目的基于网络药理学方法探究刺五加总苷抗疲劳的潜在作用机制。方法以刺五加总苷中7种主要活性成分为研究对象,利用Swiss Target Prediction网络平台预测其作用靶点;通过GeneCards、OMIM、DiGseE数据库获取与疲劳有关的靶标,借助Cytosca...目的基于网络药理学方法探究刺五加总苷抗疲劳的潜在作用机制。方法以刺五加总苷中7种主要活性成分为研究对象,利用Swiss Target Prediction网络平台预测其作用靶点;通过GeneCards、OMIM、DiGseE数据库获取与疲劳有关的靶标,借助Cytoscape 3.7.2软件构建“活性成分-抗疲劳靶点”网络图,并通过度值筛选核心成分;使用String平台进行蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)分析,结合Cytoscape 3.7.2软件构建PPI网络图,通过度值、节点紧密度、节点介度筛选关键靶点,并利用DisGeNET数据库对靶点的类型进行归属;使用AutoDock vina软件对核心成分与关键靶点进行分子对接;采用DAVID数据库对刺五加总苷抗疲劳的作用靶点进行基因本体(gene ontology,GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析。结果获得刺五加总苷中7种主要活性成分包括刺五加苷A、刺五加苷B、刺五加苷B1、刺五加苷C、刺五加苷D、刺五加苷E和芝麻素,预测得到抗疲劳靶点83个,筛选出核心成分3个,包括刺五加苷B、刺五加苷B1、刺五加苷C,关键靶点4个,包括热休克蛋白90α家族A级成员1(heat shock protein 90αfamily class A member 1,HSP90AA1)、信号传导及转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9);分子对接结果显示,核心成分与关键靶点的结合能力与三磷酸腺苷二钠(ATP-2Na)相近;基因富集分析得到GO功能条目250个(P<0.05),通路36条(P<0.05);网络药理学分析显示,刺五加总苷主要通过药物反应、细胞增殖的正调控、缺氧反应等生物过程,以及调节缺氧诱导因子1(hypoxia-inducible factor 1,HIF-1)、磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)-蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、胰岛素信展开更多
目的:建立 HPLC 法同时测定刺五加苷 B 和刺五加苷 E 含量的方法,并对刺五加不同部位的刺五加苷 B 和刺五加苷 E进行含量测定,为合理开发、利用刺五加资源提供理论依据。方法:采用 Nucleosil C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以...目的:建立 HPLC 法同时测定刺五加苷 B 和刺五加苷 E 含量的方法,并对刺五加不同部位的刺五加苷 B 和刺五加苷 E进行含量测定,为合理开发、利用刺五加资源提供理论依据。方法:采用 Nucleosil C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱(0～8 min:12%B;8～20 min:12%B→18%B;20～25 min:18%B;25 min:12%%B),流速0.8 mL·min^(-1),检测波长210 nm。结果:刺五加苷 B 在茎干中含量最高,叶中最低;刺五加苷 E 在根中含量最高,花中含量最低。除叶以外,其他各部位中刺五加苷 E 的含量均低于刺五加苷 B。结论:本方法简便,重复性好,可作为刺五加药材的质量控制方法,也为合理利用刺五加这一资源提供依据。展开更多
目的:建立大鼠血浆中刺五加苷 E 和刺五加苷 B 的 RP-HPLC 分析方法,并对这2种成分在大鼠体内过程特性进行分析研究。方法:用乙腈沉淀生物样品中的蛋白质,同时又将生物样品中的刺五加苷 B 和苷 E 提取出来,然后用固相萃取法分离提取物,...目的:建立大鼠血浆中刺五加苷 E 和刺五加苷 B 的 RP-HPLC 分析方法,并对这2种成分在大鼠体内过程特性进行分析研究。方法:用乙腈沉淀生物样品中的蛋白质,同时又将生物样品中的刺五加苷 B 和苷 E 提取出来,然后用固相萃取法分离提取物,用60%甲醇将刺五加苷 B 和苷 E 从固相萃取小柱洗脱下来,用高效液相色谱法提取出来测定,色谱柱为 KromasilODS(4.6mm×250mm,5pan),柱温25℃,水-乙腈梯度流动相(0→15min,90:10→80:20;15→25min,80:20→50:50),流速0.8mL·min^(-1),一次进样,分别在220nm和206nm 波长下检测刺五加苷 E 和苷 B。结果:Wister 大鼠一次股静脉给药后血药浓度时间曲线呈三室模型,刺五加苷 E 和苷 B 的消除半衰期 t_(1/2)分别为4.66和2.49h。在主要组织中的分布特点是:刺五加苷 E 在血液、肾脏、心脏、肝脏和脾脏中都有分布,刺五加苷 B 在血液、肾脏、心脏、肝脏中都有分布,在脾脏中没有分布,刺五加苷 E 和苷 B 主要由肝、肾代谢、排泄。结论:本法可用于刺五加苷 E 和刺五加苷 B 体内过程的研究。样品直接用固相萃取小柱处理,可消除内源性成分干扰。展开更多
文摘目的基于网络药理学方法探究刺五加总苷抗疲劳的潜在作用机制。方法以刺五加总苷中7种主要活性成分为研究对象,利用Swiss Target Prediction网络平台预测其作用靶点;通过GeneCards、OMIM、DiGseE数据库获取与疲劳有关的靶标,借助Cytoscape 3.7.2软件构建“活性成分-抗疲劳靶点”网络图,并通过度值筛选核心成分;使用String平台进行蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)分析,结合Cytoscape 3.7.2软件构建PPI网络图,通过度值、节点紧密度、节点介度筛选关键靶点,并利用DisGeNET数据库对靶点的类型进行归属;使用AutoDock vina软件对核心成分与关键靶点进行分子对接;采用DAVID数据库对刺五加总苷抗疲劳的作用靶点进行基因本体(gene ontology,GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析。结果获得刺五加总苷中7种主要活性成分包括刺五加苷A、刺五加苷B、刺五加苷B1、刺五加苷C、刺五加苷D、刺五加苷E和芝麻素,预测得到抗疲劳靶点83个,筛选出核心成分3个,包括刺五加苷B、刺五加苷B1、刺五加苷C,关键靶点4个,包括热休克蛋白90α家族A级成员1(heat shock protein 90αfamily class A member 1,HSP90AA1)、信号传导及转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9);分子对接结果显示,核心成分与关键靶点的结合能力与三磷酸腺苷二钠(ATP-2Na)相近;基因富集分析得到GO功能条目250个(P<0.05),通路36条(P<0.05);网络药理学分析显示,刺五加总苷主要通过药物反应、细胞增殖的正调控、缺氧反应等生物过程,以及调节缺氧诱导因子1(hypoxia-inducible factor 1,HIF-1)、磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)-蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、胰岛素信
文摘目的:建立 HPLC 法同时测定刺五加苷 B 和刺五加苷 E 含量的方法,并对刺五加不同部位的刺五加苷 B 和刺五加苷 E进行含量测定,为合理开发、利用刺五加资源提供理论依据。方法:采用 Nucleosil C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱(0～8 min:12%B;8～20 min:12%B→18%B;20～25 min:18%B;25 min:12%%B),流速0.8 mL·min^(-1),检测波长210 nm。结果:刺五加苷 B 在茎干中含量最高,叶中最低;刺五加苷 E 在根中含量最高,花中含量最低。除叶以外,其他各部位中刺五加苷 E 的含量均低于刺五加苷 B。结论:本方法简便,重复性好,可作为刺五加药材的质量控制方法,也为合理利用刺五加这一资源提供依据。
文摘目的:建立大鼠血浆中刺五加苷 E 和刺五加苷 B 的 RP-HPLC 分析方法,并对这2种成分在大鼠体内过程特性进行分析研究。方法:用乙腈沉淀生物样品中的蛋白质,同时又将生物样品中的刺五加苷 B 和苷 E 提取出来,然后用固相萃取法分离提取物,用60%甲醇将刺五加苷 B 和苷 E 从固相萃取小柱洗脱下来,用高效液相色谱法提取出来测定,色谱柱为 KromasilODS(4.6mm×250mm,5pan),柱温25℃,水-乙腈梯度流动相(0→15min,90:10→80:20;15→25min,80:20→50:50),流速0.8mL·min^(-1),一次进样,分别在220nm和206nm 波长下检测刺五加苷 E 和苷 B。结果:Wister 大鼠一次股静脉给药后血药浓度时间曲线呈三室模型,刺五加苷 E 和苷 B 的消除半衰期 t_(1/2)分别为4.66和2.49h。在主要组织中的分布特点是:刺五加苷 E 在血液、肾脏、心脏、肝脏和脾脏中都有分布,刺五加苷 B 在血液、肾脏、心脏、肝脏中都有分布,在脾脏中没有分布,刺五加苷 E 和苷 B 主要由肝、肾代谢、排泄。结论:本法可用于刺五加苷 E 和刺五加苷 B 体内过程的研究。样品直接用固相萃取小柱处理,可消除内源性成分干扰。
