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中药材DNA条形码分子鉴定指导原则 被引量：414
1
作者 陈士林 姚辉 +8 位作者 韩建萍 辛天怡 庞晓慧 石林春 罗焜 宋经元 侯典云 石上梅 钱忠直 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期141-148,共8页
随着中药材DNA条形码分子鉴定方法研究的深入与普及,国家药典委员会讨论通过在《中国药典》增补本中列入中药材DNA条形码分子鉴定指导原则,该指导原则通过对大样本量中药材进行DNA条形码分子鉴定研究,建立以ITS2为核心,psbA-trnH为辅的... 随着中药材DNA条形码分子鉴定方法研究的深入与普及,国家药典委员会讨论通过在《中国药典》增补本中列入中药材DNA条形码分子鉴定指导原则,该指导原则通过对大样本量中药材进行DNA条形码分子鉴定研究,建立以ITS2为核心,psbA-trnH为辅的植物类药材DNA条形码鉴定体系和以COI为主、ITS2为辅的动物类药材DNA条形码鉴定体系。该文介绍了中药材DNA条形码分子鉴定指导原则及其起草说明,并对该原则在中药材鉴定方面的应用前景进行展望。 展开更多
关键词 中国药典 中药材 DNA条形码 分子鉴定 指导原则
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中药鉴定学新技术新方法研究进展 被引量：216
2
作者 陈士林 郭宝林 +7 位作者 张贵君 严铸云 罗光明 孙素琴 吴和珍 黄林芳 庞晓慧 陈建波 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1043-1055,共13页
作者对近20年中药鉴定学研究和应用的新技术、新方法进行了综述,介绍和评述了每种技术或方法的原理、特点、应用实例及发展方向,探讨了现有新技术在鉴定中的客观性和准确性。DNA条形码技术鉴定能力较强,在鉴定没有背景信息的中药样品及... 作者对近20年中药鉴定学研究和应用的新技术、新方法进行了综述,介绍和评述了每种技术或方法的原理、特点、应用实例及发展方向,探讨了现有新技术在鉴定中的客观性和准确性。DNA条形码技术鉴定能力较强,在鉴定没有背景信息的中药样品及在方法通用性和可数字化方面具有优势,应用前景广阔。光谱鉴定具有指纹特征性,在中药材及饮片的质量管理和鉴定中具有一定的实用性。显微鉴定新技术、色谱鉴定、特定引物PCR标记鉴定、生物效应鉴定、DNA芯片以及仿生技术等其他技术在特定中药鉴定中将发挥重要作用。 展开更多
关键词 中药鉴定 分子鉴定 化学鉴定 性状鉴定 显微鉴定
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陆地棉品种SSR标记的多态性及用于杂交种纯度检测的研究 被引量：82
3
作者 武耀廷 张天真 +1 位作者 郭旺珍 殷剑美 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2001年第3期131-133,共3页
:用 48对 SSR引物对 30个棉花栽培品种和4个高优势杂交种的亲本进行了多态性筛选 ,结果只有 2 7对引物检测到了多态性。应用SSR3442、SSR2 4 95、SSR3347和 SSR1 2 31标记 ,区分了湘杂 2号、皖杂 40、中棉所 2 8、南抗 3号的F1杂种和它... :用 48对 SSR引物对 30个棉花栽培品种和4个高优势杂交种的亲本进行了多态性筛选 ,结果只有 2 7对引物检测到了多态性。应用SSR3442、SSR2 4 95、SSR3347和 SSR1 2 31标记 ,区分了湘杂 2号、皖杂 40、中棉所 2 8、南抗 3号的F1杂种和它们的亲本以及其它栽培品种 ; 展开更多
关键词 陆地棉 SSR标记 多态性 杂交种 纯度检测 分子鉴定
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库尔勒香梨研究进展 被引量：100
4
作者 高启明 李疆 李阳 《经济林研究》 2005年第1期79-82,共4页
系统概述了库尔勒香梨在品种起源、育种、栽培管理及贮藏加工等方面的研究现状,并提出了应加强库尔勒香梨在分子鉴定、果实生长发育规律及成熟机理、果实深加工等方面的研究。
关键词 库尔勒香梨 研究进展 果实生长发育规律 品种起源 研究现状 贮藏加工 栽培管理 分子鉴定 成熟机理 深加工
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明党参与川明参群体遗传结构及分子鉴定的ISSR分析 被引量：64
5
作者 邱英雄 傅承新 吴斐捷 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期598-603,共6页
目的:明党参和川明参群体遗传遗传多样性、遗传结构及分子鉴定的研究。方法:对7个不同野生群体的明党参和1个栽培群体的川明参进行ISSR分析。利用POPGENE分析软件分析了群体的遗传多样性和遗传结构。结果:共检测了152个位点,总的多态性... 目的:明党参和川明参群体遗传遗传多样性、遗传结构及分子鉴定的研究。方法:对7个不同野生群体的明党参和1个栽培群体的川明参进行ISSR分析。利用POPGENE分析软件分析了群体的遗传多样性和遗传结构。结果:共检测了152个位点,总的多态性位点百分率P为90.8％,群体遗传分化值Gst为57.5％,明党参群体水平的遗传多样性(A=1.272;P=27.26％;I=0.132;H=0.087)高于川明参群体(A=1.217;P=21.7％;I=0.103;H=0.067)。结论:明党参的遗传多样性较高,遗传变异主要存在于不同群体间。川明参的遗传多样性低于明党参。聚类分析结果表明,川明参与明党参在DNA水平出现了相当的遗传分化。并通过ISSR分析筛选出了川明参一个特有的分子标记。对明党参和川明参的系统发育关系也进行了探讨。 展开更多
关键词 明党参 川明参 群体遗传结构 分子鉴定 ISSR分析
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加强结核病实验诊断新技术的临床应用研究 被引量：72
6
作者 庄玉辉 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期69-70,共2页
关键词 结核病 实验室诊断 聚合酶链反应 DNA探针 免疫学诊断 分子鉴定
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黄海绿潮浒苔的形态学观察及分子鉴定 被引量：64
7
作者 张晓雯 毛玉泽 +3 位作者 庄志猛 柳淑芳 王清印 叶乃好 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期822-829,共8页
2008年6月初,黄海中南部海域出现罕见的大面积的绿潮现象,经初步鉴定,认为造成本次绿潮的种类为浒苔属(Enteromorpha)藻类,但是其种一级分类地位的确定成为自绿潮爆发以来最有争议的问题之一。本研究采用形态学观察与分子鉴定相结合的方... 2008年6月初,黄海中南部海域出现罕见的大面积的绿潮现象,经初步鉴定,认为造成本次绿潮的种类为浒苔属(Enteromorpha)藻类,但是其种一级分类地位的确定成为自绿潮爆发以来最有争议的问题之一。本研究采用形态学观察与分子鉴定相结合的方法,对在黄海海域采集的22个浒苔样品及青岛栈桥海域的漂浮浒苔样品进行了鉴定。结果表明,不同站位的浒苔样品均具有主枝,且高度分枝,但丝状体的长度及宽度有较大差异;藻体色泽也有较大差异,有深绿色、鲜绿色和黄绿色之分;藻体细胞大小差异较大;切片观察表明所有样品都具有浒苔典型的管状结构,且细胞位于单层藻体的中央;ITS及5.8SrDNA序列分析表明23个浒苔样品序列完全一致,由此确定这些浒苔样品均属于同一种浒苔属浒苔(Enteromorpha prolifera)。 展开更多
关键词 浒苔 形态学观察 分子鉴定
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基于mtDNA Cytb的六种果实蝇的分子鉴定(双翅目:实蝇科) 被引量：56
8
作者 朱振华 叶辉 张智英 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期386-390,共5页
本研究首次对果实蝇属的桔小实蝇Bactroceradorsalis、瓜实蝇B.cucurbitae、南瓜实蝇B.tau、番石榴实蝇B.correcta、具条实蝇B.scutellata、黑漆实蝇B.scutellaris等6种实蝇mtDNACytb基因进行了测序。对这6种实蝇72个个体mtDNACytb基因... 本研究首次对果实蝇属的桔小实蝇Bactroceradorsalis、瓜实蝇B.cucurbitae、南瓜实蝇B.tau、番石榴实蝇B.correcta、具条实蝇B.scutellata、黑漆实蝇B.scutellaris等6种实蝇mtDNACytb基因进行了测序。对这6种实蝇72个个体mtDNACytb基因中段420bp的碱基序列进行分析,得到38种单倍型,发现了116个变异位点,其中30个位点较为稳定。对这6种实蝇与其各自鉴别位点的对应关系研究表明,mtDNACytb基因可以作为这6种实蝇种类鉴别的分子标记。 展开更多
关键词 双翅目 实蝇科 果实蝇属 线粒体DNA 细胞色素b基因 分子鉴定
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百合杂交后代ISSR鉴定 被引量：50
9
作者 吴学尉 崔光芬 +4 位作者 吴丽芳 张艺萍 明军 王杰 王继华 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期749-754,共6页
使用筛选出的5对ISSR引物,对由东方百合优良品种‘Sorbonne’、‘Tiber’和‘Cobra’为亲本的4对杂交组合获得的40个杂交后代指纹进行了分析,利用NTSYSpc软件UPGMA聚类构建的遗传关系能够较好地反映其亲缘关系。其中,编号为P23和P21的... 使用筛选出的5对ISSR引物,对由东方百合优良品种‘Sorbonne’、‘Tiber’和‘Cobra’为亲本的4对杂交组合获得的40个杂交后代指纹进行了分析,利用NTSYSpc软件UPGMA聚类构建的遗传关系能够较好地反映其亲缘关系。其中,编号为P23和P21的引物是本试验中鉴定的分辨率较高的ISSR引物。 展开更多
关键词 百合 杂交后代 ISSR 分子鉴定
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分离自冬虫夏草可培养真菌的多样性研究 被引量：48
10
作者 张永杰 孙炳达 +3 位作者 张姝 旺姆 刘杏忠 巩文峰 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期518-527,共10页
冬虫夏草是生长于青藏高原的一种名贵中药材。天然冬虫夏草及其微环境中生活着多种真菌。作者使用常规分离培养方法对冬虫夏草的真菌区系进行研究。从天然冬虫夏草的子座、菌核和菌膜3个部位共分离到572个真菌菌株,并根据形态特征将大... 冬虫夏草是生长于青藏高原的一种名贵中药材。天然冬虫夏草及其微环境中生活着多种真菌。作者使用常规分离培养方法对冬虫夏草的真菌区系进行研究。从天然冬虫夏草的子座、菌核和菌膜3个部位共分离到572个真菌菌株,并根据形态特征将大部分菌株鉴定到37个不同的属。这些菌株经SSCP(single-strand conformation polymorphism)分析后,再根据nrDNAITS序列的相似性(以97%为阈值)共区分出92种不同的分类单元(operational taxonomic unit,OTU)。其中,属于子囊菌的菌株数及OTU数均比接合菌和担子菌多。从菌膜分离的菌株数及OTU数都明显多于子座和菌核。分离自子座的优势真菌是产黄青霉Penicillium chrysogenum,而分离自菌核和菌膜的优势真菌均为玫红假裸囊菌Pseudogymnoascus roseus。尚未最终鉴定的部分真菌可能为新的真菌物种。 展开更多
关键词 冬虫夏草 真菌区系 形态鉴定 分子鉴定 分类单元 单链构象多态性
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蓝莓拟盘多毛孢枝枯病的病原菌 被引量：49
11
作者 赵洪海 岳清华 梁晨 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期577-583,共7页
近期在山东省蓝莓种植区发现1种枝枯病害。为明确该致病菌,通过病原菌组织分离和接种试验获得2个致病菌株。通过形态学观察和rDNA‐ITS序列分析,确定该病原菌为棒状拟盘多毛孢Pestalotiopsis clavispora。这是棒状拟盘多毛孢所致蓝莓枝... 近期在山东省蓝莓种植区发现1种枝枯病害。为明确该致病菌,通过病原菌组织分离和接种试验获得2个致病菌株。通过形态学观察和rDNA‐ITS序列分析,确定该病原菌为棒状拟盘多毛孢Pestalotiopsis clavispora。这是棒状拟盘多毛孢所致蓝莓枝枯病在国内的首次报道。 展开更多
关键词 棒状拟盘多毛孢 形态特征 分子鉴定 枝干病害
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蔬菜内生菌的分离及其生防功能初探 被引量：35
12
作者 李萌 张海涛 +2 位作者 虞星炬 金美芳 张卫 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2003年第5期60-64,共5页
采用 5种分离培养基从油菜和芹菜的茎和叶中分离得到 2 15株内生菌 ,通过菌块对峙法对其拮抗植物病原真菌的性能进行初步的测定 ,并对发酵液的拮抗活性进行了进一步的筛选。结果表明 ,对蔬菜立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)、直喙镰孢菌 ... 采用 5种分离培养基从油菜和芹菜的茎和叶中分离得到 2 15株内生菌 ,通过菌块对峙法对其拮抗植物病原真菌的性能进行初步的测定 ,并对发酵液的拮抗活性进行了进一步的筛选。结果表明 ,对蔬菜立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)、直喙镰孢菌 (Fusariumorthoceras)、苹果黑腐皮壳 (Valsamali)有拮抗作用的菌株有 18株 ,包括10株细菌和 8株放线菌。分离自油菜茎的放线菌CHSH19A有极强的抗立枯丝核菌活性 ,通过显微镜和电镜下的观察 ,初步判断为链霉菌 ;进而对其进行DNA提取 ,16SrDNA全长扩增和长度为 1382bp的序列测定及序列分析证明 ,CHSH19A为一株链霉菌Streptomycessp . 展开更多
关键词 蔬菜 内生菌 放线菌 分子鉴定
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DNA条形码技术在中药鉴定中的应用进展 被引量：48
13
作者 张彩云 黄珊珊 颜海飞 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期2306-2312,共7页
DNA条形码(DNA barcoding)技术利用标准的一个或多个DNA片段对物种进行鉴定,是近年来生物学研究的热点领域,也是生物学发展最迅速的方向之一。总结了植物DNA条形码研究的发展历程及最新进展,重点讨论了超级条形码在近缘物种鉴别中的应... DNA条形码(DNA barcoding)技术利用标准的一个或多个DNA片段对物种进行鉴定,是近年来生物学研究的热点领域,也是生物学发展最迅速的方向之一。总结了植物DNA条形码研究的发展历程及最新进展,重点讨论了超级条形码在近缘物种鉴别中的应用前景,以及DNA条形码在中药材基原物种鉴定、道地药材鉴别以及中药材溯源系统研究中的应用,并强调了植物DNA条形码在中药资源评价、保护和可持续利用中的重要地位和作用,为药用植物DNA条形码研究提供新的思路。 展开更多
关键词 DNA条形码 道地药材 分子鉴定 叶绿体基因组 超级条形码
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药用石斛的叶绿体matK基因序列分析及鉴别 被引量：45
14
作者 刘静 何涛 淳泽 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1051-1055,共5页
比较22份(包括待检材料4份)共计12种药用石斛及密花石豆兰(1份)的叶绿体DNA matK基因序列差异,从分子水平对药用石斛进行鉴定。采用改良的CTAB法提取石斛基因组DNA,PCR扩增,克隆测序法对叶绿体DNA matK基因全序列进行测定,运用BioEdit、... 比较22份(包括待检材料4份)共计12种药用石斛及密花石豆兰(1份)的叶绿体DNA matK基因序列差异,从分子水平对药用石斛进行鉴定。采用改良的CTAB法提取石斛基因组DNA,PCR扩增,克隆测序法对叶绿体DNA matK基因全序列进行测定,运用BioEdit、MEGA4.0等软件分析序列,构建分子系统树。测得石斛属12种植物的叶绿体matK基因长1410bp,变异位点51个,信息位点11个。除了存在碱基替换的遗传变异外,还存在碱基的插入和缺失。石斛种间以及种内不同居群(品种)间均能在NJ树中明显分化开来,种间平均遗传距离为0.008,种间最大遗传距离为0.014,最小遗传距离为0.003,碱基相差8～20个。种内不同居群(品种)遗传距离为0.001,相差1～5个碱基。并成功地对4种待检种进行了鉴定。利用12种石斛的matK基因全序列数据库及遗传分析软件,通过对待检种的matK基因全序列进行测定,可以在分子水平对石斛不同种及种内不同居群(品种)进行鉴别,为石斛的分子鉴定提供依据。 展开更多
关键词 石斛 matK基因序列 分子鉴定
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白木香内生真菌的分离及分子鉴定 被引量：43
15
作者 王磊 章卫民 +3 位作者 潘清灵 李浩华 陶美华 高晓霞 《菌物研究》 CAS 2009年第1期37-42,共6页
对采自广东省信宜市的白木香进行了内生真菌分离培养,共获得50个菌株,通过rDNA中内转录间隔区(ITS)序列鉴定其为20个种,其中确定至种名的有7属8种,仅确定至属名的有8种,不能确定种属的有4种,其中A20菌株(Fimetariella rabenhorstii)为... 对采自广东省信宜市的白木香进行了内生真菌分离培养,共获得50个菌株,通过rDNA中内转录间隔区(ITS)序列鉴定其为20个种,其中确定至种名的有7属8种,仅确定至属名的有8种,不能确定种属的有4种,其中A20菌株(Fimetariella rabenhorstii)为国内首次报道。刺盘孢菌(Colletotrichum)共分离到17株,占分离总数的34%,为白木香优势种群;镰刀菌(Fusarium)共分离到11株,是结香部位的优势种群。白木香内生真菌分布部位的专一性不明显,茎中分离的数量及种类最多,叶中最少;5年龄内生真菌的多样性较好,10月龄的多样性较低。 展开更多
关键词 白木香 内生真菌 分子鉴定 ITS区
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巴戟天与常见混伪品的rDNA-ITS序列分析及其分子鉴定 被引量：37
16
作者 丁平 方琴 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期908-911,共4页
目的比较巴戟天与常见混伪品之间的rDNA-ITS碱基序列的差异及其规律,同时为巴戟天及混伪品的指纹图谱鉴别提供分子标记.方法对巴戟天及其常见混伪品的rDNA-ITS进行了PCR扩增、测序,并运用CLUSTAL X、MEGA软件对该区进行序列分析.结果测... 目的比较巴戟天与常见混伪品之间的rDNA-ITS碱基序列的差异及其规律,同时为巴戟天及混伪品的指纹图谱鉴别提供分子标记.方法对巴戟天及其常见混伪品的rDNA-ITS进行了PCR扩增、测序,并运用CLUSTAL X、MEGA软件对该区进行序列分析.结果测定了巴戟天及其混伪品的rDNA-ITS区序列,包括ITS1、5.8S和ITS2全长序列以及18S、26S部分序列.巴戟天与假巴戟天、羊角藤在ITS1和ITS2区的差异性分别为2.9%～5.8%和2.9%～4.2%,而与虎刺在ITS1和ITS2区的差异性则为21.2%和18.9%.根据ITS序列特征构建的系统树,混伪品假巴戟天与羊角藤首先聚类,然后与巴戟天聚在一起,而虎刺则单独聚为一支.结论rDNA-ITS序列可作为巴戟天与混伪品的一种较好的分子指纹图谱的标记方法. 展开更多
关键词 rDNA-ITS序列 巴戟天 混伪品 分子鉴定 分析及 ITS2区 指纹图谱鉴别 ITS区序列 ITS1 PCR扩增 碱基序列 分子标记 序列分析 全长序列 序列特征 标记方法 差异性 羊角藤 18S 系统树 虎刺
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不同基原甘草的分子鉴定及市售甘草药材的质量评价 被引量：43
17
作者 杨瑞 李文东 +4 位作者 马永生 周姗 薛宇涛 林瑞超 刘颖 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期318-326,共9页
甘草是我国最常用的大宗中药材之一,在《神农本草经》中被列为上品。2015版《中华人民共和国药典》规定,乌拉尔甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、光果甘草Glycyrrhiza glabra L.及胀果甘草Glycyrrhiza inflata Bat.的干燥根及根茎可... 甘草是我国最常用的大宗中药材之一,在《神农本草经》中被列为上品。2015版《中华人民共和国药典》规定,乌拉尔甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、光果甘草Glycyrrhiza glabra L.及胀果甘草Glycyrrhiza inflata Bat.的干燥根及根茎可作为甘草入药。然而不同基原甘草药效差异显著,而通过传统方法对其进行鉴别十分困难。为了快速、准确地对不同基原甘草进行鉴定,本文从全国7省份21居群采集了240株甘草。利用PCR扩增获得了长度为616 bp的ITS序列以及389 bp的psb A-trn H序列;通过DNAMAN比对分析,在ITS序列中找到4个变异位点,并确定了2种ITS单倍型,在psb A-trn H序列中找到3个变异位点,并确定了4种psb A-trn H单倍型;结合ITS及psb A-trn H序列分析,确定了3种基原甘草的分子鉴定方案。利用该方案对来自全国4个主要中药材市场的40份甘草药材进行了准确鉴定,并进一步利用HPLC法测定各药材中2种三萜类有效成分(甘草酸及异甘草酸)及4种黄酮类有效成分(甘草素、异甘草素、甘草苷、异甘草苷)的含量,应用SPSS 21.0对HPLC结果进行统计学分析,从而对市售甘草药材的质量进行评价。本文为不同基原甘草的准确鉴定提供了分子鉴定方案,并且对甘草药材的流通现状及质量评价具有指导意义。 展开更多
关键词 乌拉尔甘草 光果甘草 胀果甘草 ITS PSBA-TRNH 分子鉴定 HPLC 质量评价
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中药材龟甲的分子鉴定研究 被引量：36
18
作者 吴平 周开亚 +1 位作者 徐珞珊 滕健昌 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期304-309,共6页
用ＰＣＲ产物直接测序法对中药材龟甲（板）进行鉴别。从乌龟Ｃｈｉｎｅｍｙｓｒｅｖｅｓｉ和其他２０种产地为中国或东南亚国家的龟类的组织材料中提取ＤＮＡ，扩增约１１０ｂｐ的线粒体１２ＳｒＲＮＡ基因片段并进行序列分析，构建了... 用ＰＣＲ产物直接测序法对中药材龟甲（板）进行鉴别。从乌龟Ｃｈｉｎｅｍｙｓｒｅｖｅｓｉ和其他２０种产地为中国或东南亚国家的龟类的组织材料中提取ＤＮＡ，扩增约１１０ｂｐ的线粒体１２ＳｒＲＮＡ基因片段并进行序列分析，构建了２１种龟类的１２ＳｒＲＮＡ基因片段序列数据库。序列比较的结果表明乌龟与其它２０种龟类的这段序列均有差别，序列差异在３７～１５７％之间。从江苏省药品检验所提供的１９块龟甲检品上各取样０１～０５ｇ提取ＤＮＡ，扩增与上述相同的基因片段，与构建的数据库进行比较，结果表明１９块龟甲中只有３块的原动物为乌龟，其余的龟甲均为混淆品。本文的结果为药材龟甲的鉴定找到了有效、可靠的分子遗传标记方法。 展开更多
关键词 龟甲(板) 分子鉴定 PCR 12SrRNA基因片段序列
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入侵害虫西花蓟马及其他8种常见蓟马的分子鉴定 被引量：40
19
作者 游中华 路虹 +4 位作者 张宪省 冯纪年 石宝才 宫亚军 黄大卫 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期720-726,共7页
用PCR产物直接测序法对入侵害虫西花蓟马和其他8种蓟马的线粒体COⅠ基因433bp片段测序,获得62个个体的序列。分子数据分析显示：种内个体间平均遗传距离在0~0.005之间,2003年在北京发现的西花蓟马与欧洲等地区报导的西花蓟马不存在明显... 用PCR产物直接测序法对入侵害虫西花蓟马和其他8种蓟马的线粒体COⅠ基因433bp片段测序,获得62个个体的序列。分子数据分析显示：种内个体间平均遗传距离在0~0.005之间,2003年在北京发现的西花蓟马与欧洲等地区报导的西花蓟马不存在明显的遗传差异;9种蓟马种间平均遗传距离为0.213。构建的NJ树可以很好的显示蓟马的聚类,物种各单元型最初分支自展值均达到100%。结果表明,基于PCR及直接测序技术的分子鉴定可以达到准确鉴定蓟马物种之目的。 展开更多
关键词 缨翅目 蓟马 分子鉴定 线粒体DNA COⅠ基因 遗传距离 NJ树
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快速PCR方法在蛇类药材真伪鉴别中的应用 被引量：42
20
作者 陈康 蒋超 +2 位作者 袁媛 黄璐琦 李曼 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第19期3673-3677,共5页
为优化获得一种准确、快速、高效鉴别药典所载蛇类药材（乌梢蛇，金钱白花蛇，蕲蛇）真伪品的方法。该研究以蛇类药材经典PCR鉴定方法为基础，采用碱裂解法提取基因组总DNA，加人特异性PCR引物，采用两步法进行PCR扩增，从而对蛇类药材... 为优化获得一种准确、快速、高效鉴别药典所载蛇类药材（乌梢蛇，金钱白花蛇，蕲蛇）真伪品的方法。该研究以蛇类药材经典PCR鉴定方法为基础，采用碱裂解法提取基因组总DNA，加人特异性PCR引物，采用两步法进行PCR扩增，从而对蛇类药材及其混淆品进行鉴别。通过对影响PCR反应时间的退火温度、变性温度、退火时间、变性时间、循环次数等因素进行优化，并对不同型号PCR仪和Taq酶进行考察，分别获得乌梢蛇、金钱白花蛇、蕲蛇快速PCR反应程序。在PCR产物中加入SYBRGreenI染料，正品显示出明亮绿色荧光，而混淆品不显示荧光。所建立的蛇类药材快速PCR真伪检测方法可在30—45min完成，为蛇类药材现场快速鉴定提供技术支持。 展开更多
关键词 快速PCR 蛇类中药材 分子鉴定 荧光检测
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