目的:建立一种获得高质量、数量多的原代CD4^+T细胞的有效可靠的方法。方法:依次采用密度梯度离心(procell density Centrifugation)和免疫磁珠分选法从SD大鼠新鲜脾脏中分选出CD4^+T细胞,CD4^+T细胞生长状况及特点采用倒置相差显微镜...目的:建立一种获得高质量、数量多的原代CD4^+T细胞的有效可靠的方法。方法:依次采用密度梯度离心(procell density Centrifugation)和免疫磁珠分选法从SD大鼠新鲜脾脏中分选出CD4^+T细胞,CD4^+T细胞生长状况及特点采用倒置相差显微镜观察、提取细胞的纯度以流式细胞术鉴定。结果:流式细胞术鉴别CD4^+T细胞纯度为96%,其中(CD4^+T+CD62 L双标)初始CD4^+T细胞纯度为60. 7%,与密度梯度离心收集的单核细胞(CD4^+T细胞纯度为0. 2%)比较,差异均有统计学意义(P <0. 01)。通过形态学观察从原代SD大鼠脾脏中分离的CD4^+T细胞,表现为透明圆颗粒状悬浮生长,48h内活性最高。结论:采用密度梯度离心分离,免疫磁珠分选纯化原代大鼠初始CD4^+T细胞具有数量多、活性好、纯度高、生物学特性稳定的优点,可用于相关研究。展开更多
目的探讨中药复方提取物湘A-1（Hu Nan A-1,HNA-1）对猴免疫缺陷病毒（Simian immunodeficiency virus,SIV）慢性感染中国恒河猴胸腺输出功能的影响。方法采用SIVmac239病毒液对8只中国恒河猴进行感染16~21个月,随机分为对照组和治疗组...目的探讨中药复方提取物湘A-1（Hu Nan A-1,HNA-1）对猴免疫缺陷病毒（Simian immunodeficiency virus,SIV）慢性感染中国恒河猴胸腺输出功能的影响。方法采用SIVmac239病毒液对8只中国恒河猴进行感染16~21个月,随机分为对照组和治疗组,每组4只。治疗组给予HNA-1灌胃20 m L治疗,每日1次;对照组给予等体积生理盐水灌胃。两组给药2个月。观察两组一般情况、体重,采用实时荧光定量PCR方法检测两组血浆病毒载量,采用流式细胞法检测CD4比例及数量、CD4的初始亚群,实时荧光定量PCR法检测T细胞受体DNA重排删除环（TREC）,常规HE染色后观察胸腺组织的病理情况。分析胸腺组织病变情况与CD4细胞数、初始型CD4细胞数及TREC的关联性。结果治疗后两组体重、病毒载量、CD4比例绝对数比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。对照组TREC改变倍数明显呈下降趋势,治疗组总体呈明显的上升趋势,两组间差异有统计学意义（P〈0.05）。两组动物的胸腺组织均可见结构破坏、粉红色无结构样物质填充、结缔组织增多、细胞密度降低、排列紊乱等病理改变,未见明显区别。TREC含量与初始型CD4去除极值后,呈正相关（r=0.926,P=0.001）;而初始型CD4数量与CD4数量呈正相关（r=0.961,P=0.005）。结论检测TREC含量来测定新胸腺迁出细胞数量可作为评价胸腺输出功能的检测方法,且HNA-1可增加胸腺的输出功能,而TREC、初始型CD4数量及胸腺组织病理情况之间存在一定相关关系,在感染晚期尤为明显。展开更多
文摘目的探讨中药复方提取物湘A-1（Hu Nan A-1,HNA-1）对猴免疫缺陷病毒（Simian immunodeficiency virus,SIV）慢性感染中国恒河猴胸腺输出功能的影响。方法采用SIVmac239病毒液对8只中国恒河猴进行感染16~21个月,随机分为对照组和治疗组,每组4只。治疗组给予HNA-1灌胃20 m L治疗,每日1次;对照组给予等体积生理盐水灌胃。两组给药2个月。观察两组一般情况、体重,采用实时荧光定量PCR方法检测两组血浆病毒载量,采用流式细胞法检测CD4比例及数量、CD4的初始亚群,实时荧光定量PCR法检测T细胞受体DNA重排删除环（TREC）,常规HE染色后观察胸腺组织的病理情况。分析胸腺组织病变情况与CD4细胞数、初始型CD4细胞数及TREC的关联性。结果治疗后两组体重、病毒载量、CD4比例绝对数比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。对照组TREC改变倍数明显呈下降趋势,治疗组总体呈明显的上升趋势,两组间差异有统计学意义（P〈0.05）。两组动物的胸腺组织均可见结构破坏、粉红色无结构样物质填充、结缔组织增多、细胞密度降低、排列紊乱等病理改变,未见明显区别。TREC含量与初始型CD4去除极值后,呈正相关（r=0.926,P=0.001）;而初始型CD4数量与CD4数量呈正相关（r=0.961,P=0.005）。结论检测TREC含量来测定新胸腺迁出细胞数量可作为评价胸腺输出功能的检测方法,且HNA-1可增加胸腺的输出功能,而TREC、初始型CD4数量及胸腺组织病理情况之间存在一定相关关系,在感染晚期尤为明显。
