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高糖对人脐静脉内皮细胞GSH-PX活力、NOS及ICAM-1表达的影响 被引量:10
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作者 曾玉 邓红 +2 位作者 王筠 苏宁 刘东风 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2005年第3期151-155,共5页
目的:探讨体外培养条件下高糖状态对血管内皮细胞的影响。方法:培养人脐静脉内皮细胞株ECV3 0 4,分为对照组和高糖组,用分光光度比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH PX)活力,RT- PCR法检测细胞间粘附分子1(ICAM- 1)mRNA水平,免疫细胞化... 目的:探讨体外培养条件下高糖状态对血管内皮细胞的影响。方法:培养人脐静脉内皮细胞株ECV3 0 4,分为对照组和高糖组,用分光光度比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH PX)活力,RT- PCR法检测细胞间粘附分子1(ICAM- 1)mRNA水平,免疫细胞化学法观察内皮细胞型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的蛋白表达。结果:高糖组GSH- PX活力明显下降,eNOS、iNOS蛋白表达明显增高,ICAM- 1mRNA水平也显著上升。结论:在较短时间内糖浓度升高可引起血管内皮细胞GSH PX活力下降,ICAM -1mRNA、eNOS和iNOS蛋白表达增高,对糖尿病血管病变早期进展起一定的作用。 展开更多
关键词 GSH-PX活力 人脐静脉内皮细胞 ICAM-1表达 谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX) 诱导型一氧化氮合酶(iNOS) 内皮细胞ecv304 血管内皮细胞 MRNA水平 分光光度比色法 细胞间粘附分子 免疫细胞化学法 糖尿病血管病变 体外培养条件
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加味小陷胸汤对氧化低密度脂蛋白致血管内皮细胞增殖和凋亡的影响 被引量:12
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作者 喻秀兰 梅国强 +2 位作者 张德玲 刘永明 欧阳静萍 《湖北中医学院学报》 2005年第2期6-7,共2页
目的:探讨加味小陷胸汤拮抗氧化低密度脂蛋白(OXLDL)对血管内皮细胞(ECV304)增殖和凋亡的影响。方法:采用100μg/ml的OXLDL刺激培养的人脐静脉内皮细胞株ECV304,诱导细胞凋亡;观察不同浓度小陷胸汤对抗细胞凋亡的作用。结果:100μg/ml的... 目的:探讨加味小陷胸汤拮抗氧化低密度脂蛋白(OXLDL)对血管内皮细胞(ECV304)增殖和凋亡的影响。方法:采用100μg/ml的OXLDL刺激培养的人脐静脉内皮细胞株ECV304,诱导细胞凋亡;观察不同浓度小陷胸汤对抗细胞凋亡的作用。结果:100μg/ml的OXLDL在作用一定时间后可明显抑制内皮细胞增殖并诱导其凋亡,加味小陷胸汤含药血清对该细胞毒性有明显拮抗作用,并显示了效果与药物浓度有关。结论:加味小陷胸汤可通过提高内皮细胞生长活性并抑制其凋亡、保护血管内皮细胞。 展开更多
关键词 小陷胸汤 血管内皮细胞增殖 氧化低密度脂蛋白(OX-LDL) 加味 内皮细胞ecv304 诱导细胞凋亡 细胞生长活性 细胞凋亡 人脐静脉 不同浓度 拮抗作用 细胞毒性 含药血清 药物浓度 ml 抑制
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Ca^(2+)经钙激活非选择性阳离子通道进入ECV304内皮细胞
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作者 于德洁 鲍光宏 +1 位作者 林琳 郑永芳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期764-767,共4页
目的 研究钙离子进入ECV30 4内皮细胞株的途径和血管紧张素Ⅱ (AⅡ )对钙内流的影响。方法 用膜片钳的细胞贴附式和全细胞方式记录ECV30 4内皮细胞的通道活动。结果  (1 )在记录单通道电流时电极液含 1 2 0mmol·L- 1 CaCl2 ,细... 目的 研究钙离子进入ECV30 4内皮细胞株的途径和血管紧张素Ⅱ (AⅡ )对钙内流的影响。方法 用膜片钳的细胞贴附式和全细胞方式记录ECV30 4内皮细胞的通道活动。结果  (1 )在记录单通道电流时电极液含 1 2 0mmol·L- 1 CaCl2 ,细胞浴液不含K+ 、Na+ 时 ,Ca2 + 经非选择性阳离子通道 (CAN)内流的电导为γ0 =(1 2 90± 2 1 1 ) pS(n =4)。1× 1 0 - 7mol·L- 1 AⅡ可显著增强通道电流幅度和延长通道开放时 ,其电导增大为γ1 =(2 2 1 8± 2 2 9)pS(n =4)。全细胞记录得到的结果与单通道的一致。 (2 )用全细胞方式记录到ECV30 4内皮细胞的电压依赖性钙通道电流 ,记录到该峰值电流为 (2 9 32± 3 56)pA(n =4) ,2 0 μmol·L- 1 nifedepine能抑制这个峰值电流 ,被抑制后的电流峰值为 (6 0 0± 3 94)pA(n =4)。 2 μmol·L- 1 BayK8644能显著激活通道活动。结论 Ca2 + 经CAN进入ECV30 4细胞 。 展开更多
关键词 内皮细胞ecv304 钙激活非选择性阳离子通道 钙通道 血管紧张素Ⅱ
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脂质体介导NF-κB decoy ODN低温缺氧对ECV-304的转染及复氧后对其黏附分子mRNA表达的影响 被引量:1
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作者 丰贵文 于立新 +1 位作者 赵显国 张宏涛 《第四军医大学学报》 北大核心 2004年第15期1359-1364,共6页
目的 :探讨在Euro Collin’s(ECs)中 ,低温缺氧条件下脂质体 (invivoliposome)介导NF κB诱捕物寡核苷酸 (NF κBdecoyODN)对人脐静脉内皮细胞株 (ECV 30 4 )的转染效率以及复氧后对其NF κB活性及受其调控的黏附分子mR NA表达的影响 .... 目的 :探讨在Euro Collin’s(ECs)中 ,低温缺氧条件下脂质体 (invivoliposome)介导NF κB诱捕物寡核苷酸 (NF κBdecoyODN)对人脐静脉内皮细胞株 (ECV 30 4 )的转染效率以及复氧后对其NF κB活性及受其调控的黏附分子mR NA表达的影响 .方法 :应用脂质体 /decoyODN、脂质体 /scrambledODN复合物 ,在低温缺氧的ECs转染ECV 30 4 .应用荧光显微镜和流式细胞仪 ,观察在 4℃条件下 ,decoyODN浓度为 1 .0 μmol/L的ECs缺氧保存ECV 30 4 6h后的平均荧光强度 (MFI)和摄取率以及ODN的胞内分布 ;同时设立裸ODN转染为对照 ,观察脂质体介导decoyODN对ECV 30 4的转染效率 .应用凝胶电泳迁移改变试验 (EMSA)分析ECV 30 4低温缺氧保存 6h/复氧后不同时间的NF κB活性以及decoyODN对NF κB活性抑制效果 .利用RT PCR方法检测各组ECV 30 4的ICAM 1 ,VCAM 1以及P selectin的mRNA表达 .结果 :ECV 30 4在ECs中 4℃缺氧保存 6h后 ,脂质体介导ODN对ECV 30 4转染的MFI为 1 0 72 .7± 33.1 ,是裸ODN转染的 91 .1倍 ,细胞对ODN的摄取率为 (93.1±2 .6 ) % ,是裸ODN转染的 71 .5倍 ;脂质体介导ODN转染的ECV 30 4 ,荧光显微镜下可见部分荧光颗粒分布于胞质 ,胞核内呈强荧光颗粒 ,而裸ODN转染的ECV 30 4 ,胞质内偶见少量荧光 。 展开更多
关键词 内皮细胞ecv304 低温低氧 脂质体 转染 黏附分子
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腺病毒介导的TSP1_f基因转移对脐静脉内皮细胞株EC V304增殖的影响
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作者 刘澎 李建勇 +1 位作者 陆化 韩忠朝 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期735-737,共3页
目的探讨腺病毒介导的凝血酶敏感蛋白1(TSP1)抗血管新生衍生物(TSP1f)基因转移对人脐静脉内皮细胞株ECV304增殖的影响。方法应用RT-PCR方法从正常人外周血单个核细胞扩增TSP1fcDNA序列构建TSP1f重组腺病毒(ADV-TSP1f);Western blot方法... 目的探讨腺病毒介导的凝血酶敏感蛋白1(TSP1)抗血管新生衍生物(TSP1f)基因转移对人脐静脉内皮细胞株ECV304增殖的影响。方法应用RT-PCR方法从正常人外周血单个核细胞扩增TSP1fcDNA序列构建TSP1f重组腺病毒(ADV-TSP1f);Western blot方法检测ADV-TSP1f介导TSP1f在K562细胞中的表达;台盼蓝拒染检测经ADV-TSP1f感染的K562细胞条件培养基对ECV304细胞增殖的抑制作用。结果K562细胞经ADV-TSP1f感染可高效表达/分泌TSP1f多肽;经ADV-TSP1f感染的K562细胞条件培养基可显著抑制ECV304细胞增殖,以ADV-LacZ及PBS作对照,抑制率分别为51.6%和53.8%。结论ADV-TSP1f可显著抑制人脐静脉内皮细胞株ECV304增殖,可望成为有效的恶性肿瘤血管新生抑制剂。 展开更多
关键词 凝血酶敏感蛋白1 血管新生 基因治疗 腺病毒 ecv304细胞增殖 内皮细胞ecv304 腺病毒介导 人脐静脉 基因转移 K562细胞
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转tPA基因血管内皮细胞的功能表达
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作者 杨文涛 陈勇兵 +1 位作者 施立 钱永跃 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期149-150,共2页
目的 观察组织型纤溶酶原激活剂(tPA)基因转导血管内皮细胞后的功能表达。方法 利用携带tPA基因的假型逆转录病毒转导血管内皮细胞株ECV304,用G418筛选法观察基因是否成功转导,采用发色底物显色法检测转基因ECV304细胞培养上清液中... 目的 观察组织型纤溶酶原激活剂(tPA)基因转导血管内皮细胞后的功能表达。方法 利用携带tPA基因的假型逆转录病毒转导血管内皮细胞株ECV304,用G418筛选法观察基因是否成功转导,采用发色底物显色法检测转基因ECV304细胞培养上清液中tPA纤溶活性变化。结果 转tPA基因后的血管内皮细胞经G418筛选后2周左右见大量克隆形成;转tPA基因ECV304细胞培养上清液中tPA纤溶活性在转导24h后增高,48h后增高更明显,72-96h浓度达高峰。结论 假型逆转录病毒载体成功介导tPA基因转导血管内皮细胞,并呈有效功能表达,为心血管手术后预防血栓形成的基因治疗提供实验依据。 展开更多
关键词 假型逆转录病毒 组织型纤溶酶原激活剂 血管内皮细胞 基因 A基因转导 功能表达 TPA 内皮细胞ecv304 细胞培养上清液 逆转录病毒载体
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三七总皂苷对缺氧再给氧血管内皮细胞钙离子浓度及肌浆网Ca^(2+)-ATP酶活性的影响 被引量:8
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作者 江小萍 李海全 +4 位作者 潘少霞 方永奇 刘桂娥 欧阳永红 沈祖泓 《中华中医药学刊》 CAS 2011年第4期758-760,共3页
目的:探讨人脐静脉内皮细胞株(ECV304)缺氧再给氧(H/R)损伤的发生机制及三七总皂苷(tPNS)对该病理生理过程的影响。方法:将体外培养的ECV304分为七组,正常组;模型组;tPNS高、中、低浓度组;维拉帕米组;吡咯烷二硫氨基甲酸酯(PDTC)组,对... 目的:探讨人脐静脉内皮细胞株(ECV304)缺氧再给氧(H/R)损伤的发生机制及三七总皂苷(tPNS)对该病理生理过程的影响。方法:将体外培养的ECV304分为七组,正常组;模型组;tPNS高、中、低浓度组;维拉帕米组;吡咯烷二硫氨基甲酸酯(PDTC)组,对各组进行相应处理后,分别检测各组细胞内钙离子浓度[Ca2+]i、肌浆网Ca2+-ATP酶活性、一氧化氮(NO)及前列环素(PGI2)含量、细胞活力的变化。结果:模型组、tPNS高、中、低浓度组、维拉帕米组及PDTC组肌浆网Ca2+-ATP酶活性、一氧化氮(NO)及前列环素(PGI2)含量、细胞活力明显低于正常组,[Ca2+]i明显高于正常组,其中tPNS高、中、低浓度组、维拉帕米组及PDTC组肌浆网Ca2+-ATP酶活性、一氧化氮(NO)及前列环素(PGI2)含量、细胞活力明显高于H/R组,[Ca2+]i明显低于H/R组,且呈浓度依赖性改变,tPNS高浓度组肌浆网Ca2+-ATP酶活性、一氧化氮(NO)及前列环素(PGI2)含量、细胞活力明显高于维拉帕米组及PDTC组,[Ca2+]i明显低于维拉帕米组及PDTC组。结论:H/R可激活ECV304,使细胞肌浆网Ca2+-ATP酶活性、一氧化氮(NO)及前列环素(PGI2)含量、细胞活力明显降低,[Ca2+]i明显升高;tPNS能有效改善肌浆网Ca2+-ATP酶活性,减轻细胞内钙超载,减轻H/R损伤,且高浓度tPNS效果优于维拉帕米、PDTC。 展开更多
关键词 人脐静脉内皮细胞ecv304 缺氧再给氧损伤 钙离子 CA2+-ATP酶 三七总皂苷
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精粹文章摘要
8
《中国生化药物杂志》 CAS 2015年第3期I0002-I0002,共1页
张玉玲,杨光明,李萍,等.四种莲子心生物碱对H2O2诱导血管内皮细胞损伤的保护作用.中国生化药物,2015,35(3):1-5. 通过测定不同浓度莲心季铵碱(Lot)、莲心碱(Lien)、异莲心碱(Iso)和甲基莲心碱(Nef)对H2O2损伤ECV31... 张玉玲,杨光明,李萍,等.四种莲子心生物碱对H2O2诱导血管内皮细胞损伤的保护作用.中国生化药物,2015,35(3):1-5. 通过测定不同浓度莲心季铵碱(Lot)、莲心碱(Lien)、异莲心碱(Iso)和甲基莲心碱(Nef)对H2O2损伤ECV31M细胞活性的影响,探讨4种生物碱对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞株ECV304氧化损伤的保护作用,结果表明,4种生物碱均对H2O2诱导内皮细胞损伤的有一定的保护作用,其作用机制可能是通过增加NOS生成提高血管内皮细胞释放NO,从而发挥保护内皮的功能。 展开更多
关键词 血管内皮细胞损伤 文章摘要 内皮细胞ecv304 H2O2诱导 甲基莲心碱 保护作用 H2O2损伤 莲心季铵碱
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Protective effects of icariin on human umbilical vein endothelial cell injured by angiotensin Ⅱ 被引量:3
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作者 王秋娟 潘志伟 +3 位作者 王玉 杨涓 贾莹 孔令义 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS 2008年第1期16-21,共6页
To investigate the effects of icariin (ICA) on angiotensin Ⅱ(Ang Ⅱ)-induced injury in human umbilical vein endothelial cells line (ECV-304). The ECV-304 cells were cultured in vitro. After 24 h incubating with... To investigate the effects of icariin (ICA) on angiotensin Ⅱ(Ang Ⅱ)-induced injury in human umbilical vein endothelial cells line (ECV-304). The ECV-304 cells were cultured in vitro. After 24 h incubating with icariin, the model of AngⅡ-induced injury in ECV-304 was established. The cell viability (MTT method), Lactate dehydrogenase (LDH) release and Nitric oxide (NO) production in the medium, the capacity of scavenging superoxide anion radicals (O2^-) and hydroxyl radicals (.OH) were measured. The activities of superoxide dismutase (SOD), total nitric oxide synthase (T-NOS), inducible nitric oxide synthase (iNOS) and constitutive nitric oxide synthase (cNOS) in the cells were determined. Compared with the Ang Ⅱ-treated group, ICA can significantly raise the viability of EC, increase the activities of SOD, T-NOS and cNOS, increase the production of NO, enhance the capacity of scavenging superoxide anion radicals ( O2^- ) and hydroxyl radicals(.OH), and lower LDH leakage and iNOS activity. The results suggest that ICA can protect endothelial cells (ECV-304) from Ang II-induced injury. 展开更多
关键词 ICARIIN Angiotensin Human umbilical vein endothelial cells line Nitric oxide
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中药复方血栓通可抑制血管生成 被引量:3
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作者 罗旭昇 吴星伟 +3 位作者 顾青 张红梅 施宇华 仇亚婷 《国际眼科杂志》 CAS 2009年第8期1476-1480,共5页
目的:探讨复方血栓通对血管生成的作用。方法:鸡胚绒毛尿囊膜(chorioallantoic membrane,CAM)法检测复方血栓通对血管生成的影响;采用MTS比色法观察不同浓度的复方血栓通对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)... 目的:探讨复方血栓通对血管生成的作用。方法:鸡胚绒毛尿囊膜(chorioallantoic membrane,CAM)法检测复方血栓通对血管生成的影响;采用MTS比色法观察不同浓度的复方血栓通对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)诱导的ECV-304细胞增殖的影响;Transwell小室检测不同浓度的复方血栓通对ECV-304细胞移行的影响;Matrigel实验检测不同浓度的复方血栓通对ECV-304细胞内皮管腔形成的影响。结果:复方血栓通中、低浓度组能够抑制鸡胚CAM血管生成;MTS比色法显示,1.5625~100g/L复方血栓通对VEGF诱导的ECV-304细胞增殖具有抑制作用,而更低和更高浓度的复方血栓通则无抑制作用;Transwell小室实验显示,复方血栓通为0,3.125,6.25和12.5g/L时ECV-304细胞移行数分别为219±17,183±14,135±13和19±9;Matrigel实验显示,复方血栓通为0,0.390625,0.78125和1.5625g/L时ECV-304细胞内皮管腔形成数分别为26.3±1.2,18.7±1.5,14.7±0.6和2.7±0.6。结论:复方血栓通具有明显抑制血管生成的作用。 展开更多
关键词 复方血栓通 血管生成 绒毛尿囊膜 人脐静脉内皮细胞(ecv-304) 增殖 移行 管腔形成
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加减大黄虫丸抑制血管生成的实验研究
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作者 罗旭昇 吴星伟 顾青 《上海中医药杂志》 2009年第10期68-71,共4页
目的探讨加减大黄虫丸对血管生成的抑制作用。方法鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)法检测加减大黄虫丸对血管生成的影响;采用MTS比色法观察不同浓度的加减大黄虫丸对血管内皮生长因子(VEGF)诱导的ECV-304细胞增殖的影响;Tran-swell小室检测... 目的探讨加减大黄虫丸对血管生成的抑制作用。方法鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)法检测加减大黄虫丸对血管生成的影响;采用MTS比色法观察不同浓度的加减大黄虫丸对血管内皮生长因子(VEGF)诱导的ECV-304细胞增殖的影响;Tran-swell小室检测不同浓度的加减大黄虫丸对ECV-304细胞移行的影响;Matrigel实验检测不同浓度的加减大黄虫丸对ECV-304细胞内皮管腔形成的影响。结果加减大黄虫丸中、低浓度组能够抑制鸡胚CAM血管生成;MTS比色法显示,0.05-0.20g/m 浓度的加减大黄虫丸对VEGF诱导的ECV-304细胞增殖具有抑制作用,而更低和更高浓度的加减大黄虫丸则无抑制作用。Transwell小室实验显示,加减大黄虫丸浓度为0、12.5、25.0和50.0mg/m l时ECV-304细胞移行数分别为208.67±17.16、132.67±16.50、78.33±13.50和18.67±6.66;M atrigel实验显示,加减大黄虫丸浓度为0、12.5、25.0和50.0mg/m l时ECV-304细胞内皮管腔形成数分别为25.67±1.53、22.33±1.53、16.33±2.52和2.33±1.53,可见抑制细胞移行和管腔形成的作用随浓度增大而增强。结论加减大黄虫丸具有明显抑制血管生成的作用。 展开更多
关键词 加减大黄唐虫丸 血管生成 绒毛尿囊膜(CAM) 人脐静脉内皮细胞(ecv-304) 增殖 移行 管腔形成
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