白念珠菌致病相关的水解酶 被引量：8

1

作者 马虎 崔凡 林昭春 《中国真菌学杂志》 2012年第4期247-251,共5页

白念珠菌是一种重要的人类致病性真菌,其致病机制与多种因素有关。水解酶是白念珠菌最重要的毒力因子之一,在其入侵宿主过程中起关键作用。白念珠菌水解酶包括分泌型天冬氨酸蛋白酶、磷脂酶和脂肪酶,介导白念珠菌的表型转换、对宿主组... 白念珠菌是一种重要的人类致病性真菌,其致病机制与多种因素有关。水解酶是白念珠菌最重要的毒力因子之一,在其入侵宿主过程中起关键作用。白念珠菌水解酶包括分泌型天冬氨酸蛋白酶、磷脂酶和脂肪酶,介导白念珠菌的表型转换、对宿主组织的黏附及对宿主免疫系统的干预,使其能够入侵宿主组织和逃避宿主的免疫防御机制。该文我们综述了白念珠菌水解酶的生物学属性和致病机制的研究进展。 展开更多

关键词 白念珠菌 分泌型天冬氨酸蛋白酶 磷脂酶 脂肪酶

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与白念珠菌黏附和侵入相关的毒力因子研究进展 被引量：6

2

作者 廉翠红 刘维达 《国外医学（皮肤性病学分册）》 2004年第5期323-325,共3页

白念珠菌是一种重要的人类致病真菌同时又能与人类共栖生存 ,有关其毒力因子的研究人们已经作了大量的工作。白念珠菌的毒力因子包括黏附因子、利于侵入的酶、酵母相和菌丝相之间的转换及表型转换等。

关键词 白念珠菌 毒力因子 黏附素 分泌型天冬氨酸蛋白酶 细菌黏附 细菌侵入

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近平滑念珠菌临床分离菌株毒力因子差异表达研究

3

作者 瞿玉洁 李婷婷 +4 位作者 李茂媛 胡方芳 金婷婷 杨斌 罗振华 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期16-24,共9页

目的比较近平滑念珠菌临床分离株毒力相关因子天冬氨酸蛋白酶和生物膜形成及其基因表达的差异。方法采用基因测序及微卫星分型方法,对临床真菌感染患者分离的近平滑念珠菌进行鉴定,检测各菌株产生分泌型天冬氨酸蛋白酶及生物膜形成的能... 目的比较近平滑念珠菌临床分离株毒力相关因子天冬氨酸蛋白酶和生物膜形成及其基因表达的差异。方法采用基因测序及微卫星分型方法,对临床真菌感染患者分离的近平滑念珠菌进行鉴定,检测各菌株产生分泌型天冬氨酸蛋白酶及生物膜形成的能力,比较各菌株生物膜形成相关基因BCR1、EFG1、HWP1及天冬氨酸蛋白酶毒力基因SAPP1、SAPP2、SAPP3表达的差异。结果共收集8株临床分离的近平滑念珠菌,经基因鉴定均为基因Ⅰ型。微卫星分型结果显示,8株临床菌株分为4个微卫星型别,G1、G2、G3菌株为不同型别,分别分离自甲患者的尿、经外周静脉置入中心静脉导管(PICC)和血;J1、J2、J3、J4、J5菌株为同一型别,分离自乙患者不同时期血标本。8株临床菌株均能形成生物膜,生物膜形成能力均高于近平滑念珠菌标准菌株ATCC 22019,其中G1、G3和J5菌株生物膜形成能力强,J1、J2、J3、J4菌株生物膜形成能力中等,G2菌株生物膜形成能力弱。8株临床分离菌株均分泌天冬氨酸蛋白酶,酶体外表达水平均高于近平滑念珠菌标准菌株ATCC 22019,G3、G1、G2菌株分别为低表达、中表达、高表达,酶体外表达水平比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);J1、J5菌株为中表达,J2、J3、J4菌株为高表达,中表达菌株与高表达菌株比较,差异有统计学意义(P<0.05)。甲、乙患者分离的各菌株生物膜形成基因BCR1、EFG1、HWP1表达水平均增加,其中甲患者G1菌株EFG1基因表达水平高于G2菌株(P<0.05),乙患者分离的菌株BCR1、EFG1、HWP1基因表达水平差异无统计学意义。甲、乙患者分离的各菌株天冬氨酸蛋白基因SAPP1、SAPP2、SAPP3表达水平均增加,其中G1菌株的SAPP1和SAPP2表达水平高于G2、G3(均P<0.05),乙患者SAPP1、SAPP2、SAPP3基因表达水平差异无统计学意义。结论近平滑念珠菌临床分离株生物膜形成和天冬氨酸蛋白酶产生能力均高于标� 展开更多

关键词 近平滑念珠菌 毒力因子 生物膜 分泌型天冬氨酸蛋白酶

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白色念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶的纯化与性质 被引量：4

4

作者 王丹敏 刘丽英 +1 位作者 叶路 高磊 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期27-30,共4页

利用硫酸铵分级沉淀和DEAE-Sephacel离子交换层析从白色念珠菌WD27培养液中提纯得到一种蛋白酶,纯化倍数为25.4,收率为5.2％。其活性可被抑胃肽特异抑制,初步鉴定该酶为天冬氨酸蛋白酶。该酶在酸性范围内有水解蛋白活性,最适作用pH为4.0... 利用硫酸铵分级沉淀和DEAE-Sephacel离子交换层析从白色念珠菌WD27培养液中提纯得到一种蛋白酶,纯化倍数为25.4,收率为5.2％。其活性可被抑胃肽特异抑制,初步鉴定该酶为天冬氨酸蛋白酶。该酶在酸性范围内有水解蛋白活性,最适作用pH为4.0,最适温度为37℃。酶在pH5.0～6.0、45℃以下较稳定,该酶具有较广的底物作用范围,对牛血红蛋白最敏感。酶作用于牛血红蛋白的米氏常数Km为0.814mmol/L。 展开更多

关键词 分泌型天冬氨酸蛋白酶 致病性 毒力因子 白色念珠菌 纯化 性质

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口腔白念珠菌3种致病相关分泌型水解酶检测方法的建立及应用 被引量：5

5

作者 孙康德 张家胜 +2 位作者 陈旭 虞中敏 陈福祥 《检验医学》 CAS 2016年第5期355-358,共4页

目的了解口腔白念珠菌3种致病相关分泌型水解酶的体外表达水平。方法分别采用牛血清白蛋白平板、卵黄琼脂平板和三丁酸甘油酯平板检测88株临床分离的口腔白念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶(SAP)、磷脂酶(PL)和脂肪酶(Lip)的活性。结果 88株... 目的了解口腔白念珠菌3种致病相关分泌型水解酶的体外表达水平。方法分别采用牛血清白蛋白平板、卵黄琼脂平板和三丁酸甘油酯平板检测88株临床分离的口腔白念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶(SAP)、磷脂酶(PL)和脂肪酶(Lip)的活性。结果 88株白念珠菌中有70株(79.5%)高表达SAP,有64株(72.7%)高表达PL,仅有1株(1.2%)高表达Lip,有67株(76.1%)中等表达Lip。SAP和PL的表达呈正相关(r=0.221,P<0.05),Lip与SAP、PL均无相关性(r值分别为0.085、0.109,P值分别为0.432、0.311)。结论大部分口腔白念珠菌高表达SAP和PL,中等表达Lip。分泌型水解酶是口腔白念珠菌最主要的毒力因子之一。 展开更多

关键词 白念珠菌 分泌型天冬氨酸蛋白酶 磷脂酶 脂肪酶

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龙胆泻肝汤氯仿提取物抑制白念珠菌VVC临床株水解酶活性 被引量：4

6

作者 濮燕屏 王霞 +4 位作者 冯鑫 邵菁 吴大强 汪天明 汪长中 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第21期4201-4206,共6页

该研究探讨龙胆泻肝汤氯仿提取物(CELX)对白念珠菌VVC临床株外分泌水解酶的影响。分别采用牛奶培养基、蛋黄培养基、聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯(吐温-80)培养基对15株白念珠菌VVC临床株进行分泌型天冬氨酸蛋白酶(Sap)、磷脂酶(PL)、脂... 该研究探讨龙胆泻肝汤氯仿提取物(CELX)对白念珠菌VVC临床株外分泌水解酶的影响。分别采用牛奶培养基、蛋黄培养基、聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯(吐温-80)培养基对15株白念珠菌VVC临床株进行分泌型天冬氨酸蛋白酶(Sap)、磷脂酶(PL)、脂肪酶(Lip)阳性菌株的筛选;牛奶平板法、蛋黄平板法、吐温-80平板法分别检测CELX干预后,Sap,PL与Lip的活性变化;qRT-PCR检测基因SAP1~7,10,PLB1~2,LIP3~6的表达量。结果可见,15株VVC临床株的Sap,PL均为阳性,11株Lip阳性菌株。随着CELX剂量的递增,与空白对照组相比,各含药培养基(牛奶培养基、蛋黄培养基、吐温-80培养基)上菌落的沉淀圈逐渐减小,当药物达256 mg·L-1时,菌落沉淀圈几乎消失,酶活力显著减弱。qRT-PCR结果显示,256mg·L-1CELX时,除SAP5,SAP6外,SAP1,SAP2,SAP3,SAP4,SAP7,SAP9,SAP10分别下调了62%,55%,62%,84%,61%,51%,68%;PLB1下调了67%;LIP3,LIP4,LIP6分别下调了51%,54%,55%。研究表明,CELX能抑制白念珠菌重要毒力因子天冬氨酸蛋白酶、磷脂酶与脂肪酶的活性。 展开更多

关键词 龙胆泻肝汤氯仿提取物 白念珠菌VVC临床株 分泌型天冬氨酸蛋白酶 磷脂酶 脂肪酶

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白色念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶在口腔扁平苔藓患者唾液中的表达 被引量：4

7

作者 张英 闻妍 +1 位作者 康媛媛 钟鸣 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第4期40-46,共7页

研究白色念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶(SAP)家族在扁平苔藓患者唾液中的表达,进而探讨白色念珠菌病与扁平苔藓的关系。选取白色念珠菌携带者、白色念珠菌病患者、携带白色念珠菌的扁平苔藓患者、伴有白色念珠菌病的扁平苔藓患者各20例,... 研究白色念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶(SAP)家族在扁平苔藓患者唾液中的表达,进而探讨白色念珠菌病与扁平苔藓的关系。选取白色念珠菌携带者、白色念珠菌病患者、携带白色念珠菌的扁平苔藓患者、伴有白色念珠菌病的扁平苔藓患者各20例,念珠菌培养阴性的扁平苔藓患者10例。从唾液标本中直接提取RNA,进行RT-PCR。白色念珠菌携带者唾液中有SAP2、SAP4-6、SAP7的不同表达,携带白色念珠菌的口腔扁平苔藓患者唾液中有SAP2、SAP4-6、SAP7、SAP8、SAP9的不同表达,所有携带者中均未表现SAP1、SAP3和SAP10的阳性扩增。白色念珠菌患病者及伴有白色念珠菌病的口腔扁平苔藓患者唾液中有SAP1-10的不同表达。念珠菌培养阴性的扁平苔藓患者均无SAP1-10的阳性扩增。SAP9与扁平苔藓密切相关。 展开更多

关键词 白色念珠菌 分泌型天冬氨酸蛋白酶 扁平苔藓

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念珠菌耐药机制的研究进展 被引量：4

8

作者 贺小圆 赵明峰 《中国真菌学杂志》 CSCD 2015年第1期49-53,共5页

近年来,真菌感染尤其是机会性真菌感染的发生率和病死率呈不断上升的趋势,这主要与真菌耐药和抗真菌药物品种有限有关。念珠菌是人体内的重要条件致病真菌,其常见的耐药机制包括靶酶的改变、靶位的缺乏、真菌细胞膜对药物的通透性下降... 近年来,真菌感染尤其是机会性真菌感染的发生率和病死率呈不断上升的趋势,这主要与真菌耐药和抗真菌药物品种有限有关。念珠菌是人体内的重要条件致病真菌,其常见的耐药机制包括靶酶的改变、靶位的缺乏、真菌细胞膜对药物的通透性下降、多药耐药蛋白表达增高、固醇合成旁路下游的改变、生物膜的形成等,最新文献报道分泌型天冬氨酸蛋白酶在念珠菌的耐药形成中存在一定作用。该文就念珠菌感染的流行病学和念珠菌的耐药机制两个方面进行综述。 展开更多

关键词 念珠菌 真菌耐药 耐药机制 分泌型天冬氨酸蛋白酶

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白念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶基因在急性念珠菌性外阴阴道炎中的表达 被引量：2

9

作者 冯静 涂亚庭 +1 位作者 林能兴 冯爱平 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期235-237,共3页

目的了解白念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶(Sap)基因在人类阴道白念珠菌感染时的表达情况。方法收集9例阴道念珠菌检测阴性及20例阴道念珠菌感染者的阴道分泌物,通过用特异引物系列进行RT-PCR反应来评价Sap1￣Sap6在人体阴道环境中的表达... 目的了解白念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶(Sap)基因在人类阴道白念珠菌感染时的表达情况。方法收集9例阴道念珠菌检测阴性及20例阴道念珠菌感染者的阴道分泌物,通过用特异引物系列进行RT-PCR反应来评价Sap1￣Sap6在人体阴道环境中的表达情况。结果Sap2和Sap5在阴道白念珠菌感染者中是最主要的表达基因;Sap3和Sap4在所有检查者中均被检测到;所有6种Sap基因在某些阴道念珠菌病患者中同时被检出。结论Sap基因可能与阴道念珠菌病的发病机制有关。 展开更多

关键词 念珠菌性外阴阴道炎 蛋白酶基因 分泌型天冬氨酸蛋白酶 阴道念珠菌病 急性 白念珠菌感染 阴道白念珠菌 表达情况 阴道分泌物 PCR反应 表达基因 阴道环境 特异引物 发病机制 感染者 p基因 RT- 检查者 检测 Sa

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白色念珠菌伊曲康唑耐药和敏感菌株SAP活性与菌株毒力关系的研究 被引量：3

10

作者 潘彦卫 冯文莉 +1 位作者 杨静 奚志琴 《中国药物与临床》 CAS 2015年第5期614-617,共4页

目的探讨白色念珠菌伊曲康唑耐药菌株和敏感菌株分泌型天冬氨酸蛋白酶(SAP)活性与菌株毒力及致病性之间的关系。方法将收集鉴定出的白色念珠菌伊曲康唑耐药株[最小抑菌浓度(MIC)≥1 mg/L]和敏感株(MIC≤0.125 mg/L)各20株分别接种在牛... 目的探讨白色念珠菌伊曲康唑耐药菌株和敏感菌株分泌型天冬氨酸蛋白酶(SAP)活性与菌株毒力及致病性之间的关系。方法将收集鉴定出的白色念珠菌伊曲康唑耐药株[最小抑菌浓度(MIC)≥1 mg/L]和敏感株(MIC≤0.125 mg/L)各20株分别接种在牛血清白蛋白(BSA)培养基上,计算Pz值,比较2组菌株的SAP活性;制备小鼠人工菌血症模型,观察1个月,比较各组小鼠的死亡率和生存率。结果耐药组和敏感组菌株均可产生特异性透明环,其Pz值分别为0.611±0.015和0.667±0.015,2组菌株SAP活性差异有统计学意义(t=11.935,P<0.01);耐药组小鼠死亡16只,敏感组死亡7只,2组小鼠的死亡率差异有统计学意义(χ2=8.286,P=0.004)。结论白念珠菌伊曲康唑耐药菌株SAP的活性、毒力及对小鼠的致病性均高于敏感株;菌株毒力随着Sap活性的增强而增强;白念珠菌SAP与耐药有一定关系。 展开更多

关键词 白色念珠菌 分泌型天冬氨酸蛋白酶 毒力 耐药性

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念珠菌性外阴阴道炎患者阴道分泌物中白念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶表达 被引量：1

11

作者 廉翠红 刘维达 赵敬军 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期488-491,共4页

目的探讨白念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶(SAP)家族在白念珠菌无症状性阴道寄居向症状性阴道炎发展过程中的表达。方法分别从10例无症状携带者、14例念珠菌性外阴阴道炎患者和10例复发性念珠菌性外阴阴道炎患者的阴道分泌物标本中直接提取... 目的探讨白念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶(SAP)家族在白念珠菌无症状性阴道寄居向症状性阴道炎发展过程中的表达。方法分别从10例无症状携带者、14例念珠菌性外阴阴道炎患者和10例复发性念珠菌性外阴阴道炎患者的阴道分泌物标本中直接提取RNA,逆转录成cDNA后进行RT-PCR。结果所有无症状携带者和患者均表现出对SAP2和SAP4-6的阳性扩增。10例无症状携带者中无一个标本表现出对SAP1和SAP3的阳性扩增,而念珠菌性外阴阴道炎患者和复发性念珠菌性外阴阴道炎患者阴道分泌物标本提取的RNA可见9个SAP基因的不同表达,并且均不同程度地表现出对SAP1和SAP3的阳性扩增。结论念珠菌性外阴阴道炎的发病可能与SAP基因的不同表达有关。 展开更多

关键词 念珠菌病 外阴阴道 天冬氨酸内肽酶类 基因表达 复发性念珠菌性外阴阴道炎 分泌型天冬氨酸蛋白酶 阴道分泌物标本 白念珠菌 蛋白酶表达 患者 无症状携带者 RT-PCR 无症状性

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不同来源白念珠菌感染小鼠前后胞外水解酶活力差异 被引量：2

12

作者 夏茂宁 邱文 +6 位作者 牛雪可 王梅竹 赵亮 张金娟 田敏 廖万清 康颖倩 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期613-618,634,共7页

目的了解白念珠菌进入小鼠宿主前后其分泌胞外水解酶能力是否改变。方法挑选分泌型天冬氨酸蛋白酶、磷脂酶、脂肪酶活力无差异的艾滋病、外阴阴道念珠病病患来源和健康人来源白念珠菌,尾静脉注射感染小鼠,分离发病死亡小鼠肾脏菌株,比... 目的了解白念珠菌进入小鼠宿主前后其分泌胞外水解酶能力是否改变。方法挑选分泌型天冬氨酸蛋白酶、磷脂酶、脂肪酶活力无差异的艾滋病、外阴阴道念珠病病患来源和健康人来源白念珠菌,尾静脉注射感染小鼠,分离发病死亡小鼠肾脏菌株,比较感染小鼠前后菌株胞外水解酶活力差异。结果不同来源菌株感染的小鼠28d内死亡速率差异显著(χ2=82.5,P<0.05),从高到低依次为艾滋病、外阴阴道念珠病、健康人来源组;各来源菌株感染小鼠后肾脏分离株分泌型天冬氨酸蛋白酶表达水平皆高于感染小鼠前(F=7.89,P<0.05),不同来源区别显著(F=4.96,P<0.05),从高到低依次为艾滋病、外阴阴道念珠病、健康人来源;感染小鼠前均未曾测得磷脂酶活力的各来源菌株中,在感染小鼠后仅艾滋病、外阴阴道念珠病来源组小鼠肾脏分离株可测得磷脂酶活力,但艾滋病、外阴阴道念珠病来源两组间感染小鼠后肾脏分离株磷脂酶活力无显著差异(F=2.54,P>0.05);各来源白念珠菌感染小鼠前后均未测得脂肪酶活力。结论在宿主体内白念珠菌表达天冬氨酸蛋白酶、磷脂酶能力相较于体外有增强;在不同宿主环境状态下,白念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶和磷脂酶的潜在表达能力有差异,即宿主免疫状态越弱时,白念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶、磷脂酶潜在表达能力越强。 展开更多

关键词 白念珠菌 分泌型天冬氨酸蛋白酶 磷脂酶 脂肪酶 小鼠模型

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抗真菌药物靶标及其抑制剂的研究进展 被引量：2

13

作者 徐波 蒋琰 +1 位作者 张万年 盛春泉 《药学实践杂志》 CAS 2013年第5期321-325,379,共6页

目的综述抗真菌药物靶标及其抑制剂的研究进展。方法本文结合自身研究工作,分析近5年文献,总结抗真菌药物靶标及其抑制剂的最新进展。结果β-1,3-葡聚糖合成酶、羊毛甾醇14α-去甲基化酶、N-肉豆蔻酰基转移酶和分泌型天冬氨酸蛋白酶是... 目的综述抗真菌药物靶标及其抑制剂的研究进展。方法本文结合自身研究工作,分析近5年文献,总结抗真菌药物靶标及其抑制剂的最新进展。结果β-1,3-葡聚糖合成酶、羊毛甾醇14α-去甲基化酶、N-肉豆蔻酰基转移酶和分泌型天冬氨酸蛋白酶是目前研究最为集中的抗真菌药靶,其抑制剂显示了良好的新药开发前景。结论优化现有药物化学结构和发现全新作用机制的先导化合物,对研发新一代抗真菌药物具有重要意义。 展开更多

关键词 抗真菌药物靶标 β-1 3-葡聚糖合成酶 羊毛甾醇14α-去甲基化酶 N-肉豆蔻酰基转移酶 分泌型天冬氨酸蛋白酶

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分泌型天冬氨酸蛋白酶—抗真菌药物作用的新靶点 被引量：2

14

作者 刘杨 盛春泉 张万年 《中国药物化学杂志》 CAS CSCD 2011年第4期315-321,共7页

近年来,随着临床上致病真菌耐药性的日趋严重,寻找具全新作用机制的新型先导化合物成为抗真菌药物研究的重要方向。大量实验证明,分泌型天冬氨酸蛋白酶(Sap)是白色念珠菌致病的重要因素,将成为一个极具前景的抗真菌药物作用新靶点。该... 近年来,随着临床上致病真菌耐药性的日趋严重,寻找具全新作用机制的新型先导化合物成为抗真菌药物研究的重要方向。大量实验证明,分泌型天冬氨酸蛋白酶(Sap)是白色念珠菌致病的重要因素,将成为一个极具前景的抗真菌药物作用新靶点。该文综述了Sap的生物学性质与功能、催化反应机制、三维结构及抑制剂等方面的研究进展。 展开更多

关键词 分泌型天冬氨酸蛋白酶 抗真菌药靶 结构与功能 抑制剂

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念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶的研究进展

15

作者 宋悦 冯文莉 《中华生物医学工程杂志》 CAS 2021年第3期333-336,共4页

念珠菌是人体常见的机会性致病菌,在社会进步、医疗手段提高等多种因素综合作用下,侵袭性念珠菌病的发病率逐渐增高。目前临床上致病真菌耐药性日趋严重,亟需研发新的抗真菌药物。分泌型天冬氨酸蛋白酶在多种致病性念珠菌中都有发现,不... 念珠菌是人体常见的机会性致病菌,在社会进步、医疗手段提高等多种因素综合作用下,侵袭性念珠菌病的发病率逐渐增高。目前临床上致病真菌耐药性日趋严重,亟需研发新的抗真菌药物。分泌型天冬氨酸蛋白酶在多种致病性念珠菌中都有发现,不仅参与念珠菌病的发生、发展过程,在其耐药过程中也发挥重要作用,该酶的抑制剂有望发展成为新型抗真菌药物,解决目前抗真菌治疗的难点。 展开更多

关键词 念珠菌属 抗真菌药 分泌型天冬氨酸蛋白酶 分泌型天冬氨酸蛋白酶抑制剂

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白色念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶研究进展 被引量：1

16

作者 孙富丽(综述) 张英(审校) 《中国实用口腔科杂志》 CAS 2012年第6期370-374,共5页

分泌型天冬氨酸蛋白酶(secreted aspartyl proteinase,SAP)是白色念珠菌的毒力因素之一,它参与白色念珠菌的黏附与侵袭,在白色念珠菌致病过程中发挥了重要作用。目前对于SAP的研究主要集中在其结构、理化性质、基因调控、抑制因素等方面... 分泌型天冬氨酸蛋白酶(secreted aspartyl proteinase,SAP)是白色念珠菌的毒力因素之一,它参与白色念珠菌的黏附与侵袭,在白色念珠菌致病过程中发挥了重要作用。目前对于SAP的研究主要集中在其结构、理化性质、基因调控、抑制因素等方面,也有涉及其与相关口腔黏膜病的关系。本文就近年来有关SAP的研究进展做一综述。 展开更多

关键词 白色念珠菌 分泌型天冬氨酸蛋白酶

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靶向白色假丝酵母菌分泌型天冬氨酸蛋白酶的小分子干扰RNA对白色假丝酵母菌毒力影响 被引量：1

17

作者 杨怀 苑天红 +1 位作者 刘玉江 郑金鼎 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1044-1046,共3页

目的探讨靶向白色假丝酵母菌分泌型天冬氨酸蛋白酶(SAP)的小分子干扰RNA(siRNA)对白色假丝酵母菌SAP的基因表达影响,以期为RNA干扰技术抑制真菌毒力提供实验基础。方法设计并合成SAP靶向的siRNA,用醋酸锂转染白色假丝酵母菌,试验设空白... 目的探讨靶向白色假丝酵母菌分泌型天冬氨酸蛋白酶(SAP)的小分子干扰RNA(siRNA)对白色假丝酵母菌SAP的基因表达影响,以期为RNA干扰技术抑制真菌毒力提供实验基础。方法设计并合成SAP靶向的siRNA,用醋酸锂转染白色假丝酵母菌,试验设空白对照组、错义对照组、SAP siRNA组,采用RT-PCR测定转染后白色假丝酵母菌SAP mRNA表达水平,制备BSA培养基测定天冬氨酸蛋白酶活性及小鼠毒力实验。结果与空白对照组、错义对照组相比,转染48h后,siRNA组白色假丝酵母菌中SAP mRNA表达明显下调为(0.51±0.05),siRNA组天冬氨酸蛋白酶活性PA值为(0.84±0.04)均高于空白及错义对照组,小鼠30d死亡率显著降低为20.0%。结论化学合成的靶向SAP siRNA能够下调白色假丝酵母菌中SAP基因的表达,降低白色假丝酵母菌的毒力,该实验为进一步研究应用RNA干扰技术抗真菌治疗奠定基础。 展开更多

关键词 白色假丝酵母菌 分泌型天冬氨酸蛋白酶 RNA干扰

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小鼠腹腔感染中白色念珠菌芽管及蛋白酶活性与其毒力的相关性研究 被引量：1

18

作者 董小青 王丹敏 +2 位作者 刘丽英 龚海英 张威 《武警医学院学报》 CAS 2002年第2期78-80,共3页

目的 :探讨白色念珠菌与腹膜炎发生相关的毒力因子。方法 :40株临床分离菌分别以腹腔接种方式感染小鼠进行毒力试验 ,以血清中丙氨酸氨基转移酶 (ALT)和α -淀粉酶 (AM)活力为表示菌株毒力的指标。结果 :白念菌体外测得的芽管长度分别... 目的 :探讨白色念珠菌与腹膜炎发生相关的毒力因子。方法 :40株临床分离菌分别以腹腔接种方式感染小鼠进行毒力试验 ,以血清中丙氨酸氨基转移酶 (ALT)和α -淀粉酶 (AM)活力为表示菌株毒力的指标。结果 :白念菌体外测得的芽管长度分别与受染动物血清中ALT、AM含量呈正相关 (rALT=0 . 893,rAM=0 . 80 1,P <0 . 0 1) ,菌株分泌型天冬氨酸蛋白酶 (SAP)活力与血中ALT、AM水平也存在显著的正相关关系 (P <0 .0 1) ,且经SAP特异抑制剂处理过的受染小鼠其ALT活性显著降低 (P <0 . 0 1)。结论 展开更多

关键词 芽管 分泌型天冬氨酸蛋白酶 毒力

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白假丝酵母菌天冬氨酸蛋白酶Sap2多克隆抗体的制备、纯化及鉴定 被引量：1

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作者 仇萌 邹先彪 李蕾 《中国感染控制杂志》 CAS 2013年第4期241-246,共6页

目的制备白假丝酵母菌天冬氨酸蛋白酶Sap2多克隆抗体,并对其进行鉴定。方法提取白假丝酵母菌基因组DNA为模板,经聚合酶链反应(PCR)获取SAP2目的基因;双酶切SAP2基因与原核表达载体pMAL-c2x(+),构建pMAL-c2x/SAP2重组质粒;在大肠埃希菌BL... 目的制备白假丝酵母菌天冬氨酸蛋白酶Sap2多克隆抗体,并对其进行鉴定。方法提取白假丝酵母菌基因组DNA为模板,经聚合酶链反应(PCR)获取SAP2目的基因;双酶切SAP2基因与原核表达载体pMAL-c2x(+),构建pMAL-c2x/SAP2重组质粒;在大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中经IPTG诱导表达出可溶性的融合蛋白;用可溶性Sap2免疫小鼠制备抗血清,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗血清效价,亲和层析法纯化抗血清后,利用Western免疫印迹(Western Blot)检测抗体特异性。结果该研究成功制备了抗Sap2多克隆抗体,抗体效价>1∶51 200;Western Blot检测结果表明,该抗体可特异性识别Sap2蛋白。结论纯化后的Sap2作为抗原免疫小鼠,有较好的抗原性和免疫原性,可成功制备多克隆抗体,并具有高特异性,为快速检测侵袭性白假丝酵母菌感染奠定了基础。 展开更多

关键词 白假丝酵母菌 分泌型天冬氨酸蛋白酶 多克隆抗体 抗原 抗体

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白念珠菌天冬氨酸蛋白酶基因SAP2在大肠杆菌中的表达及产物纯化 被引量：1

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作者 李蕾 仇萌 邹先彪 《中国真菌学杂志》 CSCD 2013年第1期14-19,共6页

目的构建SAP 2重组原核表达载体并表达、纯化出可溶性的蛋白,为抗体制备及Sap2抗原检测奠定基础。方法提取白念珠菌基因组DNA为模板,经PCR方法获取SAP 2目的基因。双酶切SAP 2基因与原核表达载体pMAL-c2x(+),连接酶切产物,转化大肠杆菌T... 目的构建SAP 2重组原核表达载体并表达、纯化出可溶性的蛋白,为抗体制备及Sap2抗原检测奠定基础。方法提取白念珠菌基因组DNA为模板,经PCR方法获取SAP 2目的基因。双酶切SAP 2基因与原核表达载体pMAL-c2x(+),连接酶切产物,转化大肠杆菌TOP10感受态细菌,筛选菌落和测序鉴定。将pMAL-c2x/SAP2重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达出可溶性的融合蛋白,经直链淀粉树脂亲和层析、蛋白酶Factor Xa切割标签获得纯化的Sap2蛋白。结果经PCR扩增获得正确的SAP 2序列并定向插入原核表达载体pMAL-c2x(+)中。重组原核表达载体pMAL-c2x/SAP2经IPTG诱导14 h后表达出可溶性的融合蛋白,并经纯化、切除标签后得到目的蛋白。结论成功构建了白念珠菌天冬氨酸蛋白酶原核表达质粒pMAL-c2x/SAP2,该质粒在BL21(DE3)中可获得高效融合表达,通过亲和层析纯化及标签切割得到了氨基酸序列同天然蛋白一致的目的蛋白。 展开更多

关键词 白念珠菌 分泌型天冬氨酸蛋白酶 SAP2基因 重组质粒

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