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SpyTag/SpyCatcher体系蛋白共价连接条件的分析
1
作者
王蓓
胡海涛
楼觉人
《国际生物制品学杂志》
CAS
2021年第5期271-275,共5页
目的比较不同实验条件下SpyTag/SpyCatcher体系共价连接的效率,分析得出优化后的连接条件,为今后相关纳米颗粒疫苗的开发提供实验依据。方法用大肠埃希菌表达分别带有SpyTag和SpyCatcher结构的两种蛋白,摸索共价连接的反应时间、温度、...
目的比较不同实验条件下SpyTag/SpyCatcher体系共价连接的效率,分析得出优化后的连接条件,为今后相关纳米颗粒疫苗的开发提供实验依据。方法用大肠埃希菌表达分别带有SpyTag和SpyCatcher结构的两种蛋白,摸索共价连接的反应时间、温度、缓冲体系和混合比例,采用非还原型凝胶电泳检测共价连接的效率。结果反应时间对共价连接的影响有统计学意义(F=22.028,P<0.05),带有SpyTag和SpyCatcher结构的两种蛋白质可形成稳定的共价键,6 h后连接效率约为50%,偶联蛋白在25℃稳定存在至少72 h。反应温度和缓冲体系对共价连接的影响没有统计学意义。SpyTag和SpyCatcher结构蛋白比例为物质的量比1.0∶2.0混合。结论SpyTag/SpyCatcher共价连接体系的关键工艺参数为反应时间,且该体系能适用于多种温度和缓冲条件。
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关键词
SpyTag/SpyCatcher
共价
键
共价
连接
效率
原文传递
题名
SpyTag/SpyCatcher体系蛋白共价连接条件的分析
1
作者
王蓓
胡海涛
楼觉人
机构
上海至成生物科技有限公司研发部
上海生物制品研究所有限责任公司第二研究室
出处
《国际生物制品学杂志》
CAS
2021年第5期271-275,共5页
文摘
目的比较不同实验条件下SpyTag/SpyCatcher体系共价连接的效率,分析得出优化后的连接条件,为今后相关纳米颗粒疫苗的开发提供实验依据。方法用大肠埃希菌表达分别带有SpyTag和SpyCatcher结构的两种蛋白,摸索共价连接的反应时间、温度、缓冲体系和混合比例,采用非还原型凝胶电泳检测共价连接的效率。结果反应时间对共价连接的影响有统计学意义(F=22.028,P<0.05),带有SpyTag和SpyCatcher结构的两种蛋白质可形成稳定的共价键,6 h后连接效率约为50%,偶联蛋白在25℃稳定存在至少72 h。反应温度和缓冲体系对共价连接的影响没有统计学意义。SpyTag和SpyCatcher结构蛋白比例为物质的量比1.0∶2.0混合。结论SpyTag/SpyCatcher共价连接体系的关键工艺参数为反应时间,且该体系能适用于多种温度和缓冲条件。
关键词
SpyTag/SpyCatcher
共价
键
共价
连接
效率
Keywords
SpyTag/SpyCatcher
Covalent bond
Covalent bonding efficiency
分类号
R313 [医药卫生—基础医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
SpyTag/SpyCatcher体系蛋白共价连接条件的分析
王蓓
胡海涛
楼觉人
《国际生物制品学杂志》
CAS
2021
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