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题名免疫荧光技术中不同固定剂对RhoA蛋白定位的影响
被引量：6
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作者
秦犹
陈永昌
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机构
江苏大学医学院
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出处
《江苏大学学报（医学版）》
CAS
2006年第5期385-388,共4页
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基金
国家自然科学基金资助项目(30340036
30470891)
江苏大学高级科技人才启动基金项目
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文摘
目的:观察免疫荧光技术中不同固定剂对SGC7901细胞中RhoA蛋白定位的影响,找出最适合观察RhoA蛋白细胞内定位的固定方法。方法:采用免疫荧光的方法观察在使用不同固定剂(2%多聚甲醛,4%甲醛,甲醇,丙酮,10%三氯醋酸)及0.3%TritonX-100穿孔的条件下,RhoA蛋白在SGC7901细胞中的定位。结果:用2%多聚甲醛固定,不用0.3%TritonX-100时,染色显示胞质内可见少量RhoA蛋白散在分布,核内则有RhoA蛋白浓聚;用0.3%TritonX-100后,质内只能见极少量阳性染色,核内蛋白染色变得清晰。甲醛固定后染色显示RhoA蛋白主要在核内分布,使用TritonX-100后染色更为清楚。甲醇和丙酮固定后染色显示RhoA蛋白主要在胞质内分布,核内基本未见阳性分布,加TritonX-100后核内染色增强,胞质染色减弱。另外,使用10%三氯醋酸固定未加TritonX-100时染色较淡,胞质胞核都可见,加TritonX-100后核内可见蛋白浓聚,胞质染色减少。结论:用免疫荧光法观察RhoA定位时,固定剂的不同以及是否加TritonX-100对观察RhoA蛋白细胞内定位具有较大的影响。
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关键词
固定剂
免疫荧光显微镜术
TRITONX-100
RHOA
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Keywords
fixative
immunofluorescence microscopy
TritonX-100
RhoA
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分类号
R735
[医药卫生—肿瘤]
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