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补阳还五汤加减对激光损伤兔视网膜后视网膜缝隙连接蛋白Cx43表达的影响 被引量：3
1
作者 杨霞 彭清华 +2 位作者 张波涛 叶群如 江运长 《湖南中医药大学学报》 CAS 2008年第5期27-29,共3页
目的探讨补阳还五汤加减对激光致视网膜损伤修复中缝隙连接蛋白Cx43的影响。方法将32只家兔随机分为4组,每组8只兔16只眼。采用532 nm YAG激光建立模型,随机分为正常组、模型组、补阳还五汤加减组、黄芪组。连续灌胃,分别于7 d、14 d取... 目的探讨补阳还五汤加减对激光致视网膜损伤修复中缝隙连接蛋白Cx43的影响。方法将32只家兔随机分为4组,每组8只兔16只眼。采用532 nm YAG激光建立模型,随机分为正常组、模型组、补阳还五汤加减组、黄芪组。连续灌胃,分别于7 d、14 d取眼球作视网膜组织免疫组化检测。结果补阳还五汤加减组兔视网膜Cx43表达明显高于黄芪组及模型组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论补阳还五汤加减能有效增强兔视网膜缝隙连接蛋白Cx43的表达,从而保持视网膜的正常生理功能。 展开更多
关键词 补阳还五汤加减 激光 兔视网膜 CX43 黄芪 红花 地龙
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蛴螬提取物对兔视网膜静脉阻塞模型视网膜组织ET-1表达的影响 被引量：9
2
作者 张波涛 彭清华 +1 位作者 叶群如 谭涵宇 《湖南中医药大学学报》 CAS 2012年第9期8-11,共4页
目的观察蛴螬提取物对兔视网膜静脉阻塞(retinal vein occlusion,RVO)模型ET-1表达的干预作用。方法取健康兔36只,每组9只,分为空白组、模型组、血栓通组、蛴螬组4组。采用波长532 nm的Nd:YAG激光光凝法建立RVO模型,连续灌胃给药,实验后... 目的观察蛴螬提取物对兔视网膜静脉阻塞(retinal vein occlusion,RVO)模型ET-1表达的干预作用。方法取健康兔36只,每组9只,分为空白组、模型组、血栓通组、蛴螬组4组。采用波长532 nm的Nd:YAG激光光凝法建立RVO模型,连续灌胃给药,实验后7、14、21 d分别处死兔取材,石蜡包埋切片,用免疫组化法检测视网膜组织中ET-1表达活性,计算机图像分析系统并进行统计分析。结果蛴螬组7、14、21 d与模型组比较,ET-1表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);蛴螬组与血栓通组比较,差异无统计学意义(P>0.05);蛴螬组与空白组比较,7、14 d的ET-1表达活性明显高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05),21 d时的ET-1表达活性与空白组差异无统计学意义(P>0.05)。结论蛴螬能够明显降低兔RVO模型ET-1表达,抗血栓形成,改善RVO后视网膜局部微循环,减轻缺血缺氧对血管内皮细胞的损害。 展开更多
关键词 蛴螬 兔视网膜静脉阻塞模型 内皮素-1 兔
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兔视网膜色素上皮细胞培养和鉴定 被引量：5
3
作者 胡健艳 陈雪 +1 位作者 陈辉 于靖 《南通大学学报（医学版）》 2005年第3期171-173,共3页
目的:进行兔视网膜色素上皮细胞(RPE)细胞的体外培养,探讨RPE培养与鉴定方法,为研究其生理功能、生化特征和病理过程提供细胞模型。方法:用改良的眼杯固定法,将其固定在眼球托上,用胰酶直接消化视网膜色素上皮面,收取RPE细胞。作细胞形... 目的:进行兔视网膜色素上皮细胞(RPE)细胞的体外培养,探讨RPE培养与鉴定方法,为研究其生理功能、生化特征和病理过程提供细胞模型。方法:用改良的眼杯固定法,将其固定在眼球托上,用胰酶直接消化视网膜色素上皮面,收取RPE细胞。作细胞形态学、免疫组织化学、免疫荧光鉴定。结果:RPE细胞培养早期生长活跃、胞核透明、胞浆含丰富黑色素颗粒,多巴氧化酶呈阳性反应.免疫组织化学染色和免疫荧光染色提示角蛋白表达强阳性。结论:培养的大量细胞可用于RPE的体外实验研究,多巴染色是鉴定RPE细胞一种较好的方法。 展开更多
关键词 兔视网膜色素上皮细胞 免疫组织化学染色 RPE细胞 养和 免疫荧光染色 体外实验研究 细胞形态学 黑色素颗粒 多巴氧化酶 体外培养 鉴定方法 生理功能 细胞模型 病理过程 生化特征 细胞培养 蛋白表达 阳性反应 多巴染色 固定法
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枸杞子含药血清对兔视网膜色素上皮细胞光损伤凋亡线粒体信号传导途径的影响 被引量：5
4
作者 宋超 俞洋 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2016年第11期2410-2414,共5页
目的:研究兔视网膜色素(RPE)上皮细胞光损伤以及枸杞子含药血清干预防治后细胞中参与凋亡的蛋白分子表达量的变化,探讨枸杞子含药血清对兔视网膜色素上皮细胞光损伤保护可能的信号传导途径,为临床应用枸杞子治疗年龄相关性黄斑变性等视... 目的:研究兔视网膜色素(RPE)上皮细胞光损伤以及枸杞子含药血清干预防治后细胞中参与凋亡的蛋白分子表达量的变化,探讨枸杞子含药血清对兔视网膜色素上皮细胞光损伤保护可能的信号传导途径,为临床应用枸杞子治疗年龄相关性黄斑变性等视网膜光损伤性疾病提供理论依据。方法:体外培养兔RPE细胞,用三基色冷光灯模拟自然光源,选取(2500±500)Lux作为基础光照强度,照射4h建立光损伤模型。制备含不同效量的枸杞子含药血清,光照前1h孵育体外培养的兔RPE细胞后进行光照实验,设置四个实验分组:A组:空白对照组;B组:光损伤模型组;C组:低剂量组;D组:高剂量组。通过透射电子显微镜进行兔RPE细胞超微结构的观察及拍片;采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测兔RPE细胞内细胞色素C(Cyt-C)、caspase-9及caspase-3蛋白的表达量。结果:与空白对照组相比,光损模型组细胞内的Cyt-C、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达水平明显上调(P<0.05);枸杞子含药血清能有效的抑制细胞内Cyt-C、Caspase-9、Caspase-3蛋白的表达,与光损模型组比较,差异有统计学意义(均P<0.05),其中高浓度组可显著抑制细胞内Cyt-C、Caspase-9、Caspase-3蛋白的表达,与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:枸杞子对RPE细胞具有一定的保护作用,这一保护作用可能是通过线粒体信号传导途径来实现的。 展开更多
关键词 光损伤 兔视网膜色素上皮细胞 枸杞子 含药血清 线粒体信号传导通路
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乳香挥发油及地塞米松对IL-1β介导的兔视网膜色素上皮细胞增殖、凋亡及NF-κB信号通路的影响 被引量：4
5
作者 赵芳芳 杨晓旭 +2 位作者 黄洁 高园园 俞洋 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期65-71,共7页
目的观察IL-1β对兔视网膜色素上皮细胞增殖的影响,并研究乳香挥发油及地塞米松对IL-1β介导的兔视网膜色素上皮细胞增殖、凋亡及NF-κB信号通路的影响。方法MTT法检测IL-1β(2.5、5、10、15、20、30 g/L)作用兔视网膜色素上皮(RPE)细... 目的观察IL-1β对兔视网膜色素上皮细胞增殖的影响,并研究乳香挥发油及地塞米松对IL-1β介导的兔视网膜色素上皮细胞增殖、凋亡及NF-κB信号通路的影响。方法MTT法检测IL-1β(2.5、5、10、15、20、30 g/L)作用兔视网膜色素上皮(RPE)细胞24、48、72 h后对其增殖的影响,以及乳香挥发油(0.15、0.3、0.45、0.6、0.75 mg/mL)、地塞米松(50、100、200、400、600 mg/L)对IL-1β介导的兔RPE细胞增殖的影响。流式细胞仪检测乳香挥发油及地塞米松对IL-1β介导的细胞凋亡的影响。根据MTT检测结果及凋亡率检测结果筛选乳香挥发油及地塞米松低、中、高剂量组。免疫细胞化学染色法观察乳香挥发油对IL-1β作用下兔RPE细胞NF-κBp65、p-IκBα、COX-2蛋白表达的影响。结果与空白对照组比较,除外20、30 g/L IL-1β组24 h,其余IL-1β组24、48、72 h细胞存活率均显著增高(P<0.05,P<0.01),尤以浓度为10 g/L时最为明显;与本组24 h比较,20 g/L IL-1β组48 h及15、20、30 g/L IL-1β组72 h细胞存活率增高(P<0.05,P<0.01),同时30 g/L IL-1β组72 h细胞存活率高于本组48 h(P<0.01)。综合以上,选取浓度为10 g/L的IL-1β进行后续实验。与空白对照组比较,IL-1β对照组及溶媒对照组OD值及细胞存活率增高,早期及晚期凋亡率降低(P<0.01)。与IL-1β对照组比较,乳香挥发油各剂量组及地塞米松各剂量组OD值及细胞存活率降低,早期及晚期凋亡率增高(P<0.05,P<0.01),同时均具有浓度依赖性(P<0.05,P<0.01)。与空白对照组比较,IL-1β对照组NF-κBp65、p-IκBα、COX-2蛋白表达增高(P<0.01)。与IL-1β对照组比较,低、中、高剂量乳香挥发油组及低、中、高剂量地塞米松组NF-κBp65、p-IκBα、COX-2蛋白表达降低(P<0.01)。同时乳香挥发油组及地塞米松组各剂量间存在剂量依赖性(P<0.01)。结论IL-1β可明显促进兔RPE细胞增殖,其中浓度为10 g/L时促增殖作用最为明显;乳香挥发油及地塞米松可 展开更多
关键词 乳香挥发油 兔视网膜色素上皮细胞 细胞增殖 细胞迁移 NF-ΚB信号通路
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MTT法与CCK-8法检测兔视网膜色素上皮细胞活性的比较研究 被引量：3
6
作者 杨冬萍 杨晓旭 俞洋 《中国民族民间医药》 2017年第6期31-33,45,共4页
目的:探讨MTT法和CCK-8法对细胞活性检测的最佳实验条件,并比较二者的优缺点。方法:取传至第5代的兔视网膜色素上皮细胞为研究对象,分别用MTT试剂和CCK-8试剂检测兔视网膜色素上皮细胞的增殖情况。结果:MTT法最佳检测波长为570nm,最佳... 目的:探讨MTT法和CCK-8法对细胞活性检测的最佳实验条件,并比较二者的优缺点。方法:取传至第5代的兔视网膜色素上皮细胞为研究对象,分别用MTT试剂和CCK-8试剂检测兔视网膜色素上皮细胞的增殖情况。结果:MTT法最佳检测波长为570nm,最佳检测时间在加入试剂后4h,细胞数量在1.25×103~2×104之间检测较好;CCK-8法最佳检测波长在450nm,最佳检测时间在加入试剂4~6h,适宜的细胞检测范围为1.25×103~1×104。结论:MTT法较CCK-8法细胞检测范围更广,孵育时间更短,是一种优于CCK-8法的细胞活性检测方法。 展开更多
关键词 MTT CCK-8 兔视网膜色素上皮细胞 细胞活性
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二甲基亚砜对兔视网膜色素上皮细胞增殖及迁移影响的实验研究 被引量：2
7
作者 杨晓旭 杨冬萍 +1 位作者 赵芳芳 俞洋 《中南药学》 CAS 2018年第3期305-309,共5页
目的探讨二甲基亚砜(DMSO)对体外培养兔视网膜色素上皮细胞(RPE)增殖及迁移的影响。方法用含有不同浓度DMSO细胞培养基,培养兔RPE细胞24、48、72 h,采用透射电镜观察细胞形态变化;MTT比色法检测不同浓度DMSO(0.2%、0.5%、1.0%、1.5%、2... 目的探讨二甲基亚砜(DMSO)对体外培养兔视网膜色素上皮细胞(RPE)增殖及迁移的影响。方法用含有不同浓度DMSO细胞培养基,培养兔RPE细胞24、48、72 h,采用透射电镜观察细胞形态变化;MTT比色法检测不同浓度DMSO(0.2%、0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%、3.5%、4.0%)对兔RPE细胞OD值的影响并计算其存活率;流式细胞术检测DMSO(1.0%、2.0%、4.0%)对兔RPE细胞凋亡率的影响;划痕实验检测DMSO(2.0%)对兔RPE细胞迁移能力的影响。结果 MTT检测:同时相内除0.2%DMSO干预组外,各浓度DMSO组细胞存活率明显低于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);FCM检测:干预24 h时,高剂量组(4.0%DMSO)与正常对照组相比,细胞凋亡率明显增高(P<0.01);干预48 h、72 h时,中、高剂量组与正常对照组相比,细胞凋亡率明显增高(P<0.05或P<0.01)。划痕实验结果显示:划痕后正常组兔RPE细胞的迁移能力明显强于DMSO干预组兔RPE细胞的迁移能力,DMSO干预组划痕内仅有少量细胞,正常组划痕内细胞已基本长满。结论 DMSO干预兔RPE细胞后,随着时间的增长可明显抑制其增殖及迁移,且诱导细胞凋亡呈剂量依赖性。 展开更多
关键词 二甲基亚砜 兔视网膜色素上皮细胞 细胞凋亡 细胞迁移
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兔视网膜色素上皮细胞培养心得
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作者 俞洋 贾蕴颖 耑冰 《中医药学刊》 CAS 2003年第7期1075-1075,共1页
细胞培养是一种研究活细胞的良好方法 ,由于其所具有的诸多优点 ,现以被应用于生物学、医学各个领域 ,成为重要的基础科学之一。体外培养的细胞由于缺乏机体的屏障及免疫系统的保护而变得极为脆弱 ,对外界环境变化十分敏感 ,因此在组织... 细胞培养是一种研究活细胞的良好方法 ,由于其所具有的诸多优点 ,现以被应用于生物学、医学各个领域 ,成为重要的基础科学之一。体外培养的细胞由于缺乏机体的屏障及免疫系统的保护而变得极为脆弱 ,对外界环境变化十分敏感 ,因此在组织的取材、分离、消化以及防止微生物的污染上就成为细胞能否培养成功的关键 ,应尽力预防污染的发生 ,防止的关键在于严格无菌操作 ,尽可能阻止污染物进入培养操作的各个环节。以兔视网膜色素上皮细胞的培养为例对细胞培养中的关键环节作了较细致的介绍。 展开更多
关键词 兔视网膜色素上皮细胞 培养 研究
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