血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9、亲环素A与冠心病影响因素及冠状动脉病变的关系 被引量：7

1

作者 潘广杰 李松森 +2 位作者 陈艳 陈绘丽 梁爽 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2018年第16期3862-3864,共3页

目的考察血清前蛋白转化酶枯草溶菌素(PCSK)9、亲环素(Cyp)A与冠心病(CHD)影响因素及冠状动脉病变的关系。方法 106例CHD患者为研究组,同期健康体检志愿者34例为对照组。检测所有受试者外周血的前蛋白转化酶枯草溶菌素(PCSK)9和亲环素(C... 目的考察血清前蛋白转化酶枯草溶菌素(PCSK)9、亲环素(Cyp)A与冠心病(CHD)影响因素及冠状动脉病变的关系。方法 106例CHD患者为研究组,同期健康体检志愿者34例为对照组。检测所有受试者外周血的前蛋白转化酶枯草溶菌素(PCSK)9和亲环素(Cyp)A水平,分析血清PCSK9、CypA与CHD影响因素及冠状动脉病变(冠心病病变范围和狭窄程度)的关系。结果影响CHD的各种因素中,高血压、糖尿病和高血脂者的PCSK9和CypA水平显著高(P<0.05);性别、体重指数、是否吸烟和存在CHD家族史等对PCSK9和CypA水平影响不大(P>0.05);随着冠状动脉病变范围和冠状动脉狭窄程度的增大,血清PCSK9和CypA水平明显增高(P<0.05)。结论血清PCSK9和CyP A水平与高血压、糖尿病和高血脂密切相关,与冠状动脉病变程度呈正相关。 展开更多

关键词 前蛋白转化酶枯草溶菌素(pcsk)9 亲环素(Cyp)A 冠心病 冠状动脉病变

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黑龙江省东部地区汉族人群PCSK9基因第1外显子多态性与脂代谢的相关性 被引量：2

2

作者 赵晓辉 许嘉彬 +1 位作者 王秀艳 王立波 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2020年第9期1823-1827,共5页

目的 研究黑龙江省东部地区汉族人群前蛋白转化酶枯草溶菌素(PCSK)9基因第1外显子多态性与脂代谢的相关性.方法 因心绞痛和(或)运动试验阳性及有冠脉管腔狭窄证据而需入院行冠状动脉造影者220例中,110例冠心病(CHD)者为病例组,110例非CH... 目的 研究黑龙江省东部地区汉族人群前蛋白转化酶枯草溶菌素(PCSK)9基因第1外显子多态性与脂代谢的相关性.方法 因心绞痛和(或)运动试验阳性及有冠脉管腔狭窄证据而需入院行冠状动脉造影者220例中,110例冠心病(CHD)者为病例组,110例非CHD者为对照组,检测PCSK9基因第1外显子基因多态性及血脂水平,并对基因多态性与血脂水平进行相关性分析.结果 共发现c.121C>G、c.299C>T、c.427-428insGCT、A53V、P56S和c.556A>G 6个突变位点,其中在A53V突变位点上发现CC和TC两种基因型,但未发现TT基因型.病例组和对照组各基因型间血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平差异具有统计学意义(P<0.05).病例组中TC基因型血清TG、TC和LDL-C水平均显著高于CC基因型(P<0.05);对照组中TC基因型血清TC水平显著高于CC基因型(P<0.05).结论 PCSK9基因第1外显子在黑龙江省东部地区汉族人群中存在多态性,且与CHD患者脂代谢有关. 展开更多

关键词 前蛋白转化酶枯草溶菌素(pcsk)9 第1外显子 基因多态性 脂代谢

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黑龙江省东部地区汉族人群PCSK9基因第8、9外显子多态性与冠心病的相关性 被引量：2

3

作者 赵晓辉 黄咏 +1 位作者 王秀艳 王立波 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2020年第6期1125-1127,共3页

目的揭示前蛋白转化酶枯草溶菌素(PCSK)9基因第8、9外显子多态性突变位点与冠心病(CHD)的关系。方法选取经冠脉血管造影(CAG)确诊CHD者为CHD组共303例,非CHD者为对照组共233例。收集两组一般资料及临床资料,并记录入院后大生化数据(如... 目的揭示前蛋白转化酶枯草溶菌素(PCSK)9基因第8、9外显子多态性突变位点与冠心病(CHD)的关系。方法选取经冠脉血管造影(CAG)确诊CHD者为CHD组共303例,非CHD者为对照组共233例。收集两组一般资料及临床资料,并记录入院后大生化数据(如血脂、血糖)。采用聚合酶链反应(PCR)对所提取的DNA基因组中PCSK9基因第8、9外显子扩增,测序,确定PCSK9第8、9外显子单核苷酸多态性(SNP)形式及突变频率,揭示其与低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)浓度的关系。结果在黑龙江省东部地区汉族人群中,未发现PCSK9基因第8外显子的突变位点,在第9外显子的筛查中共发现3个突变位点:c.477 T>C、c.604 C>T、c.606 C>T。对照组基因位点c.477 T>C突变患者血清LDL-C浓度水平与非突变者相比无明显变化(P>0.05)。CHD组基因位点c.604 C>T突变患者血清LDL-C浓度水平与非突变患者比较存在明显差异(P<0.05);基因位点c.606 C>T突变患者的血清LDL-C浓度水平与非突变患者相比无明显变化(P>0.05)。结论在黑龙江省东部地区汉族人群PCSK9基因第9外显子的c.604 C>T突变与CHD存在相关性。 展开更多

关键词 前蛋白转化酶枯草溶菌素(pcsk)9 第8外显子 第9外显子 基因多态性 冠心病

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PCSK9致动脉粥样硬化的作用机制研究进展 被引量：1

4

作者 张海娜 王晓晶 +4 位作者 郭振 甘佼弘 崔志琼 林欣 王晔玲 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2018年第3期759-761,共3页

动脉粥样硬化（AS）是众多致死性和致残性血管事件发生的前期病理基础。AS的病理变化主要累及全身大中型肌弹力型动脉,受累动脉病变始于内膜,渐累及动脉中层,先后有多种病变合并存在,使动脉壁增厚变硬,以致管壁失去弹性、管腔缩小.

关键词 前蛋白转化酶枯草溶菌素(pcsk)9 炎症反应 细胞凋亡 动脉粥样硬化

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葱白提取物对高脂血症大鼠SREBP2/PCSK9信号通路和线粒体功能的影响 被引量：1

5

作者 冯云霞 张维丽 +2 位作者 谢沛霖 朱旭 赵晓雯 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期220-225,共6页

目的探讨葱白提取物(FOB)对高脂血症(HLP)大鼠固醇调节元件结合蛋白(SREBP)2/前蛋白转化酶枯草溶菌素(PCSK)9信号通路和线粒体功能的影响。方法脂肪乳灌胃法构建大鼠HLP模型并进行模型鉴定,将大鼠分为:正常组、模型组、FOB低、中、高剂... 目的探讨葱白提取物(FOB)对高脂血症(HLP)大鼠固醇调节元件结合蛋白(SREBP)2/前蛋白转化酶枯草溶菌素(PCSK)9信号通路和线粒体功能的影响。方法脂肪乳灌胃法构建大鼠HLP模型并进行模型鉴定,将大鼠分为:正常组、模型组、FOB低、中、高剂量组、瑞舒伐他汀组。生化方法检测血清脂质含量,苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织形态变化,油红O染色观察脂质沉积情况,实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和Western印迹分别检测低密度脂蛋白受体(LDLR)、PCSK9和SREBP2 mRNA和蛋白表达水平,透射电镜观察肝组织线粒体,流式检测活性氧(ROS)及线粒体膜电位,qPCR检测线粒体DNA(mtDNA)拷贝数、线粒体融合蛋白(mfn)1、mfn2、神经萎缩蛋白(OPA)1、线粒体动力相关蛋白(Drp)1表达水平。结果与模型组比较,FOB能够显著降低血脂水平,减少脂质沉积,修复肝组织损伤,升高LDLR水平,降低PCSK9和SREBP2水平,缓解肝组织线粒体损伤,降低ROS水平,升高线粒体膜电位,升高mtDNA拷贝数、mfn1、mfn2、OPA1水平,降低Drp1蛋白水平。结论FOB能够降低血脂、改善线粒体功能,其机制可能与FOB调控SREBP2/PCSK9信号通路有关。 展开更多

关键词 葱白提取物 高脂血症 固醇调节元件结合蛋白(SREBP)2/前蛋白转化酶枯草溶菌素(pcsk)9信号通路 线粒体功能

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阿利西尤单抗早期应用对急性非ST段抬高型心肌梗死患者PCI术后心血管结局的影响 被引量：11

6

作者 张倩倩 王同 +4 位作者 王丰云 杨雁华 朱银川 赵秋佚 汤建民 《中国急救医学》 CAS CSCD 2022年第9期742-746,共5页

目的研究入院早期及时应用阿利西尤单抗[前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)抑制剂]对急性非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后心血管结局的影响。方法选取2021年1月至2021年10月在郑州大学第二附属医院心血管... 目的研究入院早期及时应用阿利西尤单抗[前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)抑制剂]对急性非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后心血管结局的影响。方法选取2021年1月至2021年10月在郑州大学第二附属医院心血管内科收治的NSTEMI患者97例为研究对象,根据入院早期是否及时应用阿利西尤单抗分为试验组(阿利西尤单抗+他汀,n=47)和对照组(他汀,n=50),记录入组患者入院时年龄、性别、血糖、血脂、肝肾功能、心功能、用药情况等基线资料和罪犯相关血管,以及住院时长、后期复查相关指标结果及术后6个月不良心血管事件(MACE)和临床不良反应事件发生率。所有入组患者入院后均常规应用双联抗血小板药物、他汀(瑞舒他汀或阿托伐他汀)及β-受体阻滞剂等药物,并行PCI治疗。结果与对照组比较,试验组早期应用阿利西尤单抗可以明显降低患者低密脂蛋白胆固醇(LDL-C)、胆固醇(TC)水平,降低炎症指标高敏C-反应蛋白(hs-CRP),减少平均住院天数(P<0.01);并减少随访期间MACE发生率(P=0.02);但临床不良心血管反应事件并未增加(P=0.62)。结论急性NSTEMI患者入院早期及时应用阿利西尤单抗能够迅速使血脂水平下降甚至达标,减轻血管炎性作用,减少短期住院时间和6个月内院外MACE发生率,明显改善患者预后。 展开更多

关键词 急性非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI) 前蛋白转化酶枯草溶菌素9(pcsk9)抑制剂 阿利西尤单抗 经皮冠状动脉介入(PCI) 急性冠脉综合征(ACS)

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急性缺血性脑卒中患者前蛋白转化酶枯草溶菌素9与血脂水平及临床意义

7

作者 胡群亮 田竺 +1 位作者 吴焕成 张盛蕊 《吉林医学》 CAS 2024年第6期1300-1303,共4页

目的:探讨前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)与急性缺血性脑卒中(AIS)患者的血脂水平及与AIS严重程度的相关性。方法:选取天津市北辰医院诊治的200例AIS患者作为AIS组,另选取体检的200例健康者为对照组。收集两组临床资料,检测两组血脂和P... 目的:探讨前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)与急性缺血性脑卒中(AIS)患者的血脂水平及与AIS严重程度的相关性。方法:选取天津市北辰医院诊治的200例AIS患者作为AIS组,另选取体检的200例健康者为对照组。收集两组临床资料,检测两组血脂和PCSK9水平,AIS组根据美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)进行评分,分为轻-中度组(NIHSS评分<15分)和重度组(NIHSS评分≥15分)。使用Pearson相关性分析探讨在AIS组中PCSK9与AIS患者血脂水平、AIS严重程度相关性。结果:AIS组的三酰甘油(TG)、血浆总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、PCSK9水平均高于对照组(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。AIS组患者PCSK9水平与TG、TC、LDL-C、HDL-C均存在相关性(P<0.05)。重度组患者的PCSK9表达水平显著高于轻-中度组(P<0.05)。结论:脑卒中患者多伴随有血脂异常、PCSK9蛋白水平升高,且PCSK9蛋白水平与AIS患者的血脂水平、疾病严重程度存在一定相关性。 展开更多

关键词 急性缺血性脑卒中 前蛋白转化酶枯草溶菌素9(pcsk9) 血脂 严重程度

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应用C-to-G碱基编辑器对PCSK9基因靶向敲除的研究

8

作者 刘惠聪 曹小芳 +3 位作者 万子睿 安莉莎 金孝华 马旭 《中国计划生育学杂志》 2024年第6期1231-1235,1464,共6页

目的:使用C-to-G碱基编辑器(CGBE)Td-CGBE-NG靶向敲除huh-7肝癌细胞系前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)基因,以CBE(AncBE4max)为参照,评价Td-CGBE-NG对该基因的敲除效果。方法:使用引入终止密码子的策略敲除huh-7肝癌细胞系PCSK9基因。... 目的:使用C-to-G碱基编辑器(CGBE)Td-CGBE-NG靶向敲除huh-7肝癌细胞系前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)基因,以CBE(AncBE4max)为参照,评价Td-CGBE-NG对该基因的敲除效果。方法:使用引入终止密码子的策略敲除huh-7肝癌细胞系PCSK9基因。构建碱基编辑器Td-CGBE-NG和AncBE4max,构建重组质粒sg386和sg555,将Td-CGBE-NG和sg386,AncBE4max和sg555分别共转染huh-7细胞,实现c.1447C>G和c.1953C>T的转换,在两位点引入终止密码子S386X(TGA)和Q555X(TAG),使用sanger测序和T载体克隆验证编辑效率;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PCSK9基因mRNA和蛋白表达水平的变化。结果:sanger测序和T载体克隆结果显示,Td-CGBE-NG和AncBE4max的编辑效率分别为c.1447C>G 33%和c.1953C>T 25%;RT-qPCR结果显示,Td-CGBE-NG使PCSK9 mRNA的表达量降低(t=17.29,P<0.0001);Western blot结果表明,两组huh-7细胞蛋白表达量均明显下降(AncBE4max:t=5.57,P<0.01;Td-CGBE-NG:t=4.912,P<0.01)。结论:Td-CGBE-NG可以有效敲除huh-7肝癌细胞系的PCSK9基因,抑制该基因mRNA和蛋白的表达,为后续Td-CGBE-NG的应用奠定基础。 展开更多

关键词 前蛋白转化酶枯草溶菌素9(pcsk9) CRISPR/Cas 碱基编辑 huh-7肝癌细胞系

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47例系统性红斑狼疮患者血清PCSK9水平检测分析及意义 被引量：4

9

作者 方承隆 骆婷婷 +1 位作者 陈小青 林玲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期541-545,共5页

目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)水平并分析与疾病各参数的相关性。方法本研究纳入47例SLE患者及30例年龄、性别匹配的健康对照者,比较两组间传统心血管危险因素的差异,ELISA检测血清PCSK9水平;行... 目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)水平并分析与疾病各参数的相关性。方法本研究纳入47例SLE患者及30例年龄、性别匹配的健康对照者,比较两组间传统心血管危险因素的差异,ELISA检测血清PCSK9水平;行颈动脉彩超测量颈动脉内中膜厚度(c IMT),并根据c IMT将SLE患者分为SLE-AS与SLE-NonAS两个亚组(前者c IMT≥1. 0 mm,后者c IMT <1. 0 mm),并比较两个亚组的致动脉硬化因素及PCSK9水平;应用单因素相关分析方法探讨SLE患者血清PCSK9水平与疾病各参数的相关性。结果 SLE患者及健康对照组在总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白A1(Apo A1)、载脂蛋白B(Apo B)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、空腹血糖(FBG)、体质量指数(BMI)、尿酸(UA)水平等传统心血管病危险因素方面无明显差异;但SLE患者出现c IMT增厚的比例较健康对照组仍显著偏高; SLE患者血清PCSK9水平显著高于健康对照组; SLE患者无论是否有c IMT增厚,其传统心血管病危险因素无显著差异,合并c IMT增厚的SLE患者C反应蛋白(CRP)水平、血清PCSK9水平明显升高; SLE患者血清PCSK9水平与年龄、疾病活动度(SLEDAI)、脂质参数(TC、LDL-C、Apo A1、Apo B、TG、HDL-C)、BMI、UA无显著相关性,仅与CRP水平呈正相关,且这一相关性在女性患者中更为显著。结论 SLE患者血清PCSK9表达水平明显增高;尤其在合并c IMT增厚的患者中,其PCSK9水平更高; PCSK9可能与SLE患者致动脉粥样硬化性炎症有关。 展开更多

关键词 系统性红斑狼疮 前蛋白转化酶枯草溶菌素9(pcsk9) C反应蛋白(CRP)

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敲低前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)抑制人主动脉内皮细胞的内皮间质转化 被引量：2

10

作者 靳天慧 陈亮 +4 位作者 刘叶红 盛瑛 周雨婷 宣诗怡 宗刚军 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1079-1084,共6页

目的以人主动脉内皮细胞(HAEC)为研究对象,探讨敲减前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)对β甘油磷酸、地塞米松、L-抗坏血酸诱导内皮间质转化(EndoMT)的保护作用。方法以(0、10、30、50)mmol/Lβ甘油磷酸联合100 nmol/L地塞米松和50μg/ml... 目的以人主动脉内皮细胞(HAEC)为研究对象,探讨敲减前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)对β甘油磷酸、地塞米松、L-抗坏血酸诱导内皮间质转化(EndoMT)的保护作用。方法以(0、10、30、50)mmol/Lβ甘油磷酸联合100 nmol/L地塞米松和50μg/ml L-抗坏血酸诱导HAEC建立EndoMT模型。采用PCSK9的特异性小干扰RNA(si-PCSK9)转染HAEC,实时荧光定量PCR与Western blot法检测HAEC的PCSK9的mRNA和蛋白表达。将HAEC随机分为空白组、EndoMT组、转染阴性对照小干扰RNA的EndoMT组、转染si-PCSK9的EndoMT组。实时荧光定量PCR检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、成纤维细胞特异蛋白1(FSP1)、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)的mRNA水平,Western blot法检测α-SMA、VE-cadherin的蛋白水平,免疫荧光染色法检测α-SMA的表达。结果30 mmol/Lβ甘油磷酸诱导EndoMT效果最佳,发生EndoMT时,PCSK9的mRNA及蛋白表达上调。而PCSK9敲减后,α-SMA、FSP1的表达下调,VE-cadherin的表达上调。结论敲低PCSK9可抑制HAEC的EndoMT。 展开更多

关键词 内皮间质转化(EndoMT) 前蛋白转化酶枯草溶菌素9(pcsk9) 人主动脉内皮细胞(HAEC)

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PCSK9抑制剂Evolocumab和Alirocumab降低血脂和减少心血管事件的有效性和安全性评价 被引量：2

11

作者 刘金来 李苏华 《循证医学》 CSCD 2015年第6期334-338,共5页

1文献来源研究一：Sabatine MS,Giugliano RP,Wiviott SD,et al.Efficacy and safety of Evolocumab inreducing lipids and cardiovascular events[J].N EnglJ Med,2015,372（16）：1500-1509.研究二：Robinson JG,Farnier M,Krempf M,

关键词 前蛋白转化酶枯草溶菌素9(pcsk9) Evolocumab Alirocumab 低密度脂蛋白胆固醇 心血管事件

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家族性高胆固醇血症的研究进展 被引量：2

12

作者 赵福梅 崔让庄 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2015年第4期1416-1419,共4页

家族性高胆固醇血症(familial hypercholesterolemia,FH)是一种常染色体显性遗传性疾病,基因变异是该病发病的重要原因之一。其临床常见特征主要是血浆低密度胆固醇(LDL-C)升高,皮肤/肌腱黄瘤的出现和早发冠心病(CAD)。FH患者患CAD风险... 家族性高胆固醇血症(familial hypercholesterolemia,FH)是一种常染色体显性遗传性疾病,基因变异是该病发病的重要原因之一。其临床常见特征主要是血浆低密度胆固醇(LDL-C)升高,皮肤/肌腱黄瘤的出现和早发冠心病(CAD)。FH患者患CAD风险极高,因此早期做出正确诊断并同时给予适当治疗控制LDL-C水平是至关重要的,这些成为全世界亟待解决的问题,本文对目前国内外FH致病的变异基因,FH的诊断标准、治疗目标及治疗方法的研究进展做了相关的综述。 展开更多

关键词 家族性高胆固醇血症 载脂蛋白B 低密度脂蛋白受体(LDLR) 人类前蛋白转化酶枯草溶菌素9(pcsk9) 冠心病(CAD)

原文传递

免疫磁珠-高效液相色谱法测定虎杖中抑制前 白蛋白转化酶枯草菌素9成分含量 被引量：1

13

作者 刘兴艳 涂家洁 +2 位作者 朱承华 赵佳菲 张晓芝 《化工设计通讯》 CAS 2021年第6期194-195,198,共3页

基于免疫磁珠结合超高效液相色谱仪对虎杖中白蛋白转化酶枯草菌素9(PCSK9)的成分进行含量测定。首先优化免疫磁珠与PCSK9的孵育时间、孵育温度和提取液比例对PCSK9抑制剂结合程度的影响。在优化条件下,样品经高效液相色谱仪进行快速分析... 基于免疫磁珠结合超高效液相色谱仪对虎杖中白蛋白转化酶枯草菌素9(PCSK9)的成分进行含量测定。首先优化免疫磁珠与PCSK9的孵育时间、孵育温度和提取液比例对PCSK9抑制剂结合程度的影响。在优化条件下,样品经高效液相色谱仪进行快速分析,该方法可靠,精密度良好。结果表明,免疫磁珠-高效液相色谱法种方法在富集虎杖中白蛋白转化酶枯草菌素9(PCSK9)和快速成分分析,灵敏度高、准确性高,可用于检测虎杖中PCSK9的含量。该方法快速、准确,适用于天然药物中PCSK9抑制剂的快速测定。 展开更多

关键词 免疫磁珠-高效液相色谱 虎杖 前蛋白转化酶枯草溶菌素9(pcsk9)

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在真核细胞表达制备重组人前蛋白转化酶枯草溶菌素9

14

作者 贺梦影 张长江 +2 位作者 魏红 段小波 谭文 《生命科学研究》 CAS CSCD 2015年第6期471-478,520,共9页

分别优化、合成和构建了在毕赤酵母和哺乳动物细胞表达人前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)的PCSK9-p PICZαA和PCSK9-pcDNA4.0重组质粒,将重组质粒转化至GS115细胞和转染至中国仓鼠卵巢(c... 分别优化、合成和构建了在毕赤酵母和哺乳动物细胞表达人前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)的PCSK9-p PICZαA和PCSK9-pcDNA4.0重组质粒,将重组质粒转化至GS115细胞和转染至中国仓鼠卵巢(chinese hamster ovary,CHO)细胞,诱导细胞表达包含his标签的PCSK9重组蛋白。通过SDS-PAGE电泳和Western-blot分析两种系统表达重组蛋白的能力,发现GS115表达的重组蛋白相对分子质量大于人天然PCSK9蛋白且容易发生降解,而CHO细胞能够高表达与人天然PCSK9蛋白相对分子质量相同的、稳定的、易于纯化的特异重组蛋白。采用His/Ni2+亲和层析柱纯化重组蛋白,获得纯度达90%以上的PCSK9重组蛋白;用纯化的重组蛋白免疫小鼠制备了高效价特异性PCSK9多克隆抗体。所建立的CHO细胞表达体系PCSK9的平均表达量为5.6 mg/L,为开发PCSK9抑制剂和深入研究PCSK9分子结构和功能奠定了基础。 展开更多

关键词 人前蛋白转化酶枯草溶菌素9(pcsk9) 毕赤酵母表达 CHO细胞表达 重组pcsk9蛋白

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血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9在2型糖尿病合并冠心病患者中的表达分析

15

作者 黄舒洁 陈威 《中国医药指南》 2022年第18期110-112,116,共4页

目的探讨血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9在2型糖尿病合并冠心病患者中的表达及其临床意义分析。方法回顾性分析2019年12月至2021年8月在我院治疗的54例2型糖尿病合并冠心病患者的临床资料,将其作为A组,将同期54例单纯2型糖尿病患者作为B组... 目的探讨血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9在2型糖尿病合并冠心病患者中的表达及其临床意义分析。方法回顾性分析2019年12月至2021年8月在我院治疗的54例2型糖尿病合并冠心病患者的临床资料,将其作为A组,将同期54例单纯2型糖尿病患者作为B组,将同期54例健康体检者作为C组,对比3组的血糖、血脂等各血生化指标,分析血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)与各指标的相关性。结果A组PCSK9、FPG、HbA1c、FINS、TC、TG、LDL-C、hs-CRP、Hcy、IL-6水平均明显高于B组、C组,HDL-C水平明显低于B组、C组,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson分析显示,2型糖尿病合并冠心病患者PCSK9水平与FINS、TC、TG、LDL-C、hs-CRP、Hcy、IL-6呈正相关(r=0.269,0.215,0.207,0.304,0.241,0.273,0.256,P<0.05),与FPG、HbA1c、HDL-C无明显相关性(r=0.128,0.117,-0.102,P>0.05)。结论PCSK9在2型糖尿病合并冠心病患者中呈高表达,与FINS、TC、TG、LDL-C、hs-CRP、Hcy、IL-6呈正相关,可影响脂质代谢,加重炎性反应,还能降解载脂蛋白E受体2和肝细胞表面的LDL-C受体,使LDL-C水平上升,影响TC、TG水平,在T2DM合并冠心病患者的诊断与治疗中具有重要价值。 展开更多

关键词 2型糖尿病合并冠心病 血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9(pcsk9) 血糖 血脂 炎性反应

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PCSK9单抗生物学活性测定方法的建立

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作者 刘春雨 朱磊 +6 位作者 张峰 于传飞 王文波 李萌 陈伟 王兰 高凯 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第15期1715-1719,共5页

目的：建立前蛋白转化酶枯草溶菌素9（PCSK9）单抗的生物学活性检测方法。方法：利用系列稀释的PCSK9单抗以剂量依赖性方式阻断PCSK9与低密度脂蛋白受体（LDLR）结合,增加低密度脂蛋白（LDL）在Hep G2细胞内摄取率,通过BODIPY类荧光染... 目的：建立前蛋白转化酶枯草溶菌素9（PCSK9）单抗的生物学活性检测方法。方法：利用系列稀释的PCSK9单抗以剂量依赖性方式阻断PCSK9与低密度脂蛋白受体（LDLR）结合,增加低密度脂蛋白（LDL）在Hep G2细胞内摄取率,通过BODIPY类荧光染料标记低密度脂蛋白（BODIPY-LDL）检测胞内荧光强度来反映PCSK9单抗的生物学活性,并用PCSK9单抗参比品计算供试品相对百分效价。结果：PCSK9、PCSK9单抗参比品及供试品在该方法中均存在量效关系,且符合四参数方程式：Y=（A-D）/[1＋（X/C）B]＋D。利用该法对4批PCSK9单抗供试品进行检测,每批供试品重复试验3次,PCSK9单抗的相对百分效价的平均值在94.25%~110.77%之间,变异系数均小于15%。结论：该方法灵敏度高、重复性好、结果准确,可作为PCSK9单抗生物学活性测定的常规检测方法。 展开更多

关键词 单克隆抗体 前蛋白转化酶枯草溶菌素9(pcsk9) 低密度脂蛋白(LDL) 低密度脂蛋白受体(LDLR) 生物学活性 荧光染色

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PCSK9/NARC-1:动脉粥样硬化干预的新靶点? 被引量：1

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作者 姜志胜 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期505-509,共5页

PCSK9是一个新发现不久的与脂质代谢调节密切相关的基因。目前对其分子结构、分布、基因突变及表达调节和通过调节肝脏低密度脂蛋白受体的降解等功能特性有了一定的了解。但是由于对PCSK9作用底物目前缺乏系统的研究,使得对其功能研究... PCSK9是一个新发现不久的与脂质代谢调节密切相关的基因。目前对其分子结构、分布、基因突变及表达调节和通过调节肝脏低密度脂蛋白受体的降解等功能特性有了一定的了解。但是由于对PCSK9作用底物目前缺乏系统的研究,使得对其功能研究受到了局限。但是有一点可以肯定的是,针对PCSK9的药物研发已经且必将是动脉粥样硬化防治领域的一个新突破。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 前蛋白转化酶枯草溶菌素9基因(pcsk9) 神经细胞凋亡调节转化酶-1(NARC-1) 低密度脂蛋白受体 药物干预 靶点

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PCSK9基因多态性对冠心病患者使用瑞舒伐他汀调脂效果的影响 被引量：1

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作者 徐玲霞 李峰 +4 位作者 肖建强 师干伟 俞磊 李丽 蔡高军 《现代药物与临床》 CAS 2019年第12期3782-3785,共4页

目的探讨前蛋白转化酶枯草杆菌溶菌素-9(PCSK9)基因E670G多态性是否影响冠心病患者瑞舒伐他汀调脂疗效。方法选取2012年9月-2017年7月在江苏大学附属武进医院治疗的134名冠心病患者,口服瑞舒伐他汀钙片10 mg,每晚1次,疗程1个月。采用PCR... 目的探讨前蛋白转化酶枯草杆菌溶菌素-9(PCSK9)基因E670G多态性是否影响冠心病患者瑞舒伐他汀调脂疗效。方法选取2012年9月-2017年7月在江苏大学附属武进医院治疗的134名冠心病患者,口服瑞舒伐他汀钙片10 mg,每晚1次,疗程1个月。采用PCR-LDR法检测PCSK9 E670G基因多态性,比较服药前后的血脂的变化情况。结果共134名冠心病患者完成血脂随访。治疗后,患者总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平均明显下降,而三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平无明显影响。134例患者中检出AA基因型121例,AG基因型13例。不同基因型服药前后的血脂变化情况与总体相似;但是不同基因型之间,瑞舒伐他汀的调脂疗效无明显差异。结论 PCSK9E670G基因多态性可能不影响瑞舒伐他汀的调脂疗效。 展开更多

关键词 冠心病 前蛋白转化酶枯草杆菌溶菌素-9(pcsk9) 瑞舒伐他汀 血脂

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