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腺病毒介导脑源性神经营养因子基因转染在大鼠视网膜中的表达 被引量：4
1
作者 侯旭 胡丹 惠延年 《第四军医大学学报》 北大核心 2003年第21期1930-1932,共3页
目的 :研究腺病毒介导脑源性神经营养因子 (brain derivedneurotrophicfactor,BDNF)基因转染在活体大鼠视网膜的表达 .方法 :将BDNF腺病毒注入大鼠玻璃体内 ,于不同时间点免疫荧光染色检测表达 ;酶联免疫吸附实验 (enzymelinkedimmunoso... 目的 :研究腺病毒介导脑源性神经营养因子 (brain derivedneurotrophicfactor,BDNF)基因转染在活体大鼠视网膜的表达 .方法 :将BDNF腺病毒注入大鼠玻璃体内 ,于不同时间点免疫荧光染色检测表达 ;酶联免疫吸附实验 (enzymelinkedimmunosorbentassay ,ELISA)检测转染因素、损伤因素对视网膜表达BDNF的影响 .结果 :免疫荧光染色显示 3d节细胞即出现绿色荧光 ,可持续 4wk ,对照组荧光着色细胞数、荧光强度均低于各时间点转染组 ;ELISA显示经BDNF转染各组在各时间点表达均显著高于非转染组 (P <0 .0 1 ) ,损伤非转染组在 3d和 1wk时高于正常组 (P <0 .0 1 ) .结论 :腺病毒介导BDNF基因转染可在大鼠视网膜有效表达 。 展开更多
关键词 视神经 脑源性神经营养因子 基因转染 免疫荧光染色检测 基因表达 腺病毒
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针对S基因的siRNA抑制HepG22.2.15细胞中HBV基因的表达 被引量：3
2
作者 刘家云 马龙洋 +7 位作者 李庆霞 黄红艳 温伟红 贾林涛 薛采芳 李英辉 王成济 杨安钢 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期701-706,共6页
目的构建针对乙型肝炎病毒(HBV)S基因的siRNA(shortinterferingRNA)表达载体pSUPER-S1和pSUPER-S2,观察其对HepG22.2.15细胞中的HBV基因表达的影响。方法设计并合成针对HBVS区基因的siRNA寡核苷酸,经退火形成双链后克隆入pSUPER载体,构... 目的构建针对乙型肝炎病毒(HBV)S基因的siRNA(shortinterferingRNA)表达载体pSUPER-S1和pSUPER-S2,观察其对HepG22.2.15细胞中的HBV基因表达的影响。方法设计并合成针对HBVS区基因的siRNA寡核苷酸,经退火形成双链后克隆入pSUPER载体,构建成功的siRNA表达载体与pTK-Hyg质粒共转染稳定表达HBV的HepG22.2.15细胞,经200μg/ml潮霉素抗性筛选,4周后获得稳定细胞克隆,对所得细胞培养上清中的HBsAg和HBeAg进行定量检测,免疫荧光染色检测细胞内抗原的表达,同时用RT-PCR检测靶基因mRNA的抑制效果。结果成功构建了针对HBVS基因的siRNA表达载体pSUPER-S1和pSUPER-S2,两种siRNA均能明显抑制HepG22.2.15细胞的HBsAg和HBeAg分泌,抑制率分别为83%和78%,免疫荧光染色显示siRNA能抑制细胞内抗原的合成,RT-PCR结果证实HBV的mRNA表达降低,而无关序列的siRNA和对照则无此作用。结论载体产生的针对HBVS基因的siRNA能稳定、高效、特异地抑制HBV基因的表达。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 RNA干扰 转染 2.2.15细胞 siRNA HBV基因 HepG2 S基因 乙型肝炎病毒(HBV) 免疫荧光染色检测 RT-PCR检测 基因mRNA
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3
《口腔生物医学》 2014年第4期216-222,共7页
1．量子点荧光探针检测人舌鳞状细胞癌荷瘤裸鼠模型早期下颌下淋巴结转移的研究 传代培养人舌鳞状细胞癌 Tca8113细胞，接种于18只裸鼠舌体内（不过中线），建立人舌癌荷瘤裸鼠下颌下淋巴结转移模型。接种6周后，处死裸鼠，解剖下颌... 1．量子点荧光探针检测人舌鳞状细胞癌荷瘤裸鼠模型早期下颌下淋巴结转移的研究 传代培养人舌鳞状细胞癌 Tca8113细胞，接种于18只裸鼠舌体内（不过中线），建立人舌癌荷瘤裸鼠下颌下淋巴结转移模型。接种6周后，处死裸鼠，解剖下颌下淋巴结，将同一淋巴结分为两份。一份作石蜡包埋半连续切片，行 HE染色和 IHC 检测；另一份即刻液氮冷冻，制作冰冻切片行QDs605-CK（AE1／AE3）荧光探针检测。分别计算3种方法检测出的淋巴结转移率和微转移率。结果：量子点标记的免疫荧光染色检测出裸鼠下颌下淋巴结转移率为66．7％，其中微转移率为38．9％；IHC 染色检测的淋巴结转移率为61．1％，其中微转移率为33．3％；HE 染色检测的淋巴结转移率为27．8％。经统计学分析，3种方法的差异有统计学意义（P ＜0．05），量子点标记的免疫荧光染色和 IHC 检测都优于 HE 染色，但是量子点标记的免疫荧光染色和 IHC 染色间的差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论：量子点标记的QDs605-CK（AE1／AE3）免疫荧光探针能准确定位于下颌下淋巴结转移的肿瘤细胞的细胞质内，发出红色荧光，其特异性强，分辨率高，背景清晰，能够用于淋巴结转移灶及微转移灶的检测。 展开更多
关键词 免疫荧光染色检测 淋巴结转移率 人舌鳞状细胞癌 荷瘤裸鼠模型 下颌下淋巴结 AE1/AE3 TCA8113细胞 统计学分析
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刺激受体增效剂7可提高先前感染脓毒症成年小鼠炎症反应的免疫控制
4
作者 崔倩(编译) 尹明(审校) 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期692-692,共1页
受体增效剂7（TLR7）的作用是通过以脓毒症小鼠为样本的实验中得到的，它是一种病毒RNA受体。研究者采用雌性C57B／6型小鼠结肠穿孔-腹膜炎（CASP）为模型，并且对先前有脓毒症感染的小鼠静脉注射R-848（1．5mg／kg）。用CAB试剂盒检测... 受体增效剂7（TLR7）的作用是通过以脓毒症小鼠为样本的实验中得到的，它是一种病毒RNA受体。研究者采用雌性C57B／6型小鼠结肠穿孔-腹膜炎（CASP）为模型，并且对先前有脓毒症感染的小鼠静脉注射R-848（1．5mg／kg）。用CAB试剂盒检测细胞因子水平，用免疫磁性分选法从脾脏细胞中分离不同种类的细胞，并由免疫荧光染色检测TLR7表达。 展开更多
关键词 成年小鼠 脓毒症 A受体 增效剂 免疫控制 炎症反应 感染 免疫荧光染色检测
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