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农杆菌介导玉米胚性愈伤的遗传转化研究 被引量:10
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作者 杨爱国 刘爽 +3 位作者 赵琦 赵玉锦 张世煌 潘光堂 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第4期104-108,121,共6页
利用3种不同类型的农杆菌菌株C58、LBA4404和EHA105携带外源GUS基因分别侵染玉米自交系齐319和18(红)胚性愈伤。结果显示,不同的菌株和自交系间的搭配,其遗传转化效率差异很大,GUS瞬时表达率呈极显著差异(F=24.92**),抗性愈伤率也呈极... 利用3种不同类型的农杆菌菌株C58、LBA4404和EHA105携带外源GUS基因分别侵染玉米自交系齐319和18(红)胚性愈伤。结果显示,不同的菌株和自交系间的搭配,其遗传转化效率差异很大,GUS瞬时表达率呈极显著差异(F=24.92**),抗性愈伤率也呈极显著差异(F=19.43**)。其中,EHA105-齐319组合遗传转化效率最高,其GUS瞬时表达率平均为55.5%,最高可达71.1%;其抗性愈伤率平均为14.4%,最高可达20%;对22株转基因T0代抗性植株进行PCR检测,其中PCR呈阳性植株有11株,阳性率为50%。进一步对此22株T0代抗性植株进行叶片组织化学染色分析,结果显示,PCR呈阳性的植株中均有GUS基因表达。从而证明,外源GUS基因在转基因玉米T0代植株中得到稳定表达,而且验证了PCR检测结果和GUS表达分析结果的一致性。 展开更多
关键词 杆菌菌株 基因型 玉米愈伤 转化率
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影响农杆菌转化水稻的主要因素 被引量:2
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作者 崔广荣 《种子》 CSCD 北大核心 2003年第3期43-46,共4页
文章概述了影响农杆菌转化水稻的主要因子 :外植体、培养基、农杆菌菌株和载体、选择标记基因、水稻基因型、及 Vir区基因诱导因子。
关键词 影响因素 杆菌 水稻 外植体 培养基 杆菌菌株 载体 标记基因
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不同大豆品种对农杆菌EHA105和GV3101敏感性及共培养条件的优化 被引量:3
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作者 薄路花 曹越平 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2015年第1期26-31,共6页
不同的大豆品种对于农杆菌的敏感性不同,易感型的品种更有利于转化的进行。为了进一步优化大豆转化体系,实验利用农杆菌菌株EHA105、GV3101对东农50等10个大豆栽培品种进行敏感性测定。同时对2个易感性品种,东农50、中豆32共培养中添加... 不同的大豆品种对于农杆菌的敏感性不同,易感型的品种更有利于转化的进行。为了进一步优化大豆转化体系,实验利用农杆菌菌株EHA105、GV3101对东农50等10个大豆栽培品种进行敏感性测定。同时对2个易感性品种,东农50、中豆32共培养中添加光照处理,统计GUS染色率。结果表明,农杆菌GV3101的侵染能力较强,10个品种的平均GUS染色率达到66.7%,远远高于EHA105的平均值(38.4%);2个菌株对中豆32和东农50进行侵染,GUS染色率平均达到69.93%和73.62%,其他品种的GUS平均染色率显著低于东农50和中豆32;但个别品种对2个菌株的敏感性差异显著,在大豆遗传转化中对于品种和菌株的选择具有重要的意义。农杆菌的侵染时间为30~60min时效果较好;在共培养阶段进行光照处理有利于提高转化率。 展开更多
关键词 大豆 杆菌菌株 基因型 GUS染色率
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不同根癌农杆菌菌株对柑橘愈伤组织遗传转化效率的影响 被引量:12
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作者 李东栋 石玮 +1 位作者 邓秀新 伊华林 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期379-381,共3页
关键词 根癌杆菌菌株 柑橘 愈伤组织 遗传转化效率
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农杆菌菌株及其侵染浓度和时间对基于菜豆黄矮病毒表达载体瞬时表达外源基因的影响 被引量:2
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作者 李颖 张悦婧 +3 位作者 王馨 庞海龙 贾凌云 冯汉青 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期297-305,共9页
以3种常见的农杆菌菌株(GV3101、EHA105、LBA4404)和基于菜豆黄矮病毒的复制型植物表达载体为材料,利用农杆菌介导的瞬时转化技术,将外源绿色荧光蛋白(GFP)基因导入本氏烟(Nicotiana benthamiana L.)叶片中实现瞬时表达,并对不同农杆菌... 以3种常见的农杆菌菌株(GV3101、EHA105、LBA4404)和基于菜豆黄矮病毒的复制型植物表达载体为材料,利用农杆菌介导的瞬时转化技术,将外源绿色荧光蛋白(GFP)基因导入本氏烟(Nicotiana benthamiana L.)叶片中实现瞬时表达,并对不同农杆菌菌株、侵染浓度及侵染时间对于瞬时表达水平的影响进行比较。结果显示,3种不同的农杆菌菌株在介导转化本氏烟叶片瞬时表达GFP积累水平之间存在显著差异,其中EHA105菌株转化效率最高,LBA4404次之,GV3101最低。此外,GV3101、EHA105和LBA4404最适侵染浓度的OD600值分别为0.5、0.3和0.3;最佳侵染时间均为第4 d。研究结果表明农杆菌菌株染色体结构和Ti质粒的差异是影响瞬时转化过程中农杆菌侵染浓度及其外源基因瞬时表达效率的重要因素。 展开更多
关键词 根癌杆菌菌株 杆菌介导转化 双生病毒衍生载体 瞬时表达
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发根农杆菌A4菌株诱导三分三毛状根的研究 被引量:4
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作者 杨小蕊 张明生 曹然 《山地农业生物学报》 2011年第2期115-119,共5页
利用发根农杆菌A4菌株侵染三分三组培苗叶片诱导毛状根,并对其毛状根进行继代增殖培养;采用PCR技术检测毛状根。结果表明:发根农杆菌A4菌株Ri质粒的rolB基因已整合到三分三叶肉细胞的基因组中,进而成功地从叶片诱导出毛状根,诱导率可达... 利用发根农杆菌A4菌株侵染三分三组培苗叶片诱导毛状根,并对其毛状根进行继代增殖培养;采用PCR技术检测毛状根。结果表明:发根农杆菌A4菌株Ri质粒的rolB基因已整合到三分三叶肉细胞的基因组中,进而成功地从叶片诱导出毛状根,诱导率可达77%以上;毛状根除菌后,能在无激素的MS固体培养基上快速生长。三分三遗传转化体系的建立为实现基于毛状根的三分三产托品烷类生物碱的代谢工程奠定基础。 展开更多
关键词 三分三 发根杆菌A4菌株 遗传转化 毛状根
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