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农杆菌介导将Bt杀虫蛋白基因导入优良玉米自交系的研究 被引量：43
1
作者 张艳贞 王罡 +4 位作者 胡汉桥 魏松红 季静 王军军 李昌 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期35-39,共5页
以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系 34 0、4112为材料 ,用带有质粒pGBIL0 4(Pactin -Bt-Tnos)的根癌农杆菌LBA44 0 4转化其幼胚及其初始愈伤组织 ,共培养 3天后 ,在含PPT的培养基上连续筛选培养 3代 ,然后分化获得再生植株。PCR检... 以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系 34 0、4112为材料 ,用带有质粒pGBIL0 4(Pactin -Bt-Tnos)的根癌农杆菌LBA44 0 4转化其幼胚及其初始愈伤组织 ,共培养 3天后 ,在含PPT的培养基上连续筛选培养 3代 ,然后分化获得再生植株。PCR检测证明目的基因已整合到再生植株的基因组中。实验结果表明幼胚预培养后形成的新鲜的初始愈伤组织是比较适宜的转化受体 ,结果还发现将共培养温度降到 2 2℃可以提高农杆菌介导的玉米遗传转化的筛选频率。 展开更多
关键词 玉米 自交系 转基因 农杆菌 预培养 共培养温度 PCR Bt杀虫蛋白基因
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农杆菌介导法获得优良玉米自交系转Bt基因植株 被引量：11
2
作者 张艳贞 王罡 +1 位作者 魏松红 季静 《上海交通大学学报（农业科学版）》 2004年第1期31-36,共6页
用根癌农杆菌介导法将携带有苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白基因(Bt)和PPT乙酰转移酶基因(bar)的质粒pGBIL04导入优良玉米自交系340和4112经预培养的幼胚初始愈伤组织,抗性植株平均发生频率为11.21%,经PCR、PCR-Southern和Southernblotting检... 用根癌农杆菌介导法将携带有苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白基因(Bt)和PPT乙酰转移酶基因(bar)的质粒pGBIL04导入优良玉米自交系340和4112经预培养的幼胚初始愈伤组织,抗性植株平均发生频率为11.21%,经PCR、PCR-Southern和Southernblotting检测证明外源基因Bt已稳定整合到13株玉米基因组中,平均转化率为2.35%。降低共培养温度到22℃的转化率最高达4.44%,Basta抗性检测bar基因也同时转移进再生植株中,部分转化植株已经结实。 展开更多
关键词 农杆菌介导法 玉米 自交系 转Bt基因植株 根癌农杆菌 平均转化率 抗性植株 共培养温度 PCR
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导入双价基因的转基因杂交油菜亲本及其对菌核病抗性的研究 被引量：13
3
作者 王新发 王汉中 +2 位作者 刘贵华 胡赞民 郑元本 《植物学通报》 CSCD 北大核心 2005年第3期292-301,共10页
比较了乙酰丁香酮、pH、共培养温度及不同激素配比对根癌农杆菌转化油菜(Brassicanapus)的影响,建立了油菜高效转化体系。按该体系,将组成型表达几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因转化甘蓝型双低杂交油菜亲本恢复系和保持系,获得了转基因... 比较了乙酰丁香酮、pH、共培养温度及不同激素配比对根癌农杆菌转化油菜(Brassicanapus)的影响,建立了油菜高效转化体系。按该体系,将组成型表达几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因转化甘蓝型双低杂交油菜亲本恢复系和保持系,获得了转基因恢复系和保持系植株。对再生植株进行PCR和SouthernBlot检测,结果表明外源基因已整合到油菜基因组中。连续3代的PCR检测及转基因植株抗病性在自交后代中得到保持,证实外源基因已遗传到T3代。对转基因植株T1代离体叶进行菌核病菌丝体接种和T1及T2代大田自然侵染鉴定,结果表明,转基因恢复系棚40-12、棚40-32和保持系96B-2对菌核病的抗性比受体对照大幅度提高,大田鉴定其发病率连续2年均比受体对照减少78%以上,比抗病品种‘中油821’减少75%以上,病情指数比受体对照和‘中油821’减少均达显著水平,其抗病性能在后代稳定遗传,获得了高抗菌核病的转基因育种材料。 展开更多
关键词 双价基因 亲本 甘蓝型双低杂交油菜 Southern 转基因恢复系 中油821 抗性 导入 3-葡聚糖酶 外源基因 乙酰丁香酮 农杆菌转化 共培养温度 组成型表达 植株抗病性 PCR检测 转基因植株 保持系 激素配比 转化体系 几丁质酶
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影响农杆菌介导玉米愈伤组织遗传转化因素的研究 被引量：5
4
作者 农友业 何勇强 +2 位作者 覃燕 Rachid Loukehaich 吴子恺 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期142-144,i002,共4页
用农杆菌介导玉米愈伤组织的转化,其筛选的结果得到的抗性愈伤组织受玉米愈伤组织的继代时 间、浸染的农杆菌菌液浓度、共培养的温度以及其共培养时间等因素的影响。玉米愈伤继代后7～9d,农杆菌 浓度为OD600值0.3左右、共培养温度... 用农杆菌介导玉米愈伤组织的转化,其筛选的结果得到的抗性愈伤组织受玉米愈伤组织的继代时 间、浸染的农杆菌菌液浓度、共培养的温度以及其共培养时间等因素的影响。玉米愈伤继代后7～9d,农杆菌 浓度为OD600值0.3左右、共培养温度约22℃、培养时间3d时,抗性愈伤的获得率最高。 展开更多
关键词 农杆菌介导 玉米 遗传转化 抗性愈伤组织 培养时间 共培养温度 继代时间 菌液浓度
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根癌农杆菌介导玉米遗传转化的研究进展 被引量：2
5
作者 高武军 卢龙斗 +1 位作者 魏开发 孙富丛 《中国农学通报》 CSCD 2004年第6期26-28,76,共4页
对根癌农杆菌介导的玉米基因转化中包括外植体、基本培养基及其附加物、共培养温度、信号分子与vir基因的活化的几个关键因素研究进展作了论述。近年来的研究发现,大小为1~2mm的幼胚是较为理想的转化外植体,在外植体培养基本培养基一般... 对根癌农杆菌介导的玉米基因转化中包括外植体、基本培养基及其附加物、共培养温度、信号分子与vir基因的活化的几个关键因素研究进展作了论述。近年来的研究发现,大小为1~2mm的幼胚是较为理想的转化外植体,在外植体培养基本培养基一般多选用MS和N6,在基本培养基上附加有机氮和氨基酸、金属离子均有利于转化效率的提高。转化中的共培养温度一般在200C^250C之间。研究认为根癌农杆菌转化禾本科植物的困难在于禾本科植物缺乏酚类物质,难以诱导Vir基因活化表达,因此在转化中多采用加入外源的酚类物质如乙酰丁香酮来提高玉米转化的成功率。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 玉米 遗传转化 外植体 培养基 附加物 共培养温度
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