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CD_4、CD_8细胞与艾滋病治疗免疫评价及实践 被引量：8
1
作者 孙传正 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期633-634,共2页
关键词 CD4细胞 CD8细胞 艾滋病治疗 免疫评价
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欧洲型PRRSV重组腺病毒疫苗的构建及免疫效果评价 被引量：11
2
作者 曹亮 孙文超 +11 位作者 解长占 陈兴 韩继成 郭海宁 肖朋朋 张萍 马海彬 南福龙 崔卓栋 鲁会军 钱爱东 金宁一 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2015年第11期961-965,975,共6页
目的构建欧洲型PRRSV重组腺病毒疫苗并对其免疫原性进行分析,为欧洲型PRRSV的感染预防提供依据。方法 PCR扩增欧洲型蓝耳病病毒ORF3、ORF5目的基因,将其连接到腺病毒穿梭载体,构建重组腺病毒穿梭质粒pacad-EU-ORF3、pacad-EU-ORF5、paca... 目的构建欧洲型PRRSV重组腺病毒疫苗并对其免疫原性进行分析,为欧洲型PRRSV的感染预防提供依据。方法 PCR扩增欧洲型蓝耳病病毒ORF3、ORF5目的基因,将其连接到腺病毒穿梭载体,构建重组腺病毒穿梭质粒pacad-EU-ORF3、pacad-EU-ORF5、pacad-EU-ORF3-ORF5。将重组腺病毒穿梭质粒与骨架质粒共同转染至HEK 293细胞,构建重组腺病毒,并对构建的病毒用Western blot方法进行验证。用构建的重组腺病毒免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞增殖试验对重组疫苗免疫效果进行初步评价。结果 Western blot显示重组腺病毒可稳定表达目的蛋白ORF3和ORF5,分子质量单位分别为30ku和22ku,与预期值相符。免疫小鼠淋巴细胞增殖试验显示重组腺病毒刺激指数均为PBS组1.5倍以上(P<0.05),且rAd-EU-ORF3-ORF5组显著高于rAd-EU-ORF3组和rAd-EU-ORF5组,表明重组腺病毒疫苗能够诱导机体淋巴细胞增殖,增强机体的细胞免疫应答水平。结论成功包装出重组腺病毒rAdEU-ORF3、rAd-EU-ORF5和rAd-EU-ORF3-ORF5,动物实验显示其具有良好的免疫原性。 展开更多
关键词 EU-PRRSV 重组腺病毒 构建 免疫评价
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不同剂量的猪瘟活疫苗单次免疫效果评价及疫苗存留试验 被引量：10
3
作者 熊丁杰 范学政 +7 位作者 徐璐 王琴 徐志文 郭万柱 周远成 刘俊 陈蕾 汤波 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2011年第8期3-6,共4页
用1 200 RID、6 000 RID和24 000 RID 3种不同剂量的猪瘟活疫苗单次免疫9头30日龄的断奶仔猪,检测试验猪的抗体消长和疫苗毒核酸在猪体内的存留时间,并用6头猪进行攻毒保护试验。结果表明:不同免疫剂量的试验猪其抗体水平的动态变化没... 用1 200 RID、6 000 RID和24 000 RID 3种不同剂量的猪瘟活疫苗单次免疫9头30日龄的断奶仔猪,检测试验猪的抗体消长和疫苗毒核酸在猪体内的存留时间,并用6头猪进行攻毒保护试验。结果表明:不同免疫剂量的试验猪其抗体水平的动态变化没有显著差异,免疫后21 d试验猪的猪瘟抗体均成阳性,63 d后至578 d猪瘟抗体阻断率仍然高于85%,应用荧光定量RT-PCR技术检测,猪瘟疫苗毒核酸在猪血液和扁桃体中的检出时间分别达28 d和42 d;免疫后370 d进行猪瘟强毒攻击后,免疫猪没有出现明显的临床症状,存活且不带毒。本研究证实,没有其他疫病和母源抗体的仔猪单次接种合理剂量的猪瘟活疫苗就能产生坚强的保护力,提出加强种猪场各种病原监测,淘汰病原阳性种猪,净化种猪群对提高猪瘟疫苗免疫效果,最终控制猪瘟具有重要意义。 展开更多
关键词 猪瘟疫苗 免疫评价 残留
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类器官芯片在医学研究中的应用进展 被引量：8
4
作者 冯晓莹 孟倩 +2 位作者 陈巍 余磊 黄卫人 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期112-118,共7页
相比于2D细胞模型和动物模型,类器官更能够重现来源器官的关键结构和功能特征,在生物医学领域得到了广泛的研究和运用。类器官芯片结合了类器官培养腔、微流控等多种功能单元,不仅可以根据研究者对靶器官的认知来设计仿生结构,模拟人体... 相比于2D细胞模型和动物模型,类器官更能够重现来源器官的关键结构和功能特征,在生物医学领域得到了广泛的研究和运用。类器官芯片结合了类器官培养腔、微流控等多种功能单元,不仅可以根据研究者对靶器官的认知来设计仿生结构,模拟人体靶器官的复杂性;而且能控制并检测类器官所处微环境的变化,具有高通量和高灵敏度的特点。对类器官芯片的组成元件以及类器官芯片在医学研究中的应用,包括生物发育模型及疾病模型构建、药物研发、免疫评价等方面进行概述,并根据类器官芯片在目前研究应用中的不足进行讨论及展望,旨在为研究疾病或生物发育机理以及临床前研究提供有力的策略。 展开更多
关键词 类器官芯片 微流控 药物筛选 模型构建 免疫评价
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猪细小病毒病毒样颗粒的制备及其免疫评价 被引量：8
5
作者 陈玉梅 周景明 +3 位作者 刘东民 马丽萍 冯景 刘运超 《河南农业科学》 北大核心 2020年第4期131-137,共7页
为了研制猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)疫苗,结合大肠杆菌密码子偏好性,经密码子优化,合成猪细小病毒VP2蛋白编码区序列,并将其插入原核表达载体pET28a中,随后转化BL21(DE3)感受态细胞,再... 为了研制猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)疫苗,结合大肠杆菌密码子偏好性,经密码子优化,合成猪细小病毒VP2蛋白编码区序列,并将其插入原核表达载体pET28a中,随后转化BL21(DE3)感受态细胞,再转入伴侣蛋白质粒pTf16构建共表达载体,优化诱导表达条件,进行SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果表明,在L-阿拉伯糖质量浓度为2 mg/mL、IPTG浓度为0.1 mmol/L、温度为30℃、诱导12 h时重组蛋白VP2可溶性表达量最高,经硫酸铵沉淀和Ni-NTA亲和层析纯化获得纯度约90%的VP2蛋白,体外装配可形成直径约20 nm的具有血凝活性的VLPs。用制备的VLPs免疫昆明鼠并对其进行免疫评价,结果表明,制备的VLPs能有效刺激机体产生高滴度抗体,ELISA效价高达1∶25600。可见,制备的VLPs能刺激机体产生特异性抗体。 展开更多
关键词 猪细小病毒 VP2蛋白 病毒样颗粒 疫苗 免疫评价
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副猪嗜血杆菌间接ELISA抗体检测试剂盒的研制与应用 被引量：4
6
作者 张鹏云 陈敏 +3 位作者 刘明星 周红 蔺辉星 范红结 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1606-1614,共9页
【背景】副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)是猪的上呼吸道病原菌,引起格拉瑟氏病,主要引起断奶前后和保育阶段的猪发病,通常见于5—8周龄的青年猪,发病率一般为10%—15%。该菌有15种血清型,目前主要养猪国家流行的血清型为4型、... 【背景】副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)是猪的上呼吸道病原菌,引起格拉瑟氏病,主要引起断奶前后和保育阶段的猪发病,通常见于5—8周龄的青年猪,发病率一般为10%—15%。该菌有15种血清型,目前主要养猪国家流行的血清型为4型、5型、12型和13型,是严重危害养猪业发展的主要细菌性病原之一。目前国内还没有检测该菌抗体的商品化试剂盒。【目的】研制一种针对副猪嗜血杆菌的快速、敏感和特异性强的抗体检测试剂盒,为格拉瑟氏病的有效防控提供技术支持。【方法】表达并纯化OppA、DppA、HbpA 3种不同的副猪嗜血杆菌ABC转运体周质底物结合蛋白,使用副猪嗜血杆菌阴、阳性参考血清筛选以上3种蛋白中免疫反应性和反应特异性好的蛋白。以筛选的蛋白为包被抗原,建立检测HPS抗体的间接ELISA方法,优化间接ELISA反应条件,并组装试剂盒。在此基础上,确定该试剂盒的敏感性、特异性;通过对不同时间、不同猪场采集的2000份临床猪血清样本进行检测,评价该试剂盒的实用性;在以上临床血清样本中随机选取200份,分别以研制的试剂盒、间接血凝试验以及进口商品化试剂盒进行检测,比较检测结果,验证该试剂盒的符合率;最后,使用研制的试剂盒检测免疫和攻毒猪采集的血清,评价该菌免疫后的抗体消长规律。【结果】成功表达并纯化了OppA、DppA、HbpA 3种蛋白,发现OppA免疫反应性和反应特异性最好。经过反应条件优化,确定OppA包被浓度为1μg·mL-1,封闭液为0.5%的BSA-PBS溶液,样品稀释液为1%的BSA-PBST溶液,样品孵育时间为30min,样品稀释度为1﹕50,酶标二抗孵育时间为30min,底物作用时间为15 min,临界值为0.18;试剂盒的敏感性和特异性为96.67%,能与国内常见血清型HPS阳性血清反应而不与猪其他常见病原阳性血清发生交叉反应;2000份临床血清样本阳性检出率为34.65%;随机抽取 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌 ABC转运体周质底物结合蛋白 间接ELISA 免疫评价
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非疾病状态人群外周血淋巴细胞水平与性别及年龄的相关性
7
作者 刘峰 杨晓静 +5 位作者 吕炳鑫 刘星 王毅盟 沈丽 张彩虹 李继光 《健康体检与管理》 2024年第1期23-28,49,共7页
目的:分析非疾病状态人群外周血中淋巴细胞(LYM)数值、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)在不同性别人群随年龄变化的特征和规律,探讨这些指标用于评价非疾病状态人群免疫水平的可行性。方法:研究数据来自2019年1月至12月期间在河北中石油... 目的:分析非疾病状态人群外周血中淋巴细胞(LYM)数值、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)在不同性别人群随年龄变化的特征和规律,探讨这些指标用于评价非疾病状态人群免疫水平的可行性。方法:研究数据来自2019年1月至12月期间在河北中石油中心医院进行健康体检的人群,选取28~60岁年龄区间内10^(9)98例(男性5509例,女性5489例)非疾病状态人员,对其外周血LYM和NLR数值进行分析,按性别分别绘制散点图,进一步探讨这些指标在不同性别人群中,随年龄变化的差异和规律。结果:28~60岁年龄区间内,随年龄增长,男性和女性LYM、NLR散点图拟合曲线各自呈现规律性变化,其中,男性组LYM呈单调递减趋势,NLR呈单调递增趋势。女性组LYM随年龄增长大致呈“U”形,在28~30岁年龄区间,拟合曲线平直,LYM值约在(1.93~1.96)×10^(9)/L,30~35岁区间,呈下降趋势;35~50岁年龄区间,拟合曲线基本保持水平状态,LYM均值(1.79±0.02)×10^(9)/L;50~60岁年龄区间,拟合曲线呈上升趋势;NLR随着年龄的增长大致呈倒“U”形,在40~41岁年龄区间达到最大值。结论:LYM、NLR水平既有性别特征,又有年龄规律,作为非疾病状态人群免疫状态客观评估和健康管理的有效参考指标具有可行性。 展开更多
关键词 淋巴细胞 中性粒细胞/淋巴细胞 免疫评价
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L929细胞无血清悬浮驯化及其在流产衣原体灭活疫苗中的应用研究
8
作者 刘东慧 李兆才 +6 位作者 梁林 谭书敏 闫海全 白天俊 王淑芳 闫文军 周继章 《中国兽药杂志》 2024年第4期1-13,共13页
为通过悬浮细胞培养方法规模化生产流产衣原体抗原,采用逐步降血清悬浮驯化法使贴壁L929细胞逐步适应悬浮培养环境,最终获得了一株可无血清悬浮培养的L929细胞株。将流产衣原体接种于L929悬浮细胞上,研究不同的促感染试剂以提高收菌量,... 为通过悬浮细胞培养方法规模化生产流产衣原体抗原,采用逐步降血清悬浮驯化法使贴壁L929细胞逐步适应悬浮培养环境,最终获得了一株可无血清悬浮培养的L929细胞株。将流产衣原体接种于L929悬浮细胞上,研究不同的促感染试剂以提高收菌量,并选择出最佳的培养方法制备流产衣原体灭活疫苗。以25μL、50μL、100μL的剂量免疫Balb/c小鼠,攻毒后检测其免疫保护效果。结果显示,当该L929悬浮细胞初始接种密度为5×10^(5)/mL时,培养72 h后细胞浓度可达到约7×10^(6)/mL,细胞活力在95%以上;在细胞密度为6×10^(6)/mL,接菌量为5.5×10^(4) IFU/mL,加入脂质体2000的量为1.7μL/mL、放线菌酮浓度为0.4μg/mL时,菌量增殖倍数最大,48 h内约扩增了52倍。经流产衣原体悬浮培养细胞灭活疫苗免疫后,小鼠产生的抗体水平随免疫剂量的增加而提升;接种50μL、100μL疫苗组小鼠的脾淋巴细胞增殖水平、IFN-γ、IL-2的含量远高于接种25μL疫苗和注射PBS组的小鼠;对免疫后的小鼠进行攻毒,接种疫苗组小鼠的脾脏、十二指肠、子宫中的流产衣原体基因组含量远低于未接种疫苗组小鼠。注射PBS组及接种25μL疫苗组的小鼠子宫出现了不同程度的坏死及炎症,而其余两组小鼠的子宫无异常变化。结果表明,本试验成功驯化出1株L929悬浮培养细胞株,并且通过悬浮培养工艺制备的流产衣原体灭活疫苗免疫效果良好,接种50μL、100μL该灭活疫苗可以有效抑制流产衣原体的感染,该L929细胞全悬浮培养株的成功驯化为疫苗规模化生产提供了技术支持。 展开更多
关键词 L929贴壁细胞 悬浮培养驯化 流产衣原体 灭活疫苗 免疫评价
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副结核分枝杆菌免疫原蛋白的筛选及免疫保护效果评价
9
作者 陈凡若 张嘉俊 +5 位作者 鹿萍 崔宁 崔莹莹 崔子寅 党光辉 刘思国 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1204-1214,共11页
【背景】副结核病(paratuberculosis,PTB)是由副结核分枝杆菌(Mycobacterium avium subsp.paratuberculosis,MAP)主要引起反刍动物的一种慢性消耗性传染病。患病动物表现为肉芽肿性肠炎和肠道的功能失调、顽固性腹泻、渐进性消瘦、营养... 【背景】副结核病(paratuberculosis,PTB)是由副结核分枝杆菌(Mycobacterium avium subsp.paratuberculosis,MAP)主要引起反刍动物的一种慢性消耗性传染病。患病动物表现为肉芽肿性肠炎和肠道的功能失调、顽固性腹泻、渐进性消瘦、营养不良、贫血、嗜睡甚至死亡。PTB给畜牧业造成巨大的经济损失,并且严重威胁公共卫生安全。由于目前临床上对于PTB的检测和控制手段不够完善,现有的PTB疫苗保护效果不佳,并且干扰牛结核病的诊断,因此亟需研发免疫原性强、保护效果佳的疫苗以用于PTB的防控。【目的】通过筛选MAP免疫原蛋白,并对其免疫保护效果进行评价,为PTB的防控提供数据支持。【方法】根据MAP的p22、map1272c、map3531c、map3783、map3701c以及map3527这6个基因,分别构建5种重组质粒,在获得5种重组蛋白基础上,联合MONTANIDE ISA 61 VG佐剂皮下多点注射免疫小鼠,通过IFN-γELISPOT试验筛选出最佳免疫原;随后将最佳免疫原和已报道的66NC融合蛋白混合,经皮下多点注射免疫小鼠,在二免3周后用1×10^(8)CFU的MAP K-10菌株腹腔感染小鼠。通过IFN-γELISPOT试验,抗体监测和细胞因子检测,分析感染后小鼠的体重、肝脏病理学和组织病理学变化及其荷菌数差异,综合评价候选亚单位疫苗的免疫原性和免疫保护效果。【结果】以MAP p22、map1272c、map3531c、map3783以及map3701c为基础成功构建和表达了5种融合蛋白58F、62F、69F、46F和52F,其中免疫58F后产生的IFN-γ水平最高,是更具潜力的候选免疫原,且以融合蛋白组合66NC+58F诱导持久高滴度的IgG、IgM、IgG1和IgG2a水平,诱导特异性的IFN-γ、TNF-α和IL-17A的释放;在保护效果评价中,融合蛋白组合66NC+58F抵抗MAP感染造成的体重下降,显著减轻肝脏的病理损伤,降低MAP在肝脏中的定植。【结论】融合蛋白组合66NC+58F诱导小鼠产生Th1和Th17型免疫反应,对MAP感染有着一定免疫� 展开更多
关键词 副结核分枝杆菌 亚单位疫苗 58F蛋白 免疫评价
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呼吸道合胞病毒PreF和PostF重组蛋白疫苗的免疫原性评价
10
作者 陈佳敏 肖红剑 +3 位作者 杨耀云 张恒 李智华 李倩倩 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期110-119,共10页
目的对比呼吸道合胞病毒(RSV)融合前F蛋白(PreF)和融合后F蛋白(PostF)的免疫原性差异。方法通过SDS-PAGE及Western blot鉴定PreF和PostF的表达,使用Octet仪器检测F蛋白与特异性抗体的亲和力,用PreF和PostF免疫小鼠,检测免疫血清的结合... 目的对比呼吸道合胞病毒(RSV)融合前F蛋白(PreF)和融合后F蛋白(PostF)的免疫原性差异。方法通过SDS-PAGE及Western blot鉴定PreF和PostF的表达,使用Octet仪器检测F蛋白与特异性抗体的亲和力,用PreF和PostF免疫小鼠,检测免疫血清的结合抗体与中和抗体差异。结果PreF经改造后以稳定的三聚体形式存在,与单抗D25、8897、AM14、Palivizumab以及Motavizumab均具有很高的亲和力,但PostF缺乏表位Ø构象,并呈现单体构象,与D25、8897、AM14并无明显结合。PreF和PostF免疫小鼠的研究发现,AS01佐剂比铝佐剂更能诱导出高滴度结合抗体和针对RSV Long株的中和抗体。PreF与PostF免疫后诱导的结合抗体与PreF的结合能力相当,PostF免疫后诱导的结合抗体与PostF的结合水平显著高于PreF。结论PreF拥有更多的抗体结合表位,改造后稳定的PreF三聚体重组蛋白能够诱导更强的中和抗体。同时,AS01佐剂免疫效果优于铝佐剂。因此,基于PreF稳定的三聚体结构改造及佐剂的研发对于RSV疫苗的发展至关重要。 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 重组F蛋白 融合前构象 佐剂 免疫评价
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结核分枝杆菌Ag85B-mRNA疫苗的体外合成及其免疫原性研究 被引量：6
11
作者 夏敏 杨晓岚 +1 位作者 杨鹏辉 王希良 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期404-408,共5页
目的体外转录结核分枝杆菌Ag85B-mRNA并评价其免疫原性。方法结合密码子偏好性、GC含量和mRNA二级结构的自由能,优化Ag85B编码区序列,并在其两端插入β球蛋白3’和5’UTR序列。合成目的序列,进行体外转录。经琼脂糖凝胶电泳鉴定正确,体... 目的体外转录结核分枝杆菌Ag85B-mRNA并评价其免疫原性。方法结合密码子偏好性、GC含量和mRNA二级结构的自由能,优化Ag85B编码区序列,并在其两端插入β球蛋白3’和5’UTR序列。合成目的序列,进行体外转录。经琼脂糖凝胶电泳鉴定正确,体外转染细胞验证其表达后,联合鱼精蛋白免疫Balb/c小鼠,检测特异性细胞免疫应答。结果 Ag85B优化序列二级结构分析显示,其具有更高的稳定性。成功体外合成稳定的Ag85B-mRNA。Western blot检测Ag85B-mRNA转染293T细胞24、48 h,均有清晰特异性的目的蛋白条带。小鼠免疫试验结果显示,Ag85B-mRNA可诱导针对结核分枝杆菌Ag85B分泌高水平IFN-γ的Th1型免疫应答。结论成功体外合成稳定的Ag85B-mRNA疫苗,具有较好的免疫原性,为新型结核疫苗的研制提供新思路。 展开更多
关键词 AG85B mRNA疫苗 序列设计 免疫评价
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幽门螺杆菌UreB和HspA DNA疫苗的构建及免疫评价 被引量：3
12
作者 刘秀丽 李淑琴 +3 位作者 刘纯杰 陶好霞 李勣 张兆山 《生物技术通讯》 CAS 2002年第3期161-163,共3页
本研究选择幽门螺杆菌尿素酶B和热休克蛋白A为候选抗原,通过PCR扩增基因,克隆至真核表达质粒pCD-NA3.1(-)His-Myc上,构建成DNA疫苗。通过小鼠免疫效果的评价,获得两株具有免疫源性DNA疫苗。
关键词 幽门螺杆菌 UREB HSPA DNA疫苗 构建 免疫评价 尿素酶B 热休克蛋白A 候选抗原
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EV71类病毒颗粒的表达和免疫原性的初步评价 被引量：5
13
作者 郭莉莉 欧霞 +2 位作者 米锴 孙茂盛 李鸿钧 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期8-13,共6页
目的:运用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统构建EV71类病毒颗粒,并对形成的类病毒颗粒的免疫原性进行初步评价。方法:构建重组杆状病毒表达载体Bacmid-P1-3CD,转染昆虫细胞sf9细胞系,获得携带EV71病毒结构基因P1和3CD蛋白酶基因的重组杆状病... 目的:运用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统构建EV71类病毒颗粒,并对形成的类病毒颗粒的免疫原性进行初步评价。方法:构建重组杆状病毒表达载体Bacmid-P1-3CD,转染昆虫细胞sf9细胞系,获得携带EV71病毒结构基因P1和3CD蛋白酶基因的重组杆状病毒AcMNPV-P1-3CD。采用免疫荧光、Western blot及电镜观察等方法检测重组病毒表达产物及形态学特征。表达产物免疫动物后用ELISA、中和试验的方法对其免疫效果进行初步评价。结果:免疫荧光证明有特异性表达产物,Western blot结果可见大小约为39kDa的VP1特异性条带。电镜结果可观察到大小约为27nm的颗粒。免疫动物的血清ELISA抗体效价为1:776,中和抗体效价为1:588。结论:利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统能共表达EV71的P1和3CD基因,并能形成EV71类病毒颗粒。经初步评价,形成的EV71类病毒颗粒具有较好的免疫原性。 展开更多
关键词 手足口病 EV71 类病毒颗粒 Bac-to-Bac杆状病毒表达系统 免疫评价
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HIV-1 gp140蛋白疫苗的设计及其免疫原性研究 被引量：5
14
作者 宋伟 刘建东 +3 位作者 葛向阳 任莉 邵一鸣 郝彦玲 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期224-229,共6页
目的 设计HIV-1 gp140蛋白疫苗并进行免疫原性初步研究.方法 构建包含不同信号肽的gp140蛋白表达克隆,对表达效率和信号肽切割效率进行比较筛选,同时对不同长度C末端的gp140进行比较,最终获得优化的HIV-1 gp140免疫原.采用不同的免疫方... 目的 设计HIV-1 gp140蛋白疫苗并进行免疫原性初步研究.方法 构建包含不同信号肽的gp140蛋白表达克隆,对表达效率和信号肽切割效率进行比较筛选,同时对不同长度C末端的gp140进行比较,最终获得优化的HIV-1 gp140免疫原.采用不同的免疫方式免疫豚鼠,通过特异性结合抗体检测和中和抗体检测进行免疫效果评价.结果 设计的信号肽具有较好的分泌、切割效率,重组HIV-1 gp140抗原获得良好的表达.重组蛋白疫苗单独免疫就能诱导很强的结合抗体和中和抗体反应,反应强度高于重组DNA疫苗以及痘苗病毒载体疫苗的联合免疫.不同C末端长度的gp140蛋白免疫效果没有显著的差异,但长C末端的gp140蛋白免疫效果稍好.结论 优化设计了HIV-1 gp140蛋白疫苗,设计的重组疫苗获得较好的免疫效果. 展开更多
关键词 HIV-1gp140 抗原设计 免疫评价
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影响动物疫病免疫效果的因素及对策 被引量：4
15
作者 胡桂霞 王晓森 《畜禽业》 2018年第9期127-127,129,共2页
为保障畜禽养殖业健康平稳发展,月塘镇高度重视畜禽主要动物疫病的防控工作,在指导做好常规饲养管理的同时,着力指导和监管畜禽养殖场(户)做好相关疫病的免疫接种,提高抵御疫病风险的能力。免疫接种是否达到效果,接种质量如何,则需要通... 为保障畜禽养殖业健康平稳发展,月塘镇高度重视畜禽主要动物疫病的防控工作,在指导做好常规饲养管理的同时,着力指导和监管畜禽养殖场(户)做好相关疫病的免疫接种,提高抵御疫病风险的能力。免疫接种是否达到效果,接种质量如何,则需要通过实验室免疫效果检测才能得到科学评估。但多年检测结果显示:总有一些养殖户饲养的畜禽虽然接受过疫苗注射,但检测结果却不如意,甚至不达标。有的甚至经过多次整改仍不能达到要求,为此对不达标的养殖场和病种从疫苗接种剂量、途径、疫苗保存方法以及防疫员防疫情况等进行全面分析,排查出了免疫效果不理想的原因所在,加以总结,以期对防疫人员和养殖场有所启发和帮助。 展开更多
关键词 免疫评价 不合格原因分析
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桥连双苯丙氨酸二肽增强灭活猪丁型冠状病毒在小鼠上的免疫效果分析
16
作者 王子 王年祥 +6 位作者 田长明 赵福杰 刘林涛 马梦瑶 贾鑫浩 刘国星 郑兰兰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1590-1597,共8页
猪丁型冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)会引起新生仔猪腹泻、呕吐甚至死亡,对生猪养殖造成了严重危害。苯丙氨酸二肽及其衍生物可自组装成纳米超分子组装体,具有负载并递送药物的功能。本研究旨在探究桥连双苯丙氨酸二肽是否... 猪丁型冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)会引起新生仔猪腹泻、呕吐甚至死亡,对生猪养殖造成了严重危害。苯丙氨酸二肽及其衍生物可自组装成纳米超分子组装体,具有负载并递送药物的功能。本研究旨在探究桥连双苯丙氨酸二肽是否可以增强PDCoV的免疫原性。首先对桥连双苯丙氨酸二肽进行细胞毒性评价,之后作为佐剂(0.1 mg·mL^(-1))等体积混合灭活PDCoV(PDCoV HNZK-02,TCID 50为10^(8)·0.1 mL^(-1)),制备灭活疫苗。将灭活疫苗免疫小鼠(200μL·只-1),采用ELISA方法检测PDCoV N蛋白特异性IgG抗体、CCK-8试剂盒检测淋巴细胞增殖SI指数、乳酸脱氢酶(LDH)方法检测特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性。小鼠免疫5周后,灌胃攻毒PDCoV(500μL·只-1),3 d后进行回肠等组织病毒载量检测。结果显示,桥连双苯丙氨酸二肽对猪睾丸细胞没有明显毒性作用,作为佐剂与灭活PDCoV混合免疫小鼠后,PDCoV N蛋白特异性IgG抗体水平、SI和CTL检测结果均高于灭活PDCoV组,肠道组织病毒载量显著低于灭活PDCoV组。桥连双苯丙氨酸二肽有良好的佐剂效果,具有成为新型安全有效佐剂的潜力。 展开更多
关键词 桥连双苯丙氨酸二肽 佐剂 猪丁型冠状病毒 免疫评价
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BVDV-E2截短基因重组卡介苗对牛的免疫效果评价 被引量：4
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作者 时坤 李男 +7 位作者 刁乃超 李健明 冯海峰 姚泽慧 田甜 宗颖 曾范利 杜锐 《动物医学进展》 北大核心 2020年第1期34-38,共5页
为评价牛病毒性腹泻病毒(BVDV)E2截短基因重组卡介苗对牛的免疫效果,将BVDV抗原抗体阴性牛随机分为rBCG-pMV361-E2-1(1 aa-297aa)、rBCG-pMV361-E2-2(1 aa-345 aa)、rBCG-pMV361-E2-3(1 aa-374 aa)、rBCG-pMV361-E2-4(45 aa-297 aa)、rB... 为评价牛病毒性腹泻病毒(BVDV)E2截短基因重组卡介苗对牛的免疫效果,将BVDV抗原抗体阴性牛随机分为rBCG-pMV361-E2-1(1 aa-297aa)、rBCG-pMV361-E2-2(1 aa-345 aa)、rBCG-pMV361-E2-3(1 aa-374 aa)、rBCG-pMV361-E2-4(45 aa-297 aa)、rBCG-pMV361-E2-5(45 aa-345 aa)、rBCG-pMV361-E2-6(45 aa-374 aa)、BVDV对照组、BCG对照组和PBS对照组,各组牛免疫相应疫苗后通过特异性抗体检测、淋巴细胞增殖试验、淋巴细胞亚群检测和细胞因子检测分析疫苗的免疫效果。结果显示,BVDV E2截短基因重组卡介苗均可诱导BVDV特异性抗体的产生,rBCG-pMV361-E2-1组抗体水平高于其他重组卡介苗试验组和BVDV对照组。淋巴细胞增殖试验结果显示,rBCG-pMV361-E2-2组SI为2.038±0.21,显著高于其他重组卡介苗试验组(P<0.01)。牛外周血CD4^+、CD8^+T淋巴细胞亚群检测结果显示,rBCG-pMV361-E2-5组牛外周血中CD4^+和CD8^+ T淋巴细胞亚群含量与PBS组比较,差异极显著(P<0.01)。IFN-γ检测结果显示,rBCG-pMV361-E2-1的IFN-γ水平显著高于其他试验组和对照组(P<0.01)。研究表明,rBCG-pMV361-E2-1可诱导接种牛产生较好的体液免疫应答,rBCG-pMV361-E2-1、rBCG-pMV361-E2-2和rBCG-pMV361-E2-5在诱导细胞免疫应答上效果较好。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 E2截短基因 重组卡介苗 免疫评价
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猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗的安全性与生产性能评价 被引量：3
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作者 王世旗 胡欢鑫 +1 位作者 阮坤祥 田克恭 《现代牧业》 2021年第4期17-20,共4页
为评估猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗(圆柯欣)在临床上的单次免疫效果,本试验在6个养殖场选取14~19日龄仔猪20770头,分为组1圆柯欣免疫组(亚单位疫苗)和组2圆健免疫组(全病毒灭活疫苗)进行免疫。圆柯欣为单次免疫,圆健为首免后两周... 为评估猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗(圆柯欣)在临床上的单次免疫效果,本试验在6个养殖场选取14~19日龄仔猪20770头,分为组1圆柯欣免疫组(亚单位疫苗)和组2圆健免疫组(全病毒灭活疫苗)进行免疫。圆柯欣为单次免疫,圆健为首免后两周进行二次免疫,并在每次免疫之后记录试验猪的免疫应激情况、死淘率和日增重(保育猪和育肥猪)。结果显示:圆柯欣单次免疫的应激率为0.0073%,低于全病毒灭活疫苗免疫组(0.212%),安全性良好;死淘率为2.12%,低于全病毒灭活疫苗免疫组(3.31%);日增重在保育猪和育肥猪中较全病毒灭活疫苗组分别增加25克和17克,经济效益明显。以上研究结果表明,圆柯欣的免疫可为生猪养殖的健康发展提供有力保障。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 病毒样颗粒 疫苗 免疫评价
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不同免疫方式对鸡群抗体消长规律的影响 被引量：1
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作者 王雪敏 李明珠 +2 位作者 李佳佳 薛晓阳 周守长 《今日畜牧兽医》 2020年第11期74-75,共2页
选择两个不同的鸡场,不同批次,不同鸡只,进行点眼饮水免疫试验,鸡只固定编号1~30,选用T3新支二联活疫苗(VGGA+ma5+QX)。将固定好的鸡群进行分组,每30只鸡为一组,分别用点眼免疫和饮水免疫,点眼免疫剂量为1羽份,饮水剂量为2羽份。分别在... 选择两个不同的鸡场,不同批次,不同鸡只,进行点眼饮水免疫试验,鸡只固定编号1~30,选用T3新支二联活疫苗(VGGA+ma5+QX)。将固定好的鸡群进行分组,每30只鸡为一组,分别用点眼免疫和饮水免疫,点眼免疫剂量为1羽份,饮水剂量为2羽份。分别在免疫前一天、免疫后16d、免疫后30d进行采样,用HA/HI方法进行检测,评估免疫方法。 展开更多
关键词 HI抗体检测 免疫方法 免疫时间 免疫评价
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鲍曼不动杆菌外膜蛋白疫苗的制备及其保护作用评价 被引量：2
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作者 李笋 张卫军 +7 位作者 陈大群 季露 孙思 金喆 刘畅 戚远通 邹全明 李海波 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期93-101,共9页
目的鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,Ab)的感染及广泛耐药是临床防治的一大难题,国际上Ab疫苗的研制尚未成功,本研究旨在开发新型Ab候选疫苗预防其感染。方法本研究使用脱氧胆酸钠法制备鲍曼不动杆菌外膜蛋白(out membrane prote... 目的鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,Ab)的感染及广泛耐药是临床防治的一大难题,国际上Ab疫苗的研制尚未成功,本研究旨在开发新型Ab候选疫苗预防其感染。方法本研究使用脱氧胆酸钠法制备鲍曼不动杆菌外膜蛋白(out membrane protein,OMP)疫苗,命名为Ab dOMP疫苗,并通过透射电镜(TEM)、十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)对其进行表征,构建Ab感染致死模型评价疫苗的保护效果,并作免疫应答机制分析。结果Ab dOMP疫苗滴鼻免疫的保护率为71.43%(P<0.05),显著高于肌注组(保护率为28.57%)。疫苗免疫可诱导显著的血清特异性IgG应答,且与肌注免疫相比,滴鼻免疫还可以诱导高水平的特异性sIgA。Ab dOMP疫苗可以显著刺激BMDCs表面成熟标志CD40、CD80和CD86表达上调,以及促进细胞因子TNF-α、IL-12p70、IL-10、IL-6和IL-1β的分泌。结论Ab dOMP疫苗对鲍曼不动杆菌感染具有良好的保护作用,且滴鼻免疫的保护效果优于肌注免疫。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 外膜蛋白疫苗 免疫评价
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