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来自Yeosuana marina sp.JLT21内切型海藻酸裂解酶的异源表达及酶学表征 被引量：2
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作者 常晴 束月蓉 +6 位作者 王文韬 蒋昊 延泉德 钱政 高雪纯 吴金鸿 张勇 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期123-131,共9页
褐藻寡糖有着丰富的生物学功能,酶法制备功能性褐藻寡糖具有重要实践应用价值。为发掘高活性及稳定性的褐藻寡糖制备酶,对浅海热液嗜热菌Yeosuana marina sp.JLT21中的海藻酸裂解酶YMA-1的基因在大肠杆菌中进行表达、纯化及酶活鉴定。... 褐藻寡糖有着丰富的生物学功能,酶法制备功能性褐藻寡糖具有重要实践应用价值。为发掘高活性及稳定性的褐藻寡糖制备酶,对浅海热液嗜热菌Yeosuana marina sp.JLT21中的海藻酸裂解酶YMA-1的基因在大肠杆菌中进行表达、纯化及酶活鉴定。结果发现YMA-1由306个氨基酸残基构成,是多糖裂解酶家族7(PL7)新成员;重组YMA-1酶的最适催化条件是55℃,pH 9.0,比活力1.3×10^(4) U/mg,Cu^(2+)可有效促进酶活;在37℃,pH 9.0条件下,该酶对海藻酸钠、聚甘露糖醛酸和聚古罗糖醛酸的比活力分别达到(5201.21±86.46)U/mg、(6399.73±253.12)U/mg和(3751.68±116.25)U/mg,酶解海藻酸钠终产物多为不饱和三糖和四糖,表现出内切双功能型海藻酸裂解酶活性。YMA-1酶作为PL7家族中较宽底物谱、高活性及稳定性的内切海藻酸裂解酶,在高效绿色生产功能性褐藻寡糖上有着潜在应用价值。 展开更多
关键词 内切型海藻酸裂解酶 重组表达 酶学性质 Yeosuana marina sp.JLT21
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Mangrovibacterium sp.SH-52耐热内切型海藻酸裂解酶基因的克隆及酶学鉴定
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作者 李卫娜 申冬玲 +2 位作者 张煜星 刘学通 伊日布斯 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期82-90,共9页
研究来自厌氧海藻酸分解菌的海藻酸裂解酶,表征其酶学特征,旨为丰富海藻酸裂解酶工业应用提供理论依据。从一株厌氧菌Mangrovibacterium sp.SH-52中克隆一个海藻酸裂解酶基因SHA-I,分析基因序列,并在大肠杆菌中进行异源表达,纯化后对其... 研究来自厌氧海藻酸分解菌的海藻酸裂解酶,表征其酶学特征,旨为丰富海藻酸裂解酶工业应用提供理论依据。从一株厌氧菌Mangrovibacterium sp.SH-52中克隆一个海藻酸裂解酶基因SHA-I,分析基因序列,并在大肠杆菌中进行异源表达,纯化后对其酶学性质进行分析。SHA-I由362个氨基酸构成,分子量大约为41 kD,与Lewinella cohaerens中的海藻酸裂解酶同源性最高,为80%,属于多聚糖裂解酶类(Polysaccharide lyase,PL)7家族。SHA-I最适pH为7.0,最适温度是50℃,在60℃时的活性超过最高活性的50%,在80℃时约为最高活性的40%,表明SHA-I是一种耐热性海藻酸裂解酶。SHA-I对polyG(聚甘露糖醛酸)有底物特异性,其降解海藻酸主要产生二糖和三糖,是一种内切型海藻酸裂解酶。 展开更多
关键词 厌氧海藻酸分解菌 Mangrovibacterium sp.SH-52 异源表达 内切型海藻酸裂解酶 耐热性
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