扬州地区变态反应性疾病患者血清中体外过敏原检测与分析 被引量：17

1

作者 张玲 王茜 解松刚 《检验医学与临床》 CAS 2010年第3期197-198,200,共3页

目的分析扬州地区变态反应性疾病患者的主要过敏原种类。方法采用德国Allergy Screen体外过敏原检测系统检测324例变态反应性疾病患者血清中总IgE和过敏原特异性IgE（sIgE）水平。结果324例变态反应性疾病患者总IgE阳性率为79．32％，s... 目的分析扬州地区变态反应性疾病患者的主要过敏原种类。方法采用德国Allergy Screen体外过敏原检测系统检测324例变态反应性疾病患者血清中总IgE和过敏原特异性IgE（sIgE）水平。结果324例变态反应性疾病患者总IgE阳性率为79．32％，sIgE阳性率为45．37％。吸入性过敏原阳性率从高到低依次为：户尘螨粉尘螨20．99％，点青霉、分支孢霉、烟曲霉、交链孢霉13．27％，矮豚草、蒿律草4．32％，蟑螂4．01％，柏、榆、梧桐、柳、三角叶杨树花粉3．09％，猫狗毛皮屑0．62％；食入性过敏原从高到低依次为：牛奶14．20％，牛、羊肉13．89％，腰果、花生、黄豆2．78％，鱼虾蟹1．85％，芒果1．54％，鸡蛋白、鸡蛋黄0．31％。结论变态反应性疾病患者血清中总IgE明显升高，扬州地区吸入性过敏原以螨虫、真菌为主，食入性过敏原以牛奶、牛肉、羊肉为主。大部分患者只对1～2种过敏原过敏。 展开更多

关键词 变态反应 过敏原 特异性IGE 免疫印迹反应

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核转录因子在卵巢癌组织及细胞系的表达和意义 被引量：6

2

作者 孔祥 肖蔚 +1 位作者 陈刚 王志学 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 2004年第4期75-77,81,共4页

培养11株卵巢癌细胞系,收获细胞,对其进行胞质、胞核蛋白质提取,Western-blotting观察核转录因子(NFkB)家族蛋白及其抑制物的表达;采用免疫组化方法检测卵巢良性上皮性肿瘤、卵巢交界性上皮性肿瘤和卵巢癌中NFkB蛋白的表达。结果表明:11... 培养11株卵巢癌细胞系,收获细胞,对其进行胞质、胞核蛋白质提取,Western-blotting观察核转录因子(NFkB)家族蛋白及其抑制物的表达;采用免疫组化方法检测卵巢良性上皮性肿瘤、卵巢交界性上皮性肿瘤和卵巢癌中NFkB蛋白的表达。结果表明:111个卵巢癌细胞系P50、P65和IkB-α胞质表达阳性率分别为63.6%、45.5%、81.9%,胞核表达阳性率分别为63.6%、54.5%、18.2%。2在卵巢良性上皮性肿瘤、卵巢交界性上皮性肿瘤和卵巢癌中NFkB的阳性表达率分别为33.3%、37.5%和65.0%;3在卵巢癌组织,P65核染色阳性与分化程度、淋巴结转移、临床分期及肿瘤大小明显相关(P<0.05)。NFkB与卵巢癌细胞的发生、发展有关,NFkB可望成为判断卵巢癌预后新的标志物。 展开更多

关键词 卵巢癌细胞 NFkB家族蛋白 免疫印迹反应 免疫组化

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河川沙塘鳢卵母细胞发育过程中卵黄脂磷蛋白的变化 被引量：6

3

作者 顾建华 孟艳玲 +1 位作者 吕军开 周忠良 《水产科学》 CAS 北大核心 2007年第1期43-47,共5页

采用酶联免疫检测和免疫印迹技术研究河川沙塘鳢卵巢发育过程中的卵黄磷脂蛋白结构和含量变化情况。河川沙塘鳢卵黄磷脂蛋白的分子量为440 kD,免疫印迹结果显示其由3个亚集团组成,分子量分别为95-105 kDa、41.3 kDa和30.7 kDa。7-9月卵... 采用酶联免疫检测和免疫印迹技术研究河川沙塘鳢卵巢发育过程中的卵黄磷脂蛋白结构和含量变化情况。河川沙塘鳢卵黄磷脂蛋白的分子量为440 kD,免疫印迹结果显示其由3个亚集团组成,分子量分别为95-105 kDa、41.3 kDa和30.7 kDa。7-9月卵巢中不含卵黄脂磷蛋白,10月起开始累积,翌年3月达到最高值,4-5月仍保持在较高水平,其后显著降低,水溶性总蛋白年变化周期也表现出相似的趋势,但是在7-9月有一个的基本量。试验结果表明,河川沙塘鳢卵巢在10月已经开始发育,比形态观察结果提前10个月。雌性河川沙塘鳢在10月起开始启动水溶性蛋白质特别是卵黄磷脂蛋白的合成,并逐渐累积至翌年3月,3月起开始进入繁殖期,4-5月为产卵高峰期。 展开更多

关键词 河川沙塘鳢 卵黄蛋白 酶联免疫反应 免疫印迹反应

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糖皮质激素抑制Leptin、VEGF蛋白表达诱导骨质疏松作用机制研究 被引量：4

4

作者 方圣杰 章轶立 +5 位作者 朱嘉 宋庆慧 王旭 刘宁 李秋月 魏戌 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期320-324,367,共6页

目的通过比较糖皮质激素诱导骨质疏松模型大鼠(GIOP)在成模前后骨密度、病理组织以及瘦素(leptin)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白差异表达变化阐释糖皮质激素性骨质疏松的作用机制。方法采取大腿内... 目的通过比较糖皮质激素诱导骨质疏松模型大鼠(GIOP)在成模前后骨密度、病理组织以及瘦素(leptin)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白差异表达变化阐释糖皮质激素性骨质疏松的作用机制。方法采取大腿内侧交替肌肉注射地塞米松注射液(DEX)建立骨质疏松症大鼠实验模型,连续注射8周,造模8周后处死各组大鼠,对右侧股骨胫骨进行骨密度检测、HE染色,确定最佳造模剂量,继而通过免疫组织化学、蛋白免疫印迹的方法检测正常SHAM与DEX大鼠Leptin、VEGF蛋白的表达。结果结合骨密度和HE染色的结果,确定DEX 2.5 mg/kg为地塞米松注射液诱导继发性骨质疏松的最佳造模剂量,免疫组织化学和蛋白免疫印迹检测发现,与SHAM组相比,DEX 2.5 mg/kg组大鼠Leptin、VEGF蛋白的表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论糖皮质激素诱导的骨质疏松是通过抑制Leptin、VEGF蛋白表达,抑制血管生成进而抑制成骨发挥作用的,据此推测Leptin、VEGF可能是糖皮质激素性骨质疏松发病的潜在作用靶点。 展开更多

关键词 糖皮质激素 骨质疏松 瘦素 血管内皮生长因子 免疫印迹反应 免疫组化

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丽水地区213例过敏性疾病患者过敏原检测与分析 被引量：3

5

作者 刘素霞 张瑾 +1 位作者 朱艳 裴立红 《中国卫生检验杂志》 CAS 2011年第6期1580-1581,共2页

随着人们生活水平的提高、环境的改变,过敏性疾病发病率逐年增高,它是临床常见多发病,常见的有支气管哮喘、变态反应性鼻炎、变态反应性皮肤病,有时候还会发生过敏性休克。IgE在该病的发生及发展中具有重要作用,它存在于过敏体质个体的... 随着人们生活水平的提高、环境的改变,过敏性疾病发病率逐年增高,它是临床常见多发病,常见的有支气管哮喘、变态反应性鼻炎、变态反应性皮肤病,有时候还会发生过敏性休克。IgE在该病的发生及发展中具有重要作用,它存在于过敏体质个体的血清中,采用检测血清中sIgE和总IgE水平可以发现过敏原。引起人类过敏反应的过敏原种类繁多，我们通过德国MediwissAllergyScreen体外过敏原检测系统对过敏性疾病患者血清过敏原进行检测分析，现报道如下： 展开更多

关键词 特异性IGE 过敏性疾病 免疫印迹反应 过敏原

原文传递

拟南芥细胞中存在中间纤维的研究 被引量：2

6

作者 赵大中 陈丹英 +3 位作者 陈敏 刘春香 杨澄 翟中和 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1999年第8期795-799,共5页

利用整装电镜制样与选择性抽提技术，在拟南芥（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ （Ｌ．） Ｈｅｙｎｈ） 愈伤组织细胞质中观察到直径１０ ｎｍ 左右的纤维网络结构。免疫印迹分析表明纤维的主要成分是６ 种多肽，它们分别与动... 利用整装电镜制样与选择性抽提技术，在拟南芥（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ （Ｌ．） Ｈｅｙｎｈ） 愈伤组织细胞质中观察到直径１０ ｎｍ 左右的纤维网络结构。免疫印迹分析表明纤维的主要成分是６ 种多肽，它们分别与动物角蛋白单克隆抗体ＡＥ１ 、ＡＥ３ 有免疫交叉反应。利用间接免疫荧光技术，与ＡＥ１ 和ＡＥ３ 反应的抗原呈弥散状定位于整个细胞质中，而且１０ ｎｍ 纤维可以在体外重新组装。以上结果表明，在拟南芥细胞质中存在类角蛋白的中间纤维。以动物中间纤维基因的保守序列为引物，采用ＲＴ＿ＰＣＲ技术，进一步从这一模式植物中克隆到一个ｃＤＮＡ片段。 展开更多

关键词 拟南芥 中间纤维 选择性抽提 免疫印迹反应

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华支睾吸虫未脱脂和脱脂成虫抗原的免疫印迹分析 被引量：1

7

作者 华万全 曹国群 +3 位作者 许永良 余传信 娄培安 张志才 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2006年第5期369-371,共3页

目的寻找华支睾吸虫成虫抗原中具有特异性诊断价值的抗原组分。方法应用SDS-PAGE和Westernblot分析华支睾吸虫成虫未脱脂、脱脂的可溶性抗原蛋白组分的血清学反应特征。结果未脱脂成虫抗原有14条蛋白带可与华支睾吸虫病病人血清反应,其... 目的寻找华支睾吸虫成虫抗原中具有特异性诊断价值的抗原组分。方法应用SDS-PAGE和Westernblot分析华支睾吸虫成虫未脱脂、脱脂的可溶性抗原蛋白组分的血清学反应特征。结果未脱脂成虫抗原有14条蛋白带可与华支睾吸虫病病人血清反应,其中分子质量单位为180、170、100、67、41、37、35、322、6 ku是主带,180、170、37、35 ku条带还可与日本血吸虫病、卫氏并殖吸虫病病人血清发生交叉反应。脱脂成虫抗原有10条蛋白带可与华支睾吸虫病病人血清反应,其中分子质量单位为180、100、67、37、35、242、0 ku是主带,此外,180 ku带可与日本血吸虫病和卫氏并殖吸虫病病人血清发生交叉反应,78 ku带可以与血吸虫病病人血清发生交叉反应。结论华支睾吸虫成虫抗原经脱脂处理后可减少与日本血吸虫病和卫氏并殖吸虫病病人血清交叉反应的蛋白组分数量。华支睾吸虫未脱脂和脱脂成虫抗原中主要的特异性抗原组分分别是100、67、41、32、26 ku和100、67、37、35、242、0 ku,这些组分抗原可用于华支睾吸虫病的免疫诊断。 展开更多

关键词 华支睾吸虫病 成虫抗原 脱脂 免疫印迹反应

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超表达状态下的TMP21对介导阿尔茨海默氏病γ分泌酶复合物活性影响的研究

8

作者 董贵成 王迎春 +4 位作者 阿拉坦高勒 王静 门中华 赵俊利 博.格日勒图 《内蒙古师范大学学报（自然科学汉文版）》 CAS 2009年第2期203-208,共6页

研究转运膜蛋白21(TMP21)在小鼠成纤维细胞中超表达状态下,对γ分泌酶活性的影响.利用TMP21 cDNA转染敲除淀粉样前体蛋白表达基因的小鼠胚胎成纤维细胞系(MEF(KO)),以梯度浓度G418筛选TMP21表达量最高的细胞.处理超表达组(T)和对照组(C... 研究转运膜蛋白21(TMP21)在小鼠成纤维细胞中超表达状态下,对γ分泌酶活性的影响.利用TMP21 cDNA转染敲除淀粉样前体蛋白表达基因的小鼠胚胎成纤维细胞系(MEF(KO)),以梯度浓度G418筛选TMP21表达量最高的细胞.处理超表达组(T)和对照组(C)细胞,并收集纯化含γ分泌酶复合物的样本.用Western blotting检测TMP21蛋白表达量,选用饱和浓度的γ分泌酶底物C99,运用ELISA检测A-βpeptide40和A-βpeptide42的生成总量.结果表明,样本T1、T2及IPT2所含TMP21的蛋白表达量较相应对照组样本C1、C2和IPC2分别上升11.5%(P=0.08),28.1%(P<0.01),69.1%(P<0.001),提示经TMP21 cDNA转染后MEF(KO)细胞中TMP21蛋白表达明显提高.同时,对照样本C1、C2及IPC2,样本T1、T2及IPT2中所含γ分泌酶活性分别降低33.4%(P=0.01),71.9%(P<0.001),96.5%(P<0.001).转染组样本中,样本IPT2所含γ分泌酶活性最低,提示经处理γ分泌酶得到明显纯化分离,与Western blotting所得结果一致.因此,高表达状态下的TMP21蛋白,对MEF(KO)细胞中γ分泌酶的活性具有明显的降低作用,表明TMP21为γ分泌酶的负调控因子之一. 展开更多

关键词 脱氧核糖核酸超表达 转运膜蛋白21 γ分泌酶活性 酶联免疫反应 免疫印迹反应

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超表达转运膜蛋白21对介导阿尔茨海默氏病γ分泌酶复合物重要组分PS-1及NCT蛋白表达量的影响

9

作者 博·格日勒图 董贵成 +4 位作者 王迎春 阿拉坦高勒 王静 门中华 赵俊利 《内蒙古师范大学学报（自然科学汉文版）》 CAS 2009年第2期198-202,共5页

研究转运膜蛋白21(TMP21)在小鼠胚胎成纤维细胞中超表达对PS-1及NCT蛋白表达量的影响.脂质体介导TMP21 cDNA转染敲除淀粉样前体蛋白表达基因的小鼠胚胎成纤维细胞系(MEF(KO)),以梯度浓度G418筛选TMP21表达量最高的细胞.处理超表达组(T)... 研究转运膜蛋白21(TMP21)在小鼠胚胎成纤维细胞中超表达对PS-1及NCT蛋白表达量的影响.脂质体介导TMP21 cDNA转染敲除淀粉样前体蛋白表达基因的小鼠胚胎成纤维细胞系(MEF(KO)),以梯度浓度G418筛选TMP21表达量最高的细胞.处理超表达组(T)和对照组(C)细胞,并收集纯化过程中含γ分泌酶复合物的样本,用Western blotting检测γ分泌酶复合物重要组分Nicastrin(NCT)、Presenilin-1(PS-1)以及TMP21的蛋白表达量.结果表明,样本T1、T2及IPT2所含TMP21的蛋白表达量较相应对照组样本C1、C2和IPC2分别上升11.5%(P=0.08)、28.1%(P<0.01)及69.1%(P<0.001),提示经TMP21 cDNA转染后MEF(KO)细胞中TMP21蛋白表达明显提高,而转染组和对照组中,构成γ分泌酶复合物的重要组分NCT与PS-1蛋白表达量无明显变化.这表明在TMP21蛋白高表达状态下,不会影响MEF(KO)细胞中γ分泌酶复合物的重要组分NCT与PS-1蛋白表达量. 展开更多

关键词 脱氧核糖核酸超表达 转运膜蛋白21 Presenilin-1(PS-1) Nicastrin(NCT) 免疫印迹反应 Γ分泌酶

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猪流行性腹泻病毒COE蛋白原核表达及其反应原性的初步鉴定

10

作者 孙彦阔 汪志 +5 位作者 冯嘉萍 石庆伟 罗勇峰 秦锋 白小磊 张桂红 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第12期152-155,共4页

为了研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)的优势抗原表位COE可溶性原核表达及其反应原性,试验采用RT-PCR方法扩增出COE基因,将其克隆至原核表达载体p MAL-C5X上,构建重组质粒p MAL-C5X-COE,经测序鉴定正确后转化Rosetta感受态细胞,并进行IPTG诱... 为了研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)的优势抗原表位COE可溶性原核表达及其反应原性,试验采用RT-PCR方法扩增出COE基因,将其克隆至原核表达载体p MAL-C5X上,构建重组质粒p MAL-C5X-COE,经测序鉴定正确后转化Rosetta感受态细胞,并进行IPTG诱导表达和Westernblot验证。结果表明:重组菌p MAL-C5X-COE表达的融合蛋白MBP-COE的分子质量约为57 ku,优化的诱导条件为IPTG浓度0.8 mmol/L、诱导时间4 h,诱导温度30℃,重组蛋白以可溶性蛋白形式存在于菌体中,融合蛋白与兔抗PEDV多克隆抗血清发生特异的免疫印迹反应。说明原核表达的COE融合蛋白可溶且具有良好的反应原性。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) S基因 逆转录PCR 原核表达 可溶性COE蛋白 免疫印迹反应

原文传递

TNFHis-IL-11温度诱导融合表达载体的构建

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作者 韩苇 张英起 +1 位作者 颜真 石继红 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2002年第5期229-231,共3页

目的构建TNFHis IL 11温度诱导融合表达载体。方法用EcoRI和PstI消化pGEMIL 11质粒后 ,回收IL 11基因片段 ,以同样的酶切位点克隆入TNFHis表达载体。将重组质粒转入大肠杆菌DH5α菌株 ,经 4 2℃温度诱导 4 .5h后做SDS PAGE和免疫活性鉴... 目的构建TNFHis IL 11温度诱导融合表达载体。方法用EcoRI和PstI消化pGEMIL 11质粒后 ,回收IL 11基因片段 ,以同样的酶切位点克隆入TNFHis表达载体。将重组质粒转入大肠杆菌DH5α菌株 ,经 4 2℃温度诱导 4 .5h后做SDS PAGE和免疫活性鉴定。结果融合蛋白获得了表达 ,其分子量为 37kD ,其表达量占菌体总蛋白的 2 5 %。免疫印迹反应结果显示 ,表达的融合蛋白可与抗IL 11多克隆抗体产生阳性反应。该融合蛋白经盐酸羟胺裂解后可获得IL 11单体。结论TNFHis IL 11温度诱导融合表达载体构建成功。 展开更多

关键词 白细胞介素11 TNFHis表达载体 PRPL启动子 重组质粒 免疫印迹反应

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TAB3、CEBPD在卵巢癌组织和卵巢癌细胞中的表达及其相关性 被引量：1

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作者 吴淑芳 曾克非 芦珊 《实用癌症杂志》 2021年第7期1076-1079,共4页

目的探讨TAB3、CEBPD在卵巢癌组织和卵巢癌细胞中的表达及其相关性。方法收集51例临床卵巢癌病理标本和对应的癌旁组织标本,采用qRT-PCR及western blot方法检测卵巢癌组织及对应的癌旁组织中TAB3、CEBPD的表达情况,同时采用qRT-PCR及wes... 目的探讨TAB3、CEBPD在卵巢癌组织和卵巢癌细胞中的表达及其相关性。方法收集51例临床卵巢癌病理标本和对应的癌旁组织标本,采用qRT-PCR及western blot方法检测卵巢癌组织及对应的癌旁组织中TAB3、CEBPD的表达情况,同时采用qRT-PCR及western blot方法检测正常卵巢细胞和卵巢癌细胞株中TAB3、CEBPD的表达,分析TAB3、CEBPD的相关性。结果荧光定量PCR结果发现,卵巢癌组织中TAB3 mRNA的表达明显高于癌旁组织(P<0.001),而CEBPD mRNA的表达明显低于癌旁组织(P<0.05);Western blot结果发现TAB3蛋白在62.74%(32/51)的卵巢癌组织中呈过表达,CEBPD蛋白在60.78%(31/51)的卵巢癌组织中呈低表达(P<0.05)。卵巢癌细胞株中的TAB3 mRNA及蛋白表达均明显高于正常卵巢细胞株,CEBPD mRNA及蛋白表达明显低于正常卵巢细胞株。TAB3、CEBPD在卵巢癌组织中的表达呈负相关(γ=-0.2853,P<0.05;γ=-0.3091,P<0.05)。结论在卵巢癌组织及细胞中TAB3基因呈高表达,而CEBPD基因呈低表达。在卵巢癌组织中TAB3、CEBPD基因的表达存在负相关性。 展开更多

关键词 TAB3 CEBPD 原发性卵巢癌 蛋白免疫印迹反应(Western blot) 实时荧光定量PCR扩增(qRT-PCR)

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