铁军 李一汉 郭蒙 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第11期1674-1679,共6页
背景:力生长因子在多种组织中表达,能够促进多种组织细胞的增殖和迁移。目的:观察力生长因子对原代培养兔软骨细胞增殖和迁移的影响,以及内在机制探讨。方法:取北京市维通利华实验动物技术有限公司提供的新西兰大白兔的膝关节软骨,剪碎... 背景:力生长因子在多种组织中表达,能够促进多种组织细胞的增殖和迁移。目的:观察力生长因子对原代培养兔软骨细胞增殖和迁移的影响,以及内在机制探讨。方法:取北京市维通利华实验动物技术有限公司提供的新西兰大白兔的膝关节软骨,剪碎后,采用酶消化法原代分离培养软骨细胞,取处于对数生长期第3代细胞随机分5组,分别以0,1,2,4,8μg/L力生长因子进行干预24,48,72 h。结果和结论:不同质量浓度的力生长因子均能促进兔软骨细胞的增殖和迁移,且效应具有剂量依赖性,当质量浓度为4μg/L时力生长因子促增殖和迁移的效应最大。且随着力生长因子质量浓度逐渐增加,可明显增强兔软骨细胞中转化生长因子β1的表达,刺激Smad2/3的磷酸化。提示力生长因子对原代培养兔软骨细胞具有促增殖和迁移的作用,且具有剂量依赖性,可能是通过激活转化生长因子β1/Smad信号通路得以实现的。 展开更多
关键词 软骨细胞 生长因子 增殖 迁移 转化生长因子β1 成骨细胞 韧带细胞 膝关节软骨 细胞因子 SMAD蛋白质类 转化生长因子 组织工程
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MGF-Ct24E改性聚乳酸的合成、表征及其对成骨细胞增殖的评价 被引量:2
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作者 罗嘉 李玉筱 +1 位作者 王品品 王远亮 《功能材料》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第4期476-479,共4页
力生长因子(MGF)是骨修复重建的一种重要生长因子。以二环己基碳二亚胺为缩合剂,将MGF羧基端E结构域24肽(MGF-Ct24E)共价接枝到丁二胺改性的聚乳酸上(DPLA),制得了新型MGF-Ct24E改性聚乳酸仿生材料(MGF-Ct24E-DPLA)。采用氨基酸分析和... 力生长因子(MGF)是骨修复重建的一种重要生长因子。以二环己基碳二亚胺为缩合剂,将MGF羧基端E结构域24肽(MGF-Ct24E)共价接枝到丁二胺改性的聚乳酸上(DPLA),制得了新型MGF-Ct24E改性聚乳酸仿生材料(MGF-Ct24E-DPLA)。采用氨基酸分析和高效液相色谱对MGF-Ct24E含量进行了定性定量表征,静态水接触角和吸水率测定了MGF-Ct24E-DPLA材料的亲水性,MTT法评价了其对成骨细胞的增殖作用。结果表明,MGF-Ct24E成功引入到DPLA中,接枝效率为24.7%,并且和DPLA相比,MGF-Ct24E-DPLA材料具有更好的亲水性和促进成骨细胞增殖的能力。因此这种新型MGF-Ct24E改性聚乳酸仿生材料有望成为骨组织工程领域中一种卓越的生物材料。 展开更多
关键词 聚乳酸 生长因子 改性 成骨细胞
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基于力生长因子的力生物学骨重建模型 被引量:2
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作者 马宗民 李淑娴 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第24期3888-3893,共6页
背景:力学信号传导是应力与生长关系中研究热点。力生长因子是一种应力敏感因子,力学刺激作用下在成骨细胞中表达,与应力作用对骨代谢的调控有类似的效应。目的:探讨骨重建过程中力学信号的传导,在细胞分子水平揭示应力与生长的关系。方... 背景:力学信号传导是应力与生长关系中研究热点。力生长因子是一种应力敏感因子,力学刺激作用下在成骨细胞中表达,与应力作用对骨代谢的调控有类似的效应。目的:探讨骨重建过程中力学信号的传导,在细胞分子水平揭示应力与生长的关系。方法:建立力生长因子与力学激励关系控制方程、力生长因子对成骨细胞和破骨细胞调控作用控制方程、力生长因子对RANK-RANKL-OPG信号轴调控作用控制方程,进而建立以力生长因子作为介导的骨重建力生物学数学模型,并应用该模型进行了力学刺激下骨重建过程的模拟。结果与结论:(1)废用时,成骨细胞/破骨细胞比值降低,骨平衡为负,骨量减少,骨体积分数降低;(2)过载时,成骨细胞/破骨细胞比值升高,骨平衡为正,骨量增加,骨体积分数增加。模拟结果符合Frost力学调控系统理论;(3)结论:以力生长因子作为力生物学信号的传导的介导,提出力生物学骨重建数学模型,实现了骨重建过程中力生物学信号的转导。 展开更多
关键词 生物 信号传导 成骨细胞 破骨细胞 组织工程 组织构建 骨组织工程 生长因子 骨重建 数学模型 学信号传导 国家自然科学基金项目
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Dystrophin、MGF及M-Cad在难产大鼠模型盆底肌肉中的表达意义研究 被引量:1
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作者 虞琪 丁匀浚毓 +2 位作者 高赛楠 姚微 叶霖 《现代生物医学进展》 CAS 2022年第13期2436-2440,共5页
目的:研究模拟难产大鼠模型盆底肌肉中Dystrophin、MGF及M-Cad的表达,并探讨其表达与压力性尿失禁的相关性。方法:选择未生产过的雌性SD大鼠40只,按照随机数字表法均分为对照组、模型1组、模型2组和模型3组,对照组大鼠正常喂养,模型1组... 目的:研究模拟难产大鼠模型盆底肌肉中Dystrophin、MGF及M-Cad的表达,并探讨其表达与压力性尿失禁的相关性。方法:选择未生产过的雌性SD大鼠40只,按照随机数字表法均分为对照组、模型1组、模型2组和模型3组,对照组大鼠正常喂养,模型1组大鼠行阴道扩张手术,模型2组大鼠切除双侧坐骨神经,模型3组大鼠既行阴道扩张术又切除双侧坐骨神经。喂养1月后,称重后处死各组大鼠,并分离盆底肌肉,称重后通过定量PCR法(qPCR)检测Dystrophin、MGF及M-Cad m RNA的表达。结果:与对照组大鼠相比,难产大鼠模型组(模型1组、模型2组和模型3组)体重和盆底肌肉重量无显著变化(P>0.05),漏尿点压力和最大膀胱容量均显著下降(P<0.05),盆底肌肉Dystrophin、MGF及M-Cad m RNA表达均显著下降(P<0.05)。Pearson相关性分析:大鼠盆底肌肉Dystrophin、MGF及M-Cad m RNA表达水平与漏尿点压力均呈密切正相关(Dystrophin:r=0.725,P=0.002;MGF:r=0.702,P=0.018;M-Cad:r=0.838,P<0.001);鼠盆底肌肉Dystrophin、MGF及M-Cad m RNA表达水平与最大膀胱容量也均呈密切正相关(Dystrophin:r=0.733,P=0.001;MGF:r=0.682,P=0.025;M-Cad:r=0.819,P<0.001)。结论:模拟难产大鼠模型盆底肌肉Dystrophin、MGF及M-Cad的表达降低,并且提示其表达降低可能与压力性尿失禁有关。 展开更多
关键词 难产性大鼠 盆底肌肉 性尿失禁 肌养蛋白 生长因子 M型钙调蛋白
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MGF对人软骨终板干细胞增殖和迁移的影响 被引量:2
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作者 李元靖 刘欢 +1 位作者 樊欣 周跃 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2015年第3期335-342,共8页
力生长因子(mechano growth factor,MGF)在多种组织均有表达,能促进力效应细胞的增殖和迁移。为研究MGF对人软骨终板干细胞(cartilage endplate derived stem cells,CESCs)增殖和迁移的影响,该研究采用CCK-8检测法、Transwell实验、蛋... 力生长因子(mechano growth factor,MGF)在多种组织均有表达,能促进力效应细胞的增殖和迁移。为研究MGF对人软骨终板干细胞(cartilage endplate derived stem cells,CESCs)增殖和迁移的影响,该研究采用CCK-8检测法、Transwell实验、蛋白免疫印迹法(Western blot)分别对CESCs的增殖、迁移以及Erk磷酸化表达水平进行检测。结果显示,MGF能促进CESCs的增殖和迁移,且效应具有剂量依赖性,当浓度为4.5 ng/m L时MGF促增殖和迁移的效应最大(P<0.05)。给予细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,Erk)抑制剂PD98059时,MGF促增殖效应显著下降(P<0.001);给予胰岛素样生长因子-1受体(insulin-like growth factor-1 receptor,IGF-1R)抑制剂PQ401时,MGF促迁移效应也显著下降(P<0.001)。Western blot检测结果显示,给予MGF后,CESCs的Erk磷酸化表达水平显著升高(P<0.001),但IGF-1R抑制剂PQ401能抑制Erk磷酸化的表达(P<0.001)。该研究表明,MGF具有促CESCs增殖和迁移的效应,该效应依赖于Erk的磷酸化表达,且IGF-1R在MGF促迁移的效应中扮演重要角色。 展开更多
关键词 软骨终板干细胞 生长因子 增殖 迁移 ERK IGF-1R
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