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细胞衍生物在牙周组织再生中的应用 被引量:2
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作者 梁超 廖立 田卫东 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第17期2731-2738,共8页
背景:包括脱细胞外基质、外泌体、凋亡囊泡及条件培养基在内的细胞衍生物具有免疫调节、促进血管形成、骨再生、韧带重塑的作用,具有促进干细胞的趋化、迁移、增殖和黏附的能力,其优良的特性使其在牙周组织工程方面有良好的应用前景和... 背景:包括脱细胞外基质、外泌体、凋亡囊泡及条件培养基在内的细胞衍生物具有免疫调节、促进血管形成、骨再生、韧带重塑的作用,具有促进干细胞的趋化、迁移、增殖和黏附的能力,其优良的特性使其在牙周组织工程方面有良好的应用前景和临床转化价值。目的:综述细胞外基质、外泌体、凋亡囊泡和条件培养基4种细胞衍生物的特点及在牙周复杂组织结构再生修复领域的作用及最新进展。方法:以“regeneration,periodontal tissue,tissue engineering,decellularized matrix,exosome,apoptotic extracellular vesicle,condition medium”为英文检索词,以“再生、牙周组织、组织工程、外泌体、凋亡囊泡、细胞外基质、条件培养基”为中文检索词,检索PubMed和中国知网数据库发表的相关文献,最后纳入76篇文献进行分析与讨论。结果与结论:①在4种细胞衍生物中,细胞外基质具备最好的机械性能和纤维结构,在牙周组织工程中作为生物支架提供物理化学信号并参与力学信号转导,适用于需要支架支持的牙周再生场景;近年来,可溶性脱细胞基质生物墨水的发展为个性化牙周缺损再生支架的制作提供了可能。②外泌体是成分最单一的细胞衍生物,具备免疫调节的作用,促进细胞迁移分化;作为载体,可用于搭载目标分子调控牙周再生,促进韧带重塑和骨再生,适合用于牙周组织工程载药的场景。③凋亡囊泡是凋亡过程中产生的、具有强免疫调节作用的胞外囊泡,可以招募干细胞和巨噬细胞,并通过信号转导决定干细胞的命运,可以用于需要改善免疫调节的场合以促进牙周再生,工程化胞外囊泡是目前研究的热点,有望用于靶向调节体内免疫。④条件培养基的提取简单,且是完全无创的,它为组织再生提供必需的营养物质和生长因子,这些成分对于成功的牙周再生至关重要,因此条件培养基尤其适用于� 展开更多
关键词 牙周再生 细胞外基质 外泌体 凋亡囊泡 脱细胞组织 可溶性细胞外基质 牙周组织
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根尖牙乳头干细胞来源凋亡囊泡对巨噬细胞糖酵解相关酶的表达及炎症表型影响的初探研究
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作者 曾涵柔 李长芳 +4 位作者 王可境 张婧 骞爱荣 胡丽芳 王玮 《口腔生物医学》 2024年第1期6-11,共6页
目的:探究根尖牙乳头干细胞(SCAP)来源的凋亡囊泡(apoVs)是否通过影响糖酵解相关酶调控巨噬细胞(BMDMs)炎症表型,进而对炎症反应产生调节作用。方法:体外培养鉴定人源SCAP,经星形孢菌素诱导凋亡后提取apoVs,利用扫描电镜、流式细胞术等... 目的:探究根尖牙乳头干细胞(SCAP)来源的凋亡囊泡(apoVs)是否通过影响糖酵解相关酶调控巨噬细胞(BMDMs)炎症表型,进而对炎症反应产生调节作用。方法:体外培养鉴定人源SCAP,经星形孢菌素诱导凋亡后提取apoVs,利用扫描电镜、流式细胞术等对其进行表征鉴定。分别空白处理、脂多糖(LPS)处理、LPS同apoVs共处理大鼠骨髓来源的BMDMs,利用流式细胞术检测促炎表型BMDMs表面标志分子CD80、CD86的表达,利用Western blot检测BMDMs糖酵解相关酶的表达。结果:根尖牙乳头干细胞来源的apoVs能被BMDMs摄取,促炎表型标志分子CD80、CD86的表达下调,糖酵解相关酶葡萄糖转运蛋白(GLUT)1、GLUT3的表达显著下调(P<0.05)。结论:SCAP来源apoVs能降低促炎型BMDMs的分布,并对其糖酵解相关酶的表达产生影响。 展开更多
关键词 根尖牙乳头干细胞 巨噬细胞 凋亡囊泡 糖酵解
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牙髓干细胞来源的凋亡囊泡对骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化能力的影响
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作者 王鑫源 姚文德 +4 位作者 李彦 习佳飞 岳文 周军年 贺慧霞 《解放军医学院学报》 CAS 2024年第6期673-680,共8页
背景间充质干细胞来源的凋亡囊泡具有促进骨组织再生的作用,目前关于人牙髓干细胞凋亡囊泡(apoptotic vesicles derived from human dental pulp stem cells,hDPSC-apovs)用于骨组织再生的研究尚未见报道。目的探讨hDPSC-apovs对小鼠骨... 背景间充质干细胞来源的凋亡囊泡具有促进骨组织再生的作用,目前关于人牙髓干细胞凋亡囊泡(apoptotic vesicles derived from human dental pulp stem cells,hDPSC-apovs)用于骨组织再生的研究尚未见报道。目的探讨hDPSC-apovs对小鼠骨髓间充质干细胞(mouse bone marrow mesenchymal stem cells,mBMSC)增殖和成骨分化能力的影响。方法原代培养、分离和鉴定hDPSC,采用星孢素(staurosporine,STS)诱导细胞凋亡,高速离心法分离hDPSC-apovs并鉴定。将mBMSC与不同浓度的hDPSC-apovs(0μg/mL、0.2μg/mL、1μg/mL、5μg/mL、25μg/mL)进行共培养,CCK-8法检测不同浓度hDPSCapovs对mBMSC增殖能力的影响。mBMSC与不同浓度的hDPSC-apovs在成骨诱导培养基中共培养7 d后,茜素红染色分析钙结节形成,qPCR检测各组mBMSC的成骨分化相关基因Alp、Runx2、Spp1、Bglap的表达。结果与不含hDPSCapovs的对照组相比,0.2μg/mL、lμg/mL浓度hDPSC-apovs均能够促进mBMSC的增殖(P<0.05),而5μg/mL、25μg/mL浓度hDPSC-apovs则抑制mBMSC的增殖(P<0.05)。各浓度hDPSC-apovs处理组的钙结节形成量均高于对照组(P<0.05);qPCR结果显示,5μg/mL、25μg/mL组Alp、Runx2、Spp1、Bglap表达均上调(P<0.05),1μg/mL组只有Alp和Runx2表达上调,0.2μg/mL组仅有Alp表达水平上调(P<0.05)。结论在本研究浓度范围内,低浓度的hDPSC-apovs对mBMSC增殖具有促进作用,高浓度则表现为抑制作用;hDPSC-apovs对于mBMSC的成骨分化有一定促进作用,且不同浓度hDPSCapovs对成骨相关基因表达的影响不同。 展开更多
关键词 牙髓干细胞 凋亡囊泡 骨髓间充质干细胞 增殖 骨再生
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间充质干细胞来源凋亡囊泡缓解牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导下巨噬细胞促炎状态的研究 被引量:5
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作者 叶庆元 李子涵 +4 位作者 王垭铮 刘世宇 周峻 刘思颖 王勤涛 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期791-798,共8页
目的探索骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMMSC)来源凋亡囊泡对小鼠巨噬细胞系RAW264.7极化状态的影响及对牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)诱导的促炎状态巨噬细胞的调控,为牙周炎治疗提供依据。方... 目的探索骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMMSC)来源凋亡囊泡对小鼠巨噬细胞系RAW264.7极化状态的影响及对牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)诱导的促炎状态巨噬细胞的调控,为牙周炎治疗提供依据。方法使用Operetta CLS高内涵分析系统动态观察星形孢菌素(staurosporine,STS)诱导的BMMSC的凋亡过程;使用场发射扫描电镜、动态光散射技术、流动电势法测量凋亡囊泡相关表征;使用Operetta CLS高内涵分析系统动态观察小鼠巨噬细胞系RAW264.7对5-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯(5-carboxy-tetramethylrhodamine,succinimidyl ester,5-TAMRA-SE)标记的凋亡囊泡的吞噬作用;采用实时荧光定量PCR检测精氨酸合酶-1(arginase-1,Arg-1)mRNA相对表达量;采用细胞免疫荧光、蛋白质印迹法检测凋亡囊泡对Pg来源的脂多糖(lipopolysaccharide from Pg,Pg-LPS)诱导的RAW264.7中诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的影响;采用酶联免疫吸附测定法检测Pg-LPS诱导的促炎状态RAW264.7培养上清液中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factro-α,TNF-α)的分泌情况。结果0.5μmol/L STS处理12 h后小鼠BMMSC形态皱缩,周围有明显的凋亡囊泡产生;凋亡囊泡的粒径为100~1000 nm,平均Zeta电势为-16.6 mV;RAW264.7可以通过伪足吞噬小鼠BMMSC来源的凋亡囊泡;小鼠BMMSC来源的凋亡囊泡联合白介素-4(interleukin4,IL-4)刺激的RAW 264.7 Arg-1 mRNA表达量(261.97±15.91)较单独IL-4刺激的mRNA表达量(115.29±15.42)显著升高(P<0.01);凋亡囊泡与Pg-LPS共同作用下,RAW 264.7 iNOS阳性细胞数量[(39.33±4.70)个]显著低于Pg-LPS单独诱导的RAW 264.7 iNOS阳性细胞数量[(95.33±4.70)个](P=0.007),RAW264.7 iNOS蛋白相对表达量(5.84±1.05)显著低于Pg-LPS单独诱导的RAW 264.7 iNOS蛋白相对表达量(14.91±3.87)(P<0.01),RAW264.7细胞培养上清液中TNF-α含量[(21899.71±409.73)ng/L]显著低于Pg-LPS单独诱导下RAW264.7细胞� 展开更多
关键词 牙周炎 间质干细胞 巨噬细胞 凋亡囊泡 极化状态
原文传递
脐带间充质干细胞凋亡囊泡在2型糖尿病小鼠拔牙创愈合中的作用研究
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作者 王一名 马振 +6 位作者 张武阳 李元 郭祥 邓天阁 李蓓 胡开进 薛洋 《中国实用口腔科杂志》 CAS CSCD 2023年第3期312-319,共8页
目的研究脐带间充质干细胞凋亡囊泡(apoptotic extracellular vesicles of umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSC-ApoEVs)能否促进2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)小鼠拔牙创愈合并探讨其机制。方法通过星胞菌素诱导U... 目的研究脐带间充质干细胞凋亡囊泡(apoptotic extracellular vesicles of umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSC-ApoEVs)能否促进2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)小鼠拔牙创愈合并探讨其机制。方法通过星胞菌素诱导UCMSCs凋亡,将提取的UCMSC-ApoEVs(PBS悬液)用于T2DM小鼠拔牙创(T2DM+ApoEVs组,db/db小鼠28只);另设置正常组(db/m小鼠28只)和T2DM组(db/db小鼠28只),拔牙创注入等量PBS。应用体视显微镜、Micro CT、HE染色等方法评估拔牙创愈合情况,通过免疫荧光染色、实时荧光定量PCR检测拔牙创愈合过程中炎症小体核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-1、Gasdermin家族蛋白D(GSDMD)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-18等巨噬细胞焦亡相关指标。结果T2DM组小鼠拔牙创黏膜愈合和新骨形成速率均显著低于正常组小鼠,最终愈合的骨体积分数(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.th)、骨小梁数目(Tb.N)显著下降,黏膜下层炎细胞浸润明显(P<0.05);T2DM+ApoEVs组小鼠拔牙创黏膜愈合和新骨形成均较T2DM组显著加速,BV/TV、Tb.th、Tb.N显著上调,炎细胞浸润减轻,差异均具有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光结果显示,3组小鼠拔牙创新生骨周围均存在明显的NLRP3、激活态Cleaved Caspase-1、GSDMD与巨噬细胞标志物F4/80共定位;T2DM组焦亡蛋白相对荧光强度高于正常组,而T2DM+ApoEVs组较T2DM组明显下调(P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,T2DM组拔牙创内的NLRP3、GSDMD以及IL-1β、IL-18的mRNA表达水平较正常组明显增高,而T2DM+ApoEVs组较T2DM组明显下调(P<0.05)。结论UCMSC-ApoEVs可通过抑制巨噬细胞焦亡减轻炎症,最终促进T2DM小鼠拔牙创黏膜及骨愈合。 展开更多
关键词 2型糖尿病 牙拔除术 脐带间充质干细胞 凋亡囊泡 焦亡
原文传递
凋亡胞外囊泡在炎症与肿瘤发生、发展中的作用研究进展 被引量:1
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作者 王玺惠 陈依 俞卫锋 《浙江医学》 CAS 2023年第10期1116-1120,共5页
凋亡胞外囊泡(Apo-EVs)是凋亡细胞分解释放的一类细胞外囊泡。近年来,相关研究发现Apo-EVs作为凋亡细胞的代谢产物,依赖体内凋亡程序启动后肌动蛋白参与细胞膜及其内容物的重新分配,表达凋亡细胞特有信号,并携带供体细胞内容物,通过细胞... 凋亡胞外囊泡(Apo-EVs)是凋亡细胞分解释放的一类细胞外囊泡。近年来,相关研究发现Apo-EVs作为凋亡细胞的代谢产物,依赖体内凋亡程序启动后肌动蛋白参与细胞膜及其内容物的重新分配,表达凋亡细胞特有信号,并携带供体细胞内容物,通过细胞-细胞间信号传递,参与细胞凋亡与再生、免疫调控、肿瘤免疫微环境重塑等过程。本文就Apo-EVs的结构、生物形成过程、生物学功能及其在炎症与肿瘤发生、发展中的作用研究进展作一综述。 展开更多
关键词 凋亡胞外囊泡 凋亡 炎症 肿瘤
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巨噬细胞来源的凋亡外囊泡对成骨细胞增殖的影响 被引量:1
7
作者 冀吉昀 张曦戈 +5 位作者 叶庆元 王垭铮 王晓雨 葛晓彤 李蕊 王勤涛 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期291-295,共5页
目的:探索巨噬细胞来源的凋亡外囊泡(apoEVs)对成骨细胞增殖活性的影响。方法:使用星孢菌素诱导RAW264.7细胞凋亡,差速离心法提取上清液内的细胞外囊泡,BCA蛋白定量对细胞外囊泡进行定量后,使用不同浓度(0.05~10mg/L)的apoEVs与MC3T3-E... 目的:探索巨噬细胞来源的凋亡外囊泡(apoEVs)对成骨细胞增殖活性的影响。方法:使用星孢菌素诱导RAW264.7细胞凋亡,差速离心法提取上清液内的细胞外囊泡,BCA蛋白定量对细胞外囊泡进行定量后,使用不同浓度(0.05~10mg/L)的apoEVs与MC3T3-E1细胞进行共培养,通过激光共聚焦观察apoEVs是否被MC3T3-E1细胞吞噬。随后分别在24、48、72h使用MTT法测定MC3T3-E1的增殖活性。使用RNA酶对apoEVs进行处理,与MC3T3-E1细胞进行共培养一段时间后,再次使用MTT法测定MC3T3-E1细胞活性。结果:成功提取出apoEVs,5mg/L以下浓度的apoEVs使得MC3T3-E1细胞增殖活性增强,而浓度10mg/L的apoEVs使得MC3T3-E1细胞增殖活性降低;各浓度的无RNA的apoEVs均使得细胞增殖活性降低。结论:巨噬细胞来源的apoEVs在低浓度时对MC3T3-E1有促增殖能力,而高浓度时有抑制增殖能力。其中apoEVs内的RNA可能在促进增殖中发挥主要作用。 展开更多
关键词 巨噬细胞 凋亡囊泡 成骨细胞 增殖 RNA
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