河南省出血性大肠埃希菌O157病原学特征与分子分型研究 被引量：8

1

作者 赵嘉咏 张白帆 +4 位作者 穆玉姣 苏佳 夏胜利 黄学勇 许汴利 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第9期812-814,828,共4页

目的了解2012-2015年河南省出血性大肠埃希菌EHEC：O157病原学与PFGE脉冲场凝胶电泳指纹图谱特征,为相应食源性疾病的监测、预测预警、暴发溯源调查提供基线数据。方法对河南省2012-2015年采自腹泻病人及动物粪便和食品标本进行mEC肉汤... 目的了解2012-2015年河南省出血性大肠埃希菌EHEC：O157病原学与PFGE脉冲场凝胶电泳指纹图谱特征,为相应食源性疾病的监测、预测预警、暴发溯源调查提供基线数据。方法对河南省2012-2015年采自腹泻病人及动物粪便和食品标本进行mEC肉汤增菌,经免疫磁珠富集后采用ChromagarO157平板分离培养;采用系统生化鉴定大肠埃希菌,并进行EHEC：O157单抗血清玻片凝集试验;采用多重PCR鉴定出血性大肠埃希菌O157及携带的毒力基因。根据＂PulseNet China＂公布的EHEC O157PFGE分型技术标准,对阳性菌株进行PFGE指纹图谱分析。结果47株出血性大肠埃希菌O157中1株产志贺毒素1（STX1）,2株产志贺毒素2（STX2）;21株携带粘附素（eaeA）和溶血素（hlyA）毒力基因,其余23株为不产毒型;经XbaI酶切后进行脉冲场凝胶电泳,共分为40种不同带型,相似度区间为64.20%-100%,各带型包含菌株数为1～2株不等,人源与食品动物源菌株带型未发现聚集关联性。结论河南省检出的EHEC：O157中既有携带不同毒力基因的菌株,也有非产毒型菌株,其PFGE指纹图谱呈现高度分散性与多态性,体现了食源性细菌病原体所具有的多样性与复杂性。 展开更多

关键词 出血性大肠埃希菌o157 多重PCR 毒力基因 PFGE

原文传递

出血性大肠埃希菌O157:H7可视化和实时荧光RPA检测方法的比较

2

作者 徐颖 庄国栋 +1 位作者 王丽丽 滕新栋 《中国食品卫生杂志》 CSCD 北大核心 2024年第1期26-31,共6页

目的以检测出血性大肠埃希菌(EHEC)O157:H7为目的,基于重组酶聚合酶扩增(RPA)技术,分别建立可视化RPA检测方法和实时荧光RPA检测方法。方法根据出血性大肠埃希菌O157:H7的rfbE基因设计引物和探针,进行特异性、灵敏度检测,建立实时荧光RP... 目的以检测出血性大肠埃希菌(EHEC)O157:H7为目的,基于重组酶聚合酶扩增(RPA)技术,分别建立可视化RPA检测方法和实时荧光RPA检测方法。方法根据出血性大肠埃希菌O157:H7的rfbE基因设计引物和探针,进行特异性、灵敏度检测,建立实时荧光RPA检测方法。结合SYBR Green I在核酸反应中的颜色变化特征,设计可视化RPA检测方法。结果建立的实时荧光RPA检测方法和可视化RPA检测方法,分别在35℃时反应不超过25 min即可检测EHEC O157:H7。设计的引物和探针仅对EHEC O157:H7出现特异性结果。两种检测方法的检测限低于10-5 ng/μL。结论EHEC O157:H7的可视化RPA检测方法和实时荧光RPA检测方法操作简便,且特异性强、敏感性高,可为EHEC O157:H7的现场快速检测和实验室检测提供新方法。 展开更多

关键词 重组酶聚合酶扩增技术 出血性大肠埃希菌o157:h7 可视化RPA 显色反应 实时荧光RPA 检测方法 食源性致病菌

原文传递

一种新的大肠埃希菌O157∶H7 vero细胞毒素的纯化及特性分析 被引量：2

3

作者 张瑾 杨正时 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2006年第5期343-345,347,共4页

目的研究出血性大肠埃希菌的vero细胞毒素。方法通过超声破碎,硫酸铵沉淀及两次离子交换层析,再经过凝胶过滤,最终从大肠埃希菌O157∶H7 882364菌株获得了一种新的vero细胞毒素。对此毒素进行细胞毒性测定和分子量及等电点的测定,并对... 目的研究出血性大肠埃希菌的vero细胞毒素。方法通过超声破碎,硫酸铵沉淀及两次离子交换层析,再经过凝胶过滤,最终从大肠埃希菌O157∶H7 882364菌株获得了一种新的vero细胞毒素。对此毒素进行细胞毒性测定和分子量及等电点的测定,并对毒素的N端15个氨基酸序列进行了检测。结果用凝较过滤层析测定纯化的vero细胞毒素分子量为43KD,等电点为3.8,蛋白N端15个氨基酸序列为SFELPALPYAKDALA,其对vero细胞的CD50为4bg。结论这种毒素与VT1毒素和VT2毒素明显不同,因此初步确定为新毒素,称之为VT3。通过实验将推动我国对出血性大肠埃希菌O157∶H7的致病性研究和对VT类毒素和抗毒素的进一步研制和应用。 展开更多

关键词 出血性大肠埃希菌o157:h7 Veto细胞毒素 纯化 特性

下载PDF 职称材料

徐州市2000年肠出血性大肠埃希菌O157∶H7感染性腹泻的调查 被引量：48

4

作者 李洪卫 景怀琦 +3 位作者 逄波 赵广法 杨晋川 徐建国 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期119-122,共4页

目的　了解徐州市丰县和铜山县肠出血性大肠埃希菌 (EHEC)O15 7∶H7引起的出血性结肠炎 (HC)在腹泻病患者中所占的比例 ,以及临床症状和肾功能变化的情况。方法　使用EHECO15 7胶体金快速检测试剂筛选粪便标本 ,阳性者使用免疫磁珠方法... 目的　了解徐州市丰县和铜山县肠出血性大肠埃希菌 (EHEC)O15 7∶H7引起的出血性结肠炎 (HC)在腹泻病患者中所占的比例 ,以及临床症状和肾功能变化的情况。方法　使用EHECO15 7胶体金快速检测试剂筛选粪便标本 ,阳性者使用免疫磁珠方法分离病原菌。对经过细菌学证实的EHECO15 7∶H7引起的HC患者 ,进行临床症状的观察和生化检验指标分析。结果　 2 0 0 0年 5月份 ,丰县由EHECO15 7∶H7引起的HC占腹泻病患者 0 .98% ,6月份铜山县的HC患者占腹泻病患者5 .89%。在出现腹泻病症状的同时 ,18.5 %患者的肾功能已经出现异常 ,表现为尿蛋白、血清肌苷或血尿素氮等指标的升高。在 2 7例HC患者中 ,有 14和 13例分别分离到不产生志贺毒素和产生志贺毒素的EHECO15 7∶H7菌株。根据分离菌株是否产生志贺毒素将患者分为两组进行比较 ,尿蛋白阳性患者的比例分别为 4 / 13和 1/ 14 ,血小板减少患者的比例分别为 6 / 13和 3/ 14。统计学分析有显著意义。提示分离到产生志贺毒素的EHECO15 7∶H7菌株的患者 ,发生肾功能异常的可能性较大。结论　此次调查证实了EHECO15 7∶H7感染所引起的HC在整个腹泻病患者中所占的比例随季节的变化而不同 ,感染产生志贺毒素EHECO15 7∶H7菌株的患者 ,发生肾功能异常的可能性要比不产生志贺? 展开更多

关键词 徐州市 2000年 肠出血性大肠埃希菌o157:h7 感染性腹泻 调查 志贺毒素

原文传递

肠出血性大肠埃希菌O157∶H7引起的溶血性尿毒综合征患者血清抗体调查 被引量：25

5

作者 徐建国 程伯鲲 +5 位作者 冯丽萍 景怀琦 杨晋川 赵广法 汪华 李洪卫 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期114-118,共5页

目的　对 1999年某地出现的一批先有腹泻病症状后继发急性肾功能衰竭 (肾衰 )的患者进行血清学调查和诊断。方法　使用基因克隆表达纯化的肠出血性大肠埃希菌 (EHEC) -溶血素(Hly)和EHECO15 7脂多糖 (LPS)为抗原 ,对采集自 4 2例肾衰患... 目的　对 1999年某地出现的一批先有腹泻病症状后继发急性肾功能衰竭 (肾衰 )的患者进行血清学调查和诊断。方法　使用基因克隆表达纯化的肠出血性大肠埃希菌 (EHEC) -溶血素(Hly)和EHECO15 7脂多糖 (LPS)为抗原 ,对采集自 4 2例肾衰患者的血清标本进行蛋白印记试验。结果　EHEC Hly的检测发现 ,IgG抗体阳性 2 1份 ,阳性率5 0 .0 % ;IgM抗体阳性 16份 ,阳性率38.1% ;在 11份标本中同时检测到IgG和IgM抗体 ,阳性率2 6 .2 % ;检测到IgG或IgM抗体阳性的标本 2 6份 ,阳性率 6 1.9%。EHECO15 7LPS的检测发现 ,2 4份标本分别检测到IgG和IgM抗体 ,阳性率各为 5 7.1% ;在 2 9份标本中检测到IgG或IgM抗体 ,阳性率6 9.0 % ;在 2 0份标本中检测到IgG和IgM抗体 ,阳性率4 7.6 %。在 4 2份血清标本中同时检测到EHEC Hly和O15 7LPS的特异性抗体的标本 2 2份 ,阳性率 5 2 .4 % ;检测到EHEC Hly或O15 7LPS的特异性抗体的标本 34份 ,阳性率81.0 %。结论　结合细菌学和血清学诊断结果、临床症状和流行病学分析 ,可以认为这些患者感染了EHECO15 7∶H7。在分离不到病原菌的情况下 ,检测患者血清标本的EHEC Hly和 /或EHECO15 7LPS的特异性抗体 。 展开更多

关键词 溶血性尿毒综合征 溶血素 脂多糖 肠出血性大肠埃希菌o157:h7 血清抗体 调查

原文传递

大肠杆菌O157:H7的毒力岛与毒力因子的研究进展 被引量：16

6

作者 周勇 万成松 《微生物学免疫学进展》 2006年第2期58-62,共5页

大肠杆菌O157:H7是肠出血性大肠埃希菌的主要血清型,能引起人的出血性肠炎和溶血性尿路综合征。大肠杆菌O157:H7致病机制与其毒力岛编码的毒力因子有关,这些毒力岛包括染色体上的LEE岛、前噬菌体上的slt基因、大质粒上的hly、ka tP、esp... 大肠杆菌O157:H7是肠出血性大肠埃希菌的主要血清型,能引起人的出血性肠炎和溶血性尿路综合征。大肠杆菌O157:H7致病机制与其毒力岛编码的毒力因子有关,这些毒力岛包括染色体上的LEE岛、前噬菌体上的slt基因、大质粒上的hly、ka tP、espP、toxB、stcE基因。大肠杆菌O157:H7致病机理不是由单一毒力因子所决定,而是多种毒力因子共同作用的结果。 展开更多

关键词 肠出血性大肠埃希菌o157:h7 毒力岛 毒力因子

下载PDF 职称材料

我国部分产生志贺毒素肠出血性大肠埃希菌O157∶H7脉冲电场凝胶电泳分型 被引量：18

7

作者 逄波 景怀琦 +3 位作者 郑翰 孙晖 赵爱兰 徐建国 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期123-126,共4页

目的　探讨我国部分地区产生志贺毒素的肠出血性大肠埃希菌 (EHEC)O15 7∶H7菌株的分布、流行以及分型情况。方法　用脉冲电场凝胶电泳 (PFGE)方法进行分型 ,辅以药物敏感性试验对 5 1株产生志贺毒素的EHECO15 7∶H7菌株进行研究。结果... 目的　探讨我国部分地区产生志贺毒素的肠出血性大肠埃希菌 (EHEC)O15 7∶H7菌株的分布、流行以及分型情况。方法　用脉冲电场凝胶电泳 (PFGE)方法进行分型 ,辅以药物敏感性试验对 5 1株产生志贺毒素的EHECO15 7∶H7菌株进行研究。结果　根据细菌染色体DNA的XbaI酶切图谱 ,可将从江苏省徐州市等地分离的 5 1株产生志贺毒素的EHECO15 7∶H7菌株分成 8个PFGE型别 (PFGE1～PFGE8) ,宁夏菌株为PFGE1型和 2型 ,徐州菌株有 6个PFGE型。 1986～ 1988年的分离菌株属于PFGE7型 ,1999、2 0 0 0年病人分离株的优势型别分别是PFGE5型与 3型。 1999年爆发性流行期间从患者分离的 5株菌属于PFGE 5型 ,从家畜家禽的粪便、食品、蔬菜等标本分离的 19株菌 ,可以分为PFGE3～ 6等 4个型别 ,其中 ,PFGE5型占优势 (10株菌 )。结论　爆发性流行的发生与携带病原菌的家畜家禽粪便污染的食品、蔬菜等有关 ,从我国部分地区分离的EHECO15 展开更多

关键词 志贺毒素 肠出血性大肠埃希菌o157:h7 脉冲电场凝胶电泳 分型 腹泻

原文传递

中国部分地区人群和动物中肠出血性大肠埃希菌O157∶H7分布特征 被引量：9

8

作者 李永红 《疾病监测》 CAS 2008年第7期397-400,共4页

自20世纪90年代以来,中国大部分省、市、自治区相继开展了人群和动物的肠出血性大肠埃希菌O157∶H7病原监测。监测结果显示:①在不同的地区和时间,人群中O157∶H7的感染率/带菌率不同;②动物中O157∶H7的带菌率存在地区、时间及种群的差... 自20世纪90年代以来,中国大部分省、市、自治区相继开展了人群和动物的肠出血性大肠埃希菌O157∶H7病原监测。监测结果显示:①在不同的地区和时间,人群中O157∶H7的感染率/带菌率不同;②动物中O157∶H7的带菌率存在地区、时间及种群的差异;③人群O157∶H7的感染与动物带菌存在关联。提示,加强人群和动物的病原监测、揭示O157∶H7在人群和动物中的流行规律、降低动物的感染或带菌率对预防与控制人群肠出血性大肠埃希菌O157∶H7的感染具有重要意义。 展开更多

关键词 肠出血性大肠埃希菌o157:h7 病原监测 分布

下载PDF 职称材料

肠出血性大肠埃希菌O157:H7研究进展 被引量：7

9

作者 刘翔 李淑清 +1 位作者 杨景波 刘丽 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期630-631,共2页

关键词 肠出血性大肠埃希菌o157:h7 血栓形成性血小板减少性紫癜 o157:h7大肠埃希菌 溶血性尿毒综合征 出血性结肠炎 医疗卫生 发病机制 科研机构 并发症 病死率

下载PDF 职称材料

食品中肠出血性大肠埃希菌O_(157):H_7的PCR检测 被引量：6

10

作者 邢立新 孙武长 +3 位作者 刘桂华 乔凤 龚云伟 黄鑫 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1504-1505,共2页

目的建立快速准确检测食品中肠出血性大肠埃希菌O157:H7的方法。方法采用多重聚合酶链式反应技术(MPCR)特异性扩增肠出血性大肠埃希菌O157:H7的STX、rfbEf、liC基因。结果分别在228,378,709 bp处扩增出3个目的基因片段,且只有肠出血性... 目的建立快速准确检测食品中肠出血性大肠埃希菌O157:H7的方法。方法采用多重聚合酶链式反应技术(MPCR)特异性扩增肠出血性大肠埃希菌O157:H7的STX、rfbEf、liC基因。结果分别在228,378,709 bp处扩增出3个目的基因片段,且只有肠出血性大肠埃希菌O157:H7获得扩增,其他菌种扩增均呈阴性。结论PCR方法比传统细菌检测方法更特异、快速、灵敏和简便,为食品中肠出血性大肠埃希菌O157:H7的快速检测提供了新的手段。 展开更多

关键词 食品 肠出血性大肠埃希菌o157:h7 聚合酶链式反应

下载PDF 职称材料

上海市浦东新区肠出血性大肠埃希菌O157：H7的监测研究 被引量：7

11

作者 沈小明 赵冰 +3 位作者 胡培玉 张继伦 章红红 邬永明 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2008年第8期570-573,共4页

目的了解上海浦东新区腹泻病人、宿主动物肠出血性大肠埃希杆菌(E.coli)O157:H7携带情况以及市售食品的污染状况,为疾病防治工作提供决策依据。方法于2003～2006年的5～10月,在设置的监测点与超市采集家禽和腹泻病人粪便及禽畜肉制品;... 目的了解上海浦东新区腹泻病人、宿主动物肠出血性大肠埃希杆菌(E.coli)O157:H7携带情况以及市售食品的污染状况,为疾病防治工作提供决策依据。方法于2003～2006年的5～10月,在设置的监测点与超市采集家禽和腹泻病人粪便及禽畜肉制品;应用免疫磁珠富集,山梨醇麦康凯平板和Chromager O157显色平板分离培养E.coliO157:H7,生化和血清学反应进行鉴定。结果E.coliO157:H7阳性率分别为:腹泻病人粪便0.24%,鸡粪2.95%,鸭粪3.83%,家畜肉15.05%,家禽肉2.25%。检出的67株E.coliO157:H7中,仅1株来自腹泻病人的E.coliO157:H7具有毒力基因。结论浦东新区腹泻病人、宿主动物及其肉类食品中存在E.coliO157:H7感染或污染,存在E.coliO157:H7感染流行的潜在危险。 展开更多

关键词 肠出血性大肠埃希菌o157:h7 监测 毒力基因 腹泻 宿主动物

下载PDF 职称材料

肠出血性大肠埃希菌O157∶H7环介导恒温扩增快速检测方法的建立与应用 被引量：7

12

作者 徐义刚 崔丽春 +4 位作者 李苏龙 于恒纯 李丹丹 谢晓峰 姜艳春 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期618-623,共6页

目的肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)O157∶H7是一种重要的人畜共患病致病菌,主要通过被污染的食物传播,引起出血性结肠炎,建立其快速检测方法具有重要意义。方法基于EHEC O157∶H7保守的rfbE基因序列,设... 目的肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)O157∶H7是一种重要的人畜共患病致病菌,主要通过被污染的食物传播,引起出血性结肠炎,建立其快速检测方法具有重要意义。方法基于EHEC O157∶H7保守的rfbE基因序列,设计4条引物,利用环介导等温扩增技术(loop-mediatedisothermal amplification,LAMP),成功建立了EHEC O157∶H7LAMP快速检测方法 ,60min内即可完成致病菌检测。结果利用该LAMP方法对30种共38株细菌进行检测,所试EHEC O157∶H7均为阳性结果 ,说明该方法具有高度特异性。本方法对纯培养的EHEC O157∶H7检测限为12CFU/mL,污染食品中EHEC O157∶H7的检测限为18CFU/g。实践应用表明,对1121份进出口肉类、奶类制品及人工污染样品等进行检测,检出57份LAMP阳性,与采用AOAC标准检测结果的符合率为100%。结论该LAMP方法操作简便、特异性强、灵敏度高,具有良好的实用性。 展开更多

关键词 肠出血性大肠埃希菌o157∶h7 rfbE基因 环介导恒温扩增 快速检测

下载PDF 职称材料

检测肠出血性大肠埃希菌O157:H7的环介导等温扩增和PCR法比较 被引量：7

13

作者 姜容 龙北国 +3 位作者 曾桂芬 王丹 范宏英 吴娴波 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1026-1030,共5页

目的建立基于环介导等温扩增(LAMP)技术的肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157:H7快速简便检测方法,并与PCR进行比较。方法针对EHEC O157:H7保守的rfbE基因序列,设计特异性引物,建立LAMP和PCR检测技术并优化其反应条件,比较这两种检测方法的... 目的建立基于环介导等温扩增(LAMP)技术的肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157:H7快速简便检测方法,并与PCR进行比较。方法针对EHEC O157:H7保守的rfbE基因序列,设计特异性引物,建立LAMP和PCR检测技术并优化其反应条件,比较这两种检测方法的灵敏度、特异性和对实际样品的检测结果。结果成功建立了LAMP和PCR检测体系,灵敏度检测结果显示,LAMP检测限低至10 cfu/ml,PCR检测限为102cfu/ml,LAMP检测灵敏度高于PCR;对39株近源菌进行检测,结果显示,LAMP法仅7株EHEC O157:H7得到阳性结果,非EHEC O157:H7菌株均为阴性,PCR产物则出现非特异性条带,LAMP法特异性比PCR法高。对于32份猪肉样品的检测,LAMP和PCR与常规检测结果一致,3份样品检测阳性。结论 LAMP检测技术的特异性和灵敏度较PCR高,并且操作简便、检测成本低,耗时短,更有望发展成为快速准确检测EHEC O157:H7的有效手段。 展开更多

关键词 肠出血性大肠埃希菌o157:h7 环介导等温扩增技术 PCR技术 rfbE基因

下载PDF 职称材料

肠出血性大肠埃希菌遗传基因分型方法比较 被引量：6

14

作者 裴迎新 王晓平 +2 位作者 苏华 寺岛 淳 王滨有 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期525-527,共3页

目的对肠出血性大肠埃希菌（EHEC）O157：H7的遗传基因型别进行不同分子分型方法的对比研究,以对EHEC的分子流行病学追踪提供更为行之有效的方法。方法采用核酸脉冲场凝胶电泳（PFGE）与多位点串联重复序列（VNTR）分析（MLVA）两种方法... 目的对肠出血性大肠埃希菌（EHEC）O157：H7的遗传基因型别进行不同分子分型方法的对比研究,以对EHEC的分子流行病学追踪提供更为行之有效的方法。方法采用核酸脉冲场凝胶电泳（PFGE）与多位点串联重复序列（VNTR）分析（MLVA）两种方法对16株EHEC O157：H7进行分析。结果在PFGE的研究中,依据经XbaI及确认BlnI酶切后,具有相同电泳图谱的菌株被定义为PFGE同一群落的菌株,将16株菌株分成6个型别。MLVA通过对9个位点的串联重复序列的比较研究,16株菌株在3个位点上没有显示出区别,在另外6个位点上等位基因的数目为2~7种,16株细菌被分为14个MLVA的型别。流行病学资料表明,这些菌株为散发病例分离株,分离地域上基本没有关联,因此,MLVA的结果与流行病学信息高度相关。结论MLVA能够区分无法区分的PFGE型别,且可以区分来自于不同地理区域的散发菌株,具有区分肠出血性大肠埃希菌O157：H7的潜力。 展开更多

关键词 肠出血性大肠埃希菌o157:h7 核酸脉冲场凝胶电泳(PFGE) 多位点串联重复序列(VNTR)分析(MLVA) 分型

下载PDF 职称材料

TaqMan探针荧光PCR检测肠出血性大肠埃希菌O157:H7方法的建立 被引量：5

15

作者 刘生峰 肖进文 +5 位作者 刘利成 杨俊 王昱 聂福平 周庆 李应国 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第5期6-10,共5页

肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagie Escherichia coli,EHEC)O157:H7是一种重要的传染病病原菌,以EHEC O157:H7标准菌株rfbE保守区设计一对特异引物和一条探针,建立了检测EHEC O157:H7核酸的荧光定量PCR检测方法。实验结果表明荧光定... 肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagie Escherichia coli,EHEC)O157:H7是一种重要的传染病病原菌,以EHEC O157:H7标准菌株rfbE保守区设计一对特异引物和一条探针,建立了检测EHEC O157:H7核酸的荧光定量PCR检测方法。实验结果表明荧光定量PCR检测方法特异性好,最低检测限为20 cfu/mL,线性范围是102～108cfu/mL。稳定性试验表明批内变异系数和批间变异系数分别为2.06%和2.45%。 展开更多

关键词 肠出血性大肠埃希菌o157:h7 荧光PCR 检测

下载PDF 职称材料

肠出血性大肠埃希菌O157:H7感染分子流行病学方法研究进展 被引量：5

16

作者 张平平 朱叶飞 朱凤才 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2009年第12期939-942,共4页

肠出血性大肠埃希菌O157∶H7严重危害着人类的健康,已成为世界范围内的公共卫生问题。随着分子生物学的发展,质粒图谱分析,脉冲场凝胶电泳分型、随机扩增多态性分析、限制性片段长度多态性分析、扩增片段长度多态性分析、多位点可变数... 肠出血性大肠埃希菌O157∶H7严重危害着人类的健康,已成为世界范围内的公共卫生问题。随着分子生物学的发展,质粒图谱分析,脉冲场凝胶电泳分型、随机扩增多态性分析、限制性片段长度多态性分析、扩增片段长度多态性分析、多位点可变数量串联重复序列分析、多位点测序分型等技术被先后应用于O157∶H7感染的分子流行病学研究,本文对其研究进展进行了简要的综述。 展开更多

关键词 肠出血性大肠埃希菌o157:h7 分子流行病学 分子分型 综述

原文传递

基因芯片检测肠出血性大肠埃希菌O157∶H7 被引量：4

17

作者 金慧英 陶开华 +2 位作者 李越希 李法卿 张锦海 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期79-82,共4页

目的设计和制备快速、特异、灵敏的检测大肠埃希菌O157∶H7基因芯片。方法选择O157∶H7特异的rfbE、fliC、SLT1和SLT2基因,设计引物和探针,并制备检测芯片,通过两次聚合酶链反应(PCR)扩增,制备荧光标记的靶序列,并与芯片进行杂交,检测O... 目的设计和制备快速、特异、灵敏的检测大肠埃希菌O157∶H7基因芯片。方法选择O157∶H7特异的rfbE、fliC、SLT1和SLT2基因,设计引物和探针,并制备检测芯片,通过两次聚合酶链反应(PCR)扩增,制备荧光标记的靶序列,并与芯片进行杂交,检测O157∶H7菌株和非O157病原体。结果O157∶H7菌株在采用单一和多重PCR两种方法制备的荧光标记靶序列与芯片杂交,均在芯片相应探针处出现阳性信号,非O157杂交结果均为阴性;芯片检测灵敏度比PCR检测高。结论基因芯片可以快速、灵敏、特异地检测O157∶H7,为建立快速灵敏的检测细菌病原体和鉴别诊断的自动分析系统提供了新方法。 展开更多

关键词 肠出血性大肠埃希菌o157:h7 基因芯片检测 o157:h7菌株 聚合酶链反应(PCR) 自动分析系统 荧光标记 多重PCR PCR检测 检测灵敏度 细菌病原体 方法选择 FLIC 设计引物 检测芯片 阳性信号 鉴别诊断 靶序列 制备 杂交 特异

原文传递

肠出血性大肠埃希菌O157∶H7黏附HeLa细胞模型的建立 被引量：4

18

作者 余抒 顾江 +6 位作者 曾浩 杨琴 刘艳青 张卫军 罗萍 王庆旭 毛旭虎 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第20期1933-1935,共3页

目的建立肠出血性大肠埃希菌O157∶H7体外黏附HeLa细胞模型,为进一步研究其致病机制奠定基础。方法以细菌黏附HeLa细胞数量为指标,分别评价细菌数量、细菌与细胞孵育时间对细菌黏附数量的影响,得到最佳条件,最后肌动蛋白荧光染色(FAS)... 目的建立肠出血性大肠埃希菌O157∶H7体外黏附HeLa细胞模型,为进一步研究其致病机制奠定基础。方法以细菌黏附HeLa细胞数量为指标,分别评价细菌数量、细菌与细胞孵育时间对细菌黏附数量的影响,得到最佳条件,最后肌动蛋白荧光染色(FAS)试验鉴定模型。结果加入细菌为1×105CFU,细菌与细胞孵育4h时,黏附细胞的数量最佳,FAS检测发现该条件下细菌能够引起细胞特异性黏附、擦拭(attaching&effacing,A/E)损伤,模型建立成功。结论成功建立O157∶H7体外黏附HeLa细胞模型,为进一步研究其致病机制提供了条件。 展开更多

关键词 肠出血性大肠埃希菌o157:h7 细胞模型 hELA细胞

下载PDF 职称材料

湖北省首次分离出肠出血性大肠埃希菌O157∶H7 被引量：4

19

作者 龙一兵 郑华英 +3 位作者 熊燕 陈智 齐小保 徐小菊 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 2002年第2期121-132,共12页

目的 :为了解肠出血性大肠埃希菌O15 7∶H7(EHECO15 7∶H 7)在我省的动物宿主种类和菌型特征 ,制定相应流行病防治对策。方法 :采用传统方法 ,在 6～ 10月份肠道传染病高发季节 ,对武汉市 3大养殖场、屠宰场的肉猪、奶牛及武汉 7大城区... 目的 :为了解肠出血性大肠埃希菌O15 7∶H7(EHECO15 7∶H 7)在我省的动物宿主种类和菌型特征 ,制定相应流行病防治对策。方法 :采用传统方法 ,在 6～ 10月份肠道传染病高发季节 ,对武汉市 3大养殖场、屠宰场的肉猪、奶牛及武汉 7大城区的农贸商场的水产品进行调查采样 ,共采集 811份样品 ,进行EHECO15 7∶H7检测。结果 :341份猪粪样品中检出 1株EHECO15 7∶H7,阳性率为 0 .2 9% ;2 5 5份奶牛粪便样品中检出 7株EHECO15 7∶H7,阳性率为2 .75 % ;其他类标本中未检出。分离的这 8株阳性菌株与传统的EHECO15 7∶H7存在许多不同之处 ,它们均发酵山梨醇 ,大部分菌株不分解棉子糖 ,也存在不分解卫茅醇的菌株 ,而 β -葡萄糖醛酸酶试验均为阳性。在致病因子上 ,检测现有的几种毒力基因均为阴性。结论 :在我省首次检出 8株EHECO15 7∶H7,说明其普遍存在于动物体内 ,对环境、食品构成较大威胁。 展开更多

关键词 湖北 肠出血性大肠埃希菌o157:h7 牛粪 猪粪 分离

下载PDF 职称材料

琼脂糖凝胶电泳与核酸印迹杂交法检测细菌毒力基因PCR产物的灵敏度比较研究 被引量：3

20

作者 綦廷娜 刘志广 +2 位作者 王涛 李培京 叶长芸 《疾病监测》 CAS 2011年第8期651-653,共3页

目的探讨核酸印迹杂交法在检测细菌毒力基因方面的应用价值。方法分别以10倍连续稀释的O157∶H7肠出血性大肠埃希菌和血清2型猪链球菌染色体提取物为模板,与志贺毒素2基因(stx2)和荚膜多糖2J基因(cps2J)特异性引物进行聚合酶链式反应(P... 目的探讨核酸印迹杂交法在检测细菌毒力基因方面的应用价值。方法分别以10倍连续稀释的O157∶H7肠出血性大肠埃希菌和血清2型猪链球菌染色体提取物为模板,与志贺毒素2基因(stx2)和荚膜多糖2J基因(cps2J)特异性引物进行聚合酶链式反应(PCR)。用1%琼脂糖凝胶电泳及核酸印迹杂交法检测PCR产物,比较两种方法的最低检测限。结果 1%琼脂糖凝胶电泳对EDL933菌株stx2基因PCR产物的最低检测限为6.7×102cfu(56.87 pg)/PCR体系,对SC84菌株cps2J基因PCR产物的最低检测限为4.3×102 cfu(12.65 pg)/PCR体系;核酸印迹杂交法对EDL933菌株stx2基因PCR产物的最低检测限为6.7×10-1 cfu(56.87 fg)/PCR体系,对SC84菌株cps2J基因PCR产物的最低检测限为4.3×10-1 cfu(12.65 fg)/PCR体系。结论用核酸印迹杂交法检测肠出血性大肠埃希菌stx2基因和猪链球菌cps2J基因PCR产物的灵敏度均比普通琼脂糖凝胶电泳检测法高了1000倍。 展开更多

关键词 核酸印迹杂交 琼脂糖凝胶电泳 肠出血性大肠埃希菌o157∶h7 猪链球菌2型 stx2基因 cps2J基因 检测灵敏度

原文传递