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PSMAe/p特异性驱动shRNA靶向干扰前列腺癌LNCap细胞的研究
1
作者
王文滪
刘冉录
+2 位作者
徐勇
张志宏
鞠培泉
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第20期1239-1243,共5页
目的:探讨前列腺特异性膜抗原增强子/启动子(PSMAe/p)驱动短发夹RNA(shRNA)靶向干扰前列腺癌细胞的特异性。方法:运用RNA干扰技术,以转铁蛋白-聚乙二醇-聚乙烯亚胺(Tf-PEG-PEI)作为基因转移载体,以前列腺癌LNCap细胞为研究对象,并以前...
目的:探讨前列腺特异性膜抗原增强子/启动子(PSMAe/p)驱动短发夹RNA(shRNA)靶向干扰前列腺癌细胞的特异性。方法:运用RNA干扰技术,以转铁蛋白-聚乙二醇-聚乙烯亚胺(Tf-PEG-PEI)作为基因转移载体,以前列腺癌LNCap细胞为研究对象,并以前列腺癌PC-3细胞、膀胱癌T24细胞及人胚肾HEK293细胞做为对照,将外源增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因及以PSMAe/p为启动序列靶向EGFP的干扰质粒转入培养细胞,以实时定量PCR(qRT-PCR)及Western blot分别检测EGFP基因及蛋白在4种细胞各组中的表达情况,研究PSMAe/p驱动shRNA靶向干扰前列腺癌细胞的特异性。结果:在前列腺癌LNCap细胞组中,与单独转入EGFP基因(pEGFP-C1)的细胞组(A组)及转入EGFP基因(pEGFP-C1)+空载体质粒组(pPSMAe/p-UPRT)(C组)相比,转入EGFP基因(pEGFP-C1)及干扰质粒[pPSMAe/p-shEGFP-poIy(A)]组(B组),EGFP基因表达及蛋白表达水平下调,分别与对照组(A组、C组)相比差异具有统计学差异(P<0.05),而转入EGFP基因(pEGFP-C1)的细胞组(A组)和转入EGFP基因(pEGFP-C1)+空载体质粒组pPSMAe/p-UPRT)(C组)间比较差异无统计学意义(P>0.05);而在前列腺癌PC-3细胞、膀胱癌T24细胞及人胚肾HEK293细胞中EGFP基因及蛋白表达水平在实验组与对照组、对照组间比较差异无统计学意义(p>0.05)。结论:PSMAe/p驱动shRNA具有细胞特异性,其可驱动特异基因片段在前列腺癌LNCap细胞中表达,从而实现基因治疗的细胞特异性,可作为前列腺癌基因治疗的靶向策略之一。
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关键词
前列腺癌
基因治疗
rna
干扰
细胞
特异性
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题名
PSMAe/p特异性驱动shRNA靶向干扰前列腺癌LNCap细胞的研究
1
作者
王文滪
刘冉录
徐勇
张志宏
鞠培泉
机构
山西省阳泉煤业集团总医院
天津医科大学第二医院泌尿外科天津市泌尿外科研究所
出处
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第20期1239-1243,共5页
基金
国家自然科学基金(编号:30800226)
天津市应用基础及前沿技术研究计划基金(编号:09JCYBJC10000)资助~~
文摘
目的:探讨前列腺特异性膜抗原增强子/启动子(PSMAe/p)驱动短发夹RNA(shRNA)靶向干扰前列腺癌细胞的特异性。方法:运用RNA干扰技术,以转铁蛋白-聚乙二醇-聚乙烯亚胺(Tf-PEG-PEI)作为基因转移载体,以前列腺癌LNCap细胞为研究对象,并以前列腺癌PC-3细胞、膀胱癌T24细胞及人胚肾HEK293细胞做为对照,将外源增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因及以PSMAe/p为启动序列靶向EGFP的干扰质粒转入培养细胞,以实时定量PCR(qRT-PCR)及Western blot分别检测EGFP基因及蛋白在4种细胞各组中的表达情况,研究PSMAe/p驱动shRNA靶向干扰前列腺癌细胞的特异性。结果:在前列腺癌LNCap细胞组中,与单独转入EGFP基因(pEGFP-C1)的细胞组(A组)及转入EGFP基因(pEGFP-C1)+空载体质粒组(pPSMAe/p-UPRT)(C组)相比,转入EGFP基因(pEGFP-C1)及干扰质粒[pPSMAe/p-shEGFP-poIy(A)]组(B组),EGFP基因表达及蛋白表达水平下调,分别与对照组(A组、C组)相比差异具有统计学差异(P<0.05),而转入EGFP基因(pEGFP-C1)的细胞组(A组)和转入EGFP基因(pEGFP-C1)+空载体质粒组pPSMAe/p-UPRT)(C组)间比较差异无统计学意义(P>0.05);而在前列腺癌PC-3细胞、膀胱癌T24细胞及人胚肾HEK293细胞中EGFP基因及蛋白表达水平在实验组与对照组、对照组间比较差异无统计学意义(p>0.05)。结论:PSMAe/p驱动shRNA具有细胞特异性,其可驱动特异基因片段在前列腺癌LNCap细胞中表达,从而实现基因治疗的细胞特异性,可作为前列腺癌基因治疗的靶向策略之一。
关键词
前列腺癌
基因治疗
rna
干扰
细胞
特异性
Keywords
Prostate cancer
Gene therapy
rna
interference
Cellular specificity
分类号
R737.25 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
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1
PSMAe/p特异性驱动shRNA靶向干扰前列腺癌LNCap细胞的研究
王文滪
刘冉录
徐勇
张志宏
鞠培泉
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2011
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