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梅花鹿鹿茸活性多肽的提取及免疫功效的初步研究 被引量:27
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作者 潘风光 孙威 +3 位作者 周玉 陈健 文立正 刘静波 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2007年第9期669-673,共5页
目的提取并分离纯化不同加工方法处理的梅花鹿鹿茸活性多肽(PAP),并对其免疫功效进行初步研究。方法以不同工艺处理的鹿茸为原料,应用分子排阻层析和离子交换层析提取鹿茸活性多肽,通过淋巴细胞增殖、细胞因子产生等试验,检测PAP对淋巴... 目的提取并分离纯化不同加工方法处理的梅花鹿鹿茸活性多肽(PAP),并对其免疫功效进行初步研究。方法以不同工艺处理的鹿茸为原料,应用分子排阻层析和离子交换层析提取鹿茸活性多肽,通过淋巴细胞增殖、细胞因子产生等试验,检测PAP对淋巴细胞的免疫功效。结果所提取的梅花鹿鹿茸活性多肽蛋白含量分别为:冻干茸9.20 mg/ml;冷冻鲜茸1.30 mg/ml;热炸茸1.10 mg/ml。鹿茸多肽可以促进小鼠T、B淋巴细胞的增殖,活化巨噬细胞分泌IL-12,对机体有免疫增强作用。结论梅花鹿鹿茸活性多肽对机体的细胞免疫有显著增强作用。 展开更多
关键词 鹿茸多肽 分子排阻层析 离子交换层析 免疫功效
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分析超速离心研究多聚酸性氨基酸对SnRK2.6的影响 被引量:4
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作者 褚文丹 周翠燕 +2 位作者 芦亚菲 徐扬 李文奇 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2016年第3期256-264,共9页
分析超速离心技术是一种通过检测分子在离心场作用下的沉降行为,分析获得其沉降系数、扩散系数、流体力学半径、摩尔质量、结合常数等水力学和热力学性质的方法,被广泛应用于蛋白质分子溶液性质的研究中.本文利用分析超速离心技术研... 分析超速离心技术是一种通过检测分子在离心场作用下的沉降行为,分析获得其沉降系数、扩散系数、流体力学半径、摩尔质量、结合常数等水力学和热力学性质的方法,被广泛应用于蛋白质分子溶液性质的研究中.本文利用分析超速离心技术研究了拟南芥SnRK2.6(sucrosenon—fermentingl一relied protein kinase2.6)末端一段多聚酸性氨基酸序列对其溶液性质的影响,并将多聚酸性氨基酸序列SnRK2.6(333-362)及人源PDI(protein disulfide isomerase)(441-491)连接至拟南芥PYLIO(PYR likep rotein10)分子末端进行分析,同时结合分子排阻层析和静态光散射技术,研究了上述蛋白质分子的分子质量和聚合状态.结果表明,多聚酸性氨基酸序列可以引起蛋白质分子轴长比增加,在溶液中运动时摩擦系数增加,水合半径明显增大,分子排阻层析洗脱体积明显变小. 展开更多
关键词 分析超速离心 分子排阻层析 静态光散射 蛋白质分子质量 聚合状态
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多聚酸性氨基酸对蛋白质性质的影响
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作者 李亚妃 武沈阳 +3 位作者 褚文丹 周翠燕 施清华 李文奇 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期21-26,共6页
选取碳末端富含酸性氨基酸的拟南芥SnRK2.6(sucrose non-fermenting1-related protein kinase 2.6)和人源PDI(protein disulfide isomerase),以及近球形蛋白拟南芥PYL10 (PYR like protein 10),分别将重复酸性氨基酸序列添加到SnRK2.6(1... 选取碳末端富含酸性氨基酸的拟南芥SnRK2.6(sucrose non-fermenting1-related protein kinase 2.6)和人源PDI(protein disulfide isomerase),以及近球形蛋白拟南芥PYL10 (PYR like protein 10),分别将重复酸性氨基酸序列添加到SnRK2.6(1-332)、PDI(1-440)、PYL10碳末端,利用大肠杆菌BL21重组表达,经过亲和层析,离子交换层析和分子排阻层析进行纯化,综合利用分析超速离心技术,分子排阻层析技术以及多角度静态光散射技术,研究人为设计的多聚氨基酸末端对蛋白质分子排阻行为,聚合状态和其他水力学性质的影响。结果发现,多聚酸性氨基酸末端虽不影响蛋白质分子的聚合状态,但会明显减少分子排阻色谱中蛋白质的洗脱体积,影响蛋白质分子的斯托克斯半径和轴长比等水力学性质。 展开更多
关键词 分析超速离心 多角度静态光散射 分子排阻层析 多聚酸性氨基酸 水力学性质
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分析超速离心技术研究膜蛋白TmrAB 被引量:2
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作者 褚文丹 徐扬 +4 位作者 周翠燕 芦亚菲 于晓霞 张瑞轩 李文奇 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1047-1053,共7页
去垢剂在膜蛋白的提取纯化过程中起到必要的作用,对膜蛋白的聚合状态、结晶条件以及理化性质等方面都有较大影响.分析超速离心技术(analytical ultracentrifuge,AUC)通过测定溶液中膜蛋白-去垢剂复合物在离心场中的沉降运动轨迹,可以分... 去垢剂在膜蛋白的提取纯化过程中起到必要的作用,对膜蛋白的聚合状态、结晶条件以及理化性质等方面都有较大影响.分析超速离心技术(analytical ultracentrifuge,AUC)通过测定溶液中膜蛋白-去垢剂复合物在离心场中的沉降运动轨迹,可以分析获得其沉降系数、摩尔质量、流体力学半径、结合常数等水力学和热力学性质,进而判断膜蛋白-去垢剂复合物的均一性及聚合状态.本文以嗜热菌来源的ATP结合转运蛋白(ABC transporter)TmrAB作为研究对象,利用分析超速离心技术结合分子排阻层析和冷冻电镜负染技术,研究其均一性、聚合状态以及去垢剂与膜蛋白的摩尔比.结果显示,在8倍临界胶束浓度(critical micelle concentration,CMC)的DDM条件下,TmrAB性质均一,并以异二聚体的单体形式存在,DDM与Tmr AB的摩尔比为116∶1.本研究表明,分析超速离心技术是一种测定膜蛋白分子质量、研究膜蛋白聚合状态的可靠手段. 展开更多
关键词 分析超速离心 分子排阻层析 冷冻电镜 膜蛋白 分子质量
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三步层析法分离毕赤酵母工程菌中表达的新疆家蚕抗菌肽 被引量:1
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作者 窦君 郑树涛 +1 位作者 王娉 张富春 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2007年第5期710-714,共5页
通过离子交换层析、疏水作用层析和分子排阻层析等三步层析的方法,分离纯化了毕赤酵母工程菌所表达的新疆家蚕抗菌肽。结果表明,三步层析后,SDS电泳显示单一条带,分子量约为7.0 kDa;所纯化的新疆家蚕抗菌肽具有较强的抗菌活性。该纯化... 通过离子交换层析、疏水作用层析和分子排阻层析等三步层析的方法,分离纯化了毕赤酵母工程菌所表达的新疆家蚕抗菌肽。结果表明,三步层析后,SDS电泳显示单一条带,分子量约为7.0 kDa;所纯化的新疆家蚕抗菌肽具有较强的抗菌活性。该纯化工艺的建立,为新疆家蚕抗菌肽在饲料添加剂、农用抗生素等方面的广泛应用奠定基础。 展开更多
关键词 新疆家蚕抗菌肽 离子交换层析 疏水作用层析 分子排阻层析 纯化
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高压液相分子相排阻层析-十八角激光散射仪联用技术分析b型流感嗜血杆菌荚膜多糖分子量的方法的验证 被引量:4
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作者 罗树权 赵志强 +5 位作者 房明 杨英英 杜送田 朱莉萍 陈翠萍 谢贵林 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第7期736-740,共5页
目的 对高压液相分子排阻层析-十八角激光散射仪(high performance size exclusion chromatography-Multianglelaser-light scattering,HPSEC-MALLS)联用技术分析b型流感嗜血杆菌荚膜多糖重均分子量(weight-average molecularweight... 目的 对高压液相分子排阻层析-十八角激光散射仪(high performance size exclusion chromatography-Multianglelaser-light scattering,HPSEC-MALLS)联用技术分析b型流感嗜血杆菌荚膜多糖重均分子量(weight-average molecularweight,Mw)及其分布的方法进行验证。方法 用已知Mw的普鲁兰多糖标准品对方法的准确性、精密度进行验证。采用该方法对15批b型流感嗜血杆菌荚膜多糖进行Mw及分子量分布的测定,并分析b型流感嗜血杆菌荚膜多糖分子大小指标分配系数(KD)与Mw的相关性。结果 普鲁兰多糖标准品的Mw检测值与Mw标示值的相对偏差均小于5%(除P-20外);精密性相对标准偏差(relative standard clevia-tion,R SD)均小于0.5%,且色谱峰及分子量分布趋势完全重叠。15批b型流感嗜血杆菌荚膜多糖Mw(3次检测的平均值)为2.681×10^5-6.488×10^5g/mol,与KD值无明显相关性。结论 HPSEC-MALLS法具有良好的准确性与精密度,可更直观、真实地反映样品的分子量分布,本实验为多糖及结合疫苗质量控制方法的优化提供了参考。 展开更多
关键词 高压液相分子排阻层析-十八角激光散射仪 b型流感嗜血杆菌荚膜多糖 分子 验证
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蛋白质纯化虚拟仿真课程的教学设计 被引量:2
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作者 马骋 宫彩霞 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2022年第10期2063-2074,共12页
目的蛋白质纯化是医学与生物学实验教学课程中的一个重要内容,本文通过设计新的蛋白质纯化虚拟仿真教学内容,开发虚拟仿真教学系统,希望学生能够更有效率地掌握蛋白质纯化技术的要点,提升教学质量。方法利用3D虚拟仿真技术,构建虚拟仿... 目的蛋白质纯化是医学与生物学实验教学课程中的一个重要内容,本文通过设计新的蛋白质纯化虚拟仿真教学内容,开发虚拟仿真教学系统,希望学生能够更有效率地掌握蛋白质纯化技术的要点,提升教学质量。方法利用3D虚拟仿真技术,构建虚拟仿真实验室。结合线下教学经验,确定虚拟仿真教学中需要体现的教学内容、教学重点、核心仪器的特色、评分指标、考核方式、操作体验等。结果本文基于3D虚拟仿真技术构建了蛋白质纯化虚拟仿真实验室,和传统教学相比,虚拟仿真教学可以提高教学效率,节省教学成本和场地占用;教学设计和虚拟仿真教学系统融合了教学、练习和考核模块,根据以往的教学经验优化了评分体系,保证学生更加有效、严谨地掌握技术细节;涵盖了全新的教学内容——荧光检测联用的分子排阻层析,添加了蛋白质层析的常用案例,保证了内容的新颖与实用;完全再现了现实实验室中仪器设备的搭建模式,实现虚拟学习与实际操作的无缝衔接。结论蛋白质纯化虚拟仿真教学系统由虚及实,由点及面,把控细节,保证学生动手能力和探索能力的提高,学以致用,并且拥有传统教学模式不可比拟的优势。 展开更多
关键词 蛋白质纯化 荧光检测联用的分子排阻层析 虚拟仿真 实验教学
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