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免疫捕获-核酸扩增-微孔杂交检测贝类中甲型肝炎病毒的方法研究
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作者 俞晓进 李显 汪华 《中国卫生检验杂志》 CAS 2005年第1期15-16,45,共3页
目的 :建立贝类中甲型肝炎病毒新的检测方法。方法 :先用IgG抗体吸附标本中的HAV ,然后将HAV中的RNA逆转录成cDNA ,用PCR方法扩增。PCR产物与标记特异基因探针孔中分子杂交 ,最后加入与标记物对应的酶配体 ,酶联免疫检测。结果 :采用的... 目的 :建立贝类中甲型肝炎病毒新的检测方法。方法 :先用IgG抗体吸附标本中的HAV ,然后将HAV中的RNA逆转录成cDNA ,用PCR方法扩增。PCR产物与标记特异基因探针孔中分子杂交 ,最后加入与标记物对应的酶配体 ,酶联免疫检测。结果 :采用的两对引物和探针均可用于检测。仅加入HAV的可测出阳性 ,其余病毒测不出。寡核苷酸探针 3 75nmol/L、7 5nmol/L、15nmol/L比较理想 ,杂交时间为 12 0min ,显色 3 0min最佳。免疫捕获 -核酸扩增 -微孔杂交方法比原方法提高 2 5倍以上。推测方法的检测限达到 8pfu/g贝组织。 结论 :免疫捕获 -核酸扩增 -微孔杂交方法灵敏度高、特异性强 ,且可以定量。 展开更多
关键词 贝类 甲型肝炎病毒 免疫捕获-核酸扩增-微孔杂交 寡核苷酸探针
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