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金黄色葡萄球菌ClfA基因表达产物在小鼠的免疫原性分析
被引量：
2
1
作者
杨明锋
陈创夫
+4 位作者
曹旭东
刘君
王正荣
李贞
乔军
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第12期1584-1591,共8页
为分析原核表达的金黄色葡萄球菌ClfA部分基因表达产物的免疫原性,作者采用PCR方法从奶牛乳房炎病例中分离的金黄色葡萄球菌中克隆出ClfA基因的部分片段,测序后用DNAman软件进行抗原位点分析。构建原核表达质粒ClfA-pET-28a+,转化BL21(D...
为分析原核表达的金黄色葡萄球菌ClfA部分基因表达产物的免疫原性,作者采用PCR方法从奶牛乳房炎病例中分离的金黄色葡萄球菌中克隆出ClfA基因的部分片段,测序后用DNAman软件进行抗原位点分析。构建原核表达质粒ClfA-pET-28a+,转化BL21(DE3)菌,经IPTG诱导表达。用His-bind柱纯化表达蛋白,加弗氏佐剂混匀后免疫小鼠。小鼠分娩后乳腺内攻菌,检查乳腺组织病理变化,乳腺组织中金葡菌数量和TNF-α水平来评价原核表达蛋白的免疫保护效果。结果显示转化BL21(DE3)菌,经IPTG诱导可以表达ClfA蛋白。原核表达蛋白抗原免疫小鼠可以显著降低乳腺组织内金葡菌数量,TNF-α水平也显著低于对照组和全菌蛋白抗原组,提示原核表达的ClfA蛋白免疫小鼠可以减少乳腺内金葡菌定植的数量,减轻乳腺内感染造成炎症的严重程度。本研究表明原核表达金黄色葡萄球菌ClfA蛋白有一定的免疫保护效果,为奶牛乳房炎疫苗的研究提供科学依据。
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关键词
乳房炎
金黄色葡萄球菌
凝聚
因子
A(
clfa
)
小鼠
免疫原性
下载PDF
职称材料
金黄色葡萄球菌凝聚因子A区基因的克隆表达及表达产物的免疫学特性
被引量：
11
2
作者
姜晓娟
郝永清
+2 位作者
张爱荣
范鑫
陈晓杰
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第7期626-631,共6页
采用PCR技术对引起乳牛乳腺炎的金黄色葡萄球菌凝聚因子(ClfA)A区基因进行了扩增和克隆测序,并对测序结果用DNAStar软件进行了抗原表位分析,成功构建了原核表达质粒pET-32a-ClfA A。将其转入宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,证实目的蛋...
采用PCR技术对引起乳牛乳腺炎的金黄色葡萄球菌凝聚因子(ClfA)A区基因进行了扩增和克隆测序,并对测序结果用DNAStar软件进行了抗原表位分析,成功构建了原核表达质粒pET-32a-ClfA A。将其转入宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,证实目的蛋白以可溶形式存在。用His.Bind柱对其纯化后获得了纯度较高的蛋白。纯化后的蛋白与弗氏佐剂乳化后免疫家兔得到了较高效价的抗血清,通过ELISA、试管凝集试验、吞噬调理试验、抗体抗金黄色葡萄球菌黏附能力检测等对表达产物及制备的超免疫血清进行了检测。试验证明目的蛋白具有黏附活性,自制的超免疫血清具有抗金黄色葡萄球菌黏附至牛纤维蛋白原的作用以及吞噬调理作用,所表达的蛋白为ClfA A蛋白。
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关键词
乳牛
乳腺炎
金黄色葡萄球菌
凝聚
因子
(
clfa
)A区基因
下载PDF
职称材料
题名
金黄色葡萄球菌ClfA基因表达产物在小鼠的免疫原性分析
被引量：
2
1
作者
杨明锋
陈创夫
曹旭东
刘君
王正荣
李贞
乔军
机构
石河子大学动物科技学院
新疆民族与地方高发病教育部重点实验室
石河子大学医学院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第12期1584-1591,共8页
基金
兵团博士资金(2008JC08)
文摘
为分析原核表达的金黄色葡萄球菌ClfA部分基因表达产物的免疫原性,作者采用PCR方法从奶牛乳房炎病例中分离的金黄色葡萄球菌中克隆出ClfA基因的部分片段,测序后用DNAman软件进行抗原位点分析。构建原核表达质粒ClfA-pET-28a+,转化BL21(DE3)菌,经IPTG诱导表达。用His-bind柱纯化表达蛋白,加弗氏佐剂混匀后免疫小鼠。小鼠分娩后乳腺内攻菌,检查乳腺组织病理变化,乳腺组织中金葡菌数量和TNF-α水平来评价原核表达蛋白的免疫保护效果。结果显示转化BL21(DE3)菌,经IPTG诱导可以表达ClfA蛋白。原核表达蛋白抗原免疫小鼠可以显著降低乳腺组织内金葡菌数量,TNF-α水平也显著低于对照组和全菌蛋白抗原组,提示原核表达的ClfA蛋白免疫小鼠可以减少乳腺内金葡菌定植的数量,减轻乳腺内感染造成炎症的严重程度。本研究表明原核表达金黄色葡萄球菌ClfA蛋白有一定的免疫保护效果,为奶牛乳房炎疫苗的研究提供科学依据。
关键词
乳房炎
金黄色葡萄球菌
凝聚
因子
A(
clfa
)
小鼠
免疫原性
Keywords
mastitis
Staphylococcus aureus
clumping factor A（
clfa
）
mouse
immunogenicity
分类号
S852.611 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
金黄色葡萄球菌凝聚因子A区基因的克隆表达及表达产物的免疫学特性
被引量：
11
2
作者
姜晓娟
郝永清
张爱荣
范鑫
陈晓杰
机构
内蒙古农业大学动物科学与医学学院
出处
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第7期626-631,共6页
基金
国家自然科学基金项目(30760183)
教育部博士点基金项目(20070129003)
文摘
采用PCR技术对引起乳牛乳腺炎的金黄色葡萄球菌凝聚因子(ClfA)A区基因进行了扩增和克隆测序,并对测序结果用DNAStar软件进行了抗原表位分析,成功构建了原核表达质粒pET-32a-ClfA A。将其转入宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,证实目的蛋白以可溶形式存在。用His.Bind柱对其纯化后获得了纯度较高的蛋白。纯化后的蛋白与弗氏佐剂乳化后免疫家兔得到了较高效价的抗血清,通过ELISA、试管凝集试验、吞噬调理试验、抗体抗金黄色葡萄球菌黏附能力检测等对表达产物及制备的超免疫血清进行了检测。试验证明目的蛋白具有黏附活性,自制的超免疫血清具有抗金黄色葡萄球菌黏附至牛纤维蛋白原的作用以及吞噬调理作用,所表达的蛋白为ClfA A蛋白。
关键词
乳牛
乳腺炎
金黄色葡萄球菌
凝聚
因子
(
clfa
)A区基因
Keywords
dairy cow
mastitis
Stapkylococcus aureus
clumping factor A（
clfa
） region A gene
分类号
S852.611 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
金黄色葡萄球菌ClfA基因表达产物在小鼠的免疫原性分析
杨明锋
陈创夫
曹旭东
刘君
王正荣
李贞
乔军
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
2
下载PDF
职称材料
2
金黄色葡萄球菌凝聚因子A区基因的克隆表达及表达产物的免疫学特性
姜晓娟
郝永清
张爱荣
范鑫
陈晓杰
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2009
11
下载PDF
职称材料
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