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生防真菌寡雄腐霉原生质体的制备及再生 被引量:7
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作者 彭轶楠 王沛雅 +4 位作者 巩晓芳 祝英 杨晖 王治业 周剑平 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期679-690,共12页
寡雄腐霉Pythium oligandrum是一种对动、植物和环境无害,兼具杀菌和增产效果的生防真菌。本研究以0.8mol/L甘露醇与25mmol/L CaCl_2和10mmol/L Tris-HCl作为渗透压稳定剂,使寡雄腐霉菌丝体在含有裂解酶、纤维素酶、破壁酶的复合酶系中... 寡雄腐霉Pythium oligandrum是一种对动、植物和环境无害,兼具杀菌和增产效果的生防真菌。本研究以0.8mol/L甘露醇与25mmol/L CaCl_2和10mmol/L Tris-HCl作为渗透压稳定剂,使寡雄腐霉菌丝体在含有裂解酶、纤维素酶、破壁酶的复合酶系中酶解得到其原生质体。此原生质体通过液体振荡培养的途径恢复再生1d后涂于平板上可生长为成熟菌体。本研究所述方法制备得到的寡雄腐霉原生质体数量超过1×10~9CFU/m L,活性超过80%;通过液体培养再生途径使得寡雄腐霉原生质体再生率达32.9%。此方法操作简便,稳定性好,获得的寡雄腐霉原生质体品质高、数量多,完全能够满足后期基因遗传转化、细胞融合培养等研究应用。 展开更多
关键词 寡雄腐霉 生防真菌 原生质体 制备再生
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产苦马豆素疯草内生真菌Undifilum oxytropis原生质体的制备和再生 被引量:3
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作者 张蕾蕾 余永涛 +2 位作者 何生虎 赵清梅 葛松 《动物医学进展》 北大核心 2015年第2期53-58,共6页
以产苦马豆素内生真菌Undifilum oxytropis NX-FEL001为供试菌株,研究了培养方式、菌龄、酶解时间和酶解温度等,对U.oxytropis原生质体制备和再生的影响。结果表明,U.oxytropis菌丝在质量分数为10g/L纤维素酶+10g/L蜗牛酶+1g/L溶壁酶组... 以产苦马豆素内生真菌Undifilum oxytropis NX-FEL001为供试菌株,研究了培养方式、菌龄、酶解时间和酶解温度等,对U.oxytropis原生质体制备和再生的影响。结果表明,U.oxytropis菌丝在质量分数为10g/L纤维素酶+10g/L蜗牛酶+1g/L溶壁酶组成的复合酶溶液,35℃恒温,80r/min振荡孵育3h左右,原生质体释放量最高;原生质体在YCM培养基上,22℃培养9d可以再生形成菌落,培养15d其再生率可达8.5%;原生质体在YCM培养基上再生后其菌落颜色与野生型U.oxytropis不一致,呈现白色;菌丝形态与野生型U.oxytropis相一致,经检测再生后菌丝仍然能够产生苦马豆素。U.oxytropis原生质体的制备,将为进行疯草内生真菌的遗传转化和基因操作研究提供重要工具,为进一步开展疯草内生真菌合成苦马豆素的分子调控机制奠定了基础。 展开更多
关键词 苦马豆素 Undifilum OXYTROPIS 原生质体 制备再生
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酿酒酵母W5原生质体制备及再生条件的初步研究 被引量:1
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作者 孙红兵 宋刚 +1 位作者 平文祥 葛菁萍 《黑龙江大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2010年第3期386-390,共5页
对影响酿酒酵母W5制备与再生的一系列因素做了初步的研究,确定了原生质体制备与再生的最佳条件:菌龄为12h,脱壁预处理剂作用20min,在30℃,pH为偏酸或者偏碱的条件下,选用2%(m/v)的蜗牛酶用10mL试管摇床温育15min;渗透压稳定剂采用17%(m... 对影响酿酒酵母W5制备与再生的一系列因素做了初步的研究,确定了原生质体制备与再生的最佳条件:菌龄为12h,脱壁预处理剂作用20min,在30℃,pH为偏酸或者偏碱的条件下,选用2%(m/v)的蜗牛酶用10mL试管摇床温育15min;渗透压稳定剂采用17%(m/v)蔗糖,原生质体制备率和再生率可达到95.11%和14.66%。 展开更多
关键词 酿酒酵母W5 原生质体 制备再生
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