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大黄素通过BMP-9途径促进前体成骨细胞的分化 被引量：4
1
作者 陈小静 胡燕 +1 位作者 张爽 高艳虹 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期781-787,共7页
目的 研究大黄素对前体成骨细胞MC3T3-E1增殖与分化的影响及其作用机制。方法 采用不同浓度（0.05、0.1、0.5、2.0和5.0 μmol/L）大黄素处理MC3T3-E1细胞（给药组），以不加大黄素为对照组。分别采用MTT法检测细胞的增殖率；对硝基苯... 目的 研究大黄素对前体成骨细胞MC3T3-E1增殖与分化的影响及其作用机制。方法 采用不同浓度（0.05、0.1、0.5、2.0和5.0 μmol/L）大黄素处理MC3T3-E1细胞（给药组），以不加大黄素为对照组。分别采用MTT法检测细胞的增殖率；对硝基苯基磷酸二钠（PNPP）法定量检测碱性磷酸酶（ALP）活性；茜素红染色观察矿化结节数目；RT-PCR法检测骨形态发生蛋白（BMPs）途径相关信号分子的表达。采用BMPs抑制剂（Noggin）处理细胞后检测ALP活性，观察BMP-9在大黄素促成骨分化中的作用。结果 大黄素对MC3T3-E1细胞的增殖无影响，大黄素浓度为0.5~5.0 μmol/L时可促进细胞ALP表达及矿化结节形成，其中浓度为5 μmol/L时效果最显著。大黄素可增强细胞BMP-9的表达，与BMP-9信号途径相关的上下游信号分子mRNA的表达亦有相应改变；Noggin预处理后，大黄素促成骨分化的功能受到明显抑制。结论 大黄素可通过激活BMP-9信号通路促进前体成骨细胞的分化。 展开更多
关键词 大黄素 前体成骨细胞 分化 骨形态发生蛋白9
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聚丙烯酸/琼脂糖三维培养构建细胞球的方法 被引量：4
2
作者 何云影 李玲婕 +3 位作者 张舒淇 李雨舟 杨生 季平 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第4期553-559,共7页
背景:细胞球三维培养模型在组织工程领域应用前景广泛,但使用商品化超低吸附培养板进行细胞球培养的实验成本较高,因此需探寻一种细胞球成形的替代策略,推动细胞球在相关研究领域的应用。目的:采用琼脂糖和聚丙烯酸模具,并利用层层自组... 背景:细胞球三维培养模型在组织工程领域应用前景广泛,但使用商品化超低吸附培养板进行细胞球培养的实验成本较高,因此需探寻一种细胞球成形的替代策略,推动细胞球在相关研究领域的应用。目的:采用琼脂糖和聚丙烯酸模具,并利用层层自组装技术构建细胞球三维培养模型,部分模拟细胞体内生存的微环境。方法:体外培养小鼠前体成骨细胞,依次使用明胶与海藻酸钠对小鼠前体成骨细胞进行层层自组装处理(层层自组装-小鼠前体成骨细胞),同时分别制备明胶包裹与海藻酸钠包裹的小鼠前体成骨细胞。分别制备琼脂糖凝胶涂层培养板与琼脂糖凝胶微孔板,观察上述不同处理的细胞在两种培养板中的成球效果,采用Live/Dead染色法检测细胞球的活性,采用碱性磷酸酶染色法、RT-PCR实验检测细胞球的成骨能力。结果与结论:(1)光学显微镜下可见,在琼脂糖凝胶涂层孔板中,未经处理与经3种涂层处理的小鼠前体成骨细胞均未成球;在琼脂糖凝胶微孔板中,未经处理与层层自组装处理的小鼠前体成骨细胞形成了理想的细胞球,其中层层自组装-小鼠前体成骨细胞球的直径大于未经处理小鼠前体成骨细胞球(P <0.05);(2)Live/Dead染色显示,层层自组装-小鼠前体成骨细胞球内的细胞活性高于未经处理小鼠前体成骨细胞球(P <0.05);(3)层层自组装-小鼠前体成骨细胞球的碱性磷酸酶活性高于未经处理小鼠前体成骨细胞球(P <0.05),Ⅰ型胶原和Osterix基因表达高于未经处理小鼠前体成骨细胞球(P <0.05),两组Runx2基因表达比较差异无显著性意义(P> 0.05);(4)结果表明,采用琼脂糖凝胶结合层层自组装技术成功建立了细胞球三维培养模型,此方法便捷、经济、高效且细胞活性良好,保留了细胞成骨分化能力,在骨组织工程和再生医学领域具有潜在应用价值。 展开更多
关键词 细胞球 三维培养 琼脂糖 小鼠前体成骨细胞 层层自组装 细胞活性 骨组织工程
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