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胚胎大鼠神经干细胞体外培养分化的研究 被引量：6
1
作者 刘暌 王红云 +2 位作者 王忠诚 李艺影 张亚卓 《首都医科大学学报》 CAS 2002年第1期34-36,共3页
为建立啮齿类动物中枢神经系统多潜能干细胞体外分离培养及分化鉴定的方法 ,将孕 1 8d胚胎大鼠海马及脑室下区组织分离 ,体外经EGF和bFGF刺激下扩增 ,然后撤除GFs培养 ;通过免疫细胞化学方法染色鉴定神经干细胞及其子代细胞的分化方向... 为建立啮齿类动物中枢神经系统多潜能干细胞体外分离培养及分化鉴定的方法 ,将孕 1 8d胚胎大鼠海马及脑室下区组织分离 ,体外经EGF和bFGF刺激下扩增 ,然后撤除GFs培养 ;通过免疫细胞化学方法染色鉴定神经干细胞及其子代细胞的分化方向。结果 :培养的部分细胞在特定生长因子的作用下可分裂、复制 ,同时表达神经干细胞特异性抗原nestin ,并在撤除生长因子后向神经细胞和胶质细胞分化。结果表明 ,啮齿类动物海马及室下区存在着具有多向分化潜能的神经干细胞 ,其在神经发生或损伤过程中的作用尚需进一步探讨。 展开更多
关键词 神经干细胞 生长因子 分化 胚胎 体外培养 分化鉴定
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兔骨髓基质细胞体外成骨分化鉴定及与煅烧骨复合培养的实验研究 被引量：4
2
作者 杨成林 毕郑钢 +3 位作者 王玉学 祁权 付春江 陶天遵 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2005年第3期329-332,共4页
目的研究兔骨髓基质细胞体外向成骨细胞分化的生物学特性及其与牛煅烧骨体外复合培养的生物相容性。方法将体外培养1周的兔骨髓基质细胞向成骨细胞诱导分化,于1、2、4周时提取RNA,采用RTPCR技术检测ALP和I型胶原mRNA表达,并对培养2周的... 目的研究兔骨髓基质细胞体外向成骨细胞分化的生物学特性及其与牛煅烧骨体外复合培养的生物相容性。方法将体外培养1周的兔骨髓基质细胞向成骨细胞诱导分化,于1、2、4周时提取RNA,采用RTPCR技术检测ALP和I型胶原mRNA表达,并对培养2周的细胞行VonKossa染色观察钙结节形成;另制备细胞煅烧骨复合物,继续培养1、7、14d后取出,扫描电镜观察及X射线衍射仪检测。结果体外诱导培养2、4周后,兔骨髓基质细胞成功表达ALT和I型胶原,VonKossa染色可见钙结节形成。扫描电镜及X射线衍射分析证实细胞在煅烧骨表面大量贴附成活,14d后细胞铺满支架表面,合成并分泌胶原纤维及钙盐。结论兔骨髓基质细胞体外可成功向成骨细胞诱导分化,成骨特性表达佳;与牛煅烧骨体外复合培养显示良好的生物相容性。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 成骨细胞 煅烧骨 生物相容性 骨髓基质细胞 体外复合培养 牛煅烧骨 体外成骨 分化鉴定 PCR技术检测 实验研 细胞诱导分化 mRNA表达
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胚胎小鼠纹状体神经干细胞的体外培养和分化 被引量：3
3
作者 姚柏春 黄翔 《解剖与临床》 2004年第4期238-240,共3页
目的 :探索胚胎小鼠纹状体神经干细胞 (striatum -neuralstemcells ,strNSC)的体外培养和分化鉴定方法。方法 :无菌条件下分离E15天胚胎小鼠纹状体 ,制成单细胞悬液 ,在bFGF和B2 7存在的培养基中培养扩增 ,通过免疫细胞化学显色鉴定神... 目的 :探索胚胎小鼠纹状体神经干细胞 (striatum -neuralstemcells ,strNSC)的体外培养和分化鉴定方法。方法 :无菌条件下分离E15天胚胎小鼠纹状体 ,制成单细胞悬液 ,在bFGF和B2 7存在的培养基中培养扩增 ,通过免疫细胞化学显色鉴定神经干细胞及其子代细胞的分化方向。结果 :培养的部分细胞在B2 7和bFGF存在的无血清培养基中可以在体外分裂增殖 ,同时表达神经干细胞特异性抗原nestin ,并在撤出B2 7和bFGF的有血清培养基中向神经细胞和神经胶质细胞分化。结论 :胚胎小鼠纹状体存在具有多分化潜能的神经干细胞 ,它们能在体外培养、传代和自然分化。 展开更多
关键词 胚胎小鼠 纹状体 神经干细胞 体外培养 分化鉴定 B27 BFGF
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改良分次酶消化法分离培养兔肌腱干细胞及诱导分化鉴定 被引量：2
4
作者 张立岩 孙新 +7 位作者 田丹 徐睿 雷昊 艾津辉 王华 王海涛 陈继营 柴伟 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第18期1-5,共5页
目的采用改良分次酶消化法体外分离培养家兔肌腱干细胞,观察其生物学特性,并进行诱导分化及鉴定。方法无菌条件下取出家兔髌腱组织,分别运用改良的分次酶消化法和酶消化后低密度稀释接种法进行分离、培养、传代,用倒置相差显微镜观察细... 目的采用改良分次酶消化法体外分离培养家兔肌腱干细胞,观察其生物学特性,并进行诱导分化及鉴定。方法无菌条件下取出家兔髌腱组织,分别运用改良的分次酶消化法和酶消化后低密度稀释接种法进行分离、培养、传代,用倒置相差显微镜观察细胞形态特征并绘制两种方法的生长曲线,通过流式细胞鉴定仪检测肌腱干细胞表面抗原标志物的表达,取P3-P4代肌腱干细胞向成骨细胞、成软骨细胞诱导分化并鉴定。结果改良的分次酶消化法较酶消化后低密度稀释接种法细胞增殖速度加快,形态均一,杂质细胞少。分离出的肌腱干细胞表面抗原标志CD90、CD44呈阳性,而CD34、CD14呈阴性,证实之前分离的细胞为肌腱干细胞。鉴定出肌腱干细胞具有向成骨细胞和成软骨细胞分化能力。结论采用改良的分次酶消化法分离培养兔肌腱干细胞简单易行,肌腱干细胞生长及传代速度可观,活性良好,纯度较高。另外,肌腱干细胞的成功分离培养,也为肌腱相关疾病的研究开辟了一条新途径。 展开更多
关键词 改良酶消化法 肌腱干细胞 分化鉴定
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脐血间充质干细胞分离、培养与鉴定 被引量：8
5
作者 李启明 程天民 +3 位作者 李宁 粟永萍 冉新泽 艾国平 《重庆医学》 CAS CSCD 2005年第6期879-881,884,共4页
目的研究脐带血(HUCB)中含有的间充质干细胞(MSCs)体外分离、培养条件,探讨其作为种子细胞用于下一步实验研究的稳定性与实用性。方法无菌条件下取正常足生产的脐带血,经CPDA1复合抗凝剂抗凝,然后经过去红细胞处理,再用淋巴细胞分离液... 目的研究脐带血(HUCB)中含有的间充质干细胞(MSCs)体外分离、培养条件,探讨其作为种子细胞用于下一步实验研究的稳定性与实用性。方法无菌条件下取正常足生产的脐带血,经CPDA1复合抗凝剂抗凝,然后经过去红细胞处理,再用淋巴细胞分离液分离脐血的单个核细胞,DMEM/F12培养基进行培养和纯化获得贴壁细胞层,采用定向诱导分化方法检测鉴定获得的MSCs。结果来源于脐血的单个核细胞经体外培养贴壁后出现形态学上可见间充质样的细胞,间充质样细胞为类似成纤维样的细胞形态,但偏向半月形弯曲状,经过成肌、成脂肪、成骨细胞诱导分化成功后确定为间充质干细胞。结论脐血来源的间充质干细胞能够在体外分离、培养出有用的进一步实验所需要的种子细胞。 展开更多
关键词 脐带血 间充质干细胞 细胞培养 诱导分化鉴定
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绵羊骨髓间充质干细胞分离培养与鉴定
6
作者 楼梦雨 潘欠欠 +3 位作者 敬敬 韦进波 万赛罗 凌英会 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期2299-2304,共6页
旨在分离绵羊骨髓间充质干细胞(sheep bone marrow mesenchymal stem cells,SBMSC),建立绵羊骨髓间充质干细胞系,为相关研究提供种子细胞。取新生健康绵羊肋骨为试验材料,利用贴壁法分离获得SBMSC;取生长良好的P3代细胞通过免疫荧光,进... 旨在分离绵羊骨髓间充质干细胞(sheep bone marrow mesenchymal stem cells,SBMSC),建立绵羊骨髓间充质干细胞系,为相关研究提供种子细胞。取新生健康绵羊肋骨为试验材料,利用贴壁法分离获得SBMSC;取生长良好的P3代细胞通过免疫荧光,进行CD73、CD90、CD105、CD106表型鉴定;取生长良好的P3代细胞分别进行成软骨、成脂、成骨方向的诱导,对诱导结果分别进行阿利新蓝、油红O和茜素红染色,鉴定分化结果。SBMSC呈成纤维样贴壁生长;体外培养P3代细胞表面标记物CD73、CD90、CD105和CD106完全符合标准;P3代细胞经软骨、脂肪、骨方向诱导3周后,经阿利新蓝染色,细胞呈亮蓝色;经油红O染色,细胞质内出现橙红色脂滴;茜素红染色表明聚集的细胞团中央能形成钙化结节。说明SBMSC经体外诱导培养后可向软骨细胞、脂肪细胞和成骨细胞分化,并具有明显的成软骨、成脂和成骨表型,表明SBMSC具有多向分化潜能。通过贴壁培养法建立了SBMSC完整的体外培养体系,为绵羊育种等方面提供种子细胞。 展开更多
关键词 绵羊 骨髓间充质干细胞 细胞培养 诱导分化鉴定
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大鼠胰岛干细胞的体外分离培养分化鉴定
7
作者 陈建伯 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1316-1316,共1页
在研究治疗糖尿病的历程中，胰腺移植、胰岛移植、胰岛干细胞移植都曾作为胰岛素注射的替代疗法而被世界众多科研人员尝试，并且在动物和人体实验中取得了一些成果。
关键词 胰岛干细胞移植 体外分离培养 分化鉴定 大鼠 胰岛素注射 胰腺移植 胰岛移植 科研人员
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小鼠骨骼肌卫星细胞的分离培养及鉴定 被引量：1
8
作者 边艳超 牧仁 +5 位作者 牛丽丽 姜丽丽 温建勋 王忆霄 李蕊秀 肖瑞 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第13期8-11,238,239,共6页
为了探讨并完善小鼠骨骼肌卫星细胞（satellite cells,SCs）的原代分离培养技术,试验通过对SCs的取材、分离、消化、培养等步骤的改进获得SCs,并应用差速贴壁法进行纯化,从形态学、生长曲线、克隆形成能力、冻存复苏活力、SCs表面标记... 为了探讨并完善小鼠骨骼肌卫星细胞（satellite cells,SCs）的原代分离培养技术,试验通过对SCs的取材、分离、消化、培养等步骤的改进获得SCs,并应用差速贴壁法进行纯化,从形态学、生长曲线、克隆形成能力、冻存复苏活力、SCs表面标记物的检测、成肌细胞分化能力及RT-PCR鉴定等方面对SCs进行研究。结果表明：分离获得的小鼠骨骼肌SCs呈梭形或纺锤形,细胞饱满且折光性强,生长曲线呈标准的＂S＂型,克隆形成率高达（56.11±1.73）%,冻存复苏后细胞活率为（96.67±0.87）%,表达desmin、c-Met、Myf5、Myo D等SCs表面特异性标记物,成肌细胞诱导分化后能形成多核肌管并表达成肌细胞表面特异性标记物Mylpf。说明小鼠骨骼肌SCs体外培养获得成功。 展开更多
关键词 骨骼肌卫星细胞 分离 培养 鉴定 克隆形成能力 成肌细胞分化及鉴定
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