Bcl-2反义寡核苷酸增强阿糖胞苷诱导原代白血病细胞凋亡的研究 被引量：10

1

作者 雷小勇 张洹 何冬梅 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第12期1301-1304,共4页

背景与目的:有研究证实,针对bcl-2mRNA翻译起始区和蛋白编码区的2个有效反义作用靶点的反义寡核苷酸能增强HL-60和K562细胞对阿糖胞苷(Ara-C)、柔红霉素、足叶乙甙的敏感性。本研究观察这两个新靶点的反义寡核苷酸对Ara-C诱导原代培养... 背景与目的:有研究证实,针对bcl-2mRNA翻译起始区和蛋白编码区的2个有效反义作用靶点的反义寡核苷酸能增强HL-60和K562细胞对阿糖胞苷(Ara-C)、柔红霉素、足叶乙甙的敏感性。本研究观察这两个新靶点的反义寡核苷酸对Ara-C诱导原代培养的急性白血病(AL)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)细胞凋亡的影响。方法:用细胞记数法观察细胞的生存情况;免疫荧光标记法通过流式细胞仪检测细胞Bcl-2蛋白水平;用姬姆萨染色法观察并用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:靶向bcl-2mRNA翻译起始区与靶向蛋白编码区的两个反义寡核苷酸分别与Ara-C联合作用AL、CLL细胞48h,细胞的活性受到明显的抑制,分别同无关寡核苷酸(NS-ODN)联合Ara-C组、单用Ara-C组进行比较,差异有显著性(P<0.05)。这两个不同靶点的反义寡核苷酸分别与Ara-C联用均能明显下调AL、CLL细胞Bcl-2蛋白的表达,并且联合作用AL、CLL细胞48h的凋亡细胞百分率分别与NS-ODN联合Ara-C组、单用Ara-C组进行比较,差异有显著性(P<0.05)。与靶向bcl-2mRNA翻译起始区的反义寡核苷酸比较,靶向蛋白编码区的反义寡核苷酸提高AL细胞对Ara-C的敏感性作用要强些(P<0.05)。结论:针对bcl-2mRNA翻译起始区和蛋白编码区两个靶点的反义寡核苷酸能增强Ara-C诱导AL、CLL细胞的凋亡。 展开更多

关键词 Bcl-2 反义寡核苷酸 阿糖胞苷 白血病细胞 凋亡 免疫荧光标记法 姬姆萨染色法

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自水解预处理对杨木聚木糖分布的影响 被引量：5

2

作者 耿星月 刘苇 +1 位作者 侯庆喜 陈威 《中国造纸》 CAS 北大核心 2016年第7期1-6,共6页

采用免疫荧光标记法结合共聚焦显微镜(CLSM)研究了自水解强度对杨木聚木糖分布的影响。结果表明,聚木糖荧光信号较均匀地分布于杨木纤维细胞壁中,随强度因子的增大细胞壁中心部位荧光信号下降逐渐增多,细胞壁边缘荧光信号下降较少,有些... 采用免疫荧光标记法结合共聚焦显微镜(CLSM)研究了自水解强度对杨木聚木糖分布的影响。结果表明,聚木糖荧光信号较均匀地分布于杨木纤维细胞壁中,随强度因子的增大细胞壁中心部位荧光信号下降逐渐增多,细胞壁边缘荧光信号下降较少,有些部位甚至会稍许增加。采用高效液相色谱(HPLC)检测法测得强度因子增强到3.72时,聚木糖含量从原料的14.64%下降到7.33%;对聚木糖荧光图谱进行区域强度统计,可得出与HPLC检测法结果相同的变化趋势。 展开更多

关键词 自水解预处理 杨木聚木糖 免疫荧光标记法 共聚焦显微镜

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三磷酸肌醇受体在大鼠血管平滑肌细胞的表达

3

作者 董莉 刘乃丰 何家声 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2001年第4期230-232,共3页

目的 :研究三磷酸肌醇受体 (IP3R)在大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC)的表达。方法 :用异硫氰酸胍酸酚一步法提取大鼠VSMC总核糖核酸 (RNA)。用AMV逆转录酶反转录 ,以IP3R各亚型的引物进行反转录PCR(RT PCR) ,并对扩增产物进行克隆及测序。用... 目的 :研究三磷酸肌醇受体 (IP3R)在大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC)的表达。方法 :用异硫氰酸胍酸酚一步法提取大鼠VSMC总核糖核酸 (RNA)。用AMV逆转录酶反转录 ,以IP3R各亚型的引物进行反转录PCR(RT PCR) ,并对扩增产物进行克隆及测序。用间接免疫荧光标记技术检测I型IP3R在VSMC的分布。结果 :3个亚型IP3RmRNA在VSMC中均有表达 ,扩增片断分别为 40 5、183和 16 9bp。VSMC中表达缺失型I型IP3R。免疫荧光染色显示 ,Ⅰ型IP3R在细胞质内围绕核膜周边分布。结论 :大鼠血管平滑肌细胞内表达 3种亚型的IP3R 。 展开更多

关键词 血管平滑肌细胞 三磷酸肌醇受体 逆转录-多聚酶链反应 免疫荧光标记法

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脐血造血细胞中AC_(133)抗原表达及其功能特征研究 被引量：1

4

作者 马艳萍 邹萍 +1 位作者 肖娟 黄士昂 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期798-800,共3页

目的　探讨AC133抗原在正常人造血细胞中表达的意义。方法　采用双色直接免疫荧光标记法 ,使用流式细胞仪测定脐血中造血细胞的免疫表型。通过祖细胞集落形成单位 (CFC)和长期培养启动细胞 (LTC IC)的测定对脐血中AC+ 133、CD+ 34 和AC-... 目的　探讨AC133抗原在正常人造血细胞中表达的意义。方法　采用双色直接免疫荧光标记法 ,使用流式细胞仪测定脐血中造血细胞的免疫表型。通过祖细胞集落形成单位 (CFC)和长期培养启动细胞 (LTC IC)的测定对脐血中AC+ 133、CD+ 34 和AC-133CD+ 34 细胞的造血潜能进行了研究。结果　脐血单个核细胞 (MNCs)中AC+ 133细胞比例为 0 67% ,AC+ 133细胞中 93 4%表达CD34 抗原 ,94 2 %为PKH2 6 阳性。虽然三群细胞产生的CFC总数差异无显著性 ,但AC+ 133细胞中 5 0 %以上为粒 单集落形成单位 ,CD+ 34 、AC-133CD+ 34 细胞中 60 %和 80 %以上为红系集落形成单位。AC+ 133细胞产生的LTC IC显著高于CD+ 34 和AC-133CD+ 34 细胞。体外培养 7d ,AC+ 133细胞组细胞总数和CFC分别扩增 2 8 2和 7 1倍 ,6 8%细胞仍保持PKH2 6阳性。结论　脐血中早期造血干 /祖细胞富集在AC+ 133细胞群中 ,AC+ 133细胞在体外具有较强的增殖能力 ,既能产生大量的早期定向祖细胞 ,又能保持一定数量的早期干 /祖细胞 ,AC133抗原可作为临床分选造血干 展开更多

关键词 脐血 造血干细胞 免疫表型分型 AC133抗原 双色直接免疫荧光标记法

原文传递

早期效应细胞因子对脐血AC133^+细胞表面趋化因子受体和粘附分子的调节作用 被引量：2

5

作者 马艳萍 邹萍 +1 位作者 肖娟 黄士昂 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期196-198,共3页

目的　探讨不同细胞因子组合对脐血AC133+ 细胞表面趋化因子受体 (CXCR4 )和粘附分子VLA4 (CD4 9d)表达的影响。方法　采用双色直接免疫荧光标记法 ,使用流式细胞仪测定新鲜分离的、不同培养条件下体外培养 7d的脐血AC133+ 细胞表面CXCR... 目的　探讨不同细胞因子组合对脐血AC133+ 细胞表面趋化因子受体 (CXCR4 )和粘附分子VLA4 (CD4 9d)表达的影响。方法　采用双色直接免疫荧光标记法 ,使用流式细胞仪测定新鲜分离的、不同培养条件下体外培养 7d的脐血AC133+ 细胞表面CXCR4和VLA4 (CD4 9d)的表达情况。结果　 2 6例新鲜脐血AC133+ 细胞中CXCR4的表达率为 (46 .3± 11.5 ) % ;VLA4的表达率为(5 1.2± 17.3) %。在无血清、有细胞因子存在的条件下 ,短期液体扩增培养后 ,脐血AC133+ 细胞中CXCR4和VLA4的表达率发生变化 ,其中在早期效应细胞因子SCF、FL和TPO组合下 ,CXCR4和VLA4表达率为 (6 8.9± 15 .8) %和 (73.6± 19.8) % ,与新鲜脐血比较 ,差异非常显著 ,P <0 .0 1。结论　在体外短期扩增培养过程中 ,早期效应细胞因子能显著上调脐血AC133+ 细胞CXCR4和VLA4的表达 ;用SCF、FL和TPO组合扩增脐血 ,不仅能获得足够数量的造血干 /祖细胞 ,还能增加造血干 /祖细胞的迁移和归巢能力。 展开更多

关键词 脐血 造血干细胞 趋化因子受体 粘附分子 双色直接免疫荧光标记法

原文传递

非小细胞肺癌凋亡及相关基因bcl-2和bax的表达 被引量：1

6

作者 秦建文 陈光瑾 王新允 《天津医药》 CAS 北大核心 2005年第5期275-277,共3页

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)细胞凋亡与相关基因bcl-2、bax表达产物的关系及其临床意义。方法:应用流式细胞术和间接免疫荧光标记法进行检测。结果:凋亡率,Bcl-2、Bax蛋白标记率在NSCLC组与对照组中的差别有统计学意义(P<0.05)。NS... 目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)细胞凋亡与相关基因bcl-2、bax表达产物的关系及其临床意义。方法:应用流式细胞术和间接免疫荧光标记法进行检测。结果:凋亡率,Bcl-2、Bax蛋白标记率在NSCLC组与对照组中的差别有统计学意义(P<0.05)。NSCLCI期凋亡率明显高于II、III期组(P<0.01)。NSCLCI期组Bcl-2蛋白标记率明显低于II、III期组(P<0.01)。NSCLC中Bcl-2蛋白标记率与凋亡率呈负相关(r=-0.667,P<0.01)。Bax标记率与凋亡率无直线相关性(r=0.230,P>0.05)。Bcl-2/Bax>1组凋亡率明显低于Bcl-2/Bax≤1组(P<0.05)。结论:随着NSCLC临床分期的进展凋亡率下降,Bcl-2通过抑制凋亡影响NSCLC的进展。NSCLC细胞内存在一种对死亡讯号的应答模式:bcl-2/bax。 展开更多

关键词 基因BCL-2 非小细胞肺癌(NSCLC) Bcl-2蛋白 间接免疫荧光标记法 BCL-2/BAX BCL-2/BAX 凋亡率 流式细胞术 Bax蛋白 NSCLC 标记率 细胞凋亡 临床意义 表达产物 临床分期 抑制凋亡 应答模式 统计学 对照组 负相关 相关性

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流式细胞术外周血样品的直标法 被引量：1

7

作者 杜秀敏 齐法莲 杨道理 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期559-560,共2页

关键词 流式细胞术 外周血样品 直标法 FCM免疫荧光标记法

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顺铂对人舌癌Tca8113细胞hTERT蛋白表达和端粒酶活性的影响 被引量：1

8

作者 陈鹏 雷德林 +2 位作者 刘冰 郭涛 商洪涛 《实用医学杂志》 CAS 2002年第11期1153-1154,共2页

目的 :探讨顺铂处理人舌癌Tca8113细胞前后细胞增殖活性和凋亡以及人类端粒酶逆转录酶(hTERT)蛋白表达和端粒酶活性的改变 ,进一步揭示顺铂的抗癌机制并初步探讨端粒酶作为化疗敏感性指标的可行性。方法 :以 1/2血药峰值浓度的顺铂处理... 目的 :探讨顺铂处理人舌癌Tca8113细胞前后细胞增殖活性和凋亡以及人类端粒酶逆转录酶(hTERT)蛋白表达和端粒酶活性的改变 ,进一步揭示顺铂的抗癌机制并初步探讨端粒酶作为化疗敏感性指标的可行性。方法 :以 1/2血药峰值浓度的顺铂处理人舌癌Tca8113细胞 12～ 72h ,应用MTT法检测细胞增殖活性 ,光镜观察细胞凋亡变化特征并计算调亡指数 ,用间接免疫荧光标记法通过流式细胞仪检测hTERT蛋白含量 ,同时行TRAP PCR ELISA端粒酶活性检测。结果 :Tca8113细胞在顺铂作用后 ,细胞增殖活性明显下降 ;出现明显的凋亡 ;hTERT蛋白表达下降的同时端粒酶活性也相应下降 ,而且四者都有一定的时间依赖性。结论 :顺铂可使细胞增殖活性明显下降 ,诱导凋亡产生 ,下调hTERT蛋白表达及抑制端粒酶活性 。 展开更多

关键词 顺铂 舌肿瘤 抗癌机制 间接免疫荧光标记法 端粒酶逆转录酶 蛋白表达 端粒酶活性

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Flt3和c-kit在脐血CD34^+干/祖细胞中功能性表达及意义 被引量：1

9

作者 马艳萍 邹萍 +1 位作者 肖娟 黄世昂 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第4期277-280,共4页

为了解作用于早期造血的细胞因子受体Flt3和c-kit在脐血CD34^+造血干/祖细胞中的表达及功能,从蛋白和基因水平对其进行了研究。采用常规双色直接免疫荧光标记法,使用流式细胞术测定新鲜分离的和体外不同培养时间的脐血CD34^+造血干/祖... 为了解作用于早期造血的细胞因子受体Flt3和c-kit在脐血CD34^+造血干/祖细胞中的表达及功能,从蛋白和基因水平对其进行了研究。采用常规双色直接免疫荧光标记法,使用流式细胞术测定新鲜分离的和体外不同培养时间的脐血CD34^+造血干/祖细胞中Flt3和c-kit蛋白水平的表达,用RT-PCR法测定Flt3和c-kit的mRNA水平表达,并在体外对受体功能进行了探讨。研究结果显示,新鲜脐血CD34^+细胞中(68.8±15.4)％为Flt3^+,(50.6±12.7)％为c-kit^+,随着体外培养时间的延长,二者表达逐渐下降。结论:脐血CD34^+造血干/祖细胞在体外液体培养条件下Flt3和c-kit阳性表达可维持2-3周,其配体FL和SCF在培养的第1周内对细胞扩增效果最显著。 展开更多

关键词 脐血 CD34^+细胞 造血干/祖细胞 FLT3 C-KIT 细胞分子 受体-配体网络系统 直接免疫荧光标记法 流式细胞术

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三色流式细胞术在检测人外周血CD4^+CD25^+CD62L^+调节性T细胞的应用

10

作者 王珊 廖杰 +1 位作者 于力方 李宁 《标记免疫分析与临床》 CAS 2007年第1期37-38,共2页

关键词 三色流式细胞术 调节性T细胞 间接免疫荧光标记法 人外周血 淋巴细胞亚群 检测 分型技术 免疫状态

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天麻素通过蛋白激酶B/p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路抑制H9c2心肌细胞凋亡 被引量：12

11

作者 张玲 杨萍 +4 位作者 姜永良 普俞维 谢立秋 孙林 陆地 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期40-48,共9页

目的采用血清剥夺/复灌的大鼠H9c2心肌细胞模拟心肌缺血/再灌注损伤(I/R),从细胞层面探讨天麻素(gastrodin)抗H9c2心肌细胞凋亡的作用及其机制。方法体外培养H9c2心肌细胞随机分为对照组、血清剥夺(0.5~6 h)处理组、血清剥夺/复灌(2/4 h... 目的采用血清剥夺/复灌的大鼠H9c2心肌细胞模拟心肌缺血/再灌注损伤(I/R),从细胞层面探讨天麻素(gastrodin)抗H9c2心肌细胞凋亡的作用及其机制。方法体外培养H9c2心肌细胞随机分为对照组、血清剥夺(0.5~6 h)处理组、血清剥夺/复灌(2/4 h)处理组、天麻素(10、20和40μmol/L)处理组、天麻素(20μmol/L)+渥曼青霉素(wortmannin)(1μmol/L)处理组、wortmannin (1μmol/L)处理组。采用免疫印迹法检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt以及凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3、Bcl-2和Bax的表达变化;采用流式细胞术检测细胞凋亡;通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测Caspase-3、Bcl-2和Bax的mRNA表达变化;采用免疫荧光双标记法检测细胞内p-Akt蛋白水平表达的变化。结果血清剥夺(0.5~6 h)和血清剥夺/复灌(2/4 h)处理诱导细胞凋亡水平增加;加入不同浓度天麻素处理,与血清剥夺(0.5~6 h)和血清剥夺/复灌(2/4 h)处理组比较,凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3表达降低,Bcl-2/Bax蛋白表达的比值上调(P<0.05),基因转录水平检测的Caspase-3和Bax表达量降低,Bcl-2表达量上调((P<0.05),流式细胞术凋亡检测结果也同样显示,天麻素能抑制血清剥夺/复灌(2/4 h)诱导的细胞凋亡(P<0.05);同时,血清剥夺(0.5~6 h)和血清剥夺/复灌(2/4 h)处理能抑制Akt/p38MAPK信号通路;加入不同浓度的天麻素(10、20和40μmol/L)处理后,p-Akt的表达水平增多,p-p38MAPK蛋白表达减少(P <0.05)。加入Akt的特异性抑制剂wortmannin(1μmol/L)处理后,天麻素对上述因子的调控作用被反转(P<0.05)。结论在H9c2心肌细胞中,天麻素通过激活Akt/p38MAPK信号通路,抑制血清剥夺/复灌诱导的细胞凋亡,从而发挥抗心肌I/R损伤的保护作用。 展开更多

关键词 天麻素 心肌缺血/再灌注损伤 P38丝裂原活化蛋白激酶 免疫印迹法 免疫荧光双标记法 流式细胞术 大鼠

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人参皂苷Rg1通过自噬抑制Raw 264.7巨噬细胞凋亡 被引量：10

12

作者 凌露 杨萍 +4 位作者 盖盛坤 刘燃 陈媛丽 陆地 孙林 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期599-606,共8页

目的探讨人参皂苷Rg1在血清剥夺诱导的Raw 264.7巨噬细胞自噬和凋亡中的作用及其机制。方法体外培养小鼠Raw 264.7巨噬细胞随机分为空白对照组、不同时间(12、24、36、48和60h)血清剥夺处理组、人参皂苷Rg1(50μmol/L)+不同时间(24、36... 目的探讨人参皂苷Rg1在血清剥夺诱导的Raw 264.7巨噬细胞自噬和凋亡中的作用及其机制。方法体外培养小鼠Raw 264.7巨噬细胞随机分为空白对照组、不同时间(12、24、36、48和60h)血清剥夺处理组、人参皂苷Rg1(50μmol/L)+不同时间(24、36和48h)血清剥夺处理组;依据最佳血清剥夺时间进一步分为空白对照组、血清剥夺(36h)处理组、人参皂苷Rg1(50μmol/L)+血清剥夺(36h)处理组、人参皂苷Rg1(50μmol/L)+血清剥夺(36h)+3-甲基腺嘌呤(3-MA)(5mmol/L,1h)处理组。采用Western blotting检测LC3、Atg 5、Beclin 1、cleaved Caspase-3、Bcl-2及Bax蛋白水平的表达变化;采用免疫荧光双标记检测细胞内LC3蛋白水平表达的变化;采用Hoechst 33342/PI荧光双染检测细胞凋亡的变化。结果不同时间(12、24、36、48和60h)血清剥夺诱导Raw264.7巨噬细胞凋亡;与血清剥夺处理组相比,人参皂苷Rg1处理组LC3、Atg 5及Beclin 1蛋白表达水平显著上调;加入3-MA抑制剂后,凋亡细胞较人参皂苷Rg1处理组明显增多,且Bcl-2蛋白表达水平明显下调的同时,cleaved Caspase-3和Bax蛋白表达水平则显著上调。结论人参皂苷Rg1通过促进血清剥夺诱导的Raw 264.7巨噬细胞自噬,发挥抗凋亡的保护作用。 展开更多

关键词 人参皂苷RG1 自噬 RAW 264.7巨噬细胞 免疫印迹法 免疫荧光双标记法 Hochest 33342/PI荧光双染 小鼠

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结缔组织生长因子在增生性玻璃体视网膜病变增生膜中的表达 被引量：7

13

作者 郭长梅 惠延年 +4 位作者 王雨生 阎峰 韩泉洪 崔志利 马吉献 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2005年第2期128-131,共4页

目的观察结缔组织生长因子(CTGF)在增生性玻璃体视网膜病变(PVR)增生膜中的表达,并鉴别增生膜中阳性细胞来源。方法采用SABC免疫组织化学方法对玻璃体切割手术获得的43例PVR增生膜进行CTGF蛋白的检测,并采用免疫荧光双标记技术在阳性表... 目的观察结缔组织生长因子(CTGF)在增生性玻璃体视网膜病变(PVR)增生膜中的表达,并鉴别增生膜中阳性细胞来源。方法采用SABC免疫组织化学方法对玻璃体切割手术获得的43例PVR增生膜进行CTGF蛋白的检测,并采用免疫荧光双标记技术在阳性表达的增生膜和正常人眼球标本中判定CTGF阳性细胞来源。结果免疫组织化学显示PVR增生膜中阳性细胞形态多是一类胞体为长圆形或多角形,胞浆丰富的上皮样细胞。17例C2-C3级膜中12例阳性,26例D1-D3级膜中19例阳性,其染色反应为阴性"-"、弱阳性"+"、阳性"2+"和强阳性"3+"的分别有5、3、6、3例和7、5、8、6例,总阳性率分别为70.6%和73.1%。统计学分析CTGF阳性表达与膜分级问无相关性(P>0.1)。免疫荧光双标记法显示PVR增生膜中有RPE、巨噬细胞、神经胶质细胞,CTGF阳性细胞来源于RPE细胞;正常眼球RPE层不表达CTGF。结论正常眼球RPE层不表达CTGF,PVR形成过程中RPE细胞在TGF-β1等生长因子的刺激下,CTGF表达上调,表明CTGF参与了PVR增生膜的形成和发展。 展开更多

关键词 增生性玻璃体视网膜病变 结缔组织生长因子 增生膜 SABC免疫组织化学方法 免疫荧光双标记法 CTGF 玻璃体切割手术 RPE细胞 细胞来源 神经胶质细胞 TGF-β1 阳性表达 PVR 双标记技术 上皮样细胞 统计学分析 眼球标本 细胞形态

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免疫荧光双标记法在子宫平滑肌肿瘤中的应用 被引量：4

14

作者 王晶 耿海燕 苗雨春 《实用医技杂志》 2014年第7期776-777,共2页

随着激光共聚焦显微镜及其技术的推广，石蜡组织免疫荧光标记的方法也日益广泛运用，尤其是荧光双标或多标的方法，因其具有敏感性高、信号分明的特点，成为广大科研工作者喜欢使用的技术方法。荧光双标实验过程较为复杂，它的成功与否... 随着激光共聚焦显微镜及其技术的推广，石蜡组织免疫荧光标记的方法也日益广泛运用，尤其是荧光双标或多标的方法，因其具有敏感性高、信号分明的特点，成为广大科研工作者喜欢使用的技术方法。荧光双标实验过程较为复杂，它的成功与否会受到很多因素的影响，如果某些环节处理不恰当，会直接导致实验失败。本研究以子宫平滑肌肿瘤为研究对象，分为子宫平滑肌肉瘤组（LMS）、普通型子宫平滑肌瘤组（OUL）、正常子宫平滑肌组（NUSM）3组，选择Survivin和Ki-67两种与细胞增殖和凋亡相关的蛋白，采用免疫荧光双标记法检测各组中2种蛋白的表达情况，取得了较为满意的效果，现以异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate，FITC）与四甲基异硫氰酸罗丹明（tetramethyl rhodamine isothio-cyanate，TRITC）的荧光双标为例，介绍免疫双荧光切片制备及运用激光共聚焦显微镜采集信号数据的方法。 展开更多

关键词 免疫荧光双标记法 子宫平滑肌肿瘤 激光共聚焦显微镜 异硫氰酸荧光素 RHODAMINE SURVIVIN 子宫平滑肌肉瘤 应用

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Lewisy抗原及胰岛素样生长因子受体1在卵巢浆液性肿瘤中的表达及临床意义 被引量：1

15

作者 刘大我 刘娟娟 +6 位作者 林蓓 胡珍华 高健 侯锐 刘川 郝莹莹 张淑兰 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期336-339,350,共5页

目的探讨Lewis y抗原及胰岛素样生长因子受体1(IGF-1R)在卵巢浆液性肿瘤中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测卵巢浆液囊腺癌(恶性组)、交界性卵巢浆液性囊腺瘤(交界性组)、良性卵巢浆液性囊腺瘤(良性组)和正常卵巢组织(正常组)中L... 目的探讨Lewis y抗原及胰岛素样生长因子受体1(IGF-1R)在卵巢浆液性肿瘤中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测卵巢浆液囊腺癌(恶性组)、交界性卵巢浆液性囊腺瘤(交界性组)、良性卵巢浆液性囊腺瘤(良性组)和正常卵巢组织(正常组)中Lewis y抗原与IGF-1R的表达。用免疫荧光双标记法检测2者在卵巢癌组织中表达的相关性。结果恶性组Lewis y抗原和IGF-1R的阳性率明显高于交界性组、良性组及正常组(P<0.05);低分化组IGF-1R的表达水平与中、高分化组相比,差异有统计学意义(P<0.05),而低、中、高分化3组间Lewis y抗原表达差异无统计学意义(P<0.05)。Lewis y和IGF-1R在恶性组中的表达水平增高,具有正相关性(P<0.05),且2者存在共定位关系。结论 Lewis y抗原及IGF-1R参与了卵巢浆液性肿瘤由良性向恶性的转化与发展,与患者的预后密切相关。 展开更多

关键词 LewisY抗原 胰岛素样生长因子受体1 卵巢浆液性肿瘤 临床意义 卵巢浆液性囊腺瘤 IGF-1R 免疫荧光双标记法 免疫组化SP法

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LewisY抗原及黏蛋白1在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其相关性

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作者 侯锐 高健 +4 位作者 胡珍华 刘大我 郝莹莹 林蓓 张淑兰 《中国综合临床》 2013年第3期250-255,共6页

目的探讨LewisY抗原及黏蛋白1（MUCl）在卵巢上皮性肿瘤中的表达及意义，并探讨LewisY抗原与MUCl表达的相关性。方法应用免疫组化sP法检测恶性卵巢上皮性肿瘤60例（其中高分化2l例、中分化21例、低分化18例），交界性卵巢上皮性肿瘤30... 目的探讨LewisY抗原及黏蛋白1（MUCl）在卵巢上皮性肿瘤中的表达及意义，并探讨LewisY抗原与MUCl表达的相关性。方法应用免疫组化sP法检测恶性卵巢上皮性肿瘤60例（其中高分化2l例、中分化21例、低分化18例），交界性卵巢上皮性肿瘤30例，良性卵巢上皮性肿瘤30例及正常卵巢组织20例中Lewisy抗原与MUCl的表达情况，并分析两者之间的关系及其与卵巢癌生物学特性的关系。同时利用免疫荧光双标记法检测Lewisy抗原与MUCl在卵巢癌组织中的结构关系。结果在恶性卵巢上皮性肿瘤中，LewisY抗原的阳性表达率为88．33％，明显高于交界性组（60．00％，X2=9．6405）、良性组（33．33％，X2=28．8095）及正常卵巢组（0，X2=52．3457）（P均〈0．01）；LewisY抗原的阳性表达率与卵巢癌临床病理参数无关，但其表达强度随恶性程度的增加而增加（P〈0．05）。MUCl在卵巢恶性组的阳性表达率为86．67％，明显高于交界性组（53．33％，X2=12．0321）、良性组（30．00％，X2=29．4064）以及正常卵巢组（25．00％，X2=27．8464）（P均〈0．01），其表达强度随临床分期的增加而增加（P〈0．01），与淋巴结转移、组织学分级无关（P均〉0．05）；LewisY抗原和MUCl在卵巢癌组织中同时高表达，其表达具有正相关（r=0．707，P〈0．01），且二者存在共定位关系。结论LewisY抗原及MUCl参与了卵巢癌的发生、发展，可作为判断卵巢癌生物学行为的参考指标，为卵巢癌的生物学治疗提供理论依据。 展开更多

关键词 卵巢上皮性肿瘤 黏蛋白1 LEWIS Y抗原 免疫组织化学法 免疫荧光双标记法

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受体megalin和cubilin介导白蛋白吸收的免疫组织化学研究

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作者 翟效月 刘霞 赵晶 《锦州医学院学报》 2002年第2期1-3,共3页

目的及方法　采用免疫荧光双标记技术对培养的opossum肾 (OK)细胞膜受体megalin和cubilin的表达及其与荧光标记的白蛋白摄取的关系进行研究。结果　不同荧光标记的受体megalin及cubilin同时表达在相同的OK细胞上 ,分布主要局限在细胞膜 ... 目的及方法　采用免疫荧光双标记技术对培养的opossum肾 (OK)细胞膜受体megalin和cubilin的表达及其与荧光标记的白蛋白摄取的关系进行研究。结果　不同荧光标记的受体megalin及cubilin同时表达在相同的OK细胞上 ,分布主要局限在细胞膜 ,而且形式相似。被摄取的荧光标记的白蛋白点状分布在OK细胞内。此外 ,有受体megalin和cubilin表达的细胞就有白蛋白的摄取 ;反之 ,既不表达受体megalin和cubilin的细胞 ,也没有白蛋白的摄取。结论　这种白蛋白的摄取与受体megalin和cubilin表达的特征提示 ,两种大分子糖蛋白受体megalin和cubilin与白蛋白的摄取有密切相关性 ,很可能在肾小管重吸收白蛋白中起到相互作用。 展开更多

关键词 免疫组织化学 MEGALIN CUBILIN OK细胞 白蛋白 免疫荧光双标记法 肾疾病 受体 opossum肾

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细胞免疫在迁延性慢性腹泻患儿检测的临床意义 被引量：4

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作者 邓寅业 何爽 《广西医学》 CAS 2007年第4期502-502,共1页

目的了解迁延性慢性腹泻患儿细胞免疫功能变化。方法用免疫荧光标记法测定35例迁延性慢性腹泻患儿和30例同期儿童保健门诊体检婴幼儿的T细胞亚群。结果35例迁延性慢性腹泻患儿CD3、CD4水平、CD4/CD8比值均明显低于对照组(P<0.01),CD... 目的了解迁延性慢性腹泻患儿细胞免疫功能变化。方法用免疫荧光标记法测定35例迁延性慢性腹泻患儿和30例同期儿童保健门诊体检婴幼儿的T细胞亚群。结果35例迁延性慢性腹泻患儿CD3、CD4水平、CD4/CD8比值均明显低于对照组(P<0.01),CD8高于对照组(P<0.01)。结论迁延性慢性腹泻患儿细胞免疫功能下降,细胞免疫功能紊乱可以导致腹泻迁延不愈。 展开更多

关键词 迁延性慢性腹泻 细胞免疫 婴幼儿 免疫荧光标记法

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多发性骨髓瘤细胞的免疫表型特点 被引量：22

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作者 李金兰 刘艳荣 +2 位作者 常艳 付家瑜 陈珊珊 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第3期226-228,共3页

为了解多发性骨髓瘤 (multiplemyeloma ,MM)细胞的免疫表型特点 ,采用三色免疫荧光直接标记法和流式细胞术对 2 0例MM患者的骨髓标本进行了免疫分型检测。研究结果发现 ,每例病人骨髓细胞中均可见一群异常的细胞 ;CD4 5 /SSC值较有核红... 为了解多发性骨髓瘤 (multiplemyeloma ,MM)细胞的免疫表型特点 ,采用三色免疫荧光直接标记法和流式细胞术对 2 0例MM患者的骨髓标本进行了免疫分型检测。研究结果发现 ,每例病人骨髓细胞中均可见一群异常的细胞 ;CD4 5 /SSC值较有核红细胞大 ;CD4 5阴性或弱阳性 ;CD38强阳性 ;CD19均为阴性 ;多数标本CD5 6阳性 ;少数标本胞浆κ(cκ)或胞浆λ(cλ)阳性及CD2 0阳性。检测的所有标本除三分之一为CD5 6 -外 ,均无正常浆细胞的表型 (CD19阳性 ,CD5 6阴性 )。结论 :流式细胞术是确定MM细胞的有用的方法 。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 免疫表型 流式细胞术 MM 三色免疫荧光直接标记法 流式细胞术

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