Aspergillus ficuum菊粉酶的分离纯化及其酶解菊粉制备低聚果糖 被引量：12

1

作者 王静 金征宇 +1 位作者 江波 徐学明 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期5-9,20,共6页

采用硫酸铵分级沉淀、透析脱盐、DEAE-Cellulose离子交换色谱等分离纯化技术，从Aspergillus ficuum菌株混合酶系中分离得到4种菊粉酶组分，应用薄层层析法分离各组分水解菊粉的产物，发现其中3种组分主要含外切菊粉酶，一种主要含有内... 采用硫酸铵分级沉淀、透析脱盐、DEAE-Cellulose离子交换色谱等分离纯化技术，从Aspergillus ficuum菌株混合酶系中分离得到4种菊粉酶组分，应用薄层层析法分离各组分水解菊粉的产物，发现其中3种组分主要含外切菊粉酶，一种主要含有内切菊粉酶。进一步对所得到的内切菊粉酶组分酶解菊粉制备低聚果糖进行了研究，研究了底物浓度、加酶量、反应温度和反应pH对低聚果糖制备的影响，确定其最适反应条件为：底物浓度50g／L、加酶量10U／g底物，反应温度45℃，反应PH6．0。在此条件下反应72h，菊粉酶解率达74％，低聚果糖得率可达50％以上，酶解产物以DP2～DP4为主。 展开更多

关键词 ASPERGILLUS ficuum 菊粉酶 外切菊粉酶 内切菊粉酶 低聚果糖

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毛壳霉内切菊粉酶的纯化与性质 被引量：7

2

作者 张国青 崔福绵 +1 位作者 杨秀清 钱世钧 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期785-788,共4页

毛壳霉 (Chaetomiumsp .)C34发酵液经硫酸铵分级沉淀、DEAE 纤维素 11离子交换层析、Q SepharoseFastFlow离子交换层析、SephacrylS 2 0 0凝胶过滤、PhenolSepharoseTM HP疏水层析 ,得到电泳纯的内切菊粉酶组分 ,纯化倍数为 30 8倍 ,... 毛壳霉 (Chaetomiumsp .)C34发酵液经硫酸铵分级沉淀、DEAE 纤维素 11离子交换层析、Q SepharoseFastFlow离子交换层析、SephacrylS 2 0 0凝胶过滤、PhenolSepharoseTM HP疏水层析 ,得到电泳纯的内切菊粉酶组分 ,纯化倍数为 30 8倍 ,活力回收率为 7 7%。用SDS PAGE测得该酶亚基的分子量为 6 6kD。菊粉酶的最适pH为 6 0 ,最适温度为 5 0～ 5 5℃。菊粉酶在 5 0℃以下 ,pH5 0～ 8 0时较稳定。Cu2 + 完全抑制酶的活性 ,Mn2 + 、Zn2 + 、Fe2 + 、EDTA以及NBS(N bromosuccinimide ,N 溴代丁二酰亚胺 )对该酶有很强的抑制作用。该酶对菊粉有较强底物专一性 ,产物主要为低聚果糖 ,也可作用于蔗糖 ,I S值为 2 0。以菊粉为底物时 ,Km 为 0 199mmol L ,Vmax为 115 μmol (mg·min)。 展开更多

关键词 毛壳霉 内切菊粉酶 纯化 性质

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Aspergillus ficuum菊粉酶酶学性质的研究 被引量：3

3

作者 王静 金征宇 +1 位作者 孙宝国 曹雁平 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第4期272-277,共6页

本实验对Aspergillus ficuum产菊粉酶体系中的外切菊粉酶和内切菊粉酶的酶学性质进行了研究,研究表明二者酶学性质非常相似:两种酶的最适反应温度均在45℃左右;外切菊粉酶的最适反应pH为4.5,内切菊粉酶为pH5.0;Ag^+完全抑制两种酶的活性... 本实验对Aspergillus ficuum产菊粉酶体系中的外切菊粉酶和内切菊粉酶的酶学性质进行了研究,研究表明二者酶学性质非常相似:两种酶的最适反应温度均在45℃左右;外切菊粉酶的最适反应pH为4.5,内切菊粉酶为pH5.0;Ag^+完全抑制两种酶的活性,Fe^2+和Al^3+对两种酶有较强的抑制作用,尤其是外切菊粉酶,Mg^2+对两种酶有激活作用;实验还对两种酶的动力学常数进行了测定和比较。 展开更多

关键词 外切菊粉酶 内切菊粉酶 酶学性质 ASPERGILLUS ficuum

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一株产内切菊粉酶菌株培养条件的响应面优化 被引量：3

4

作者 苟亚峰 王丹 +3 位作者 孙丹 张岩 葛娟 高剑峰 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第19期135-140,共6页

从新疆石河子盐碱地菊芋生长根际土壤中,分离筛选得到10株具有内切菊粉酶活力的菌株,复筛得到1株高产内切菊粉酶活力菌株,将其命名为G-60。在单因素实验的基础上,采用Plackett-Burman实验法对8个因素进行了显著因素的筛选,结果表明,菊... 从新疆石河子盐碱地菊芋生长根际土壤中,分离筛选得到10株具有内切菊粉酶活力的菌株,复筛得到1株高产内切菊粉酶活力菌株,将其命名为G-60。在单因素实验的基础上,采用Plackett-Burman实验法对8个因素进行了显著因素的筛选,结果表明,菊粉浓度、蛋白胨浓度和装液量对内切菊粉酶酶活影响显著;通过最陡爬坡实验及Central Composite Design设计进一步优化,得到最佳发酵产酶条件为:菊粉浓度66.5g/L、蛋白胨浓度29.1g/L、装液量49.38mL,内切菊粉酶活力达24.62U/mL,与优化前相比提高了1.55倍。 展开更多

关键词 菌株G-60 内切菊粉酶 响应面法

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内切菊粉酶基因在毕赤酵母中的高水平表达研究 被引量：2

5

作者 冯碧薇 张赓 +2 位作者 李悦 袁汉英 吕红 《复旦学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期99-104,共6页

低聚果糖(Fructooligosaccharides,FOS)具有改善胃肠道环境、刺激和加强机体免疫反应、抑制肠道特定肿瘤的发生等生物活性.内切菊粉酶能够水解菊粉获得低聚果糖.为了实现内切菊粉酶的高表达,从无花果曲霉(Aspergillus ficuum ATCC16882... 低聚果糖(Fructooligosaccharides,FOS)具有改善胃肠道环境、刺激和加强机体免疫反应、抑制肠道特定肿瘤的发生等生物活性.内切菊粉酶能够水解菊粉获得低聚果糖.为了实现内切菊粉酶的高表达,从无花果曲霉(Aspergillus ficuum ATCC16882)中克隆了内切菊粉酶编码基因INU2,并实现了在毕赤氏酵母中的重组分泌表达,摇瓶表达的酶活力为570.4U/mL.去除内切菊粉酶的内源性信号肽序列后,其重组表达水平显著提高,摇瓶表达的酶活力为1013.8U/mL,提高幅度77.7%.TLC分析表明:毕赤酵母重组表达的内切菊粉酶(不含内源性信号肽序列)能将2%长链菊粉水解为2～3个聚合度的低聚果糖. 展开更多

关键词 内切菊粉酶 毕赤酵母 酶活力

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Aspergillus ficuum内切菊粉酶的酶解条件优化及酶解动力学研究 被引量：2

6

作者 王静 金征宇 +2 位作者 江波 曹雁平 孙宝国 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第21期161-165,共5页

采用Aspergillus ficuum内切型菊粉酶Endo-Ⅰ酶解商品菊粉制备低聚果糖,经正交试验确定其最适酶解条件为:pH5.0、温度45℃、底物浓度50g/L、加酶量10U/g,在此酶解条件下,低聚果糖得率可达70.37%,酶解产物以DP3和DP4为主,同时含有一定量... 采用Aspergillus ficuum内切型菊粉酶Endo-Ⅰ酶解商品菊粉制备低聚果糖,经正交试验确定其最适酶解条件为:pH5.0、温度45℃、底物浓度50g/L、加酶量10U/g,在此酶解条件下,低聚果糖得率可达70.37%,酶解产物以DP3和DP4为主,同时含有一定量的DP2、DP5、DP6、DP7、DP8;在此条件下酶解自制菊芋干粉时,低聚果糖得率为41.72%,酶解产物以DP3～DP6的低聚果糖为主,DP2含量很少,同时酶解液中还含有大量的果糖;在此条件下酶解自制菊芋提取液时,低聚果糖得率高达79.80%,酶解产物中除DP6含量较低外,其他各聚合度的低聚糖分布比较平均。在此相同酶解条件下酶解72h时,3种底物中,以菊芋提取液酶解后的低聚果糖得率最高。因此,应用Aspergillus ficuum内切型菊粉酶Endo-Ⅰ酶解菊芋制备低聚果糖宜选择菊芋提取液作底物。 展开更多

关键词 ASPERGILLUS ficuum 内切菊粉酶 酶解条件优化 动力学

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Aspergillus ficuum产果聚糖酶体系的分析 被引量：1

7

作者 王静 金征宇 《无锡轻工大学学报（食品与生物技术）》 CSCD 北大核心 2002年第4期424-427,共4页

采用活性聚丙烯酰胺凝胶电泳法对Aspergillusficuum产果聚糖酶体系进行了分离 ,获得8条谱带 ;进一步运用薄层色谱 (TLC)和高效液相色谱 (HPLC)法进行分析 ,发现 8条谱带中有 3条属于外切菊粉酶 ,2条属于内切菊粉酶 ,证明了Aspergillusfi... 采用活性聚丙烯酰胺凝胶电泳法对Aspergillusficuum产果聚糖酶体系进行了分离 ,获得8条谱带 ;进一步运用薄层色谱 (TLC)和高效液相色谱 (HPLC)法进行分析 ,发现 8条谱带中有 3条属于外切菊粉酶 ,2条属于内切菊粉酶 ,证明了Aspergillusficuum能同时产内切菊粉酶和外切菊粉酶 . 展开更多

关键词 果聚糖酶 外切菊粉酶 内切菊粉酶 活性聚丙烯酰胺凝胶电泳法 分离

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Aspergillus ficuum菊粉酶的化学修饰和荧光光谱

8

作者 陈晓明 陈寒青 +2 位作者 王静 金征宇 徐学明 《江苏大学学报（自然科学版）》 EI CAS 北大核心 2009年第4期334-337,361,共5页

选用N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)、焦碳酸二乙酯(DEPC)、丁二酮(DIC)、氯氨-T(Ch-T)、碳二亚胺(EDC)、苯甲基磺酰氟(PMSF)和二硫苏糖醇(DTT)等化学修饰剂,通过对Aspergillus ficu-um内切和外切菊粉酶进行修饰,以研究菊粉酶分子中氨基酸侧链... 选用N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)、焦碳酸二乙酯(DEPC)、丁二酮(DIC)、氯氨-T(Ch-T)、碳二亚胺(EDC)、苯甲基磺酰氟(PMSF)和二硫苏糖醇(DTT)等化学修饰剂,通过对Aspergillus ficu-um内切和外切菊粉酶进行修饰,以研究菊粉酶分子中氨基酸侧链基团对酶活性的影响.研究结果表明:内切菊粉酶和外切菊粉酶活性中心的必需氨基酸残基均含有色氨酸和羧基氨基酸,且内切和外切菊粉酶活性中心的色氨酸残基数目分别为1和2;组氨酸可能是酶活性中心的组成基团.荧光光谱法研究表明:内切菊粉酶的色氨酸残基比外切菊粉酶的色氨酸残基所处环境的极性大,对环境的变化更敏感,并且更加暴露,表明这两种酶具有不同的构象,这种构象上的差别可能是导致二者对底物菊粉作用机理不同的原因. 展开更多

关键词 内切菊粉酶 外切菊粉酶 酶活性 化学修饰 荧光光谱

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黑曲霉中内切菊粉酶基因及其全合成基因在解脂耶氏酵母中表达的比较 被引量：1

9

作者 祝林 王博 +3 位作者 陈晶 舒望云 蒋思婧 马立新 《氨基酸和生物资源》 CAS 2006年第2期32-34,44,共4页

利用酵母密码子偏爱性将黑曲霉(Aspergillus niger)中的内切菊粉酶(Endoinu linase)基因通过基因全合成的方式合成为酵母密码子偏爱性的内切菊粉酶基因。然后将原始和全合成的内切菊粉酶基因克隆到解脂耶氏酵母表达载体PINA1296上,得重... 利用酵母密码子偏爱性将黑曲霉(Aspergillus niger)中的内切菊粉酶(Endoinu linase)基因通过基因全合成的方式合成为酵母密码子偏爱性的内切菊粉酶基因。然后将原始和全合成的内切菊粉酶基因克隆到解脂耶氏酵母表达载体PINA1296上,得重组解脂耶氏酵母表达载体pHBM2020、pHBM2021,将两种质粒分别转化解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)CLIB725,筛选得到重组解脂耶氏酵母CLIB725(pHBM2020)、CLIB725(pHBM2021),将两种重组酵母摇瓶培养,经SDS-PAGE、测酶活检测表明两种基因在解脂耶氏酵母中都有表达,全合成菊粉酶比原始菊粉酶酶活要高。 展开更多

关键词 内切菊粉酶 解脂耶氏酵母 酵母密码子偏爱性

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分子对接和定点突变提高内切菊粉酶的催化活力 被引量：1

10

作者 包敏 钮成拓 +4 位作者 陈玙捷 郑飞云 王金晶 刘春凤 李崎 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第19期57-62,共6页

内切菊粉酶可以有效地水解菊粉得到低聚果糖(inulooligosaccharides,IOS)。低聚果糖是一种强效益生元,对人体健康有益,具有广泛应用价值。前期研究获得了Lipomyces starkeyi NRRL Y-11557来源的内切菊粉基因inu3B,并在大肠杆菌中进行了... 内切菊粉酶可以有效地水解菊粉得到低聚果糖(inulooligosaccharides,IOS)。低聚果糖是一种强效益生元,对人体健康有益,具有广泛应用价值。前期研究获得了Lipomyces starkeyi NRRL Y-11557来源的内切菊粉基因inu3B,并在大肠杆菌中进行了克隆表达。为进一步提高该酶催化活力,利用同源建模预测INU3B的三维结构,结合分子对接技术确定底物结合口袋附近的氨基酸,将筛选的关键氨基酸分别突变成丙氨酸,获得突变体M46A,比酶活力达到2611.40 U/mg,是原始酶的1.26倍。这可能是由于该位点的改变减小了结合口袋的外表面积、体积和深度,增强了酶与底物结合,从而增加了酶活力。M46A突变株具有工业生产低聚果糖的应用前景,也为定点突变技术改造酶活性提供了新思路。 展开更多

关键词 内切菊粉酶 同源建模 分子对接 定点突变 催化活力

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黑曲霉内切菊粉酶基因在毕赤酵母中的表达及应用研究

11

作者 王宁鹤 邢雪岩 +2 位作者 封志媚 路福平 李玉 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期219-224,共6页

利用PCR方法从黑曲霉(Aspergillus niger)基因组DNA中扩增内切菊粉酶(endo I)全长基因(1551 bp),经序列分析后将其连接到表达载体p PIC9K上,得到重组表达载体p PIC9K-endo I。重组质粒经Sac I线性化并电转化到毕赤酵母GS115,阳性转化子... 利用PCR方法从黑曲霉(Aspergillus niger)基因组DNA中扩增内切菊粉酶(endo I)全长基因(1551 bp),经序列分析后将其连接到表达载体p PIC9K上,得到重组表达载体p PIC9K-endo I。重组质粒经Sac I线性化并电转化到毕赤酵母GS115,阳性转化子进行发酵产酶后考察其酶学性质。酶学性质研究表明,重组酶的最适p H和最适温度分别为5和60℃,重组酶在55℃下保温9 h后,重组菊粉内切酶仍残余83.2%的活性,表现出极高的热稳定性,Cu^(2+)、Ag^+对重组酶有明显的抑制作用。对内切菊粉酶水解菊粉的过程研究表明,重组内切菊粉酶能在8 h内将4%(w/v)菊粉水解为3~6个聚合度的低聚果糖,水解11 h后,低聚果糖得率达到63.5%,本研究为进一步开发以菊粉为原料生产低聚果糖的应用奠定了基础。 展开更多

关键词 内切菊粉酶 毕赤酵母 酶学性质 转化率

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产内切菊粉酶的海洋放线菌菌株的筛选与鉴定

12

作者 宫颖 于基成 刘秋 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第21期171-174,共4页

获得高活性内切菊粉酶微生物菌株是以菊粉生产低聚果糖的基础。本研究采用以菊粉为唯一碳源的选择培养基从鸭绿江滨海湿地海泥样品中筛选获得14株产菊粉酶菌株。通过摇瓶复筛,获得3株产较高活力内切菊粉酶的放线菌菌株,其酶活力分别为14... 获得高活性内切菊粉酶微生物菌株是以菊粉生产低聚果糖的基础。本研究采用以菊粉为唯一碳源的选择培养基从鸭绿江滨海湿地海泥样品中筛选获得14株产菊粉酶菌株。通过摇瓶复筛,获得3株产较高活力内切菊粉酶的放线菌菌株,其酶活力分别为14.13、18.24、28.52U/m L。通过16S rRNA测序分析和形态观察确定该3株菌分别为孔雀石褐链霉菌(Streptomyces malachitofuscus)、棘孢小单孢菌(Micromonospora echinospora)、锂链霉菌(Streptomyces carpaticu)。其产酶活性均高于目前已报道产内切菊粉酶放线菌菌株,为内切菊粉酶工业化生产提供了依据。 展开更多

关键词 内切菊粉酶 海洋放线菌 筛选 鉴定

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内切菊粉酶在大肠杆菌中的高效表达

13

作者 吴若凡 马江锋 +2 位作者 戴仲雪 王培培 姜岷 《生物加工过程》 CAS 2016年第5期45-50,共6页

内切菊粉酶可以有效地水解菊粉得到低聚果糖(IOS),低聚果糖是一种水溶性膳食纤维,应用广泛。为了实现内切菊粉酶的高效表达,通过无花果曲霉中的inu2基因,成功在大肠杆菌中重组表达。为提高表达水平,通过使用pel B和omp C代替本身的信号... 内切菊粉酶可以有效地水解菊粉得到低聚果糖(IOS),低聚果糖是一种水溶性膳食纤维,应用广泛。为了实现内切菊粉酶的高效表达,通过无花果曲霉中的inu2基因,成功在大肠杆菌中重组表达。为提高表达水平,通过使用pel B和omp C代替本身的信号肽序列,来研究不同的信号肽对菊粉内切酶表达的影响。此外,还通过正交试验的方法优化了IOS的催化条件。研究结果表明,用pel B代替本身的信号肽的E.coli INU2-A3的酶活最高,达到75.22 U/mg。在菊粉为150 g/L,纯化的菊粉内切酶为5 U/g菊粉,55℃,p H 4.6,反应24 h时,低聚果糖的收率达到了94.41%,主要的水解产物为DP3-DP7。 展开更多

关键词 内切菊粉酶 信号肽 大肠杆菌 低聚果糖

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Aspergillus ficuum内切菊粉酶基因在大肠杆菌中表达 被引量：4

14

作者 陈晓明 陈静 +2 位作者 陈寒青 金征宇 徐学明 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期388-393,共6页

研究内切菊粉酶基因在大肠杆菌中表达,利用基因工程的原理和方法,将来源于Asper-gillus ficuum JNSP5-06的内切菊粉酶基因(endoI)克隆到pET-28a(+),并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。重组菌经IPTG诱导后对表达产物进行酶活检测和酶水... 研究内切菊粉酶基因在大肠杆菌中表达,利用基因工程的原理和方法,将来源于Asper-gillus ficuum JNSP5-06的内切菊粉酶基因(endoI)克隆到pET-28a(+),并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。重组菌经IPTG诱导后对表达产物进行酶活检测和酶水解产物分析。结果表明已成功构建表达载体pET28a-endoI,表达后的粗酶活为35 U/mL发酵液;重组酶水解菊粉的产物经TLC分析证实酶液具有内切菊粉酶活性,水解产物主要为低聚二糖、三糖和四糖。为其应用和工业化生产奠定基础。 展开更多

关键词 内切菊粉酶基因 克隆 表达 低聚果糖

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菊芋低聚果糖生产及前景展望 被引量：11

15

作者 董全 丁红梅 《中国食物与营养》 2009年第4期16-18,共3页

近年来,以现代新技术分离精制而成的低聚果糖,在国际上已被公认为具有较高的营养价值和保健作用。低聚果糖是功能性低聚糖,具有抗龋齿、调节肠道菌群、提高机体免疫力、降血压、降血脂及促进钙吸收的优良生理功能。本文综述了低聚果糖... 近年来,以现代新技术分离精制而成的低聚果糖,在国际上已被公认为具有较高的营养价值和保健作用。低聚果糖是功能性低聚糖,具有抗龋齿、调节肠道菌群、提高机体免疫力、降血压、降血脂及促进钙吸收的优良生理功能。本文综述了低聚果糖的生理功能和生物发酵法生产,同时阐述了国内外的研究现状及发展趋势。 展开更多

关键词 低聚果糖 菊粉 内切型菊粉酶 分离纯化

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菊粉的酶法生物转化在食品中应用的研究进展 被引量：5

16

作者 战荣荣 沐万孟 +2 位作者 李赟高 张涛 江波 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第3期226-233,共8页

菊粉是我国分布广泛、含量丰富的重要农副产品,利用菊粉酶对其进行生物深加工可高效实现菊粉在食品领域的低成本、多方向、高附加值利用。本文综述国内外菊粉应用于食品的酶法研究开发现状,对不同类型菊粉酶生物转化产品的性质及食品应... 菊粉是我国分布广泛、含量丰富的重要农副产品,利用菊粉酶对其进行生物深加工可高效实现菊粉在食品领域的低成本、多方向、高附加值利用。本文综述国内外菊粉应用于食品的酶法研究开发现状,对不同类型菊粉酶生物转化产品的性质及食品应用、酶的微生物来源及菊粉酶的最新研究进展进行阐述。 展开更多

关键词 内切型菊粉酶 外切型菊粉酶 菊糖果糖转移酶 低聚果糖 高果糖浆 双果糖酐

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酵母产内切型菊粉酶水解菊芋生产饲用低聚果糖的研究 被引量：3

17

作者 王艳 金征宇 +2 位作者 徐学明 许继春 王伟 《饲料工业》 北大核心 2001年第1期44-46,共3页

利用酵母所产内切型菊粉酶水解廉价菊芋 30min后，其饲用低聚果糖的最高含量达 42％，应用于饲料工业具有广阔的生产前景。

关键词 内切型菊粉酶 菊芋 饲用低聚果糖 水解

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内切型菊粉酶生产菌株的筛选及诱变选育 被引量：2

18

作者 王艳 金征宇 +1 位作者 徐学明 王伟 《生物技术》 CAS CSCD 2001年第1期26-28,共3页

采用透明圈法筛选得到了产菊粉酶的多株菌株，并得到了１株产内切型菊粉酶较高的隐球酵母属（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）菌株Ｌ１，以Ｌ１作为出发菌株经Ｃｏ６０诱变后，得到１株产内切型菊粉酶最好菌株Ｃ１０，其诱变后低聚果糖得率... 采用透明圈法筛选得到了产菊粉酶的多株菌株，并得到了１株产内切型菊粉酶较高的隐球酵母属（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）菌株Ｌ１，以Ｌ１作为出发菌株经Ｃｏ６０诱变后，得到１株产内切型菊粉酶最好菌株Ｃ１０，其诱变后低聚果糖得率比诱变前提高了５２．６％，酶活力提高了５１．９％。 展开更多

关键词 内切型菊粉酶 CO^60诱变 低聚果糖 酶活力 生产菌株 诱变选育

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利用原生质体再生技术选育内切型菊粉酶高产菌株 被引量：1

19

作者 曹泽虹 董玉玮 王春艳 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2016年第8期97-105,共9页

利用原生质体制备与再生技术选育内切型菊粉酶高产菌株,以I200913作为出发菌株(酶活为0.413 u/m L),研究了在不同酶配比酶解液、不同酶解温度、不同酶解时间的条件下,对原生质体制备、再生以及内切型菊粉酶酶活的影响。研究结果表明,在... 利用原生质体制备与再生技术选育内切型菊粉酶高产菌株,以I200913作为出发菌株(酶活为0.413 u/m L),研究了在不同酶配比酶解液、不同酶解温度、不同酶解时间的条件下,对原生质体制备、再生以及内切型菊粉酶酶活的影响。研究结果表明,在酶配比为:纤维素酶0.7%+蜗牛酶0.2%+溶菌酶0.1%=1%,酶解温度为30℃,酶解时间为2.5h条件下,原生质体形成率最高,为22.32%。在酶配比为:纤维素酶0.7%+蜗牛酶0.2%+溶菌酶0.1%=1%,酶解温度为30℃,酶解时间为2.5h条件下,原生质体再生率最高,为16.02%。在酶配比为:纤维素酶0.7%+蜗牛酶0.2%+溶菌酶0.1%=1%,酶解温度为30℃,酶解时间为2.5h条件下,原生质体再生菌株内切型菊粉酶酶活最高为0.598 u/m L,比出发菌株提高了28%。 展开更多

关键词 黑曲霉 原生质体 内切型菊粉酶 酶活

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内切型菊粉酶酶学性质的研究

20

作者 王春 曹泽虹 +4 位作者 董玉玮 高兆建 陈阔 李雪晴 王娟 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2015年第3期119-126,共8页

以食品与生物工程实验中心酶工程实验室保藏的黑曲霉菌种作为菌源,利用黑曲霉细胞深层发酵法生产内切型菊粉酶。通过测定发酵液酶活,从20株黑曲霉菌株中筛选得到产菊粉酶活力最高的编号为E133131的一株黑曲霉菌株,酶活为0.66U/mL。对黑... 以食品与生物工程实验中心酶工程实验室保藏的黑曲霉菌种作为菌源,利用黑曲霉细胞深层发酵法生产内切型菊粉酶。通过测定发酵液酶活,从20株黑曲霉菌株中筛选得到产菊粉酶活力最高的编号为E133131的一株黑曲霉菌株,酶活为0.66U/mL。对黑曲霉E133131号菌株所产内切型菊粉酶进行了酶学性质的研究,得到以下结论：最适pH为4.5;最适温度为60℃;最佳底物浓度为4mmol/L;米氏常数（Km）为1.434mmol/L;Ca^2＋对内切型菊粉酶有激活作用,当加入浓度为1.5mmol/L的Ca^2＋时,使酶活从0.66U/mL提高到1.09U/mL;Mn2＋、Cu^2＋和Mg2＋对内切型菊粉酶有抑制作用,其中Cu^2＋的抑制作用最大,使酶活从0.66U/mL降低到0.095U/mL;Na^＋、K＋、Zn2＋、Fe2＋、Mg2＋对内切型菊粉酶的酶活影响不大;pH在4.5-8.0范围内,温度在50-60℃之间,内切型菊粉酶的酶活力较稳定。 展开更多

关键词 内切型菊粉酶 酶学性质 黑曲霉 底物浓度 米氏常数

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