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鸭肝脂肪酸合成酶的胍变性与失活 被引量:2
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作者 田维熙 蔡晖 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第1期6-12,共7页
报道了鸭肝脂肪酸合成酶在胍变性过程中构象变化和活性变化的关系,首次验证了邹承鲁提出的酶活性部位柔性构象的理论适用于多功能复合酶,同时该酶变性及复性均可测定出多个阶段,且证明有无活性稳态酶存在。在低浓度盐酸胍溶液中该酶... 报道了鸭肝脂肪酸合成酶在胍变性过程中构象变化和活性变化的关系,首次验证了邹承鲁提出的酶活性部位柔性构象的理论适用于多功能复合酶,同时该酶变性及复性均可测定出多个阶段,且证明有无活性稳态酶存在。在低浓度盐酸胍溶液中该酶的全反应活性和其中两个还原部位单独活性被同步可逆抑制,随着胍浓度增高,出现不可逆失活且程度和速度均迅速提高,在0.54mol/L胍中该酶全反应活性在1.5分钟内已有一半不可逆丧失,终态只余约5%活性。失活过程有快相和慢相。全反应的失活程度及速度均大大高于两个还原反应。全反应的快相失活中,还原反应仍保持大部分活性,此时稀释可恢复活性。慢相失活使全反应和两个还原反应均失活,此时简单稀释不能恢复活性。在0.72mol/L胍中该酶的内源荧光开始出现峰位红移和峰强下降,紫外差光谱增大,约1至2mol/L胍处有一个台阶,2.16mol/L以上胍中其内源荧光和紫外差光谱再次迅速变化,2.88mol/L以上胍形成第二台阶,不再变化。CD谱的变化是类似的规律。该天然二聚体酶中的的20%硫基可和DTNB极快反应,应为表面硫基。胍处理后表面巯基增加,至2.88mol/L胍中全部SH均已可迅速和DTNB作用。该酶的多阶? 展开更多
关键词 胍变性 构象变化 分子 脂肪酸合成酶 失活化
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