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农杆菌介导甘蔗基因转化技术的优化 被引量：13
1
作者 罗敬萍 张树珍 杨本鹏 《热带作物学报》 CSCD 2003年第4期23-28,共6页
以甘蔗(Saccharum officinarum L.)品种ROC10为转化受体材料,以GFP基因为报告基因,通过对农杆菌介导遗传转化的一系列条件,包括农杆菌菌株及侵染菌液浓度、侵染时间、受体愈伤组织龄期、AS活化时间及使用浓度、共培养时间等进行优化,同... 以甘蔗(Saccharum officinarum L.)品种ROC10为转化受体材料,以GFP基因为报告基因,通过对农杆菌介导遗传转化的一系列条件,包括农杆菌菌株及侵染菌液浓度、侵染时间、受体愈伤组织龄期、AS活化时间及使用浓度、共培养时间等进行优化,同时进行了便于vir基因活化和T-DNA转移的条件组合,如附加果糖和葡萄糖、酸性环境感染,低温共培养等,从而建立了一个可行、有效而又简便的农杆菌介导的甘蔗遗传转化体系。结果表明:农杆菌菌株EHA105优于LBA4404,其适宜侵染浓度D_(600)为1.3752;适宜受体愈伤组织龄期为25℃暗培养25d;适宜侵染时间为30min;适宜AS活化时间为2h,使用浓度为200μmol·L^(-1);适宜共培养时间为4d。获得2株有荧光信号的植株,对这2株植株进行斑点Southern杂交检测,均有阳性反应,证明GFP基因已整合到甘蔗基因组中并得到了有效表达,表明该转化体系确实是有效的。 展开更多
关键词 甘蔗 品种 基因转化技术 农杆菌 GFP基因 菌株 侵染菌液浓度 侵染时间 受体愈伤组织龄期 AS活化时间 使用浓度 共培养时间
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根癌农杆菌介导水稻基因转化研究进展 被引量：6
2
作者 胡凤仙 何龙飞 +1 位作者 易小平 冯斗 《广西农业生物科学》 CAS CSCD 2001年第2期137-140,共4页
简要综述了根癌农杆菌介导水稻基因转化的优点及转化后代的遗传学行为 。
关键词 根癌农杆菌 水稻 基因转化 基因型 载体 转化受体 共培养时间
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小麦花药液体漂浮培养体系优化及黄淮麦区高花药培养力基因型筛选
3
作者 王永霞 张弯弯 +3 位作者 常莹莹 华夏 齐学礼 胡琳 《江苏农业科学》 北大核心 2024年第16期87-93,共7页
为进一步优化和提高小麦单倍体诱导效率,以中麦895、郑麦7698、万丰269等为材料,研究不同低温预处理时间、胚状体共培养时间和培养基附加成分对小麦花药液体漂浮培养体系的影响,并利用该体系对42份黄淮麦区小麦品种(系)的花药培养特性... 为进一步优化和提高小麦单倍体诱导效率,以中麦895、郑麦7698、万丰269等为材料,研究不同低温预处理时间、胚状体共培养时间和培养基附加成分对小麦花药液体漂浮培养体系的影响,并利用该体系对42份黄淮麦区小麦品种(系)的花药培养特性进行评价。结果表明,小麦花药培养效率随着低温预处理时间呈先上升后下降的趋势,处理1~5 d时培养效率最佳;胚状体共培养时间与绿苗分化率间呈显著或极显著负相关,共培养25~35 d转出胚状体的绿苗分化率和绿苗产率较高,随后逐渐降低,55 d后基本丧失绿苗分化能力;培养基附加成分对花药培养效率的影响同样呈现先升高后降低的趋势,添加3 mg/L AgNO_(3)或60 mmol/L山梨醇能有效提高胚状体诱导率、绿苗分化率和绿苗产率,AgNO_(3)效果优于山梨醇。42份黄淮麦区小麦品种(系)的花药培养特性差异明显,筛选出郑麦0856、徐麦856、郑麦1354、郑麦1936、周麦32、郑麦6687和07H508等7个高花药培养力材料。本研究结果可为小麦单倍体育种提供参考依据,筛选的高花药培养力基因型在黄淮麦区单倍体育种、DH群体构建或遗传转化研究等方面具有重要的潜在应用价值。 展开更多
关键词 小麦 液体漂浮培养 低温预处理 共培养时间 培养基附加成分 绿苗产率 基因型
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共培养条件对农杆菌转化大豆子叶节的影响 被引量：5
4
作者 李桂兰 刘晨光 +3 位作者 乔潇 杨晓倩 王迪 乔亚科 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1567-1575,共9页
为提高大豆的遗传转化效率,利用根癌农杆菌对大豆成熟种子的子叶节进行遗传转化,从影响农杆菌和大豆子叶节外植体双方的因素出发,重点研究共培养阶段培养基的pH值、光照条件和共培养时间三个因素对转化的影响,以寻找适宜农杆菌和外植体... 为提高大豆的遗传转化效率,利用根癌农杆菌对大豆成熟种子的子叶节进行遗传转化,从影响农杆菌和大豆子叶节外植体双方的因素出发,重点研究共培养阶段培养基的pH值、光照条件和共培养时间三个因素对转化的影响,以寻找适宜农杆菌和外植体的平衡点。分析单因素试验和正交试验的研究结果表明,在共培养阶段,培养基pH值适宜范围为6.0~6.6,pH值以6.6为佳;提供10~16h·d-1光照均提高了转化效率,与完全黑暗差异显著;延长共培养时间显著提高转化效率,以7~10d为宜。本研究范围内以冀豆12、豫豆22和秦黄小粒12三个基因型大豆获得了较高转化效率,供试的6个大豆品种均获得了转基因植株,PCR和Southern分析表明植酸酶基因phyA基因已经整合到大豆基因组中。该结果对提高大豆的遗传转化效率有重要参考价值。 展开更多
关键词 农杆菌 大豆子叶节 共培养基pH值 共培养时间 共培养光照
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光照条件和共培养时间对大豆的遗传转化效率影响研究
5
作者 张东辉 史国敏 《农村经济与科技》 2017年第13期66-67,共2页
选取不同大豆基因型的胚尖、子叶节和下胚轴为受体材料,运用农杆菌介导法转化GUS基因,通过对GUS基因瞬时表达率的比较,探讨大豆遗传转化的主要影响因素(光照条件和共培养时间等),以寻找适宜农杆菌和外植体的平衡点,并进一步对遗传转化... 选取不同大豆基因型的胚尖、子叶节和下胚轴为受体材料,运用农杆菌介导法转化GUS基因,通过对GUS基因瞬时表达率的比较,探讨大豆遗传转化的主要影响因素(光照条件和共培养时间等),以寻找适宜农杆菌和外植体的平衡点,并进一步对遗传转化条件进行优化。结果表明:提供10~16h·d-1光照均提高了转化效率,与完全黑暗差异显著;延长共培养时间,显著提高转化效率,以7~10d为宜。该结果对提高大豆的遗传转化效率有重要参考价值。 展开更多
关键词 光照条件 共培养时间 大豆 遗传转化效率
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