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抑制核转录因子E2相关因子2途径对高糖状态下胰腺癌细胞转移及免疫逃逸因子表达的调节作用
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作者 唐津天 唐润娟 +1 位作者 薛峰 黎旺红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1883-1888,共6页
目的:探究抑制核转录因子E2相关因子2(Nrf2)途径对高糖状态下胰腺癌细胞转移及分泌免疫逃逸因子水平的影响。方法:培养人胰腺癌细胞株Panc-1,采用5.5、10、25、50 mmol/L葡萄糖处理细胞,分别于12 h、24 h、48 h通过MTT检测细胞增殖率,2... 目的:探究抑制核转录因子E2相关因子2(Nrf2)途径对高糖状态下胰腺癌细胞转移及分泌免疫逃逸因子水平的影响。方法:培养人胰腺癌细胞株Panc-1,采用5.5、10、25、50 mmol/L葡萄糖处理细胞,分别于12 h、24 h、48 h通过MTT检测细胞增殖率,24 h时通过RT-qPCR和Western blot检测细胞内Nrf2表达变化;实验分为:对照组、高糖(HG)组、Nrf2抑制剂ML385+高糖(ML385+HG)组,MTT检测细胞增殖率,细胞克隆形成实验检测细胞集落形成数,Transwell检测细胞迁移数与侵袭数,体外划痕实验检测细胞划痕愈合情况,ELISA测定细胞培养液上清中血管内皮生长因子(VEGF)、IFN-γ、转化生长因子-β1(TGF-β1)和IL-6含量,细胞免疫荧光染色观察细胞内Nrf2分布,Western blot测定细胞中Nrf2和血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达。结果:相较于5.5 mmol/L葡萄糖组,10、25、50 mmol/L葡萄糖处理12 h和24 h时Panc-1细胞增殖率升高,Nrf2 mRNA和蛋白表达均升高(P<0.05);与对照组比较,HG组细胞增殖率升高,集落形成数增加,迁移数与侵袭数均增加,划痕愈合率升高,细胞培养上清中VEGF、IFN-γ、TGF-β1和IL-6含量均增加,Nrf2荧光染色明显增强,细胞核内Nrf2表达增加,Nrf2和HO-1蛋白表达上调(P<0.05);与HG组比较,ML385+HG组细胞增殖率降低,集落形成数、迁移数与侵袭数均减少,划痕愈合率下降,培养上清中VEGF、IFN-γ、TGF-β1和IL-6含量均减少,细胞内Nrf2荧光染色较弱,Nrf2和HO-1蛋白表达下调(P<0.05)。结论:高糖状态下胰腺癌细胞中Nrf2高表达,抑制Nrf2途径能够抑制高糖促进的胰腺癌细胞增殖、迁移及侵袭,并减少免疫逃逸因子分泌。 展开更多
关键词 胰腺癌 高糖 核转录因子E2相关因子2 免疫逃逸因子
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外泌体介导LOXL4通过PI3K/AKT信号通路调控口腔鳞癌的免疫逃逸相关因子表达 被引量：4
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作者 王梦漪 朴维英 苗伟 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期679-685,共7页
目的探讨外泌体(EXO)介导的赖氨酰氧化酶样蛋白4(LOXL4)对口腔鳞癌细胞(OSCC)免疫逃逸相关因子表达的影响和调控机制。方法q RT-PCR检测口腔鳞癌细胞SCC9以及人口腔上皮细胞HOEC培养上清液中LOXL4的mRNA水平。差速离心法提取SCC9的外泌... 目的探讨外泌体(EXO)介导的赖氨酰氧化酶样蛋白4(LOXL4)对口腔鳞癌细胞(OSCC)免疫逃逸相关因子表达的影响和调控机制。方法q RT-PCR检测口腔鳞癌细胞SCC9以及人口腔上皮细胞HOEC培养上清液中LOXL4的mRNA水平。差速离心法提取SCC9的外泌体,进行表征分析。Western blot检测外泌体标志物CD63、CD9以及目标基因LOXL4的表达量。使用荧光蛋白标记外泌体、SCC9细胞以及细胞核,利用共聚焦显微镜观察SCC9细胞对LOXL4-EXO的摄取。SCC9细胞和CD8+T细胞共培养,共培养体系分为空白对照组、LOXL4-EXO处理组、LOXL4-EXO联合PI3K/AKT的阻断剂Wortmannin处理组(LOXL4-EXO+WOR组)。CCK-8法检测细胞增殖率,ELISA法检测细胞培养液中IL-2、INF-γ、TNF-α的水平,Western blot检测PI3K、Akt、p-Akt、PD-L1的表达变化。结果与HOEC相比,LOXL4的m RNA水平在SCC9培养上清液中上调(P<0.05),并且成功分离和鉴定LOXL4-EXO,而且SCC9可摄取LOXL4-EXO。与空白对照组相比、LOXL4-EXO组的细胞增殖率上调(P<0.05),IL-2、INF-γ、TNF-α的水平下调(P<0.05),PI3K、Akt、p-Akt、PD-L1的表达量上调(P<0.05)。与LOXL4-EXO组相比,LOXL4-EXO+WOR组的细胞增殖率下调(P<0.05),IL-2、INF-γ、TNF-α的水平上调(P<0.05),PI3K、Akt、p-Akt、PD-L1的表达量下调(P<0.05)。结论外泌体介导LOXL4通过PI3K/AKT信号通路调节口腔鳞癌的免疫逃逸相关因子IL-2、INF-γ、TNF-α、PD-L1的表达。 展开更多
关键词 外泌体 赖氨酰氧化酶样蛋白4 PI3K/AKT信号通路 口腔鳞癌 免疫逃逸相关因子
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